全 文 ：中国热带医学 2015年第15卷第11期 China Tropical Medicine，November 2015，Vol.15，No.11
眼树莲（Dischidia chinensis）是萝藦科眼树莲属
附生藤本植物，是我国的特有植物，别名：瓜子金、瓜
子藤、滴锡藤等[1]。在我国主要分布于海南、广东、广
西等省区，在海南主要产于乐东、三亚、保亭等地，生
长在低海拔至中海拔的山地林谷或旷地[2]。眼树莲全
株入药，有清肺化痰，凉血解毒之效，民间用于治疗肺
燥咳痰，咳血，百日咳，小儿疳积，痢疾，疥疮毒脓，跌
打肿痛，毒蛇咬伤[3]。海南黎族地区用其全草煮水熏
眼，治疗眼疾[4]。霍丽妮等[5]从眼树莲全株中分得总酚
和总酮成分，经研究显示其具有体外抗氧化活性。目
前国内外尚未见有关眼树莲急性毒性和药理活性的
研究报道。本文采用二甲苯致小鼠耳肿胀、醋酸致小
鼠毛细血管通透性增加、鸡蛋清诱导大鼠足肿胀三种
炎症模型考察眼树莲水提取物与乙醇提取物的抗炎
效果，为开发利用该植物的药用资源提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 药物和试剂 眼树莲采自海口市火山口地区，
经中国热带农业科学院生物研究所戴好富研究员鉴
定为萝藦科（Asexepiadaeeae）眼树莲属（Disehidia R.
B）植物眼树莲（Dischidia chinensis Champ.ex Benth）全
株；阿司匹林肠溶片（江苏平光制药有限责任公司，批
号: 140902）；伊文思蓝（BS，阿拉丁试剂上海有限公
司）；羧甲基纤维素（AR，国药集团化学试剂厂）；二甲
苯（AR，天津大茂制药化学试剂厂）。
1.1.2 动物 昆明种小鼠体重 18～22 g，合格证号：
43006700005502；SD大鼠体重（140±10）g，合格证号：
43006700005574；均为清洁级（长沙市天勤生物技术
·论 著·
海南眼树莲两种提取物急性毒性及抗炎活性实验研究
杨柳 1，王小蒙 1，余邦良 1*，姚瑰玮 1，李雪莲 2，陈俊波 3，谢蓉 4
1.海南医学院药学院，海南海口 571119；2.海南医学院国际护理学院，海南海口 571119；
3.海南职业技术学院生物工程学院，海南海口 570216；4.海南医学院中医学院，海南海口 571119
摘要：目的 比较海南眼树莲水提取物和乙醇提取的急性毒性和抗炎活性。方法 用最大浓度、最大给药体积的
水提取物和乙醇提取物给小鼠灌胃给药，观察急性毒性；采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通
透性模型、鸡蛋清致大鼠足跖肿胀增加模型观察眼树莲水提取物和乙醇提取物的抗炎活性。结果 眼树莲水提取物
和醇提物的小鼠最大耐受生药量分别为228.71g/kg和206.45g/kg。水提取物和乙醇提取物均能抑制二甲苯引起的小鼠
耳肿胀、醋酸引起的小鼠毛细血管通透性增加、鸡蛋清诱导大鼠足肿胀。结论 海南眼树莲水提取物和醇提取物分别
在最大耐受量这个剂量下研究其抗炎作用较为安全，乙醇提取物的抗炎活性优于水提取物。
关键词：海南眼树莲；提取物；急性毒性；抗炎活性
中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1009-9727(2015)11-1302-04 DOI:10.13604/j.cnki.46-1064/r.2015.11.05
Acute toxicity and anti-inflammatory effectiveness of two extracts from Dischidia chinensis
YANG Liu1, WANG Xiao-meng, YU Bang-liang, YAO Gui-wei, LI Xue-lian, CHEN Jun-bo,XIE Rong
1. Department of Pharmacy, Hainan Medical University, Haikou 571119, Hainan, P.R. China
Corresponding author: YU Bang-liang, E-mail：yubangliang@126.com
Abstract：Objective To observe the acute toxicity and anti- inflammatory effectiveness of water extract and ethanol
extract of Dischidia chinensis. Methods The acute toxicity in water extract and ethanol extract of Dischidia chinensis were
determined via i.g. route with maximum concentration and volume in mice. The anti-inflammatory effect in water extract and
ethanol extract were evaluated in the inflammatory models of xylene- induced ear edema mice, acetic acid- induced celiac
capillary permeability increased mice and egg white-induced foot swelling mice. Results Maximum tolerable doses (MTD) in
water extract and ethanol extract of Dischidia chinensis in mice were 228.71 g/kg and 206.45 g/kg, respectively. Water extract
and ethanol extract could inhibit xylene-induced ear edema, acetic acid-induced celiac capillary permeability increased and
egg white-induced foot swelling in mice. Conclusion Water extract and ethanol extract of Dischidia chinensis are safe in
anti-inflammatory effect under the doses of the MTD. Anti-inflammatory effect of ethanol extract is better than water extract of
Dischidia chinensis.
Key words：Dischidia chinensis; Extracts; Acute toxicity; Anti-inflammatory effect
基金项目：海南省自然科学基金（No.814304）
作者简介：杨柳（1981—），女，本科，实验师，研究方向：新药研发和药物分析。
*通讯作者：余邦良，E-mail：yubangliang@126.com
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中国热带医学 2015年第15卷第11期 China Tropical Medicine，November 2015，Vol.15，No.11
有限公司，许可证号：SCXK（湘）2014-0011）。根据实
验性质分笼喂养，适应环境1周，自由饮水进食。
1.1.3 仪器 AE100型电子天平（梅特勒-托利多仪
器上海有限公司）；722N型可见分光光度计（上海精
密科学仪器公司）；C-YLS-Q4型耳片打孔器（北京哲
成科技有限公司）；大鼠足容积测定装置（自制）。
1.2 方法
1.2.1 水提取物的制备 取干燥眼树莲5 kg，粉碎后
以10倍量水煎煮提取3次，每次2h，冷却，过滤，合并
滤液，减压浓缩至浸膏状，即得水提取物212.5 g，回收
率为4.25 %。取水提取物适量加1%的羧甲基纤维素
水溶液配制成所需浓度，作为供试样品。
1.2.2 乙醇提取物的制备 取干燥眼树莲5 kg，粉碎
后以10倍量95 %乙醇浸泡3次，每次5d。过滤，合并
滤液，减压浓缩至无醇味得乙醇提取物 108.5 g，回收
率为 2.17 %。取乙醇提取物适量加 1 %的羧甲基纤
维素水溶液配制成所需浓度，作为供试样品。
1.2.3 急性毒性实验 [6-7] 经预实验，用眼树莲水提
取物最大浓度 243 mg/ mL和乙醇提取物最大浓度
112 mg/mL，分别以最大灌胃容量 0.4 mL/10 g给小鼠
灌胃给药，连续观察2周，未见小鼠死亡，故确定两种
提取物急性毒性按最大耐受量进行正式实验。取昆
明种雄性小鼠60只，随机分为3组：空白对照组、水提
取物组、乙醇提取物组，每组20只，称重，标记。小鼠
禁食不禁水12h后，水提取物组和乙醇提取物组分别
以相应的最大浓度、最大灌胃容量灌胃给药 1次，空
白对照组给予等体积的 1%羧甲基纤维素灌胃 1次，
正常饲养，密切观察各小鼠的运动进食、饮水情况，记
录是否出现烦躁、嗜睡或昏迷、肌肉抽搐、瞳孔改变、
大小便异常、皮毛颜色等。若有小鼠死亡，则将其死
亡小鼠解剖，肉眼观察其心、肝、肾、脾等脏器外观的
改变。给药后 2h之内，每 20min观察 1次；给药后 2~
8h之内，每1h观察1次；给药后8~24h每2h观察1次；
给药后第 2d起每天观察 1次，连续观察 2周，并记录
体重。末次称重后，脱颈处死，解剖小鼠，肉眼观察其
心、肝、脾、肾等脏器的外观。
1.2.4 对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响[8-10] 取昆明
种雄性小鼠 80只，随机分为 8组：即空白对照组（1%
的羧甲基纤维素水溶液）；阿司匹林组；眼树莲乙醇提
取物高（H）、中（M）、低（L）剂量组；水提取物高（H）、
中（M）、低（L）剂量组；每组10只，称重，标记。灌胃给
药，各组小鼠灌胃 1 次/d，连续 5d，给药体积 0.1 mL/
10 g，末次给药后 1h，将小鼠右耳双面均匀涂抹二甲
苯2 μL/只，左耳不涂作为对照，30min后脱颈处死，用
9 mm打孔器分别在双耳相同位置打下耳片，置于电
子天平上称取耳片重量，以左右耳片重量差值表示肿
胀度，采用 q检验比较各组间耳肿胀度，并计算肿胀
抑制率。
肿胀抑制率（%）=[（空白对照组平均耳肿胀度-给
药组平均耳肿胀度）/空白组平均耳肿胀度]× 100（%）
1.2.5 醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性实验[8-10] 取
昆明种雄性小鼠 80只，分组及给药同“1.2.3”项。末
次给药后 1h，各鼠尾静脉注射 0.5%伊文思蓝生理盐
水溶液 0.1mL/10g，并立即腹腔注射 0.6%的醋酸溶液
0.2mL/只。20min后脱颈处死，腹腔注射 6mL生理盐
水，轻柔小鼠腹部 1min，剪开腹腔，收集洗涤液 4mL，
用离心机 4000r/min 离心 5min，取上清液于波长 590
nm处比色，测定吸光度（A）值，计算小鼠腹腔毛细血
管通透性增加的抑制率。
抑制率＝[（空白对照组A590－给药组A590）/空白
组A590] × 100（%）
1.2.6 鸡蛋清诱导大鼠足肿胀实验[8~10] 取雄性大鼠
80只，随机分 8组，每组 10只。各组大鼠灌胃给药 1
次/d，给药量为1 mL/100 g，连续5d。第5天禁食12h，
用足容积测定装置先测得大鼠右后足的初始容积，末
次给药后 1h，大鼠右足掌皮下注射鸡蛋清 0.1mL致
炎，使右足肿胀，分别在0.5、1、2、4、6h用足容积测定
装置测量足肿胀情况，记录足肿胀后的容积，计算大
鼠足肿胀率。左足不做任何处理。
大鼠足肿胀率=[（致炎后足掌容积－致炎前足掌
容积）/致炎前足掌容积]× 100( % )
1.3 统计学分析 采用 SPSS17.0统计软件，各指标
均以 x±s表示，两组间比较采用 t检验和 q检验。以
P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 急性毒性实验 给小鼠灌胃给药后，连续观察
14d，小鼠全部健存，其外观、食欲、行为活动、排泄等
均未见异常；第 14d脱颈处死并解剖，各个脏器官未
见异常。因此，小鼠对眼树莲水提取物和乙醇提取物
的最大耐受生药量分别为 228.71 g/kg和 206.45 g/kg，
两种提取物对小鼠正常生长影响小，安全性高。
2.2 对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响 经多次二甲
苯致炎预实验结果，确定两种提取物的高、中、低剂量
分别 48、24、12 mg/Kg；阿司匹林给药组给药剂量为
500 mg/Kg；空白对照组为 1 %羧甲基纤维素水溶液；
各实验组给药量均为 0.1 mL/10g。结果表明，乙醇提
取物和水提取物高、中剂量组均有明显抑制作用，且
与空白对照组比较差异有统计学意义（P<0.01）；两种
提取物随着剂量的增加，抑制作用增加；两种提取物
在相同剂量下差异无统计学意义（P>0.05），见表1。
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中国热带医学 2015年第15卷第11期 China Tropical Medicine，November 2015，Vol.15，No.11
2.3 醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性实验 两种提
取物高、中剂量组均能抑制醋酸引起的小鼠毛细血管
通透性增加，使腹腔内渗出的染料明显减少（P<
0.01），可降低毛细血管的通透性，减少急性、早期炎
症的渗出，并随着剂量的增加，抑制作用增强。两种
提取物在相同剂量下比较差异无统计学意义（P>
0.05），作用效果不及阿司匹林组，见表2。
2.4 鸡蛋清诱导大鼠足肿胀实验 根据大鼠与小鼠
之间用药剂量的换算[11]，确定提取物的高、中、低剂量
分别为 33.6、16.8、8.4 mg/Kg。结果表明，水提取物和
乙醇提取物高、中剂量组对鸡蛋清诱导大鼠足肿胀均
有一定的抑制作用，并随着剂量的增加，抑制作用增
强。与空白对照组比较，两种提取物有统计学意义
（P<0.05）。但两种提取物在相同剂量下差异无统计
学意义（P>0.05）；作用效果不及阿司匹林组，见表3。
注：与空白对照组比较，*P<0.05；**P<0.01。Note : Compared with control group，*P<0.05；** P<0.01.
组别Groups
空白对照组Control group
阿司匹林组Aspirin group
水提取物H组Water extract H group
水提取物M组Water extract M group
水提取物L组Water extract L group
乙醇提取物H组Ethanol extract H group
乙醇提取物M组Ethanol extract M group
乙醇提取物L组Ethanol extract L group
剂量Dose（mg·Kg-1）
-
500
48
24
12
48
24
12
肿胀度Swelling degree（mg）
10.43±1.12
3.72±0.63**
6.45±1.17**
7.23±1.21**
8.14±0.63**
6.24±1.99**
6.94±1.46**
8.2±1.53**
肿胀抑制率Swelling inhibitory rate（%）
-
64.3
38.2
30.7
22.0
40.2
33.5
21.4
表1 眼树莲水提取物和乙醇提取物对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响（x±s，n=10）
Table 1 Effects of water extracts and ethanol extracts of Dischidia chinensis on ear edema induced by xylene in mice（x±s，n=10）
组别Groups
空白对照组Control group
阿司匹林组Aspirin group
水提取物H组Water extract H group
水提取物M组Water extract M group
水提取物L组Water extract L group
乙醇提取物H组Ethanol extract H group
乙醇提取物M组Ethanol extract M group
乙醇提取物L组Ethanol extract L group
剂量Dose（mg·Kg-1）
-
500
48
24
12
48
24
12
吸光值Absorbance
0.5986±0.0512
0.3186±0.0567**
0.4276±0.1226*
0.5328±0.1458**
0.5679±0.0994**
0.4270±0.0654**
0.5178±0.0946**
0.5835±0.0761**
抑制率（%）Inhibitory rate
-
46.8
28.6
11.0
5.1
28.7
13.5
2.5
注：与空白对照组比较，*P<0.05；** P<0.01。Note : Compared with control group，*P<0.05；**P<0.01.
表2 眼树莲水提取物和乙醇提取物对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响（x±s，n=10）
Table 2 Effects of water extracts and ethanol extracts of Dischidia chinensis on celiac capillary permeability induced by acetic acid in
mice（x±s，n=10）
表3 眼树莲水提取物和乙醇提取物对鸡蛋清诱导大鼠足肿胀的影响（x±s, n=10）
Table 3 Effects of water extracts and alcohol extracts of Dischidia Chinensis on foot swelling induced by egg white in mice（x±s, n=10）
组别Groups
空白对照组Control group
阿司匹林组Aspirin group
水提取物H组Water extract H group
水提取物M组Water extract M group
水提取物L组Water extract L group
乙醇提取物H组Ethanol extract H group
乙醇提取物M组Ethanol extract M group
乙醇提取物L组Ethanol extract L group
剂量 Dose
（mg·Kg-1）
-
350.0
33.6
16.8
8.4
33.6
16.8
8.4
注射后不同时间的足肿胀率（%）Foot swelling rate in different time after injection
0.5h
0.644±0.190
0.608±0.084
0.614±0.134
0.630±0.120
0.624±0.146
0.612±0.123
0.631±0.121
0.628±0.102
1h
0.641±0.121
0.586±0.111
0.594±0.123
0.603±0.132
0.592±0.141
0.581±0.125
0.605±0.093
0.602±0.094
2h
0.670±0.125
0.447±0.123**
0.516±0.145*
0.535±0.132*
0.560±0.136
0.514±0.112**
0.535±0.112*
0.558±0.089*
4h
0.638±0.146
0.365±0.109**
0.429±0.129**
0.435±0.108**
0.502±0.123*
0.420±0.098**
0.436±0.105**
0.480±0.110*
6h
0.600±0.119
0.222±0.119**
0.344±0.098**
0.348±0.130**
0.425±0.112**
0.337±0.099**
0.345±0.116**
0.420±0.104**
注：与空白对照组比较，*P<0.05；**P<0.01。Note : Compared with control group，*P<0.05；** P<0.01.
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3 讨论
确定一个药物有无抗炎作用，宜采用2~3种急性
型炎症模型，然后综合抗炎结果，评定疗效；急性型炎
症模型一般以肿胀、渗出等主要指标评价疗效[8]。二
甲苯所致小鼠耳肿胀致炎实验操作简便，不需要特殊
设备，见效快，用药量少，且复制成功率高，适用于新
抗炎药的筛选；但该方法更适用于受试药物以全身给
药，局部涂药影响因素较多，可能会出现假阳性[11-12]。
醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性实验，通过测定腹腔
染料（伊文思蓝）的渗出量来反映毛细管通透性的大
小。抗炎药物一般可降低毛细管通透性，对比毛细管
的通透性可以用于评价药物的抗炎性 [11,13]。该实验优
点在于使用仪器测定其吸光度，结果准确。但冲洗腹
腔时应避免液体外溢，处死时要注意动作轻柔，防止
各种引起腹腔内出血因素，导致实验误差增加。鸡蛋
清诱导大鼠足趾肿胀实验，通过测定肿胀足趾的容
积，比较给药组和对照组足趾肿胀抑制率，评价药物
的抗炎作用。该炎症模型较可靠，大鼠易得且物属间
差异性较小，敏感性和重现性高[8,11-13]。但实验中用于
测量大鼠足趾容积的装置是自制，装置的重现性有待
考察。本研究采用3种急性炎症模型，通过相互比较
实验结果来评价眼树莲的抗炎作用，具有科学性。
经预实验发现，两种提取物对雄性小鼠和大鼠的
抗炎效果均要比雌性鼠好，所以在实验中所用的动物
均为雄性。急性毒性实验表明，小鼠对眼树莲水提取
物和乙醇提取物最大耐受量分别为生药量 228.71g/k
和206.45 g/kg，将两种提取物均以最大灌胃容量给小
鼠灌胃，并连续观察 14d，小鼠未出现明显毒性反应
和死亡情况。实验结果符合不同周龄昆明种小鼠体
重的增长关系[14]，说明眼树莲在该剂量下研究其抗炎
性较安全。两个提取物的最大耐受剂量为今后进行
长期毒性试验、特殊毒性试验和临床研究的剂量设置
提供参考。
抗炎活性实验表明，眼树莲水提取物和乙醇提取
物的高、中剂量组均对二甲苯引起的耳肿胀、醋酸引
起的毛细血管通透性增加、鸡蛋清诱导大鼠足肿胀均
有一定抑制作用，且均有剂量依赖关系。通过对抗炎
实验数据的统计学分析，两种提取物抗炎活性无显著
差异性（P>0.05），但乙醇提取物抗炎效果优于水提取
物，为进一步寻找抗炎有效成分提供科学依据。
本实验对眼树莲在肺燥咳痰，咳血，百日咳，小儿
疳积，痢疾，疥疮毒脓，跌打肿痛，毒蛇咬伤治疗的民
间用药方面提供了一定的理论依据，但对于治疗疾病
的有效活性部位和抗炎机制还有待进一步深入研究。
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收稿日期：2015-06-05 编辑：符式刚
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