全 文 ：２９卷０６期
Ｖｏｌ．２９，Ｎｏ．０６
草　业　科　学
ＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＬ　ＳＣＩＥＮＣＥ
９３１－９３６
０６／２０１２
长叶点地梅愈伤组织诱导和植株再生
张彦妮，陈素波
（东北林业大学园林学院，黑龙江 哈尔滨１５００４０）
摘要：以长叶点地梅（Ａｎｄｒｏｓａｃｅ　ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ）的无菌实生苗的下胚轴和叶片为外植体，研究不同种类、不同浓度的
激素组合培养对愈伤组织诱导、芽诱导和生根的影响。结果表明，诱导下胚轴基部愈伤组织的最佳培养基为
ＭＳ＋０．３ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ＋０．１ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ，诱导率达８５％；诱导叶片愈伤的最佳培养基为 ＭＳ＋０．０２ｍｇ·Ｌ－１
ＮＡＡ＋０．３ｍｇ·Ｌ－１　ＴＤＺ，诱导率为８０％；下胚轴愈伤诱导芽的最佳培养基为 ＭＳ＋０．５ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ＋０．２
ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ，分化率达９２．５％；叶片愈伤诱导芽的最佳培养基为 ＭＳ＋１．０ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ＋０．２ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ，
分化率达８２．５％；最佳生根培养基为 ＭＳ＋１．０ｍｇ·Ｌ－１　ＩＢＡ，生根率达１００％，移栽成活率达９５％。
关键词：长叶点地梅；愈伤组织诱导；植株再生
中图分类号：Ｑ９４３．１　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１００１－０６２９（２０１２）０６－０９３１－０６
＊
　　长叶点地梅（Ａｎｄｒｏｓａｃｅ　ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ）又称矮葶
点地梅，为报春花科点地梅属多年生草本，叶丛生，
线性，灰绿色，花冠白色，喉部紫红色，５月开花［１］。
点地梅属约有１００种，分布于北半球温带，其中青藏
高原地区和欧洲的阿尔卑斯山脉是该属的两个分布
中心。中国有７３种，７变种，主要分布在青藏高原，
有部分种类分布在西北至内蒙古、东北以及秦岭以
南各省区。长叶点地梅的植株较矮小，单朵花虽小，
但花色清新，开花较早，具有很高的观赏价值。长叶
点地梅的叶呈丛生状，铺地，适应性较强，能够在中
国东北、内蒙古、蒙古高原［２］，草原、半干旱石质山地
的油松－沙棘混交林林下［３］，多石质山坡生长，可用
于岩石园、园林地被及盆栽观赏及灌木丛旁作地被
材料。长叶点地梅还具有一定的生态效益，可以降
低地表湿度、减少尘土飞扬和防止水土流失，因而它
又是一种不可多得的草坪植物和优良的地被植物，
对丰富东北地区景观植物多样性、推动园林事业以
及绿地建设具有一定的实用价值。同时，野生花卉
是构成多样化的生态环境和自然植被的重要组成部
分，也是研究和培育花卉新品种的重要种源和进行
园林绿化的优秀材料［４］。
长叶点地梅虽有诸多优势，但目前园林应用极
少，同时随着生存环境的恶化，其生存状况不断受到
威胁，资源受到破坏。快繁技术是保护野生花卉种
质资源的有效途径之一，但点地梅属植物组织培养
方面的研究迄今还是很少。聂勇［５］对点地梅叶片进
行了愈伤组织的诱导，李承花等［６］采用层析法对点
地梅的化学成分进行分离纯化，秦向菁［７］对点地梅
进行了药理分析试验认为点地梅在抗肿瘤方面具有
一定作用。而对于野生花卉长叶点地梅的相关研究
却鲜见报道，因此本试验对长叶点地梅进行愈伤组
织诱导和再生体系的建立，以期为长叶点地梅种质
资源的保护、园林应用和培育新品种等奠定基础。
１　材料与方法
１．１材料　本试验的研究材料为长叶点地梅无菌
实生苗。
１．２方法
１．２．１不同培养基对长叶点地梅下胚轴愈伤诱导的
影响　将培养皿中萌发的长叶点地梅转接于添加不
同激素６－ＢＡ（０、０．１、０．３ｍｇ·Ｌ－１）、ＮＡＡ（０、０．１
ｍｇ·Ｌ－１）的 ＭＳ培养基中，每组２０株，观察生长状
况，３０ｄ后统计生长状况及诱导率。
１．２．２愈伤组织的诱导及增殖　试验中长叶点地梅
的愈伤组织有两种来源：一种是由叶片诱导而来；另
一种是由萌发苗下胚轴基部产生。将叶片切为０．５
ｃｍ左右的小块，接到添加不同种类、不同浓度的
ＴＤＺ（０．１、０．２、０．３ｍｇ·Ｌ－１）、ＮＡＡ（０．０１、０．０２、
０．０３ ｍｇ·Ｌ－１）的ＭＳ培养基中，进行愈伤组织诱
＊ 收稿日期：２０１２－０１－０９　　接受日期：２０１２－０２－２３
基金项目：中央高校基本科研业务费专项资金项目（ＤＬ１２ＣＡ１７）
作者简介：张彦妮（１９７４－），女，山西大同人，副教授，博士，主要从事园林植物繁殖栽培及育种。Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｙａｎｎｉ８０８＠１２６．ｃｏｍ
ＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＬ　ＳＣＩＥＮＣＥ（Ｖｏｌ．２９，Ｎｏ．０６） ０６／２０１２
导，之后选择最佳培养基进行愈伤继代增殖。将两
种不同的愈伤组织继代两次（每次周期为３０ｄ），下
胚轴产生愈伤后，将愈伤组织与苗分离后再进行继
代增殖，之后进行愈伤组织的分化。３０ｄ后统计分
化外植体数、诱导率和形态指标。
１．２．３愈伤组织的分化与植株再生　将继代后的愈
伤组织转接到添加不同激素的６－ＢＡ（０．５、１．０、２．０
ｍｇ·Ｌ－１）、ＮＡＡ（０．１、０．２、０．４ｍｇ·Ｌ－１）分化培养
基中，待分化出芽后，将芽接入芽伸长培养基中，芽
伸长培养基为 ＭＳ＋０．１ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ＋０．２
ｍｇ·Ｌ－１　ＫＴ。３０ｄ后统计愈伤分化数、分化率和平
均分化芽数。
１．２．４组培苗的生根及移栽　参照葛蓓孛［８］的移栽
法，将幼苗在生根培养基中进行生根培养。生根培
养基为添加不同浓度ＩＢＡ（０．５、１．０、２．０ｍｇ·Ｌ－１）
的 ＭＳ和１／２ＭＳ培养基中，两种培养基均加入１
ｇ·Ｌ－１的活性炭，每组２０株苗，待根长为３～４ｃｍ
时，将小苗移出组培室，在温室中不打开封口膜放置
４～５ｄ，让组培苗适应温度的变化，然后半开封口膜
缓苗３ｄ，再将小苗取出，用自来水冲洗掉附着在根
上的培养基，将苗移栽于基质中（基质为已灭菌的蛭
石），３０ｄ后统计平均苗根数、平均根长、生根率、成
活率及生长状况。本试验无特殊说明外，均为 ＭＳ
培养基，ｐＨ值为５．８，高压灭菌（１．１ＭＰａ，１２１℃）
１５ｍｉｎ。
１．２．５数据统计
诱导率＝
产生愈伤组织的外植体数
接种的外植体数 ×１００％；
生根率＝
生根的苗数
接种苗总数×１００％；
成活率＝
成活的植株数
移栽生根苗的总苗数×１００％；
平均根数＝
接种苗根总数
接种苗总生根株数
；
平均根长＝
接种苗根总长度
接种苗平均根数
；
愈伤组织
分化率
＝
分化出不定芽的愈伤组织块数
接种的愈伤组织块数 ×１００％。
２　结果与分析
２．１不同培养基对长叶点地梅下胚轴愈伤诱
导的影响　植株在不同培养基上的生长状况不
同。在不加激素的培养基中植株叶片发黄，长势一
般，植株下胚轴基部无愈伤组织产生，但有极少量根
发生，而在添加不同浓度６－ＢＡ的培养基中，植株叶
片呈绿色或黄绿色，植株下胚轴基部有愈伤产生；只
添加ＮＡＡ的植株也有少量根产生，无愈伤产生，说
明ＮＡＡ有利于无菌苗根的发生。其中产生大量愈
伤、长势好的培养基为 ＭＳ＋０．３ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ＋
０．１ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ，诱导率达８５％（表１）。本试验
获得的植株下胚轴基部的愈伤组织可作为愈伤诱导
芽的材料。
表１　不同培养基对长叶点地梅下胚轴愈伤诱导的影响
Ｔａｂｌｅ　１　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｖａｒｉｏｕｓ　ｍｅｄｉｕｍｓ　ｏｎ　ｈｙｐｏｃｏｔｙｌ　ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
组号
Ｇｒｏｕｐ
ｃｏｄｅ
生长调节物质
Ｇｒｏｗｔｈ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ／ｍｇ·Ｌ－１
６－ＢＡ　 ＮＡＡ
诱导率
Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
ｒａｔｅ／％
叶色
Ｌｅａｆ　ｃｏｌｏｕｒ
长势
Ｇｒｏｗｉｎｇ
产生愈伤情况
Ｃａｌｕｓ　ｓｔａｔｕｓ
生根情况
Ｒｏｏｔｉｎｇ　ｓｔａｔｕｓ
１　 ０　 ０　 ０
黄绿色
Ｙｅｌｏｗ－ｇｒｅｅｎ
＋ 无Ｎｏ 少量Ａ　ｆｅｗ
２　 ０．１　 ０　 １５
绿色或浅绿色
Ｇｒｅｅｎ　ｏｒ　Ｌｉｇｈｔ　ｇｒｅｅｎ
＋＋ 少量Ｂｉｔ 无Ｎｏ
３　 ０　 ０．１　 ０
浅绿色
Ｌｉｇｈｔ　ｇｒｅｅｎ
＋ 无Ｎｏ 较多 Ｍｏｒｅ
４　 ０．１　 ０．１　 ５５
绿色或浅绿色
Ｇｒｅｅｎ　ｏｒ　Ｌｉｇｈｔ　ｇｒｅｅｎ
＋＋ 较多 Ｍｏｒｅ 无Ｎｏ
５　 ０．３　 ０．１　 ８５
绿色或浅绿色
Ｇｒｅｅｎ　ｏｒ　Ｌｉｇｈｔ　ｇｒｅｅｎ
＋＋＋ 大量Ａ　ｌｏｔ 无Ｎｏ
注：　“＋”表示长势一般；“＋＋”表示长势好；“＋＋＋”表示长势很好。下同。
Ｎｏｔｅ：“＋”ｍｅａｎｓ　ｇｒｏｗｉｎｇ　ｇｅｎｅｒａｌ；“＋ ＋”ｍｅａｎｓ　ｇｒｏｗｉｎｇ　ｗｅｌ；“＋ ＋ ＋”ｍｅａｎｓ　ｇｒｏｗｉｎｇ　ｂｅｔｔｅｒ．Ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｂｅｌｏｗ．
２３９
０６／２０１２ 草　业　科　学 （第２９卷０６期）
２．２叶片愈伤组织的诱导及继代　不同浓度
ＴＤＺ和ＮＡＡ组合对长叶点地梅叶片愈伤组织诱
导的影响显著（表２）。无激素的 ＭＳ培养基不能诱
导叶片愈伤组织，在添加不同浓度ＮＡＡ和ＴＤＺ组
合的培养基中诱导叶片愈伤组织大部分呈绿色，结
构紧实的愈伤长势一般，结构疏松的愈伤长势相对
较好。当ＮＡＡ浓度为０．０２ｍｇ·Ｌ－１、ＴＤＺ浓度为
０．３ｍｇ·Ｌ－１时，愈伤启动期为１２ｄ，愈伤颜色为淡
绿色，结构疏松，长势好，诱导率达８０％；所以诱导
叶片 愈 伤 的 最 佳 ＮＡＡ 和 ＴＤＺ 组 合 为 ０．０２
ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ＋０．３ｍｇ·Ｌ－１　ＴＤＺ。
２．３愈伤组织诱导再生芽　以两种来源不同的
愈伤组织诱导芽分化，结果表明（表３），苗基部愈伤
组织的分化率明显大于由叶片诱导的愈伤。当
６－ＢＡ浓度为 １．０ ｍｇ·Ｌ－１、ＮＡＡ 浓度为 ０．２
ｍｇ·Ｌ－１时，叶片愈伤的分化效果最好，分化率为
８２．５％，平均分化芽数为４．３。当６－ＢＡ浓度为０．５
ｍｇ·Ｌ－１、ＮＡＡ浓度为０．２ｍｇ·Ｌ－１时，苗基部愈
伤的分化效果最好，分化率为９２．５％，平均分化芽
数为６．１。来自下胚轴的愈伤组织的平均分化芽数
高于叶片愈伤平均分化芽数，主要是由于下胚轴的
胚性愈伤形成率高于叶片的胚性愈伤形成率。因
此，苗下胚轴基部愈伤为诱导芽的最佳愈伤，最佳激
素比为０．５ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ＋０．２ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ。
２．４组培苗的生根及移栽　将在芽伸长培养基
上生长为３～４ｃｍ的无菌苗转接到生根培养基中，
进行生根诱导。在生根试验中发现（表４），添加不
同浓度ＩＢＡ的 ＭＳ和１／２ＭＳ两种培养基，前者的
生根率均达到１００％，移栽后的成活率及状况相对最
好；前者的平均苗根数最多为７．３，平均根长最长为
２．７，成活率达９５％，移栽后植株长生新叶较多，后者
的平均苗根数最多为４．９，平均根长最长为１．８，成活
表２　不同浓度ＴＤＺ和ＮＡＡ组合对长叶点地梅叶片愈伤组织诱导的影响
Ｔａｂｌｅ　２　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ＴＤＺ　ａｎｄ　ＮＡＡ　ｏｎ　ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｆｒｏｍ　ｌｅａｆ
组号
Ｇｒｏｕｐ
ｃｏｄｅ
生长调节物质
Ｇｒｏｗｔｈ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ／ｍｇ·Ｌ－１
ＮＡＡ　 ＴＤＺ
接种外植体数／个
Ｎｏ．ｏｆ
ｅｘｐｌａｎｔｓ
启动期
Ｄａｙ　ｏｆ
ｂｅｇｉｎｎｉｎｇ／ｄ
分化外植体数／个
Ｎｏ．ｏｆ
ｆｏｒｍｅｄ　ｃａｌｕｓ
诱导率
Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
ｒａｔｅ／％
形态指标
Ｃｏｌｏｕｒ　ｑｕａｌｉｔｙ　ａｎｄ
ｇｒｏｗｔｈ　ｓｔａｔｕｓ
１　 ０　 ０　 ３０　 ０　 ０　 ０ －
２　 ０．０１　 ０．１　 ３０　 １４　 ９　 ３０．０
绿色，紧实，＋
Ｇｒｅｅｎ，ｃｏｍｐａｃｔ，＋
３　 ０．０１　 ０．２　 ３０　 １２　 １４　 ４６．７
淡绿，疏松，＋＋
Ｌｉｇｈｔ　ｇｒｅｅｎ，ｓｏｆｔ，＋＋
４　 ０．０１　 ０．３　 ３０　 １０　 １６　 ５３．３
淡绿，疏松，＋＋＋
Ｌｉｇｈｔ　ｇｒｅｅｎ，ｓｏｆｔ，＋＋＋
５　 ０．０２　 ０．１　 ３０　 １５　 １３　 ４３．３
绿色，紧实，＋
Ｇｒｅｅｎ，ｃｏｍｐａｃｔ，＋
６　 ０．０２　 ０．２　 ３０　 １７　 １７　 ５６．７
绿色，紧实，＋＋
Ｇｒｅｅｎ，ｃｏｍｐａｃｔ，＋＋
７　 ０．０２　 ０．３　 ３０　 １２　 ２４　 ８０．０
淡绿，疏松，＋＋＋
Ｌｉｇｈｔ　ｇｒｅｅｎ，ｓｏｆｔ，＋＋＋
８　 ０．０３　 ０．１　 ３０　 １６　 ２１　 ７０．０
绿色，紧实，＋
Ｇｒｅｅｎ，ｃｏｍｐａｃｔ，＋
９　 ０．０３　 ０．２　 ３０　 １６　 １９　 ６３．３
绿色，紧实，＋
Ｇｒｅｅｎ，ｃｏｍｐａｃｔ，＋
１０　 ０．０３　 ０．３　 ３０　 ９　 １５　 ５０．０
绿色，疏松，＋＋
Ｇｒｅｅｎ，ｓｏｆｔ，＋＋
３３９
ＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＬ　ＳＣＩＥＮＣＥ（Ｖｏｌ．２９，Ｎｏ．０６） ０６／２０１２
表３　不同浓度６－ＢＡ和ＮＡＡ组合对愈伤诱导芽的影响
Ｔａｂｌｅ　３　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　６－ＢＡ　ａｎｄ　ＮＡＡ　ｏｎ　ｂｕｄ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
愈伤种类
Ｃａｌｕｓ　ｔｙｐｅ
组号
Ｇｒｏｕｐ
ｃｏｄｅ
生长调节物质
Ｇｒｏｗｔｈ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ／ｍｇ·Ｌ－１
６－ＢＡ　 ＮＡＡ
外植体数／个
Ｎｏ．ｏｆ
ｅｘｐｌａｎｔ
愈伤分化数／个
Ｎｏ．ｏｆ　ｃａｌｕｓ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
分化率
Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ
Ｒａｔｅ／％
平均分化芽数／个·块－１
Ａｖｅｒａｇｅ　Ｎｏ．ｏｆ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｂｕｄ／ｐｉｅｃｅ
叶片愈
伤组织
Ｌｅａｆ　ｃａｌｕｓ
１　 ０．５　 ０．１　 ４０　 ２２　 ５５．０　 １．６
２　 ０．５　 ０．２　 ４０　 １６　 ４０．０　 ０．９
３　 ０．５　 ０．４　 ４０　 ９　 ２２．５　 ０．５
４　 １．０　 ０．１　 ４０　 ２７　 ６７．５　 ２．８
５　 １．０　 ０．２　 ４０　 ３３　 ８２．５　 ４．３
６　 １．０　 ０．４　 ４０　 ２４　 ６０．０　 ２．１
７　 ２．０　 ０．１　 ４０　 ３１　 ７７．５　 ２．５
８　 ２．０　 ０．２　 ４０　 ２５　 ６２．５　 ３．７
９　 ２．０　 ０．４　 ４０　 １１　 ２７．５　 ３．０
苗下胚轴
基部愈伤
组织
Ｈｙｐｏｃｏｔｙｌ
ｃａｌｕｓ
１０　 ０．５　 ０．１　 ４０　 ３４　 ８５．０　 ５．４
１１　 ０．５　 ０．２　 ４０　 ３７　 ９２．５　 ６．１
１２　 ０．５　 ０．４　 ４０　 ３０　 ７５．０　 ５．２
１３　 １．０　 ０．１　 ４０　 ３２　 ８０．０　 ４．８
１４　 １．０　 ０．２　 ４０　 ２９　 ７２．５　 ４．１
１５　 １．０　 ０．４　 ４０　 ２３　 ５７．５　 ３．７
１６　 ２．０　 ０．１　 ４０　 ２０　 ５０．０　 ３．２
１７　 ２．０　 ０．２　 ４０　 １７　 ４２．５　 ２．６
１８　 ２．０　 ０．４　 ４０　 １３　 ３２．５　 １．７
表４　组培苗的生根及成活状况
Ｔａｂｌｅ　４　Ｓｔａｔｕｓ　ｏｆ　ｐｌａｎｔ　ｒｏｏｔｉｎｇ　ａｎｄ　ｓｕｒｖｉｖａｌ
培养基
Ｍｅｄｉｕｍ
ｔｙｐｅ
ＩＢＡ／
ｍｇ·Ｌ－１
根数／条
Ｎｏ．ｏｆ　ｒｏｏｔ
根长
Ｒｏｏｔ　ｌｅｎｇｔｈ／
ｃｍ
生根率
Ｒｏｏｔｉｎｇ
ｒａｔｅ／％
成活率
Ｓｕｒｖｉｖａｌ
ｒａｔｅ／％
生长状况
Ｇｒｏｗｔｈ　ｓｔａｔｕｓ
ＭＳ　 ０．５　 ５．０　 ３．１　 １００　 ９５．０
根长，量较多，有较多新叶产生
Ｌｏｎｇ　ａｎｄ　ｍｏｒｅ　ｒｏｏｔｓ，ｍｏｒｅ　ｎｅｗ　ｌｅａｖｅｓ
ＭＳ　 １．０　 ７．３　 ２．７　 １００　 ９５．０
根较长，量多，有较多新叶产生
Ｌｏｎｇ　ａｎｄ　ｍａｎｙ　ｒｏｏｔｓ，ｍｏｒｅ　ｎｅｗ　ｌｅａｖｅｓ
ＭＳ　 ２．０　 ６．４　 ２．４　 １００　 ９０．０
根较长，量较多，有少量新叶产生
Ｌｏｎｇｅｒ　ａｎｄ　ｍｏｒｅ　ｒｏｏｔｓ，ａ　ｆｅｗ　ｎｅｗ　ｌｅａｖｅｓ
１／２ＭＳ　 ０．５　 ３．２　 １．２　 ９５　 ６３．２
根很短，量很少，有少量新叶产生
Ｒｏｏｔｓ　ａｒｅ　ｓｈｏｒｔｅｓｔ　ａｎｄ　ｌｅａｓｔ，ａ　ｆｅｗ　ｎｅｗ　ｌｅａｖｅｓ
１／２ＭＳ　 １．０　 ４．９　 １．８　 ９５　 ８９．５
根较短，量较少，有少量新叶产生
Ｓｈｏｒｔｅｒ　ａｎｄ　ｌｅｓｓ　ｒｏｏｔｓ，ａ　ｆｅｗ　ｎｅｗ　ｌｅａｖｅｓ
１／２ＭＳ　 ２．０　 ４．１　 １．３　 ８５　 ７３．７
根较短，量较少，有极少新叶产生
Ｓｈｏｒｔｅｒ　ａｎｄ　ｌｅｓｓ　ｒｏｏｔｓ，ｌｅａｓｔ　ｎｅｗ　ｌｅａｖｅｓ
４３９
０６／２０１２ 草　业　科　学 （第２９卷０６期）
图１　叶片愈伤的诱导（Ａ）、增殖（Ｂ）、分化（Ｃ），下胚轴愈伤的诱导（Ｄ）、分化（Ｅ）、增殖（Ｆ）和组培苗的生根（Ｇ）及移栽（Ｈ）
Ｆｉｇ．１　Ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｆｒｏｍ　ｌｅａｖｅｓ（Ａ），ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃａｌｕｓ（Ｂ）ａｎｄ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ（Ｃ），
ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｆｒｏｍ　ｈｙｐｏｃｏｔｙｌ（Ｄ），ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｙｐｏｃｏｔｙｌ　ｃａｌｕｓ（Ｅ）ａｎｄ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ（Ｆ），ｒｏｏｔｉｎｇ（Ｇ）ａｎｄ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｉｎｇ（Ｈ）
率达８９．５％，移栽后产生的新叶相对较少。因此，
组培苗的最佳生根培养基为 ＭＳ＋１．０ｍｇ·Ｌ－１
ＩＢＡ。
３　讨论与结论
本研究以长叶点地梅的实生苗及其叶片来诱导
愈伤组织，初步建立植株再生体系，实现长叶点地梅
的快繁（图１）。不同植物激素对幼苗的生长影响不
同，只添加ＮＡＡ的植株１９ｄ后下胚轴周围少膨大，
变褐色，２５ｄ后有少量根产生，说明ＮＡＡ有利于无
菌苗根的发生，但不能诱导其产生愈伤组织。当
６－ＢＡ与ＮＡＡ共同作用时，无根发生，植株下胚轴基
部均出现愈伤组织，说明６－ＢＡ能够促进愈伤的形
成，其中发生愈伤效果最佳的培养基为 ＭＳ＋０．３
ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ＋０．１ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ。
目前，ＴＤＺ在愈伤组织诱导［９－１２］、体胚细胞发
生［１３］、丛生芽诱导［１４－１５］、内源激素水平［１６］等方面都
有所应用。本研究在叶片诱导愈伤的过程中，高浓
度的ＴＤＺ和ＮＡＡ都会在一定程度上抑制愈伤组
织的发生，在培养基 ＭＳ＋０．０２ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ和
０．３ｍｇ·Ｌ－１　ＴＤＺ上诱导出的愈伤淡绿疏松、长势
好，因此，为叶片诱导愈伤的最佳培养基。在愈伤组
织分化试验中，植株下胚轴基部产生的愈伤其分化
能力优于叶片愈伤，在最佳培养基 ＭＳ＋ ０．５
ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ＋０．２ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ上，愈伤分化
率最高，达９２．５％，平均分化芽个数最高达６．１。有
的植物的不同部位产生的愈伤，其分化能力也会有
一定的差别，如莴苣（Ｌａｃｔｕｃａ　ｓａｔｉｖａ）子叶和真叶诱
导产生的愈伤组织和再生苗频率与下胚轴相比会相
对较低［１７］。通过下胚轴基部的愈伤建立植株再生
体系已经在豆科牧草沙打旺（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ　ａｄｓｕｒ－
ｇｅｎｓ）等植物中研究应用［１８－１９］，是建立再生体系的有
效途径。在诱导生根的试验中发现，ＭＳ培养基更
有利于植株的生根成活，ＩＢＡ浓度过高或过低都会
影响植株的根数、根长及移栽苗的成活率，当ＩＢＡ
浓度为１．０ｍｇ·Ｌ－１　ＩＢＡ时，植株的根较长，量多，
有较多新叶产生，为最佳生根培养基。
本试验以长叶点地梅种子为外植体，通过叶片
愈伤及下胚轴愈伤诱导芽，并进行生根培养，从而建
立起完整的再生体系，为以后的组培快繁等相关研
究奠定基础。
参考文献
［１］　柳参奎．中国东北盐碱地植物原色图鉴［Ｍ］．哈尔滨：
东北林业大学出版社，２００６：１２３．
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ＺＨＡＮＧ　Ｙａｎ－ｎｉ，ＣＨＥＮ　Ｓｕ－ｂｏ
（Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｌａｎｄｓｃａｐｅ　Ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ，Ｎｏｒｔｈｅａｓｔ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｒｂｉｎ　１５００４０，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｈｙｐｏｃｏｔｙｌｓ　ａｎｄ　ｌｅａｖｅｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｓｔｅｒｉｌｅ　ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ　ｏｆ　Ａｎｄｒｏｓａｃｅ　ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ　ｗｅｒｅ　ｔａｋｅｎ　ａｓ
ｅｘｐｌａｎｔｓ　ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｈｏｒｍｏｎｅ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ　ｏｎ　ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ，ｂｕｄ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｒｏｏ－
ｔｉｎｇ．Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｍｅｄｉｕｍ　ｆｏｒ　ｈｙｐｏｃｏｔｙｌｓ　ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｗａｓ　ＭＳ＋０．３ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ＋０．１ｍｇ·Ｌ－１
ＮＡＡ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｒｅａｃｈｅｄ　８５％．Ｔｈｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ＭＳ＋０．０２ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ＋０．３ｍｇ·Ｌ－１　ＴＤＺ
ｗａｓ　ｂｅｔｔｅｒ　ｆｏｒ　ｌｅａｆ　ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｒｅａｃｈｅｄ　８０％．Ｔｈｅ　ｂｕｄｓ　ｗｅｒｅ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｉｎ　ｍｅｄｉｕｍ
ＭＳ＋０．５ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ ＋０．２ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ　ｆｒｏｍ　ｈｙｐｏｃｏｔｙｌｓ　ｃａｌｕｓ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｒａｔｅ
ｒｅａｃｈｅｄ　９２．５％．Ｔｈｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ＭＳ＋１．０ｍｇ·Ｌ－１　６－ＢＡ ＋０．２ｍｇ·Ｌ－１　ＮＡＡ　ｗａｓ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｆｏｒ　ｉｎｄｕｃｉｎｇ
ｂｕｄｓ　ｆｒｏｍ　ｌｅａｆ　ｃａｌｕｓ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｓｔ（８２．５％）．Ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｒｏｏｔｉｎｇ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗａｓ
ｍｅｄｉｕｍ　ＭＳ＋１．０ｍｇ·Ｌ－１　ＩＢＡ．Ｔｈｅ　ｒｏｏｔｉｎｇ　ｒａｔｅ　ｒｅａｃｈｅｄ　１００％ａｎｄ　ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｒａｔｅ　ｒｅａｃｈｅｄ　９５％．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ａｎｄｒｏｓａｃｅ　ｌｏｎｇｉｆｏｌｉａ；ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ；ｐｌａｎｔ　ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ
Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ａｕｔｈｏｒ：ＺＨＡＮＧ　Ｙａｎ－ｎｉ　Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｙａｎｎｉ８０８＠１２６．ｃｏｍ
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