免费文献传递   相关文献

蓝猪耳的组织培养和植株再生



全 文 :收稿 2001-07-27    修定 2001-11-23
 * 国家自然科学基金资助课题(批准号:300070077)。
蓝猪耳的组织培养和植株再生*
佟晓南 韩玉珍  徐夙侠(中国农业大学生物学院植物科学系 ,植物生理学与生物化学国家重点实验室 ,北京 100094)
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Torenia fournieri
TONG Xiao-Nan , HAN Yu-Zhen , Xu Su-Xia(S tate Key Laboratory of Plant Physiology and Biochemistry;Department of Plant
Science , College of Biological Science , China Agricultural University , Beijing 100094)
1 植物名称 蓝猪耳(Torenia fournieri)。
2 材料类别 叶片 。
3 培养条件 (1)MS 培养基;(2)MS +NAA 0.1
mg·L-1(单位下同)+6-BA 1;(3)MS+IAA 0.1+
6-BA 1 ,(4)MS +2 , 4-D 0.1+6-BA 1;(5)MS +
2 ,4-D 0.01+6-BA 1;(6)MS+IAA 1。培养基均
加 0.7%琼脂 、3%蔗糖 ,pH 5.8。培养温度为 22 ~
25℃,每天照光 12 h ,光照度 1 500 ~ 2 000 lx 。
4 生长与分化情况
4.1 芽的诱导 切取蓝猪耳幼苗叶片 , 用蒸馏水
冲洗干净后 , 在 70%酒精中浸洗 30 s , 然后在
0.5%NaClO中消毒 6 ~ 8 min , 用无菌水冲洗4 ~ 5
次 , 将叶片切成 1.5 cm 见方小块 , 接种于培养基
(1)~ (5)中进行培养。在(1)~ (3)中培养 1 周后
可见叶片开始膨大 , 约 3周后开始长芽。但在不加
激素的 MS 培养基(1)上出现明显的玻璃化现象 ,
在(2)、(3)培养基中均可产生正常芽 , 在(2)培养
基上的生长情况略好于(3), 生芽数量多 , 且生长
健康。在(4)和(5)培养基上培养的外植体 2 周后
拱起 , 边缘长出淡黄色瘤状愈伤组织 , 在(4)培养
基上 , 100%的外植体都长出愈伤组织 , 且愈伤组
织生长快 , 而在(5)培养基上仅有 50%的外植体长
出愈伤组织 , 且生长速度十分缓慢。当进一步提高
培养基中的 2 ,4-D浓度时 , 外植体变黄 , 不能长出
愈伤组织 。在(4)培养基上形成的愈伤组织切下转
至生芽培养基(2)上时 , 大约 1 周后可分化出芽
丛。
4.2 根的诱导 在培养基(2)中芽可继续生长。
待芽长至 2 ~ 3 cm 高 ,具有 3 ~ 5片叶片时(约 6周
后),将其移出并将芽丛切成单个小芽 , 转入培养
基(6)中继续培养诱导生根 ,约 2周后有新根长出 ,
生根率达 100%(图 1)。
4.3 移栽 当小苗长至 6 ~ 8 cm 时 ,将培养瓶塞
打开 ,置于 25-30℃温室中炼苗 2 d后 ,小心取出
用自来水冲洗去根部琼脂 , 移栽于蛭石和营养土
(1∶1)混合的培养基质中 , 注意保湿 1周 ,苗成活率
可达 85%以上 。
5 意义与进展 蓝猪耳属玄参科蓝猪耳属植物 ,
是热带亚热带地区的一种观赏花卉植物 。它具有
特殊的裸露胚囊 ,在胚囊发育的四核期 ,胚囊即从
珠孔端伸出 ,在胚囊发育成熟时 ,助细胞 、卵细胞和
大部分中央细胞均暴露在胚珠组织之外 ,是研究被
子植物胚囊发育和受精过程的极好模式植物 。本
图 1 蓝猪耳的组织培养再生植株
文建立了蓝猪耳的再生系统 ,可为蓝猪耳的遗传转
化及分子生物学技术研究其受精过程提供基础资
料 。国内外未见蓝猪耳植株再生的报道 。
255植物生理学通讯 第 38 卷 第 3 期 , 2002年 6月
DOI :10.13592/j.cnki.ppj.2002.03.023