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野生蔬菜地笋的染色体核型分析



全 文 :第 32 卷 第 2 期
2011 年 4 月
内 蒙 古 农 业 大 学 学 报
Journal of Inner Mongolia Agricultural University
Vol. 32 No. 2
Apr. 2011
野生蔬菜地笋的染色体核型分析
*
靳 博1, 王 永2, 康丽萍3, 云兴福1
(1. 内蒙古农业大学农学院,呼和浩特 010019;2. 内蒙古农牧业科学院,呼和浩特 010019;
3. 呼和浩特市职业学院,呼和浩特 010051)
摘要: 运用常规的根尖细胞压片法,对地笋的染色体核型进行了研究。结果表明:地笋染色体核型公式为 2n = 2x
= 30 = 18m(SAT)+ 10sm + 2T,染色体基数 x = 15,其中一对有随体,一对为端部着丝点染色体。染色体相对长度组
成为 2n = 30 = 6L + 12M2 + 6M1 + 6S,为二倍体植物。核型类型为 2C。
关键词: 地笋; 染色体; 核型分析
中图分类号: S647. 01 文献标识码: A 文章编号:1009 - 3575(2011)02 - 0151 - 04
KARYOTYPE ANALYSIS OF
WILD VEGETABLE BAMBOO SHOOTS
JIN Bo1, WANG Yong2, KANG Li - ping1, YUN Xing - fu1
(1. College of Agronomy,Inner Mongolia Agricultural University,Huhhot 010019,China;
2. Inner Mongolia Academy of Agricultural and Animal Sciences,Huhhot 010019,China;
3. Huhehaote Vocational Technical College,Huhhot,010019,China)
Abstract: Karyotype Analysis of Wild Vegetable Bamboo ShootsThe conventional method of pressure root - tip cells was used to ana-
lyze the chromosome number and karyotype of bamboo shoots. The results showed that the karyotype formula of bamboo shoots was 2n
= 2x = 30 = 18m(SAT)+ 10sm + 2T,and the chromosome base was x = 15,and one pair with satellite,and one pair was telocentric
chromosome. And the relative length of chromosome was 2n = 30 = 6L + 12M2 + 6M1 + 6S,and it belonged to diploid plant. The karyo-
type type was 2C.
Key words: Bamboo Shoots;Chromosome;Karyotype Analysis
地笋(Lycopus Lucidus Turcz) ,双子叶植物,唇形
科,地笋属,别名泽兰,地瓜儿苗,地参,蛇王草等。
其变种毛叶地笋(Var. hirtus Regel) ,别名地瓜儿苗,
行叶地瓜儿苗。其地上部分称为泽兰,别名:水香、
虎兰、虎蒲、龙枣、孩儿菊[1]。蒙名:给拉嘎日 -额布
斯[2]。属多年生草本植物,菜药兼用。主要分布在
辽宁、吉林、黑龙江、山东、河北、内蒙古、山西等地
区。地笋地上部分的茎叶作为蔬菜食用,一年收割
数茬,晒干后为常用中草药(泽兰) ,具有降血脂、通
九窍、利关节、养气血等功能。地下部分为地参,不
但能作为蔬菜使用,晒干后入药,功能与冬虫夏草相
当。地笋作为蔬菜,适合大众口味,具有很强的保健
功能。它是一种多用途的保健蔬菜,具有极高的开
发价值[3,4]。目前国内只是初步研究了地笋的生物
学特性、生长发育规律以及营养成分,关于地笋的细
胞学研究基本无报道,特别是对其细胞染色体进行
核型分析的研究未见报道[3,4]。因此,我们对地笋体
细胞染色体核型进行详尽的研究,以期为地笋的分
类和育种工作提供参考依据;为地笋种类的鉴定,引
种驯化,亲缘关系的鉴定和进化分析提供初步的细
* 收稿日期: 2010 - 11 - 08
基金项目: 内蒙古自治区自然科学基金项目的部分内容(200711020514)
作者简介: 靳博(1983 -) ,在读硕士.
* 通讯作者: 云兴福. E - mail:yxf5807@ sohu. com
胞学理论基础;更重要的是对丰富我国野生蔬菜品
种和新、奇、特品种具有重要的理论和实际意义。
1 材料与方法
1. 1 材料
地笋的播种材料 -根状茎于 2008 年 4 月取自
内蒙古鄂尔多斯市达拉特旗地笋种植基地,随后在
内蒙古农业大学试验基地种植,到秋季收取地下根
状茎后,于 2008 年 11 月在实验室中进行培养。
1. 2 方法
1. 2. 1 制片 采用根尖压片法[5 - 7],将地笋的根状
茎用清水冲洗数遍,摆放在铺有 3 层湿润纱布的容
器中,置 25℃恒温箱中,待有侧根长出且大部分根尖
达到 1cm ~2cm时,于早晨 7:30 取样,将切下的根尖
在 0. 002mol /L的 8 -羟基喹啉溶液中处理 1. 5h,用
清水冲洗后放入卡诺液中,在 4℃冰箱内固定 20h ~
24h,倒出卡诺液,水洗根尖,放入 1mol /L 盐酸中在
60℃水浴锅内解离 10min,取出后清水冲洗数遍,随
后放入清水中准备压片。常规压片,并用卡宝品红
染色 4min,在 OLYMPUS BX51 显微镜 100x 物镜下
用 DV 320 型显微图像捕捉系统拍照。
1. 2. 2 观察 选择细胞分裂中期染色体分散、数目
全的染色体图像进行显微摄影,并测 5 个细胞的染
色体指标,核型分析参照李懋学、陈瑞阳的方法[8],
染色体命名参照 Levan[9]等的命名系统,核型分类参
照 Stebbins[10]提出的分类标准,核型不对称系数按
Arano[11]的方法计算,染色体相对长度系数按 Kuo
等[12]的方法确定。核型分析用 Adobe Photoshop 软
件手工进行照片背景处理、长度测量和染色体配对,
同时对染色体数目进行统计,染色体长度包括随体
长度,并计算相对长度、相对长度系数、染色体长度
比及臂比,并对染色体类型进行统计分析,进而绘制
染色体核型模式图。
2 结果与分析
从地笋根尖制片中选 30 个染色体分散良好的
细胞做计数观察,见表 1,其中 85%[13]以上的细胞染
色体数为 30 条,因此确定地笋的染色体数目为 2n =
2x = 30,x = 15;没有发现非整倍体变异和多倍现象。
地笋的 15 对染色体相对长度变化范围在
1. 513% ~9. 034%,相对长度系数变幅为 0. 227 ~
1. 355,臂比幅度为 1. 034 ~ ∞,最长染色体的长度与
最短染色体的长度比为 5. 971,其中 3 对染色体臂比
值大于 2,为全组染色体的 20%,核型不对称系数为
60. 11%。根据 Stebbins 的核型分类标准,即按核型
中最长染色体与最短染色体之比,臂比值大于 2 的
染色体在染色体组中所占的比例,把核型的不对称
程度分为 12 个等级,分别为 1A、2A、3A、4A、1B、2B、
3B、4B、1C、2C、3C、4C,即由对称向不对称发展,其
中1A型最对称,4C型最不对称。地笋的核型属
于 2C型,说明其对称程度较低,进化程度较高。
根据染色体相对长度系数组成划分,染色体相
对长度组成为 2n = 30 = 6L + 12M2 + 6M1 + 6S,地笋
有 3 对(第 1 号,2 号,3 号)大染色体(L) ,有 6 对
(第 4 号,5 号,6 号,7 号,8 号,9 号)较大染色体
(M2) ,有 3 对(第 10 号,11 号,12 号)较小染色体
(M1) ,还有 3 对(第 13 号,14 号,15 号)小染色体
(S) ,较大染色体居多数。
表 1 30 个染色体分散良好的细胞计数观察表
Tab. 1 Counting observation of well dispersed
chromosome in 30 cells
细胞染色体数
Chromosome number
细胞个
Cell number
27 0
28 0
29 1
30 27
31 1
32 1
m:中部着丝点;sm:近中部着丝点;
T:端部着丝点;* :具随体染色体;
m:Median region;sm:Submedian region;
T:Telocentric;* :Chromosome with satellite
图 1 地笋体细胞染色体数目
Fig. 1 Somatic chromosome
numbers of Lycopus Lucidus Turcz
图 2 地笋核型
Fig. 2 karyotype of Lycopus Lucidus Turcz
251 内 蒙 古 农 业 大 学 学 报 2011 年
图 3 地笋的染色体核型模式图
Fig. 3 Chromosome karyotype of Lycopus Lucidus Turcz
根据图 3Levan 等的染色体命名系统,地笋第 1
对、2 对、3 对、6 对、8 对、10 对、12 对、13 对、14 对等
9 对染色体为中部着丝点染色体,其中第 2 对有随
体,第 4 对、5 对、7 对、9 对、11 对等 5 对染色体为近
中部着丝点染色体,第 15 对染色体为端部着丝点染
色体。从而得出核型公式为:2n = 2x = 30 = 18m
(SAT)+ 10sm +2T,见表 2。核型及核型模式图见图
1,图 2,图 3。
表 2 地笋的核型分析
Tab. 2 Karyotype analysis of Lycopus Lucidus Turcz
序号
Number
相对长度
Relative length /%
(S + L = T)
相对长度系数
Index of Relative
Length
着丝粒指数
Centromere
index /%
臂比
Arm Ratio
(Long /Short)
着丝点类型
Centromeric
Type
1 4. 099 4. 935 9. 034 1. 355 45. 373 1. 203 m
2 3. 862 5. 138 9. 000 1. 350 42. 911 1. 330 m*
3 4. 224 4. 630 8. 854 1. 328 47. 707 1. 096 m
4 2. 868 4. 935 7. 803 1. 170 36. 755 1. 721 sm
5 2. 665 5. 082 7. 747 1. 162 34. 400 1. 907 sm
6 3. 264 4. 438 7. 702 1. 155 42. 379 1. 360 m
7 2. 067 5. 048 7. 115 1. 067 29. 051 2. 442 sm
8 2. 846 4. 178 7. 024 1. 054 40. 518 1. 468 m
9 2. 338 4. 574 6. 912 1. 037 33. 825 1. 956 sm
10 3. 252 3. 365 6. 617 0. 993 49. 146 1. 034 m
11 1. 852 4. 529 6. 381 0. 957 29. 024 2. 445 sm
12 2. 654 3. 060 5. 714 0. 857 46. 447 1. 153 m
13 2. 213 2. 835 5. 048 0. 757 43. 839 1. 281 m
14 1. 683 1. 852 3. 535 0. 530 47. 610 1. 100 m
15 0. 000 1. 513 1. 513 0. 227 0. 000 ∞ T
m:中部着丝点;sm近中部着丝点;T:端部着丝点;* :具随体染色体
m:Medion region;sm Submedian region;T:Telocentric;* :Chromosome with satellite
3 讨论
本文初次报道了地笋染色体及其核型,目前国
内尚未见其报道。地笋染色体数为 2n = 30,x = 15;
核型公式:2n = 2x = 30 = 18m(SAT)+ 10sm + 2T,染
色体长度组成为 2n = 30 = 6L + 12M2 + 6M1 + 6S,核
型分类为 2C型。
对地笋二倍体的确定,我们从多数分散良好的
图片中观察,都可看到只有两个端粒,由此可以确定
地笋有两个染色体组,即为二倍体。
通过研究收录在陈瑞阳等编著的《中国主要经
济植物基因组染色体图谱》中唇形科的 21 个属的 26
种植物,发现这 26 个种类的染色体数目在 12 ~ 72
之间,因此地笋属的地笋的染色体数目可能在 12 ~
72 之间。统计其中 19 个二倍体唇形科植物的染色
体基数,可以知道它们的染色体基数范围在 6 ~ 17
之间[14],那么二倍体植物地笋的染色体基数可能在
6 ~ 17 之间,本试验对地笋染色体数目和基数的判
定,恰好分别落在这两个范围之间。由此,更加确定
地笋染色体数目是 30,染色体基数是 15。
Levitzky和 Stebbins[15]关于核型进化的基本观
点,认为高等植物染色体核型的进化趋势是由对称
向不对称发展,系统演化上处于比较古老或原始的
植物,大多具有较对称的核型,而不对称的核型则主
要见于衍生的,特化的以及比较进化的类群植物。
本试验中地笋核型不对称系数为 60. 11%,核型分类
为 2C型。说明地笋是进化程度较高的植物。地笋
染色体核型分类为 2C。纵观已测出的唇形科植物
351第 2 期 靳 博等: 野生蔬菜地笋的染色体核型分析
核型类型有 2A、3A、2B、3B,基本没有 2C 类型的报
道,在唇形科中这种植物为什么与其他种类的植物
在核型类型方面有这么大的差异?需要我们进一步
深入研究与探讨。
地笋属于在唇形科中具有较为特殊的核型类型
的植物,加之其含有丰富的营养成分和奇特的保健
功能,使我们不仅仅只是从宏观研究,更要把握它的
微观机理。本试验对地笋细胞微观水平进行初步研
究,为其微观机理的进一步研究奠定理论基础,并对
其抗逆性原理、良种培育及驯化等方面的研究有重
要的指导作用。
4 结论
地笋染色体数目为 2n = 30,x = 15,核型公式为:
2n = 2x = 30 = 18m(SAT)+ 10sm +2T,染色体长度组
成为 2n = 30 = 6L + 12M2 + 6M1 + 6S。最长与最短染
色体长度比为 5. 971,核型不对称系数为 60. 11%,
根据 Stebbins的核型分类标准属于 2C型。
参 考 文 献:
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