全 文 ：灵香草提取物的抑菌活性研究
杨瑞云1 , 李 远1 , 何瑞杰1 , 兰艳素1 , 邓业成2 　(1.广西师范大学化学化工学院药用资源化学与药物分子工程教育部重点实验
室 ,广西桂林 541004;2.广西师范大学生命科学学院 ,广西桂林 541004)
摘要　[目的] 研究灵香草系统溶剂提取物对10种植物病原菌的抑制作用。[方法] 分别以石油醚、氯仿、乙酸乙酯 、甲醇和水为溶剂制
取灵香草浸膏 ,用生长速率法测定各浸膏的抑菌活性。[结果] 在浸液浓度为 10 mg/ml 时 ,乙酸乙酯提取物对 8种病菌的抑制率为
100%;氯仿提取物对甘蔗凤梨菌 、芒果叶枯菌、玉米炭疽菌的抑制率高于 90%,对香蕉炭疽菌、柿角斑菌的抑制率为 88.39%和 87.68%;
甲醇提取物对稻瘟病菌的抑制率为 100%,对甘蔗凤梨菌、水稻纹枯菌的抑制率高于 90%;石油醚提取物的抑制率均在 70%以下;水提物
的抑菌活性最弱。预试试验表明 ,灵香草中含有萜类、黄酮类、醌类、内酯类、酚类和鞣质、氨基酸、多肽和蛋白质。[结论] 灵香草粗提物
对 10种植物病原菌具有强的抑制活性。
关键词　灵香草;提取物;抑菌活性
中图分类号　Q946.8　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2009)07-03035-02
Research on the Antibacterial Activity of Extracts from Lysimachia foenum-graecum
YANG Rui-yun et al　(College of Chemistry and Chemical Engineering ,Guangxi Normal University, Guilin , Guangxi 541004)
Abstract　[ Objective] The purpose was to research the inhibitions of extracts extracted from Lysimachia foenum-graecum by systematic solvents on 10
plant pathogens.[Method] The L.foenum-graecum extracts were produced with petroleum ether, chloroform, ethyl acetic methanol and water as solvents
and their antibacterial activities were measured by growth rate method.[ Result] When the extracts concn.was 10 mg/ml , the inhibitory rates on 8
pathogens of extracts extracted by ethyl aceticwere 100%;the inhibitory rates on Thielaviopsis paradoxa , Pestalotia calabae and Colletotrichum maydis of
extracts extracted by chloroform were higher than 90% and their inhibitory rates on Glorosprium musarum and Persimmon angular were 88.39% and
87.68%;the inhibitory rates on Pyricularia oryzae of extracts extracted by methanol was 100%and their inhibitory rates on T.paradoxa and Rhioctonia
solani were higher than 90%;the inhibitory rates of extracts extracted by petroleum ether were all lower than 70%and the antibacterial activity of extracts
extracted by water was weakest.There were terpenoids , flavonoids , anthraquinones , lactones , phenols , tannins , amino acids , polypeptides and protein in L.
foenum-graecum.[ Conclusion] The crude extracts of L.foenum-graecum had extensive antibacterial activity.
Key words　Lysimachia foenum-graecum;Extracts;Antibacterial activity
基金项目　973计划前期研究专项(2007cB516805);广西应用基础研究
专项(桂科基 0731050);药用资源化学与药物分子工程教育
部重点实验室主任基金项目(桂科能 0630006-5D08);广西
医药产业人才小高地项目(0809)。
作者简介　杨瑞云(1978-),女 ,广西桂林人 ,博士 ,副教授 , 从事天然
产物化学研究。
收稿日期　2008-12-08
　　随着人们健康意识的不断提升 ,植物源农药以其高效 、
低毒 、安全的特性得到广泛关注[ 1-2] ,在农业生产中使用高
效无公害农药将是必然趋势。灵香草(Lysimachia foenum-
graecum Hance)为报春花科珍珠菜属植物 ,主产于广西 、广东 、
四川 、云南 、贵州等地[ 3] 。作为一种纯天然香料来源 ,灵香草
精油在食品工业和烟草行业中被广泛应用 ,是烟用香精的重
要赋香剂之一[ 4] ,以无污染 、无毒副作用而倍受消费者青睐。
同时 ,灵香草全草入药 ,味辛 、甘 ,性平 ,无毒 ,归肺 、胃经 ,具
有解表 、止痛 、行气 、祛风寒 、辟秽浊 、驱蛔的功效[ 5] 。
目前针对灵香草提取物的抑菌活性研究报道较少 ,因
此 ,笔者选用 10种常见植物病原真菌 ,对灵香草的系统溶剂
提取物分别进行抑菌测试 ,同时进行化学成分的初步研究 ,
以期为植物源抑菌剂的研究与开发提供新的素材 ,也为灵香
草更合理的开发利用提供有效参考。
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　供试植物。灵香草于 2007 年 7 月采集于广西金
秀县。
1.1.2　供试菌种 。梨褐斑病菌 Mycosphaerella sentina (Fr.)
Schroter 、柑桔疮痂病菌 Sphaceloma fawcettii Jenkins 、香蕉炭疽
病菌 Glorosprium musarum Cookeet Mass 、甘蔗 凤梨病菌
Thielaviopsis paradoxa(de Seynes)V.Hohel 、水稻纹枯菌 Rhiocto-
nia solani Kǜhn、芒果叶枯菌 Pestalotia calabae Westond、稻瘟病
菌 Pyricularia oryzae Cavara.、梨锈病菌 Gymnosporangium fuscum
R.Hed、玉米炭疽病菌 Colletotrichum maydis、柿角斑病菌 Per-
simmon Angular Leaf Spot ,均由广西师范大学生命科学学院
提供 。
1.1.3　仪器与试剂。仪器:R-1001旋转蒸发仪(郑州长城科
工贸有限公司),BS/BT124S 型电子天平 、LRH-250-G光照培
养箱(广东省医疗器械厂),洁净工作台(上海博迅实业有限
公司医疗设备厂),不锈钢手提式压力蒸汽灭菌器(上海博迅
实业有限公司医疗设备厂)。试剂:乙醇 、氯仿 、石油醚 、乙酸
乙酯 、丙酮均为分析纯(广东汕头西陇化工厂),蒸馏水 ,马铃
薯 、蔗糖 、琼脂均为生化级试剂。
1.2　灵香草成分的提取　称取干燥的灵香草样品 100 g ,粉
碎 ,用 3倍于样品的石油醚溶剂回流提取。提取液经旋转蒸
发器减压浓缩 ,得到石油醚(1#)浸膏。残渣挥干溶剂 ,加入
3倍于样品的氯仿溶剂回流提取 ,提取液浓缩后得到氯仿
(2#)浸膏。同法操作 ,依次得到乙酸乙酯(3#)、甲醇(4#)、水
(5#)浸膏。取灵香草各个部分浸膏分别用丙酮∶水为 1∶1配成
质量浓度为 100mg/ml的溶液 ,冰箱(0～ 4 ℃)中保存备用。
1.3　抑菌活性测定　采用生长速率法[ 6] ,在洁净操作台上 ,
将供试菌种接在马铃薯琼脂蔗糖培养基(PDA)平板培养基上
扩大培养 3 d ,备用 。用移液管取 1 ml药液加入 10 ml量筒
中 ,再加入 9 ml PDA热培养基 ,混匀 ,倒入已灭菌的 9 cm培
养皿中 ,冷却凝固后即制成带毒培养基。真菌用直径 0.4 cm
的打孔器在培养好的菌落边缘切取菌饼 ,并用接种针将菌饼
接在带毒培养基表面 ,使菌饼带有菌丝的一面朝下 ,每个培
养皿接 3个菌饼。将培养皿放入温度为(28±1)℃,相对湿度
为 65%～ 75%的培养箱中培养 48 h ,用十字交叉法测量菌落
直径 ,按下式计算抑菌率:
安徽农业科学 , Journal of Anhui Agri.Sci.2009 , 37(7):3035-3036　　　　　　　　　　　　　　　　　　　责任编辑　金琼琼　责任校对　卢瑶
真菌的菌落直径=测量的平均菌落直径-0.4
抑菌率(%)=(对照菌落直径-处理菌落直径)/对照菌
落直径×100
1.4　系统预试
1.4.1　样品制备。参照方法“1.2” ,分别制取石油醚 、氯仿 、
乙酸乙酯 、甲醇浸膏。
1.4.2　预试方法[ 7] 。萜类:Sallkowski 反应呈阳性;生物碱:
加碘化铋钾试剂 ,反应呈阳性;黄酮类:盐酸镁粉反应呈阳
性;醌类:Brntrager反应呈阳性;内酯类:内酯化合物的开环与
闭环反应呈阳性;酚类和鞣质:三氯化铁反应呈阳性;氨基
酸 、肽和蛋白质类:双缩脲反应呈阳性。
2　结果与分析
2.1　抑菌效果　采用生长速率法测定灵香草系统溶剂提取
物对10种病原菌生长的抑制作用。由表 1可知 ,在供试浓度
为 10 mg/ml时 ,不同提取物均表现出良好的抑制活性 ,乙酸
乙酯提取物的活性最好 ,除对梨褐斑病菌的抑制率为
93.26%、对玉米炭疽病菌的抑制率为 95.89%外 ,对其他 8
种病菌的抑制率都达到了 100%;氯仿提取物次之 ,对甘蔗凤
梨菌 、芒果叶枯菌 、玉米炭疽菌的抑制率在 90%以上 ,对香蕉
炭疽菌 、柿角斑菌的抑制率为 88.39%和 87.68%,对其余 5
种病菌的抑制率也均在 50%以上;甲醇提取物对稻瘟病菌的
抑制活性达到 100%,对甘蔗凤梨菌 、水稻纹枯菌的活性在
90%以上 ,对其余 7种病菌的抑制活性一般;石油醚提取物
的抑菌活性相对较弱 ,均在 70%以下;水提物的抑菌活性
最弱 。
表1　灵香草不同溶剂提取物对病原菌的抑制活性
Table 1　Inhibitory activity of different solvents extracts from Lysimachia foenum-graecum Hance on the pathogenic bacteria %
供试菌株
Test strains
1# 2# 3# 4# 5#
甘蔗凤梨菌 Thielaviopsis paradoxa (de Seynes)V.Hohel 66.72±0.84 c 90.15±0.16 b 100.00±0.00 a 92.48±1.19 b 67.68±1.78 c
水稻纹枯菌 Rhioctonia solani Kǜhn 51.90±0.75 d 69.20±0.46 c 100.00±0.00 a 95.26±0.44 b 44.81±0.96 e
香蕉炭疽菌 Glorosprium musarum Cookeet Mass 47.54±0.80 c 88.39±0.80 b 100.00±0.00 a 40.40±1.34 d 30.80±1.18 e
柑桔疮痂菌 Sphaceloma fawcettii Jenkins 29.17±0.86 c 77.87±1.41 b 100.00±0.00 a 24.53±0.96 d 9.33±0.53 e
梨褐斑病菌 Mycosphaerella sentina(Fr.)Schroter 43.87±1.89 c 71.57±0.73 b 93.26±0.15 a 31.19±0.10 d 34.52±1.28 d
芒果叶枯菌 Pestalotia calabae Westond 45.85±0.34 c 94.56±0.38 a 100.00±0.00 a 55.66±3.97 b 28.14±2.25 d
柿角斑菌 Persimmon Angular Leaf Spot 57.78±0.98 c 87.68±0.60 b 100.00±0.00 a 37.45±1.32 d 9.17±1.27 e
稻瘟病菌 Pyricularia oryzae Cavara 47.95±0.52 c 51.27±2.13 c 100.00±0.00 a 100.00±0.00 a 56.92±0.30 b
梨锈病菌 Gymnosporangium fuscum R.Hed 52.71±0.96 c 56.88±0.72 c 100.00±0.00 a 53.00±0.86 c 22.22±0.48 b玉米炭疽菌 Colletotrichum maydis 69.54±1.09 c 90.42±1.37 b 95.89±1.19 a 97.26±0.68 a 29.09±1.52 d
　注:各样品溶液浓度为 10 mg/ml;数据为 3次重复平均值 ,同列数据后标有相同字母者表示在 0.05水平上差异不显著。
　Note:The concentration of each sample solution was 10 mg/ml;The data are the average values for three repetitions.The same letters in the same columnmean no sig-
nif icant difference at 0.05 level.
2.2　预试结果　从表 2可知 ,石油醚提取物中含有萜类 、醌
类成分;氯仿提取物含有萜类 、醌类 、黄酮类成分;乙酸乙酯
提取物中含有萜类 、黄酮类 、醌类 、氨基酸 、多肽和蛋白质成
分;甲醇提取物含有萜类 、黄酮类 、醌类 、内酯类 、酚类和鞣质
成分。在系统预试中 ,通过不同溶剂分步萃提 ,不仅有效物
质浓度增大 ,而且排除许多杂质干扰 ,现象更为明显。综合
上述试验结果 ,可知灵香草中含有萜类 、黄酮类 、醌类 、内酯
类 、酚类和鞣质 、氨基酸 、多肽和蛋白质成分 。
表 2　灵香草不同溶剂提取物的预试情况
Table 2　Pre-test of different solvents extracts from Lysimachia foenum-
graecum Hance
化学成分
Chemical components
1# 2# 3# 4#
萜类 Terpenoid + + + +
生物碱 Alkaloids - - - -
黄酮类 Flavonoid - + + +
醌类 Anthraquinones + + + +
内酯类 Lactones - - - +
酚类和鞣质 - - - +
Phenols and tannins
氨基酸、肽和蛋白质类 - - + -
Amino acids and polypeptides , protein
3　结论
灵香草不同溶剂提取物的抑菌活性各有差异 ,在浓度为
10 mg/ml时 ,乙酸乙酯提取物的活性最好 ,对甘蔗凤梨菌 、水
稻纹枯菌 、香蕉炭疽菌等 8种病菌的抑制率均达到了 100%,
提示其中可能含有某些高效广谱抗菌成分;氯仿和甲醇提取
物的抑菌活性也较好 ,说明在灵香草中存在着丰富的抑菌成
分 ,既有强极性的 ,也包含弱极性的。从预试结果也可看出 ,
灵香草中含有萜类 、黄酮类 、醌类 、内酯类 、酚类和鞣质 、氨基
酸 、多肽和蛋白质等多种化学成分 ,这些成分大多具有良好
的生物活性 ,使得灵香草粗提物在抑菌活性方面表现出广谱
性 ,同时 ,多种成分在抑制真菌生长方面也可能存在着协同
作用 。对灵香草抑菌成分的进一步分离纯化和活性测试工
作正在进行之中。
参考文献
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究[ J] .西北植物学报 ,2004, 24(10):1949-1952.
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