全 文 :第 52卷第 4期
V o l
.
52 No
.
4
重庆工商大学学报 ( 自然科学版 )
J C ho n g甲n gTeC a ho lB s uin e s sUni v
.
( Na tSc i Ed )
20 8年 8月
A u g
.
20 8
文章编号 : 167 2一 0 5 8X ( 2X)( 8) 0 4一 0 416 一 0 3
黄连花蓄润肠通便功能研究
冯 敏
(重庆工商大学 环境与生物工程学院 ,重庆 创X旧76 )
摘 要 :采用动物实验对不同剂量 ( 5田 、 1 仪x〕、 2 《x x〕 mg · k g 一 ` )的黄连花荃提取物对小鼠便
秘模型的通便效果进行观察 ,发现在不影响小鼠正常生长的情况下 ,黄连花荃中高剂童组能够显著
缩短首便时间 , 增加黑便数量和质量 , 增加墨汁推进率 , 说明黄连花荃具有润肠通便的功能 。
关键词 :黄连花荃 ;提取物 ;润肠通便
中图分类号 : 0 656 文献标识码 : A
黄连的花具有与根茎相同的功能成分£’ ,jz , 表明黄连花墓具有和黄连相同的药理功能 。 重庆石柱黄
连产区年产干花 30 t 左右 ,如能加以开发利用 ,势必会带来良好的经济效益和社会效益 。 通过小鼠小肠
推进实验和排黑便的实验 ,测定黄连花墓的润肠通便的功能 。
1 材料和方法
( l) 实验材料 。 黄连花墓 ( 4 年生 , 采于重庆石柱 ) ;小白鼠 18 一 2 9 (昆明种 ) :购于重庆市中药研究
院动物室 , 许可证号 : SCX K (渝 ) 20 2侧X娜 ;基础饲料 ( 由重庆中药研究院动物室提供 ) ;地芬诺醋 ( 四川绵
阳市兽药厂 ) ;阿拉伯胶 (上海顶满工贸有限公司 ) ;活性炭 (上海活性炭厂 ) 。
( 2) 仪器与设备 。 OT M Y sS 一 325 灭菌锅 ( oT MY K OGY O 有限公司 ) ; RE 一 52 旋转蒸发器 (上海亚荣
生化仪器厂 ) ; AC S 一 6 H 一 B 电子秤 (中山市金利电子衡器有限公司 ) ;小鼠饲养笼 R CSP 新型 (重庆腾鑫
机电设备有限公司 ) ;洁净级动物房许可证号 : SxY K (渝 ) 20 5。厌)2 , 温度 : 20 一 24 ℃ , 湿度 : 72 % , 粉尘 50
林m , 噪声 50 d ;B 小鼠灌胃专用针头 ,杭州冯氏实验动物器材厂 (杭州冯氏实验动物器材厂 ) 。
( 3) 灌胃液制备 。 取干燥的黄连花墓 50 9 , 20 倍水量沸水提取 30 而 n , 过滤后加水 ,反复提取 3 次 。
合并滤液 , 减压浓缩至 50 m (L 提取液浓度为 1 9 · mL 一 ’ ) 。 将其分别分装于小瓶中 , 密封 , 于 121 ℃ , 30
m in 灭菌 ,放置于冰箱中 ,备用 。
( 4) 动物分组 。 取 18 一 2 9小白鼠 :购于重庆市中药研究院动物室 ,许可证号 : SC x K (渝 ) 20 2。以科 ,
雌雄各半 , 随机分为 5 组 ,每组 20 只 , 10 只用于做小肠推进实验 , 10 只用于做排便功能实验 。 设定空白对
照组 ,便秘对照组和高 、 中 、低 3 个剂量组 。 每天分别用不同浓度的黄连花墓提取液灌胃 ,正常对照组和
模型对照组每天用等量蒸馏水灌胃 ,连续灌胃 10 d ,每天 l 次 。
( 5) 墨汁的配置和地芬诺醋悬液的配置 。 准确称取阿拉伯胶 10 9 ,加水 80 mL , 煮沸至溶液透明 , 称
取活性碳 (粉状 ) 5 9 加至上述溶液中煮沸 3 次 ,待溶液凉后加水定容到 10 m L , 4 ℃保存 。
地芬诺醋混悬液的配制 :取地芬诺醋粉末 25 m g ,加水配制成 25 mL , 即配成 1 m g · rnL 一 ’地芬诺醋悬
液 。 按 10 m g · k g 一 ’ bw 灌胃 ,则每只鼠灌胃量为 0 . 2 m L 。 注意要现配现用 。
( 6) 剂量确定 。 按人每 日 6 9 推荐用量 ,按人 60 k g计算每 日推荐量为 l o mg · k g 一 ’ 。 按照人体推荐
量 5 、 10 、 20 倍设计低 、 中 、高 3 个剂量 , 即 50 、 l (x x 〕、 2 仪均 m g · k g 一 ` 。 对应于 3 个剂量的提取物浓度分
收稿日期 : 2 0 8 一 4 一 06 ;修回日期 二2X() 8 一 4 一 2 。
作者简介 :冯敏 ( 19 50 一 ) ,女 ,四川新都人 ,助教 ,主要从事天然产物开发研究。
第 4 期 冯 敏 : 黄连花签润肠通便功能研究 4 1 7
别为 50 、 10 、 20 mg · mL 一 ’ 。 按每只小鼠以 20 9计 , 每鼠灌胃量均按照 0 . 01 m L · g 一 ’ , 则每鼠灌胃
0
.
2 m L
。试验期间根据小鼠体重的实际增加情况对灌胃体积做适当调整 ,灌胃量确定以全部试验小鼠的
平均体重为基准 。
( 7) 首便时间。 将小白鼠连续灌胃 10 d 后 ,各组小鼠禁食 24 h 。 除正常对照组外 ,其余各组灌胃地
芬诺醋 or m g · k g 一 ` bw 。 将小鼠放人鼠笼中单独饲养 , 正常饮水进食 。 l h 后 , 给各组动物灌胃已经配好
的墨汁作为标记物 。 观察记录每只小鼠自灌胃地芬诺醋起 ,至首次排出黑便时间 , 以及 7 h 内小鼠排便数
量和重量 。
( 8) 小肠推进率 。 按照上述剂量 ,将小白鼠连续灌胃 10 d 后 ,末次给药前禁食 24 h 。 再次给提取液 ,
30 m in 后除空白对照组外 ,其余各组灌胃地芬诺醋 10 m g · k g 一 ’ bw( 空白组灌胃蒸馏水 ) 。 20 m in 后给各
组动物灌胃 15% 墨汁 ,再过 20 m i n 用颈椎脱臼法 3[] 处死小鼠 , 立即取出自幽门至回盲肠部的整段小肠 ,
不加牵引平铺至直线 。 测量小肠全长和由幽门至墨水运动前沿为 “ 推进长度 ” ,计算小肠推进率 :
墨汁推进率 二 墨汁推进长度 ( 。m ) /小肠管总长度 ( c m ) x 10 %
( 9) 统计方法 。 SSP 1S 2 . O统计软件进行方差分析和 t 检验 。
2 结果与讨论
( l) 黄连花蔓提取液对小鼠体重的影响 ,详见表 1 。
表 1 黄连花井提取液对于小鼠体重的影响 ( n 二 9 ) 《无 士 : )
组别 试验前体重g/ 试验末体重 / g 体重增长/ g 增长率 /% 尸值
正常对照 18 . 5 士 1 . 4 29 . 4 士 1 . 5 10 . 9 土 1 . 5 59 -
模型对照 19 . 2 土 1 . 5 30 . 2 士 1 . 5 1 1 士 1 . 5 57 0 . 2 9
低剂量组 18 . 4 士 0 . 9 29 . 6 士 2 . 1 11 . 2 士 2 . 1 6 1 0 . 5 76
中剂量组 18 . 6 土 0 . 9 29 . 7 士 1 . 7 11 . 1 士 1 . 3 6() 0 . 4 85
高剂量组 18 . 9 土 0 . 9 3 0 . 6 土 2 . 2 11 . 7 士 1 . 6 62 0 . 7 19
( 2) 黄连花墓对小鼠首便时间和黑便量的影响 。 给予小鼠灌胃地芬诺醋形成便秘模型 ,再灌胃黄连
花墓提取液 , 观察小鼠首次排除黑便的时间 ,记录 7 h 内小鼠的排便数量并称重 ,结果见表 2 。
表 2 黄连花 , 提取液对小鼠首便时间和黑便 t 的影响 ( n 二 9 ) (无 土 : )
组别 正常对照 模型对照 低剂量组 中剂量组 高剂量组
首黑便时间 / m i n 5 9 . 8士 16 . 6… 170 . 7 士 3 5 . 4 136 . 6士 32 . 3 . 11 1. 2 . 6 士 24 . 6 ` 9 1. 7士 19 . 6二
黑便数量 /个 5 0 . 9 士 6 . 2二 ` 20 . 9 土 9 . 3 26 . 6土 8 . 3 39 . 6 土 8 . 6 4 1. 3士 7 . 9 * .
黑便重量 / 9 0 . 57 土 0 . 3 3 . ` 0 . 33土 0 . 10 0 . 3 6士 0 . 4 1 0 . 4一土 0 . 15 0 .盯 土 0 .对 ’ .
注 : 与模型对照比较 , ’ 尸 < 0 . 05 , “ 尸 < 0 . 01 , . ` . P < 0 . 0 1)
( 3) 黄连花墓对小鼠小肠推进率的影响 。 由表 1 可见 ,小鼠的初始体重在各剂量组及对照组间比较 ,
无显著差异 (尸 > 0 . 05 ) ,黄连花墓对小鼠正常生长无影响。 由表 2 和表 3 可见 ,模型对照组与正常对照组
相比 ,首便时间延长 ,黑便数量和重量减少 ,小肠推进率降低 , 且具有极显著差异 (尸 < 0 . 01 ) ,表明建模成
功 。 实验在 1 以x〕 m g · k g 一 ’ 和 2 以x ) m g · k g 一 ’剂量时 ,缩短排便时间和排便量具有显著和极显著差异 ,表
明黄连花墓具有促进小鼠排便 、缩短排便时间 、增加排便数量和重量的作用 。 各实验剂量组与便秘模型
组相比 ,小肠推进率提高 ;在 l (x x〕 m g · k g 一 ’ 和 2 仪旧 m g · k g 一 ’剂量时 , 与模型组对比 , p 值分别为 0 . 0 25
和 0 . 020 ,具有显著差异 ,表明黄连花墓具有促进小肠推进作用 。
4 18 重庆工商大学学报( 自然科学版 ) 第25 卷
组别
表 3 黄连花共提取液对小鼠小肠运动的影响 ( n二 9) ( 无土 :)
小肠总长度/c m墨汁推进长度/c m推进率/ % 尸值
正常对照
模型对照
低剂量组
中剂量组
高剂量组
5 4
.
56 土 4 .5 2
5 4
.
(X) 土 5
.
2 2
5 2
.
6 9土 3 .(X)
5 3
.
56 土 4 .2 1
5 6
.
3 1士 0 .7 3
34
.
3 1士 10 .20
6 1
.
56 土 4 .56
18
.
54 土 5 .35
23
.
25 士 7
.
2 9
23
.
75 土 6 .4 9
62
.
40 士 16 .35
30
.
97 土 9.36
35
.
23 土 10 .57
42
.
8 3 土 10
.
92
42
.
19土 9.0 1
0
.仪洲)
0
.
37 9
0
.
0 25
0
.
02 0
3 结 论
通过小鼠小肠推进实验和排黑便的实验 ,在不影响小鼠体重的情况下 , 中、 高剂量组的黄连花墓具有
促进小肠蠕动 、促进排便的功效 , 即具有润肠通便的功能 。 拟考虑将黄连花蔓开发为一种具有润肠通便
功能的茶或冲泡剂 。
参考文献 :
【l] 冯敏 ,李学刚 ,张保顺 . 味连及副产物有效成分和氨基酸含量的研究【J〕. 中药材 , 20 5 ( 9 ) : 753 一 754
【2〕冯敏 ,李学刚 ,屠大伟 ,等 . 黄连花氨基酸及矿质元素含量的测定〔J] . 中华中医药杂志 , 2加5 , 20 : 2 78 一 279
【3] 卫生部. 保健食品功能评价程序和检验方法〔M ] . 北京 : 中国标准出版社 , 2的 3
【4〕苗明三 . 实验动物和动物实验技术【M 〕. 北京 : 中国中医出版社 , 19 7
S t u d y o n t h e fu n e t i o n o f l o o s i n g t h e b o w e l t o r e l i e v e e o n s ti P at i o n b y
th e fl o w e r o f C o P t i s e h i n e n s i s F r a n e h
F EN G M in
( C
o l e罗 o f En v i
onmr
e n tal an d B iol
o
ig
e al E n ig
n e e ir n g
,
Ch o n gq i
n g eT
e hon fo 盯 an d B u s i n e s s
U n iv e sr iyt
,
Ch o n明i n g 4 (兀旧67 , Ch i n a )
A bs tr a c t
:
nI
o dr e r ot s t u衍 ht e if o w e r o f Co P t i s e h i n e n s i s F r an e h w h i e h h a s ht e e fe e t on lo s i n g ht e bo w e l
ot er l i e v e e o n s u p iat
o n , id 价 er n t a o s e of e x atr e u o n of 山 e fl o w e r ( 50 m g · k g 一 ` , l 《x x 〕 m g · k g 一 ’ , 2 0 0 m g ·
k g
一 ’
) w
e er u s e d b y ht e e o n s it p a t io n m i e e m ed
e ls
.
hT
e er s u lst , how
e d 山 at w h e n ht e m i e e w e ihg t has n o infe e it o n
,
ht e m idd le
,
h ihg d
o s e 脚 u p s h a v e ht e 51 , i if e an t滋 e i e n e y ot sh o ert n ht e d e fe e a it on it m e , in e er as e ht e q u an t iyt
an d q
u al iyt Of ht e dej
e e it o n
,
in e er as
e ht e sm al l i
n et st i n e p or p u ls i o n
.
hT
e fl ow
e r
Of C
o p it s e h in e n s i s Farn
e h h a d
ht e e fe
e t ; o n lo s in g ht e ha w
e l ot er il
e v e e o n s it P iat
o n w a s ht
e e o n e l u s io n
.
K e y w o r ds
: fl ow
e r Of C o P it s e h i n e n s i s F r an e h ; e x tacr
t ; lo s i n g ht e b o w e l to er il e v e e o n s tiP a t io n
贵任编辑 : 田 静