全 文 ：隔山消及其不同炮制品对小鼠的抗炎作用
*
刘 刚，朱小珊，陈金利，邓旭坤，梅之南＊＊
(中南民族大学药学院，武汉 430073)
摘 要 目的:研究隔山消及其不同炮制品的抗炎作用及机制。方法:采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、角叉菜胶致小鼠足肿胀
和醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性试验观察其抗炎作用，测定对炎症渗出液中前列腺素 E2(PGE2)以及血清中超氧化物歧化酶
(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)和一氧化氮(NO)的影响。结果:隔山消生品及炮制品(2、4 和 8g /kg)对小鼠耳廓肿胀
及足肿胀均有明显的抑制作用，并可显著抑制醋酸致小鼠腹腔毛细血通透性增加。能够明显降低炎症渗出液中 PGE2 和血清中
MDA、NO含量，明显提高小鼠血清 SOD和 CAT活力。结论:隔山消及两种炮制品均有一定的抗炎作用，两种炮制品的抗炎效果比
生品有所增强。抗炎作用机制可能与其抑制 PGE2、NO等炎症介质生成，抑制脂质过氧化、增强自由基清除能力有关。
关键词 隔山消;抗炎作用
土家药隔山消为萝藦科植物牛皮消 Cynanchumauricutalum
Royle ex Wight． 的块状根。土家医认为本品具有健胃消积，解
毒消肿、抗炎镇痛之功效，由于本品具有滑肠致泻的副作用，为
了增效减毒，一般采用米制法或黑豆黄酒制法［1］进行炮制后使
用。有关隔山消的研究很多，但不同炮制方法抗炎作用的研究
尚未见报道。
1 材料与方法
1． 1 试验药物 隔山消采集于湖南省湘西土家族自治州，经
中南民族大学药学院万定荣教授鉴定为萝藦科植物耳叶牛皮
消的块茎。将药材切成薄片，晒干，备用。炮制品 1:将 3kg 米
置热锅中加热至起烟，投入生品薄片 1kg，中火拌炒至药物变为
黄色，米成焦黄或焦褐色，出锅，筛去米，放凉。炮制品 2:黑豆
100g加水适量煮 3h，得汁后再加水煮 2h。两次所得料液集中
后蒸干至 50g，与 100g黄酒混匀，将黑豆汁黄酒混合液与 1kg生
品拌匀，密闭使饮片吸干混合液，最后烘干饮片，放凉。
分别取生品与两种炮制品，按料液比 1:10 用水微沸 2h 得
滤液，连续操作 3 次后合并滤液，浓缩，干燥得浸膏。用时以生
理盐水配成所需浓度溶液。地塞米松磷酸钠注射液(安阳九州
药业有限责任公司)。
1． 2 动物 SPF级昆明种小鼠，体重 18 ～ 22g，由武汉生物制
品研究所提供。实验动物许可证号:SCXK(鄂)2008-0003。
1． 3 试剂 角叉菜胶(美国 Sigma 公司)。超氧化歧化酶
(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)和一氧化氮(NO)试
剂盒均购于南京建成生物工程研究所。
1． 4 方法
1． 4． 1 对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响［2，3］ 小鼠 110 只，随
机分为 11 组，雌雄各半，灌胃给药，每日 1 次，连续 7d。空白对
照组灌胃给予等容积生理盐水，阳性药腹腔注射地塞米松
(10mg /kg)。末次给药后 30min，将 50μl 二甲苯涂于小鼠右耳
廓两面致炎，致炎 1h 后脱颈处死动物［4］，剪下耳壳，用直径
8mm的打孔器在两耳对称位置取下左右耳片，精密称取两耳片
重量的差值(mg)作为炎症肿胀度，计算炎症抑制率(%)。
1． 4． 2 对角叉菜胶致小鼠足肿胀［5］及炎症渗出液中 PGE2 含
量的影响［6，7］ 小鼠 110 只，按体重随机分组，给药方法同上。
末次给药后 30min，每只小鼠右后足跖皮下注射 1%角叉菜胶
50μl。致炎 4h后脱颈处死动物，在踝关节上剪下致炎足，精密
称取左右两足重量的差值(mg)作为炎症肿胀度，计算炎症抑制
率(%)。将致炎足充分剪碎后用生理盐水 2ml 4℃浸泡过夜，
3000rpm离心 5min，取上清液 0． 25ml，加 0． 5mol /L的氢氧化钾-
甲醇溶液 2ml，50℃下异构化 20min，用 5ml 甲醇稀释，于波长
278nm处测定其 OD 值，以每克炎症组织相当的 OD 值表示
PGE2 的相对含量。
1． 4． 3 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响［8］ 小鼠 110 只，
按体重随机分组，给药方法同上。末次给药后 30 min，尾静脉注
射 0． 5%依文思兰生理盐水溶液 0． 1 ml /10g(体质量) ，随后腹
腔注射 0． 6%冰醋酸致炎 0． 2 ml /只，15 min 后，脱颈椎法处死
小鼠。然后腹腔注射 5 ml 生理盐水冲洗腹腔，轻揉小鼠腹部，
剪开腹腔收集洗出液，3000rpm 离心 5 min 离心，取上清液于波
长 590 nm处测其 OD值。
1． 4． 4 对小鼠血清 MDA 含量、SOD、CAT 活力和 NO 的影响
小鼠 120 只，按体重随机分组，给药方法同上。于末次给药
30 min后，每只小鼠右后足皮下注射 1%角叉菜胶 50μl。致炎
4h后眼眶静脉取血，分离血清，按检测试剂盒中的操作方法测
定血清 MDA含量、SOD、CAT和 NO活力。
2 结果
2． 1 隔山消生品及炮制品对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
表 1 隔山消生品及炮制品对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(珋x ± s，n = 10)
组别
剂量
(g /kg)
鼠数
(只)
耳廓肿胀度
(m /mg)
肿胀度抑制率
(%)
模型组 10 20． 0 ± 1． 9
地塞米松 10mg /kg 10 8． 50 ± 1． 6＊＊ 57． 5
生品组 2 10 14． 8 ± 1． 7＊＊ 26． 0
生品组 4 10 14． 1 ± 1． 4＊＊ 29． 5
生品组 8 10 13． 5 ± 2． 6＊＊ 32． 5
炮制品 1 组 2 10 13． 9 ± 1． 4＊＊ 30． 5
炮制品 1 组 4 10 12． 8 ± 2． 9＊＊ 36． 0
炮制品 1 组 8 10 12． 0 ± 2． 9＊＊ 40． 0
炮制品 2 组 2 10 12． 9 ± 2． 3＊＊ 35． 5
炮制品 2 组 4 10 12． 6 ± 4． 8＊＊ 37． 0
炮制品 2 组 8 10 12． 3 ± 3． 2＊＊ 38． 5
与模型组比较 * P ＜0． 05，＊＊ P ＜0． 01(下同)
28 中药药理与临床 2011;27(3)
* 基金项目:国家科技支撑计划项目(2007BAI48B08) ＊＊通讯作者
DOI:10.13412/j.cnki.zyyl.2011.03.033
从表 1 可见，与模型组比较，隔山消生品及两种炮制品高、
中、低剂量组均对二甲苯致小鼠耳廓肿胀炎症模型有明显的抑
制作用，表明它们均具有显著的抗炎作用，炮制品 2 组抑制作用
在各同等剂量组明显比较强。
2． 2 隔山消生品及炮制品对角叉菜胶致小鼠足肿胀及炎症渗
出液中 PGE2 含量的影响
表 2 隔山消生品及炮制品对角叉菜胶致小鼠足跖肿胀及炎症渗
出液中 PGE2 含量的影响(珋x ± s，n = 10)
组别
剂量
(g /kg)
鼠数
(只)
足趾肿胀度
(m /mg)
肿胀度
抑制率(%)
PGE2
(OD值)
模型组 10 137． 1 ± 15． 9 0． 233 ± 0． 041
地塞米松 10mg /kg 10 77． 10 ± 9． 37＊＊ 43． 8 0． 167 ± 0． 024＊＊
生品组 2 10 119． 6 ± 9． 59* 12． 8 0． 195 ± 0． 021*
生品组 4 10 110． 9 ± 14． 7＊＊ 19． 1 0． 190 ± 0． 019＊＊
生品组 8 10 92． 5 ± 27． 2＊＊ 32． 5 0． 189 ± 0． 028＊＊
炮制品 1 组 2 10 96． 0 ± 24． 3＊＊ 30． 0 0． 190 ± 0． 039*
炮制品 1 组 4 10 96． 4 ± 21． 0＊＊ 29． 7 0． 185 ± 0． 031＊＊
炮制品 1 组 8 10 92． 0 ± 20． 2＊＊ 32． 9 0． 183 ± 0． 018＊＊
炮制品 2 组 2 10 102． 0 ± 10． 4＊＊ 25． 6 0． 186 ± 0． 031＊＊
炮制品 2 组 4 10 89． 8 ± 20． 9＊＊ 34． 5 0． 183 ± 0． 025＊＊
炮制品 2 组 8 10 90． 3 ± 21． 8＊＊ 34． 1 0． 181 ± 0． 017＊＊
从表 2 可见，与模型组比较，隔山消生品及两种炮制品高、
中、低剂量组均对角叉菜胶致小鼠足跖肿胀炎症模型有明显的
抑制作用且能显著降低小鼠足跖肿胀时炎症渗出液中 PGE2 含
量，炮制品 1 组与 2 组在各同等剂量组作用较生品组均有所增
强。
2． 3 隔山消生品及炮制品对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响
表 3 隔山消生品及炮制品对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响(珋x
± s，n = 10)
组别
剂量
(g /kg)
鼠数
(只)
吸收值
(OD值)
抑制率
(%)
模型组 10 0． 299 ± 0． 108
地塞米松 10mg /kg 10 0． 117 ± 0． 083＊＊ 60． 9
生品组 2 10 0． 177 ± 0． 060* 40． 8
生品组 4 10 0． 176 ± 0． 050* 41． 1
生品组 8 10 0． 169 ± 0． 049＊＊ 43． 5
炮制品 1 组 2 10 0． 162 ± 0． 057＊＊ 45． 8
炮制品 1 组 4 10 0． 156 ± 0． 073＊＊ 47． 8
炮制品 1 组 8 10 0． 140 ± 0． 039＊＊ 53． 2
炮制品 2 组 2 10 0． 153 ± 0． 036＊＊ 48． 8
炮制品 2 组 4 10 0． 136 ± 0． 024＊＊ 54． 5
炮制品 2 组 8 10 0． 125 ± 0． 029＊＊# 58． 2
从表 3 可见，与模型组比较，隔山消生品及两种炮制品高、
中、低剂量组均可明显抑制醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性
增加，炮制品 1 组与 2 组在各同等剂量组作用较生品组均有所
增强。
2． 4 隔山消生品及炮制品对小鼠血清 MDA 含量、SOD、CAT
和 NO活力的影响
表 4 隔山消生品及炮制品对小鼠血清 MDA含量、SOD、CAT和 NO活力的影响(珋x ± s，n = 10)
组别 剂量(g /kg) 鼠数(只) MDA(nmol /mgprot) SOD(U /ml) CAT(U /ml) NO(umol /L)
空白组 10 5． 79 ± 0． 61＊＊ 91． 41 ± 8． 60＊＊ 7． 79 ± 1． 49* 23． 60 ± 7． 51＊＊
模型组 10 9． 79 ± 1． 29 61． 33 ± 9． 52 5． 75 ± 1． 28 33． 69 ± 9． 80
地塞米松 10mg /kg 10 5． 98 ± 0． 62＊＊ 88． 35 ± 14． 01＊＊ 9． 79 ± 1． 95＊＊ 24． 23 ± 8． 81＊＊
生品组 2 10 8． 89 ± 1． 66 86． 15 ± 12． 63* 12． 39 ± 1． 87＊＊ 29． 32 ± 11． 78
生品组 4 10 8． 75 ± 1． 53 88． 81 ± 8． 60＊＊ 15． 30 ± 2． 00＊＊ 27． 32 ± 8． 07*
生品组 8 10 7． 91 ± 1． 22* 90． 98 ± 8． 54＊＊ 15． 64 ± 2． 37＊＊ 24． 81 ± 9． 72*
炮制品 1 组 2 10 8． 93 ± 1． 49 87． 71 ± 13． 17* 13． 50 ± 1． 78＊＊ 28． 54 ± 8． 38*
炮制品 1 组 4 10 8． 79 ± 1． 59 90． 77 ± 8． 87＊＊ 13． 74 ± 1． 09＊＊ 27． 00 ± 10． 38*
炮制品 1 组 8 10 8． 09 ± 1． 03* 95． 22 ± 10． 90＊＊ 17． 44 ± 1． 08＊＊ 24． 74 ± 8． 55＊＊
炮制品 2 组 2 10 9． 14 ± 0． 80 84． 07 ± 10． 78＊＊ 10． 59 ± 1． 50＊＊ 28． 29 ± 7． 18*
炮制品 2 组 4 10 8． 70 ± 1． 34 86． 16 ± 5． 07＊＊ 16． 32 ± 2． 01＊＊ 26． 22 ± 9． 85*
炮制品 2 组 8 10 7． 88 ± 1． 11* 91． 08 ± 9． 26＊＊ 16． 08 ± 2． 25＊＊ 23． 65 ± 7． 94＊＊
从表 4 可见，与模型组比较，隔山消生品及两种炮制品高剂
量均显著降低了 MDA和 NO的含量，隔山消生品及两种炮制品
高、中、低剂量组能显著提高小鼠血清中 SOD和 CAT的活力，炮
制品 1 组与 2 组在各等剂量组均较生品组有所增强。
3 讨论
本实验采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀及角叉菜胶致小鼠足跖
肿胀等方法对隔山消生品及两种炮制品进行了抗炎作用研究。
实验结果表明隔山消生品及两种炮制品对小鼠耳廓肿胀及角叉
菜胶致小鼠足跖肿胀均具一定的抑制作用，而其中两种炮制品
的抑制作用较生品有所增强。
炎症是许多疾病的主要病理过程，急性炎症反应中致炎因
子可直接损伤内皮引起血管通透性升高，释放炎症介质参与炎
症反应。前列腺素(PGE2)和 NO 是炎症过程重要的炎症介质，
可引起血管扩张，并可加强组胺和缓激肽升高血管通透性的作
用。实验结果表明隔山消生品及两种炮制品均能显著减少炎症
渗出液中的 PGE2 含量，明显抑制醋酸所致小鼠腹腔毛细血管
通透性增加，能够显著降低小鼠血清中 NO 含量。说明抑制
PGE2、NO等炎症介质生成是其抗炎作用机制之一。
炎症过程中机体产生大量自由基，他们攻击细胞膜、线粒体
膜，与膜中的不饱和脂肪酸反应，造成脂质过氧化增强。脂质过
氧化产物(MDA等)又可分解为更多的自由基，引起自由基的连
锁反应。SOD和 CAT作为体内主要的自由基清除剂，能催化超
氧化物、H2O2 及脂质过氧化物的还原，控制脂质过氧化物的水
平。研究还发现隔山消生品及两种炮制品能够显著降低小鼠血
清中 MDA的含量，并且可以提高小鼠血清中 SOD 和 CAT 的活
性，来减少炎症过程中自由基的产生从而发挥抗炎作用的。
本试验结果表明隔山消及两种炮制品均有一定的抗炎作
用，两种炮制品的抗炎作用相对生品有增强趋势。这为隔山消
饮片的临床应用提供了实验依据，但其炮制机理尚有待于进一
步研究。
38中药药理与临床 2011;27(3)
参考文献
1 叶定江，原思通．中药炮制学辞典． 上海:上海科学技术出版社(第 1
版) ，2005∶ 247 ～ 248
2 王榕乐，谭毓治，罗绍宝． 毛茛总苷抗炎镇痛作用研究． 时珍国医国
药，2009;20(2)∶ 290 ～ 292
3 路玫，荣延平，蒙大平，等． 广西苦丁茶老叶提取物抗炎作用实验． 中
国药师，2008;11(8)∶ 899 ～ 890
4 莫书蓉，朱慧，缪舒益，等． 中药橘核不同炮制品镇痛抗炎作用研究．
中药药理与临床，2007;23(5)∶ 141 ～ 142
5 马瑜红，李玲，欧阳静萍，等．荔枝草抗炎作用的实验研究． 时珍国医
国药，2008;19 (9)∶ 2209 ～ 210
6 顾莹，季晖，张云，等．厚参痔疮膏抗炎作用及其机制．中国天然药物，
2007;5(5)∶ 221 ～ 224
7 张士侠，李心，尹家乐，等．江苏地产自首乌 C21 甾苷抗炎作用及其机
制研究．中国现代中药，2007;5(5)∶ 8 ～ 12
8 瞿燕，胡慧玲，傅超美，等．川木香煨制前后抗炎与镇痛作用的实验研
究．时珍国医国药，2010;21(6)∶ 1442 ～ 1443
Studies of anti-inflammatory effects and mechanisms of
Cynanchumau ricutalum Royle ex Wight． and different processed products
Liu Gang，Zhu Xiaoshan，Chen Jinli，Deng Xukun，Mei Zhinan
(College of Pharmacy，South-central University for Nationalities，Wuhan 430073)
Objective :To study anti-inflammatory effects and mechanisms of Cynanchumau ricutalum Royle ex Wight． and different processed prod-
ucts． Methods:Dimethyl benzene-induced auricular swelling model，carrageen-induced metatarsal swelling model and acetic acid-induced
abdominal capillary permeability increase in mice were established to observe the anti-inflammatory effects． The model of metatarsal swelling
induced by carrageenin was used to determine the effects of on the content of prostaglandin E2 (PGE2)in the exudates and SOD，MDA，
CAT，NO in blood serum． Results :Cynanchumau ricutalum Royle ex Wight． and different processed products (2、4 and 8g /kg)could signif-
icantly inhibit auricular swelling induced by dimethyl benzene，metatarsal swelling induced by carrageenin of mice，inhibit abdominal capil-
lary permeability，reduce PGE2，MDA，NO contents in blood serum and increase CAT，SOD activity in blood serum． Conclusion :Crude and
processed products have significantly anti-inflammatory effects and the effects of processed products is stronger than crude． The mechanisms
involved in the anti-inflammatory are related to the decrease of abdominal capillary permeability，reduction of inflammatory mediators and aug-
mentation of oxygen free radical scavenging capacity and anti-lipid peroxidation．
Key words Cynanchumau ricutalum Royle ex Wight．;anti-inflammatory
洋葱总黄酮透过血脑屏障抑制脑胶质瘤的作用研究
*
何 丹1，2，范雪娇1，杨鸣鸣1，所起凤1，杜文婷1，刘 戟1＊＊
(1 四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物教研室，成都 610041;
2四川中医药高等专科学校药学与检验系医学检验教研室，绵阳 621000)
摘 要 目的:研究采用热水浸提和乙醇冷浸两种方法从洋葱中提取的总黄酮对血脑屏障(BBB)透过作用以及对人脑胶质
母细胞瘤 U251 细胞增殖和凋亡的影响。方法:共培养原代鼠脑微血管内皮细胞(BMVEC)和星形胶质细胞(AC) ，建立血脑屏障
(BBB)体外模型，通过透射电子显微镜观察和跨膜电阻值(TEER)测量验证;采用高效液相色谱(HPLC)检测黄酮类提取物对血脑
屏障的透过率。两组提取物分别处理 U251 细胞，MTT 法观察细胞的增殖抑制、彗星电泳(SCGE)分析 DNA 损伤及流式细胞术
(FCM)分析细胞周期分布情况。结果:透射电镜及跨膜电阻仪鉴定 BBB 体外模型构建成功;HPLC 检测证实两组黄酮类提取物尤
其是乙醇冷浸法产物能有效透过血脑屏障;该提取物 80μmol /L浓度即对人胶质母细胞瘤 U251 细胞有明显的增殖抑制及凋亡诱导
作用，并使 U251 细胞阻滞于 G2 /M细胞周期检查点。结论:采用乙醇冷浸法从洋葱中提取的黄酮类物质可有效透过血脑屏障，并对
人胶质母细胞瘤 U251 细胞有明显的增殖抑制及凋亡诱导作用。
关键词 洋葱;总黄酮;血脑屏障;胶质母细胞瘤
48 中药药理与临床 2011;27(3)
* 教育部博士点基金新教师项目(项目代码:20070610124)和教育部留学回国人员基金项目(项目代码:2008890-19-11) ＊＊通讯作者