全 文 ：第 18卷第 24期 中国现代医学杂志 Vol. 18 No.24
2008年 12月 China Journal of Modern Medicine Dec . 2008
天然植物药防龋的研究具有鲜明的地域特性。
根据全球各地不同的地理环境和国情，不同的国家
和地区都有代表性的天然药物。目前，在龋病预防
和治疗方面天然药物的作用前景引起了广泛的关
注[1]。隔山消为白族、彝族民间习用草药，原植物为
牛龙牛儿苗科老鹳草属植物 G.Strictps R.Kunth，其根
入药,民间长期用作厌食症的治疗，同时具有消炎、
止痢和收敛的功效，药源十分丰富。王艳等针对鞣
酸能与蛋白反应,抑制胶原分解的特性,用于牙本质
研究,发现鞣酸抑制了牙本质胶原的分解,阻碍牙本
质龋的进程[2- 3]。隔山消的有关研究报道很少，但有
研究证实隔山消含有大量的鞣酸[4]。因此，民族药隔
山消有可能成为防龋药物。
1 材料和方法
1.1 隔山消水提物实验浓度的筛选
文章编号： 1005- 8982（2008）24- 3639- 03
隔山消水提物对再矿化及抗酸脱矿作用的体外研究*
蓝 海 1，杨 颖 1，杨晓莉 1，王丽梅 2
（1 .云南省大理学院 药学院，云南 大理 671000；2.云南省大理学院
非直属医院 口腔科，云南 大理 671000）
摘要：目的 研究隔山消水提物对牛牙齿的再矿化、抗酸脱矿作用。方法 利用显微硬度仪测定隔山消早期
人工龋的再矿化作用，通过动力学实验观察隔山消处理人工龋后的抗酸脱矿作用。结果 隔山消组牙齿的硬度
值再矿化后显著升高，再矿化前后差异有显著性（P＜0.01）。而对照组牙齿的硬度值无明显改变（P＞0.01）。
30 mg/mL隔山消组消耗的乙酸最少，脱矿速率最慢，抗酸脱矿作用最强。结论 体外实验表明隔山消有明显的
再矿化、抗酸脱矿作用，30 mg/mL隔山消的防龋效果优于 1 mg/mL隔山消。
关键词：隔山消；再矿化；抗脱矿
中图分类号：R781.1 文献标识码：B
Study remineralization and anti-demineralization of
Geranium Strictipes of bovine teeth in vitro*
LAN Hai1，YANG Ying1，YANG Xiao-li1，WANG Li-mei2
(1.Department of Pharmaceutical, Dali university, Dali, Yunnan 671000..P.R.China; 2.Department
of Ophthalmology, Dali Prefectural Teaching of Dali university, Dali, Yunnan 671000.P.R.China）
Abstract: 【Objective】 To study the effects of extract from Geranium Strictipes on remineralition and anti-dem-
ineralization about bovine teeth. 【Methods】 Microhardness was used to examine the effects of Geranium Strictipes
on remineralition in early decayed teeth. Kinetics experiment was used to observe the effects of anti-demineralization
on decayed teeth dealt with Geranium Strictipes. 【Results】 Compared with fore-remineralization, the hardness of
teeth dealt with Geranium Strictipes was significantly reforced after remineralization (P <0.01). And the hardness of
teeth in control group was basically unchanged after remineralization (P >0.01). Compared with other drug dose
group, 30mg/mL Geranium Strictipes made the consumption of acetic acid least, the speed of demineralization slow-
est and had the strongest anti-demineralization effects. 【Conclusion】 Geranium Strictipes had significant effects of
remineralization and anti-demineralization. The effects against decayed teeth of 30mg/mL Geranium Strictipes was
better than 1 mg/mL.
Key words：Geranium Strictipes；Remineralization；anti-demineralization
收稿日期：2008- 05- 14
*基金项目：云南省教育厅科研项目：（No：03y637A）
3639· ·
中国现代医学杂志 第 18卷
参照王芸 [5]的实验方法,将 500 g隔山消用 5 L
去离子水浸泡 24 h,然后将水提物蒸发浓缩成浸膏，
干燥研细成粉, 再用去离子水配制成实验浓度分别
为 1 mg/mL和 30 mg/mL隔山消处理液。
1.2 标本制备
新鲜拔除的牛切牙 48颗，体视显微镜下无龋
损、氟斑及裂痕，去根，用去离子水加压将牙髓冲洗
干净，用 0.1 mol/L PBS溶液超声清洗 5 min，再用去
离子水超声清洗干净，置于生理盐水 - 4℃冰箱中保
存备用。
1.3 再矿化组
将以上清洗干净的 24颗牛切牙分为三组,每组
8颗，在每颗牛切牙的釉质表面开窗 3 mm×4 mm，
其余部分用指甲油涂布封闭。置于 500 mL可形成
人工龋的酸液中（乳酸 0.1 mL/L，琼脂 5%，pH=5）,
37℃恒温持续侵泡 6 h，取出冲洗干净，自然干燥。
用 HX- 1000型显微硬度仪测定开窗部位脱矿后釉
面的硬度，负荷 25 g，作用时间 5秒，每个釉面测定
8次，计算平均硬度值[6]。之后将三组牛切牙开窗口
向上分别放入处理液 300 mL 1 mg/mL隔山消处理
液、300 mL 30 mg/mL隔山消处理液和 300 mL去离
子水中浸泡 6 h，取出冲洗干净，再将三组牙齿开窗
口向上分别放入再矿化液 300 mL（1.5 mmol/L Ca-
Cl2，0.9 mmol/L NaH2PO4，0.15 mol/L KCl，pH=7.0）中
过夜，连续循环 8天。取出后清洗干净，自然干燥。同
法测定开窗釉面的硬度。对每组牙齿再矿化前后的
平均硬度值进行统计学检验（配对 t检验），见表 1。
1.4 抗酸脱矿组
将以上清洗干净的 24颗牛切牙分为三组,每组
8颗。一组作为对照组,开窗面向上放入 300 mL的
去离子水中，另 16颗牛切牙作为实验组，随机分为
两组，实验组一的 8颗牛切牙开窗面向上放入 300
mL 1 mg/mL隔山消溶液中，实验组二的 8颗牛切牙
开窗面向上放入 300 mL 30 mg/mL隔山消溶液中,
三组同时 37℃恒温持续浸泡 8 d，取出后清洗干净，
在 - 4℃依次分别用 95%乙醇浸泡 15 min，无水乙醇
浸泡 15 min（2次），无水乙醚浸泡 15 min，梯度脱
水，在空气中干燥过夜，玛瑙研磨成 20~40目粉末，
密封放置于 - 20℃冻存备用。
脱矿液：0.15 mol/L 的 KCl，用乙酸调 pH 至
4.00。实验开始时，将三组 10 mg牙釉质粉分别倒入
100 mL 0.15 mol/L的 KCl脱矿液中，置于 37℃恒
温，恒 pH法控制滴定，伺服系统（self control sys-
tem） 向脱矿液中自动加入 99.79 mmol/L的乙酸溶
液维持 pH恒定在 4.00，定时记录醋酸溶液的加入
量,滴定液体积和时间的关系见图 1。以上实验均重
复 3次[7]。
表１ 牙齿脱矿、再矿化后的平均硬度值 （kg/mm2，x±s）
注：覮与脱矿后比较，P＜0.01
图 1 （VHAc- t）关系图
2 结果
2.1 再矿化组
每组牙齿脱矿、再矿化后的平均硬度值见表 1。
统计学检验表明，隔山消组牙齿的硬度值再矿化后显
著升高，再矿化前后差异有显著性（P＜0.01）。而对照
组牙齿的硬度值无明显改变（P＞0.01）。
2.2 抗酸脱矿组
根据脱矿动力学曲线（图 1）可以看出，滴定液
添加的多少反映了脱矿速率的快慢，脱矿速率快，表
示釉质抗酸能力弱，反之，抗酸能力强。30 mg/mL隔
山消组脱矿消耗的乙酸最少 , 脱矿速率最慢，1
mg/mL隔山消组消耗的乙酸次之，脱矿速率比 30
mg/mL隔山消组的快，而去离子水组消耗的乙酸最
多，脱矿速率最快，即一定浓度的隔山消水提物有抗
酸脱矿作用。
3 结论
3.1 再矿化组
再矿化是在已经脱矿的牙齿硬组织内发生矿物
质的重新沉积，并且进行结晶化，可以是部分脱矿晶
体恢复正常，也可以是新晶体的形成。再矿化的主
要物质基础（原材料）是磷酸盐类[8]。牙釉质大约含
95%的羟基磷灰石,实验中，用酸胶浸泡釉质 6 h，形
成了早期的人工龋，使得牙釉质多孔。再矿化液中
时段 测定次数 去离子水 隔山消(1 mg/mL) 隔山消(30 mg/mL)
脱矿后 8 36.42±2.52 37.37±4.43 36.67±4.43
再矿化后 8 42.50±3.12 71.58±6.67覮 79.31±3.12覮
0 200 400 600
t/min
3.0
2.5
2.0
1.5
1.0
0.5
0.0
对照组
实验组 1
实验组 2
H
Ac
/m
L
3640· ·
第 24期 蓝 海，等：隔山消水提物对再矿化及抗酸脱矿作用的体外研究
的 Ca2+、PO43- 可结合为各种难溶的磷酸盐,沉积于多
孔牙釉质的表面，但去离子水组硬度的增大值不显
著（P＞0.01）。隔山消中的鞣酸是一种多羟基酚，
结构较复杂, 可以和再矿化液中的 Ca2+结合为难溶
的鞣酸钙[9]进入牙釉质沉积下来，另外，鞣酸中的羟
基还能和酸胶脱矿后牙釉质中的有机质和钙结合形
成稳定的环状复合物，使得脱矿釉质孔隙缩小，促进
再矿化。隔山消组形成的沉积物不单纯是磷酸盐类，
还有其它的沉积物，所以隔山消组硬度增大值显著
（P＜0.01）。由于 30 mg/mL隔山消中的鞣酸量大于
1 mg/mL隔山消组，所以，再矿化作用强于 1 mg/mL
隔山消。
3.2 抗酸脱矿组
去离子水组中，牙齿的釉面直接和乙酸
（pH=4.00）接触，H+半径小、电荷小，穿透力很强，
可以快速的进入釉质，使其脱矿，消耗的乙酸最多，
脱矿速率最快。隔山消实验组中，用隔山消浸泡牛
切牙，由于外环境中含有鞣酸，鞣酸进入多孔的釉质
表面和牙釉质中的有机质、钙结合形成稳定的环状
复合物。另外，酸脱矿发生的釉质龋，蛋白不会丢
失，所以，隔山消可能还会和牙釉质中的蛋白结合
生成不溶性的釉质蛋白[10]，覆盖在釉质表面，阻碍了
H+进入釉质，消耗的乙酸比对照组少，使其脱矿的
速率减慢。同理，30 mg/mL隔山消中的鞣酸量大于
1 mg/mL隔山消组，所以，30 mg/mL隔山消组消耗的
乙酸最少，脱矿速率最慢，抗酸脱矿作用最强。
总之，隔山消有一定的再矿化作用和抗酸脱矿
作用，这一结果提示，民族药隔山消是一种防龋的天
然植物药。
参 考 文 献：
[1] 王芸，唐荣银.再矿化药物的研究进展[J].牙体牙髓牙周病学杂志，
2005，15（9）：523- 525.
[1] WANG Y, TANG RY. Current concepts of remineralizing agents
[J]. Chinese Journal of Conservative Dentistry,2005,15(9):523- 525.
Chinese.
[2] 王艳，唐荣银，陈强，等.中药五倍子防龋的动物实验研究[J].牙体
牙髓牙周病学杂志，2001，11(3):172- 174
[2] WANG Y， TANG RY， CHEN Q， et al.Inhibitory activity of
Chinese nutgall to caries in animal experiments [J]. Chinese
nutgall[J], Chinese Journal of Conservative Dentistry，2001，11(3):
16- 18. Chinese.
[3] 黄冰冰，樊明文.鞣质防龋的研究进展[J].现代口腔医学杂志，
2003，17（5）：458- 460
[3] HUANG BB，FAN MW. Progress Inhibitory activity tannins to
caries [J]. Journal of Modern Stomatology.2003，17 (5)458- 460.
Chinese
[4] 蓝海，李龙星，杨永寿.隔山消有效成分的研究[J].大理医学院学
报，2001，10（4）：13- 14.
[4] LAN H，LI LX，YANG YS. Chemical Constituents of Geranium
strictipes R.Knuth. [J]. Journal of Dali University,2001,10（4）：
13- 14.Chinese.
[5] 王芸，唐荣银.五倍子水提物处理早期人工釉质龋后的表面结构
的扫描电镜观察[J],牙体牙髓牙周病学杂志，2005,15(3):133- 135.
[5] WANG Y, TANG RY. Scanning electron microscopy observations
of surface morphology of initial artificial lesions of enamel treated
with Chinese nutgall[J], Chinese Journal of Conservative Dentistry,
2005,15(3):133- 135.Chinese.
[6] 王文辉，卞金有，王勤，等.氟化牛奶再矿化、抗酸脱矿及抗龋作用
的体外观察[J].现代口腔医学杂志，2000，14（6）：377- 378.
[6] WANG WH， BIAN JY， WANG Q, et al Remineralization,
antidemineralization and anti- caries effects of fluoridated milk in
vitro [J] Journal of Modern Stomatology,2000,14 (6):377- 378.
Chinese.
[7] 刘红梅，蓝海，王和平等.高脂诱导动脉脂沉积时的骨构变化和镧
的影响[J]，自然科学进展，2004，14（4）:397- 403.
[7] LIU HM， LAN H，WANG HP, et al. The influence on the
change of skeleton and the content of La during lipidosis in
artery induced by high lipid[J]，Progress in Natural Science,2004,
14（4）:397- 403.Chinese.
[8] MURRAY JJ,RUGG- GUNN AJ,JENKINS GN. Fluorides in caries
prevention [M]. Butterworth - Heinemann Ltd,1991,England:
118- 120.
[9] 李瑞芬.为什么[J].中国食品,1998,12(12):39- 39.
[9] LI RF.What[J].China Food Journal,1998,12(12):39- 39. Chinese.
[10] 李伟丽，唐荣银，陈强，等.五倍子抑龋作用的实验研究[J]，牙体
牙髓牙周病学杂志，2002,12(5):258- 260
[10] LI WL, TANG RY, CHEN Q, et al. The experimental study of
the effect of Chinese nutgall on restraining caries [J], Chinese
Journal of Conservative Dentistry，2002,12(5):258- 260.Chinese.
（顾 靓 编辑）
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