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对夜来香生物活性的研究



全 文 :对夜来香生物活性的研究
祝尧荣 , 金阳* (绍兴文理学院生命科学学院 ,浙江绍兴 312000)
摘要 [目的]为研制和开发夜来香源绿色农药 、夜来香多功能产品提供依据。[方法]采用超声波提取获得夜来香乙醇提取液 ,研究提
取液对果蝇的熏蒸作用、驱避作用和触杀作用。[结果]果蝇在夜来香乙醇提取液和夜来香稀溶液中经过 1 h 的熏蒸 ,全部死去 , 说明夜
来香乙醇提取液和夜来香稀溶液对果蝇有较好的驱避作用 , 30 min内驱避效果达 100%。夜来香稀溶液和夜来香乙醇提取液对果蝇的
触杀作用都很弱 ,触杀效果仅为 10%。在受到夜来香乙醇提取液和夜来香稀溶液的熏蒸时 ,果蝇有局促不安的症状 ,并渐渐失去活力直
至死亡 , 30 min内熏蒸效果达 100%。[结论]夜来香对果蝇有较好的熏蒸作用和驱避作用 ,但触杀作用较弱。
关键词 夜来香;驱避作用;熏蒸作用;触杀作用
中图分类号 S58  文献标识码 A  文章编号 0517-6611(2008)30-13261-02
Study on Biological Activity of Cestrum nocturnum Linn
ZHU Yao-rong et al (College of Life Sciences ,Shaoxing College of Arts and Science , Shaoxing , Zhejiang 312000)
Abstract [Objective] The study was to provide the basis for the development and exploitation of the green pesticides of Cestrum nocturnum Linn source
and the multi-functional products of C.nocturnum.[Method] The ethanol-extracts of C.nocturnum.was obtained with ultrasonicwave extraction , and
the effects of fumigation , repellent and contact toxicity of the extracts on drosophila were studied.[ Result] After the drosophilas were fumigated by
ethanol-extracts and dilute solution of C.nocturnum for 1 h , they were all dead , which indicated that the ethanol-extracts and dilute solution of C.noc-
turnum had better repellent effects on drosophila and the repellent effects reached 100% in 30 min.The contact action of dilute solution and ethanol-ex-
tracts of C.nocturnum on drosophila were all weak and the contact action onlywas 10%.When drosophilas were fumigated by ethanol-extracts and dilute
solution of C.nocturnum , they had embarrassed.symptom and then gradually lost activity until died , and the fumigation effect reached 100%in 30 min.
[ Conclusion] The C.nocturnum had better fumigation and repellent effects on drosophila, but its contact action on drosophila was weak.
Key words Cestrum nocturnum Linn;Repellent effects;Fumigation effect;Contact action
作者简介 祝尧荣(1965-),男 ,浙江绍兴人 ,实验师 ,从事动物学的
教学与研究。 *通讯作者。
收稿日期 2008-09-01
  夜来香(Centrum nocturnum Linn)为茄科夜香树属植物 ,
是一种极具开发应用价值的天然野生植物[ 1] 。研究表明 ,夜
来香具有较高的镇痛 、抑菌 、局部麻醉 、抗乳腺癌 、中枢抑制
等药理作用 。随着技术的发展 ,人们对夜来香的研究和利用
也逐渐深入 。已经有文献采用 GC-MS -计算机联用技术 ,
对夜间花朵(发香期)的挥发油成分作了定量分析[ 2] ,但在以
夜来香的生物活性作为依据研制植物源农药方面鲜有报道。
笔者利用所提取的夜来香乙醇提取液研究其对果蝇的熏蒸
作用 、驱避作用 、触杀作用等生物活性作用 ,旨在为研制和开
发夜来香源绿色农药以及夜来香多功能产品提供理论依据
和试验数据 。
1 材料与方法
1.1 材料 供试植物材料为夜来香花朵和嫩枝 ,产于绍兴
本地。乙醚 、乙醇 、无水乙醇(标准分析纯),果蝇为从绍兴文
理学院生命科学学院获得蛹 ,经室内饲养后挑选整齐一致的
初期幼虫供试。
提取设备:SK5200H 超声波发生器(59 KHz),上海科导超
声仪器有限公司。抽滤仪器:SHB-B95型循环水式多用真空
泵 ,河南省巩义市峪予华仪器厂 。玻璃仪器:培养皿;烧杯
150ml 2个;滴管 2个;玻璃棒 1根;广口瓶 500 ml 、125 ml 的
各 1个;锥形瓶 250 ml 3个;毛细管 2根;表面皿;烧瓶 1个。
其他仪器:纱布 、胶布 、镊子 、剪刀 、保险膜 、铁架台。
1.2 方法
1.2.1 夜来香的提取。采集夜来香白天嫩枝 ,风干后切碎
榨汁 ,并将夜来香嫩枝碎末装入烧瓶内 ,在超声波提取器中
提取。提取器中将乙醇溶剂进行提取 ,室温(在提取过程中 ,
水温上升 10 ℃左右 ,该温度对超声波提取有机物的结果不
造成影响)下 ,抽提 0.5 h。采用梯度提取法 ,提取多次 ,使浓
度逐渐增加 ,达到浓缩的效果。
1.2.2 生物活性的测定。以果蝇作为其生物活性的试验对
象来研究夜来香提取液的生物活性。溶液 a:夜来香的乙醇
提取液;溶液 b:夜来香稀溶液(移取夜来香的乙醇提取液 25
ml ,用无水乙醇稀释至 50 ml定容所得的夜来香溶液)。
1.2.2.1 驱避作用。试验 1:将放有培养基的广口瓶置于
14.5 cm×14.5 cm×12.8 cm的顶盖透明的纸箱四角 ,每瓶接
20头残翅果蝇 ,待虫适应后 ,将装有试剂的培养皿置于广口
瓶瓶颈边。分别用夜来香稀溶液(溶液 b)2.0 g和酒精处理 ,
并分别于药后 1 h内检查试虫逃离以及死亡情况 。
试验 2:将 20头果蝇将乙醚麻醉之后 ,置于两纱布隔层
之间 ,等到乙醚对果蝇的麻醉作用消失以后 ,把果蝇连同纱
布隔层一起置于事先装有 2.0 g夜来香乙醇提取液的培养皿
上方 ,再将这个装置整个放入 2 000ml的大烧杯内 ,大烧杯口
用保险膜密封 ,保险膜上刺几个小孔 ,以保证烧杯内空气的
流通 。分别用夜来香的乙醇提取液(溶液 a)2.0 g和酒精处
理 ,并分别于药后 1 h内检查试虫逃离以及死亡情况。
试验 3:用 2.0 g溶液 b作试验 2的处理。
1.2.2.2 触杀作用[ 3] 。试验 1:先用乙醚麻醉果蝇 ,再将乙
醇配制而成的夜来香稀溶液(溶液 b)和 50%乙醇溶液分别
用毛细管点滴于果蝇体背 ,每种试剂处理 10头。处理后的
果蝇放在滤纸上 ,然后置于培养皿中温室条件下饲养 ,观察
果蝇接触试液后的反应。
试验 2:先用乙醚麻醉果蝇 ,再将夜来香乙醇提取液(溶
液 a)和 50%乙醇溶液分别用毛细管点滴于果蝇体背 ,每种试
剂处理 10头。处理后的果蝇放在滤纸上 ,然后置于培养皿
中温室条件下饲养 ,观察果蝇接触试液后的反应。
1.2.2.3 熏蒸作用。试验 1:将 10只果蝇用培养基饲养在
500 ml广口瓶中 ,用棉花塞口 ,在棉花上滴上夜来香稀溶液
(溶液 b)。让溶液蒸气进入瓶内 ,置于室温条件下饲养 ,观察
安徽农业科学 , Journal of Anhui Agri.Sci.2008, 36(30):13261-13262                责任编辑 李菲菲 责任校对 张士敏
果蝇在溶液熏蒸下 30min内的反应。
试验 2:将 10头果蝇用培养基饲养在 12.0 cm×1.5 cm
培养皿中 ,用纱布扎口。在另一同样大小的培养皿底部垫上
直径 9 cm的滤纸 ,滤纸分别滴加夜来香乙醇提取液(溶液 a)
和 50%乙醇 。迅速将 2个培养皿对合 ,试虫皿在上 ,药皿在
下 ,并用透明胶布将接合处封严 ,置于室温条件下饲养 ,观察
果蝇在溶液熏蒸下 30min内的反应。
2 结果与分析
2.1 夜来香提取液对果蝇的驱避作用 由表 1可知 ,在 4组
试验中 ,果蝇在酒精的长期熏蒸下 ,会从纱布的小孔中钻到
纸盒中 ,随时间的推移 ,逃离的果蝇数逐渐增加;然而 ,在 2
组夜来香提取液乙醇溶液中 ,果蝇在其中经过 60 min的熏蒸
后 ,没有从纱布孔中逃离 ,而是全部死去。可见 ,排除酒精背
景 ,夜来香的乙醇提取液确实对果蝇有较好的杀伤作用 ,在
30 min内其杀虫效率达到 100%,即能在短时间内使果蝇死
亡。从试验 1也可以看出 ,果蝇虽然经受夜来香溶液的熏
蒸 ,但是并没有出现死亡现象 ,可能是由于果蝇所处的容器
较大 ,夜来香溶液浓度不够高 ,所以才没有出现预期的杀虫
效果。
表1 夜来香提取液以及酒精对果蝇的驱避效果
Table 1 Effects of Centrum nocturnum extract and alcohol on the evading
of Drosophila
处理
Treatment
逃离及死亡情况∥头
Escaping and death situation
30 min 60 min
驱避效果∥%
Evading effect
30 min 60min
酒精 Alcohol 1 2 5 10
试验 1 Test 1 0 0 0 0
试验 2 Test 2 死亡20 20 deaths死亡 20 20 deaths 100 100
试验 3 Test 3 死亡20 20 deaths死亡 20 20 deaths 100 100
2.2 夜来香提取液对果蝇的触杀作用 由表 2可知 ,在夜
来香提取液的 2组试验中 ,试虫在点滴试液后无明显的中毒
反应 ,先是多动不安 ,后逐渐活动正常化。从试验中可以观
察到 ,随着时间的延长 ,果蝇并没有死去 ,只有 1头果蝇有行
动迟缓的现象 ,由此可见 ,夜来香稀溶液以及夜来香乙醇提
取液对果蝇的触杀效果都很弱 ,均为 10%。
表 2 夜来香提取液对果蝇的触杀效果
Table 2 Effects of Centrum nocturnum extract on the contact toxicity of
Drosophila
处理
Treatment
死亡情况∥头 Death situation
30 min 60 min 90 min 120min
触杀效果∥% Contact toxicity
30min 60min 90 min120 min
试验 1Test 1 0 0 0 1 0 0 0 10
试验 2Test 2 0 0 0 1 0 0 0 10
酒精Alcohol 0 0 0 1 0 0 0 10
2.3 夜来香提取液对果蝇的熏蒸作用 由表 3可见 ,在受
到各种试液熏蒸的时候 ,果蝇大都有局促不安的症状 ,但在
酒精组中 ,果蝇并没有出现死亡现象;在夜来香的 2 组溶液
的作用下 ,果蝇渐渐失去活力直至死亡。
表 3 夜来香提取液对果蝇的熏蒸效果
Table 3  Effects of Centrum nocturnum extract on the fumigating of
Drosophila
处理
Treatment
死亡情况∥头 Death situation
10 min 20 min 30 min
熏蒸效果∥%Fumigating effect
10min 20 min 30 min
试验1 Test 1 - - 10 - - 100
试验2 Test 2 - - 10 - - 100
酒精Alcohol - - 0 - - 0
3 结论
从以上试验中可以看出 ,尽管夜来香溶液浓度不一样 ,
但在排除酒精的作用之后 ,可以得出它们对果蝇的熏蒸效果
和驱避效果在 30 min内可达 100%,而对果蝇的触杀效果很
弱 ,只有 10%。
参考文献
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(上接第 13186页)
反应 。对于比较轻微的肝炎 ,应以细小病毒的辅助治疗为
主 ,同时维持体内相对较低浓度的抗生素 ,可能的情况下 ,可
以把消炎药通过灌肠作用于肠道。在病毒基本控制后 ,再进
行肝炎后期症状的治疗和护理。2种病毒性疾病混合感染 ,
重点是前期对病毒的控制 ,在生物制品的选择中 ,尽量选择
对机体刺激反应较小的品种 ,如纯度较高的白单克隆抗体 ,
有质量的干扰素 、血清和免疫球蛋白等 。
3.4 犬传染性肝炎和细小病毒混合感染的护理 对于细小
病毒与传染性肝炎的病例 ,输液疗法是其最有效的治疗手
段 ,输液可以快速有效地给机体补充水分和能量 ,为机体疾
病的恢复提供有利的内环境 ,但在输液的过程中应严格控制
输液速度 ,因细小病毒的肠炎多伴发心肌炎型 ,如果输液过
快则会加重心脏负担 ,加上肝脏机能下降 ,很容易造成病犬
在输液过程中急性死亡。康复阶段的护理也很重要 ,细小病
毒主要侵害病犬的整个胃肠道黏膜 ,并破坏肠道的内部环
境 ,可在该阶段让病犬口服鞣酸蛋白或思密达以修复胃肠道
黏膜 ,改善内环境 ,并限制其采食 ,以免加重胃和肠道的负
担 ,造成肠套叠或肠梗阻。
3.5 预防 疫苗免疫接种是预防该病的有效措施 ,对犬进
行定期的疫苗免疫接种 ,可有效地预防该病的发生。幼犬在
45日龄进行首次免疫 ,60日龄和 75 日龄各加强免疫 1次 。
在临床上较常用的为荷兰英特威和美国辉瑞的五联弱毒疫
苗 ,以后每年加强免疫 1次 。
参考文献
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13262              安徽农业科学                        2008年