全 文 :不同产地广西莪术的质量研究
覃 葆,江海燕* ,刘英丽,袁 艳,蒋文兰 (广西中医学院,广西南宁 530001)
摘要 [目的]对广西灵山、桂平、贵港等不同产地莪术药材中挥发油及吉马酮含量进行比较。[方法]采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,
高效液相色谱法测定吉马酮,色谱条件为:乙腈 -水(V/V,70∶ 30),流速为 1 ml /min,柱温为 35 ℃,检测波长为 215 nm,进样量为 10 μl。
[结果]吉马酮检测浓度在 0. 022 3 ~0. 139 8 mg /ml范围内线性关系良好,不同产地莪术药材中挥发油及吉马酮含量均有一定差距。
[结论]灵山县产的莪术药材挥发油及吉马酮含量高于其他 8个地区。
关键词 莪术(RHIZOMA CURCUMAE);挥发油;吉马酮;含量比较
中图分类号 S567 文献标识码 A 文章编号 0517 -6611(2011)24 -14602 -02
Study on the Quality of RHIZOMA CURCUMAE from Different Producing Areas in Guangxi
QIN Bao et al (Guangxi Traditional Chinese Medical University,Nanning,Guangxi 530001)
Abstract [Objective] to compare the contents of volatile oil and of germacrone in RHIZOMA CURCUMAE from different producing area such
as Lingshan,Guiping and Guigang in Guangxi Province. [Method]The volatile oil was extracted from RHIZOMA CURCUMAE by steam distil-
lation. The content of germacrone was determined by high performance liquid chromatography method(HPLC),and its chromatograph conditions
were as follows:acetonitrile - water(V/V,70∶ 30),flow rate of 1 ml /min,column temperature of 35 ℃,detection wavelength of 215 nm and
sampling volume of 10 μl. [Result]The germacrone presented a good linear relation between the detection concentration of 0. 022 3 and 0. 139 8
mg /ml. The contents of volatile oil and of germacrone in RHIZOMA CURCUMAE varied for different producing area. [Conclusion]The contents
of volatile oil and of germacrone in RHIZOMA CURCUMAE from Lingshan were higher than that in other 8 areas.
Key words RHIZOMA CURCUMAE;Volatile oil;Germacrone;Content comparison
基金项目 广西科技攻关项目(桂科攻 0718002-4-3)。
作者简介 覃葆(1956 - ) ,男,广西象州人,副教授,从事中药饮片质量
及中药炮制研究,E-mail:bbythemoon@ yahoo. com. cn。* 通
讯作者,教授,硕士,硕士生导师,从事中药质量控制与管理
研究,E-mail:jhywe@ sina. com。
收稿日期 2011-04-21
莪术(RHIZOMA CURCUMAE)为姜科(Zingiberaceae)植
物蓬莪术(Curcuma phaeocaulis Val.)、广西莪术(Curcuma
kwangsiensis S. G. Lee et C. P. Liang)或温郁金(Curcuma we-
nyujin Y. H. Chen et C. Ling)的干燥根茎,具有行气破血、消
积止痛的功能,可用于治疗癥瘕痞块、淤血经闭、食积胀痛、
早期宫颈癌等疾病[1]。莪术主要产于广西的灵山、容县、贵
港等地,原药材一般冬季茎叶枯萎后采挖,洗净,蒸或煮至透
心,晒干或低温干燥后除去须根及杂质,其块根与根茎分别
是中药商品桂郁金(绿丝郁金)和桂莪术的来源。广西莪术
中主要含有挥发油,以桉油精、樟脑、异龙脑、β-榄香烯、莪术
烯、吉马酮、α-松油醇等含量为高,尚有姜黄素、脱甲氧基姜
黄素和双脱甲氧基姜黄素等成分。目前,广西莪术以挥发
油、吉马酮等作为莪术药材质量评价指标已逐渐被重视[2]。
鉴于此,笔者对广西不同产地莪术药材中的挥发油和吉马酮
含量进行比较,以期考察其药材质量。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 研究对象。广西莪术药材(RHIZOMA CURCUM-
AE) ,分别采自平南,邕宁,容县,灵山,贵港,钦州,桂平等地,
经药学院药用植物教研室王建教授鉴定为姜科植物(Zingib-
eraceae)广西莪术(Curcuma kwangsiensis S. G. Lee et C. P. Li-
ang)的干燥根茎。
1. 1. 2 主要试剂。吉马酮对照品(批号:111665-200401) ,购
自中国药品生物制品检定所。
1. 1. 3 主要仪器。美国 Agilent1100 Series型高效液相色谱
仪、Agilent1100 Series色谱工作站,购自美国安捷伦公司;LG-
16W型高速微量离心机,购自北京医用离心机厂;BP211D电
子分析天平,购自德国赛多利斯。
1. 2 方法
1. 2. 1 出油率测定。根据 2010年版中国药典一部附录 XD
挥发油测定甲法测定,读取挥发油量,并计算药材的出油率。
1. 2. 2 吉马酮含量测定。
1. 2. 2. 1 色谱条件的确定。色谱条件为:日本岛津公司
Shim-pack CLC-ODS 柱(6. 0ID × 15 mm) ,流动相为乙腈-水
(V /V,70∶ 30) ,流速为 1 ml /min,柱温为 35 ℃,检测波长为
215 nm,进样量为 10 μl。
1. 2. 2. 2 对照品溶液的制备。精密称取吉马酮对照品 6. 70
mg,置于 25 ml量瓶中,加色谱甲醇溶解、并定容至刻度,即
得吉马酮对照品储备液。
1. 2. 2. 3 供试品溶液的制备。各取不同产地莪术药材粉末
5 g,精密称定,置于锥形瓶中,精密加入甲醇 25 ml,称定重
量,超声提取 30 min,放冷至室温,用甲醇补足减失的重量,
摇匀,过滤,取续滤液,10 000 r /min离心 10 min,备用。
1. 2. 2. 4 线性关系考察。分别精密量取对照品液 2、4、6、8、
10 ml,置于 10 ml量瓶中,加色谱甲醇定容至刻度,即得 5个
浓度的对照品溶液。分别注入高效液相色谱仪,进样量为 10
μl,按照色谱条件“1. 2. 2. 1”进样,测定吉马酮峰面积。以峰
面积 A为纵坐标,样品浓度 C为横坐标绘制标准曲线,并进
行线性回归。
1. 2. 2. 5 精密度试验。取对照品溶液,连续进样 6 次,每次
进样 10 μl,对峰面积进行考察。
1. 2. 2. 6 稳定性试验。精密吸取供试品溶液,分别于 0、2、
4、8、12、24 h进样 10 μl进行分析,分别测定峰面积并计算其
含量。
1. 2. 2. 7 重复性试验。取桂平莪术药材粉末 6份,各取 5 g,
精密称定,分别按照“1. 2. 2. 3”制备供试品溶液,按照色谱条
件“1. 2. 2. 1”进样,测定峰面积并计算吉马酮的含量。
责任编辑 侯美灵 责任校对 况玲玲安徽农业科学,Journal of Anhui Agri. Sci. 2011,39(24):14602 - 14603,14606
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.24.138
1. 2. 2. 8 加样回收率试验。精密称取吉马酮对照品 3. 26
mg,置于 50 ml容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度。取桂
平产的莪术药材粉 6份,各约 2. 500 g,分别精密加入甲醇 20
ml及对照品溶液 5 ml,按照“1. 2. 2. 3”制备供试品溶液,按照
色谱条件“1. 2. 2. 1”进样,计算回收率和 RSD值。
1. 2. 2. 9 样品中吉马酮含量测定。取不同产地莪术样品,
按照“1. 2. 3”制备供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液
与供试品溶液各 10 μl,注入液相色谱仪,按照色谱条件
“1. 2. 1”进样,测定其峰面积,并计算样品中吉马酮的含量。
2 结果与分析
2. 1 出油率测定 按照“1. 2. 1”来测定出油率,结果显示产
自兴业、灵山、钦州、贵港、桂平、容县、平南、邕宁和横县的莪
术原药材挥发油出油率分别为 1. 3%、1. 68%、1. 56%、
1. 51%、1. 45%、1. 47%、1. 5%、1. 62%和 1. 41%。
2. 2 吉马酮测定
2. 2. 1 色谱分析结果。对照品吉马酮的色谱图见图 1。
2. 2. 2 线性关系考察。吉马酮的线性回归方程为:A =
31.298C +12.79,r =0.999 9,表明吉马酮在 9. 50 ~47. 50 μg /ml
范围内线形关系良好。
2. 2. 3 精密度试验。吉马酮峰面积的 RSD值为 0. 22%,表
明仪器操作过程中精密度良好。
2. 2. 4 稳定性试验。样品溶液在 24 h内吉马酮的平均含量
为 1. 172 mg /g,峰面积的 RSD值为 0. 57%(n =6) ,表明莪术
样品供试液在 24 h内稳定性良好。
图 1 对照品吉马酮 HPLC色谱图
Fig. 1 HPLC chromatogras of germacrone reference substance
2. 2. 5 重复性试验。吉马酮的平均含量为 0. 351 mg /g,RSD
值为 0. 55%(n =6) ,说明该法重复性良好。
2. 2. 6 加样回收率试验。由表 1可知,吉马酮的平均回收率
为 102. 38%,RSD值为 2. 56%,说明该方法检测准确度良好。
表 1 加样回收率结果(n =6)
Table 1 Results of recovery test (n =6)
编号
No.
取样量
Sample
amount∥g
原有量
Original
amount∥mg
加入量
Addition
amount∥mg
测得量
Measured
amount∥mg
加样回收率
Recovery
%
平均值
Average
%
RSD
%
1 2. 567 0. 298 5 0. 326 0 0. 636 4 100. 58
2 2. 504 0. 291 2 0. 326 0 0. 623 0 101. 78
3 2. 513 0. 292 3 0. 326 0 0. 636 0 105. 43 102. 38 2. 56
4 2. 567 0. 298 5 0. 326 0 0. 622 5 99. 39
5 2. 504 0. 291 2 0. 326 0 0. 636 0 105. 77
6 2. 490 0. 289 6 0. 326 0 0. 620 0 101. 35
表 2 样品测定结果(n =6)
Table 2 Determination of germacrone in samples(n =6)
产地
Producing
area
样品量
Sample
amount∥%
峰面积
Peak area
吉马酮含量
Germacrone
content∥mg /g
平南 Pingnan 1. 006 0 1 347. 2 1. 01
邕宁 Yongning 1. 030 7 1 361. 3 1. 13
容县 Rongxian 1. 004 0 1 208. 7 0. 99
灵山 Lingshan 1. 026 6 1 454. 5 1. 22
贵港 Guigang 1. 018 9 878. 7 0. 74
钦州 Qinzhou 1. 023 2 1 064. 5 0. 89
桂平 Guiping 1. 031 5 904. 3 0. 81
兴业 Xingye 1. 007 9 951. 6 0. 85
横县 Hengxian 1. 035 7 880. 7 0. 73
2. 2. 7 样品中吉马酮含量测定。按照“1. 2. 2. 9”操作,测定
样品中吉马酮的含量,结果见表 2。由表 2 可知,采自平南,
邕宁,容县,灵山,贵港,钦州,桂平,兴业,横县的莪术的吉马
酮含量分别为 1. 01、1. 13、0. 99、1. 22、0. 74、0. 89、0. 81、0. 85
和 0. 73 mg /g。
3 结论与讨论
(1)结果表明不同地区种植的莪术挥发油及吉马酮含量
存在一定的差异,9 个产地广西莪术中吉马酮平均含量为
0. 93 mg /g,灵山的莪术吉马酮含量为 1. 22 mg /g,明显高于
其他 8个产地,比最低的横县约高 40%。挥发油提取率以钦
州、灵山及平南县为高。
(2)吉马酮含量测定试验中,样品液的提取方法曾考察
了冷浸法、回流提取法及超声提取方法 3 种方法,以超声法
提取率及吉马酮含量为高,故选择超声法。吉马酮含量测定
结果与王建等[3]测定结果有所不同,可能是样品提取方法、
色谱条件有差异等因素带来的。
(3)广西莪术主产于广西、云南,是广西的地道药材。广
西钦州市灵山县为主产地,据灵山县农业招商项目介绍,全
县莪术种植面积达 2 000 hm2,年产量 3 800 t,已成为广西最
大的莪术种植基地。该研究可为完善广西莪术饮片质量标
准,以及上述产地的继续推广与应用提供试验科学依据。
参考文献
[1]国家药典委员会.中国药典2010 版一部[S].北京:中国医药科技出版
社,2010:257.
[2]何秀英,章建民,何娟. HPLC法测定清肌瘤胶囊中牻牛儿酮[J].中草
药,2006,33(7):1023.
[3]王建,刘雯,张炜,等.广西不同产地莪术中吉马酮含量比较[J].时珍
国医国药,2009,20(5):1091.
(下转第 14606页)
3064139 卷 24 期 覃 葆等 不同产地广西莪术的质量研究
3 讨论
栽培基质主要是从养分供应[12]和透气排水性[13]等方面
影响植物生长。野生石韦大多生长在林中树干或山岩、溪边
岩石面的腐殖质土上,土壤养分丰富且通透性良好。研究结
果表明,不同栽培基质对石韦有效成分含量的影响不尽相
同。甘蔗渣处理可明显石韦叶片的总黄酮、多糖、总皂苷、蒽
醌和绿原酸含量;木糠基质可极显著提高绿原酸含量,显著
提高多糖和总皂苷含量,但对总黄酮和蒽醌含量无显著影
响,蘑菇渣和炉渣基质可显著提高多糖和总皂苷含量,但同
时会降低总黄酮含量,且对蒽醌含量无显著影响。由此可
见,甘蔗渣处理是石韦人工栽培的较适宜的栽培基质,有利
于石韦各种有效成分的积累。黄建安等[14]的研究表明,腐
熟甘蔗渣含各种营养元素,与泥炭相比,其全氮含量较高而
C /N较低,含磷量是泥炭的 1. 6倍,速效磷是泥炭的 3. 1 倍,
速效钾和有效锌是泥炭的 2. 3倍和 4. 2 倍,且其酸性较泥炭
弱。甘蔗渣作为栽培基质可为作物生长提供良好的养分基
础。养分供应状况与植物光合碳代谢有密切的关系,而光合
碳代谢的产物又是黄酮等活性成分在植物体内合成的起初
源[15]。因此,适宜的养分供应可促进植物体内各活性成分
的合成[16 -17]。这可能也是甘蔗渣处理促进了石韦各有效成
分的积累的一个重要原因。此外,甘蔗渣还具有透气排水性
良好的特点。杨林等[12]的研究表明,基质透气排水性好可
促进植物根系的生长。进而可促进植物对养分的吸收。但
值得注意的是,黄建安[13]等指出植物的生长与蔗渣堆沤的
时间有密切的联系。龙明华[18]等的研究表明,在蔗渣堆沤
的过程中加入堆肥速效菌曲和尿素可使蔗渣在短时间内充
分腐熟。因此,在今后要加强这方面的研究,进一步选择出
对石韦活性成分积累效果最佳的甘蔗渣堆沤期和堆沤方法。
参考文献
[1]江苏新医学院.中药大辞典[M].上海:上海人民出版社,1985.
[2]陈超君,尹小红,杜金子,等.广西不同产地石韦活性成分的分析研究
[J].时珍国医国药,2009,20(9):2200 -2201.
[3]陈超君,尹小红,李莉蓉,等.广西石韦叶片性状的变异度及主成分和
聚类分析[J].时珍国医国药,2009,20(11):2745 -2748.
[4]中华人民共和国药典委员会.中国药典2005版(一部)[M].北京:化学
工业出版社,2005.
[5]中国医科院药物研究所等.中药志(第四册)[M].北京:人民卫生出版
社,1993.
[6]陈苏利,张延龙,牛立新.不同栽培基质对百合生长的影响[J].陕西农
业科学,2005(3):33 -36.
[7]王自军,杨红兵,齐誉,等.正交设计研究石韦总黄酮和鞣质提取工艺
[J].时珍国医国药,2007,8(2):463 -465.
[8]黄荣韶,罗永明,胡彦,等.毛鸡骨草总皂苷含量测定及其动态变化研
究[J].广东农业科学,2006(6):28 -30.
[9]杨林莎,李玉贤,李明丽,等.苯酚 -硫酸比色法测定百合多糖的含量
[J].中国中医药信息杂志,2004,11(8):704 -705.
[10]周红燕,陈建伟.紫外分光光度法测定炒决明子中总蒽醌含量[J].天
津中医药,2007,24(2):156 -158.
[11]张秋芳,刘波,史怀,等.金银花中绿原酸的快速测定方法[J].福建医
科大学学报,2006,40(4):398 -401
[12]姚玉敏,王秀峰,于喜艳,等.不同栽培基质对甜瓜品质和养分含量的
影响[J].山东农业科学,2009(2):45 -47.
[13]杨林,张正伟,莫东发.不同栽培基质对盆栽大甜薰衣草生长的影响
[J].北方园艺,2010(1):114 -116.
[14]黄建安,傅显华,云永利.蔗渣在花卉无土栽培基质中的应用[J].甘
蔗糖业,1995(1):14 -17.
[15]程水源,王艳,李俊凯,等.银杏叶黄酮类化合物合成代谢规律的研究
[J].林业科学,2002,38(5):60 -63.
[16]吴家胜,应叶青,曹福亮,等.施氮对银杏叶产量及黄酮含量的影响
[J].浙江林学院学报,2002,19(4):372 -375.
[17]汪吉东,刘兆普,郑青松,等.供氮水平对芦荟幼苗生长、硝酸盐和次生
代谢产物含量的影响[J].植物营养与肥料学报,2006,12(6):864 -
868.
[18]龙明华,唐小付,于文进,等.蔗渣处理作物西瓜、甜瓜栽培基质的效益
[J].浙江农业科学,2004(6):310 -312.
[19]SONG X D,ZHANG Z X,WANG W W,et al. Determination of isoflavone
from soybean lines cultivated in Jilin Province and correlation analysis be-
tween isoflavone content and soybean quality[J]. Agricultural Science &
Technology,2010,11(1):48 -50.
[20]尚海涛.液质联用分析黄毛耳草中的黄酮类化合物[J].畜牧与饲料
科学,2009,30(6):26 -27.
[21]SU J Q,CHU X L,WEI X B. Effects of proliferation of CEF with ginsen-
oside and its derivatives[J]. Agricultural Science & Technology,2009,10
(6):97 -100,167.
[22]冒玉娟,李小平. RP - HPLC 法测定 2 种银杏外种皮中黄酮苷含量
[J].畜牧与饲料科学,2009,30(6):28 -29.
[23]WANG S,WEI F J,CAI Y P,et al. Anti - oxidation activity in vitro of
polysaccharides of Dendrobium huoshanense and Dendrobium moniliforme
[J]. Agricultural Science & Technology,2009,10(6):121 -124.
[24]霍强,王宇,高荣远,等.瑞香狼毒总黄酮的提取及体外抗氧化作用研
究[J].畜牧与饲料科学,2010,31(2):
檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
83.
(上接第 14603页)
[4]LIU X,MA X C,HUANG H,et al. Analysis for the volatile secondary me-
tabolites of Mortierella alpine[J]. Agricultural Science & Technology,
2009,10(4):12 -14,21.
[5]罗维巍.牛奶挥发性成分的 GC -MS分析[J].畜牧与饲料科学,2009,
30(4):80 -81.
[6]XIA L Y,ZHANG X Y,WANG T X,et al. Study on the chromatographic
fingerprint of volatile constituents from acacia honey[J]. Agricultural Sci-
ence & Technology,2010,11(6):42 -44.
[7]冒玉娟,李小平. RP-HPLC法测定 2种银杏外种皮中黄酮苷含量[J].
畜牧与饲料科学,2009,30(6):28 -29.
[8]WANG C X,SHU Y. Evaluation on uncertainty of determining aspartame on
beverage by HPLC[J]. Agricultural Science & Technology,2009,10(5):6
-8.
[9]乐薇,杨静.胶束增敏法测定果蔬中 VC的含量[J].畜牧与饲料科学,
2009,30(6):35 -36.
60641 安徽农业科学 2011年