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不同产地广西莪术的质量研究



全 文 :不同产地广西莪术的质量研究
覃 葆,江海燕* ,刘英丽,袁 艳,蒋文兰 (广西中医学院,广西南宁 530001)
摘要 [目的]对广西灵山、桂平、贵港等不同产地莪术药材中挥发油及吉马酮含量进行比较。[方法]采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,
高效液相色谱法测定吉马酮,色谱条件为:乙腈 -水(V/V,70∶ 30),流速为 1 ml /min,柱温为 35 ℃,检测波长为 215 nm,进样量为 10 μl。
[结果]吉马酮检测浓度在 0. 022 3 ~0. 139 8 mg /ml范围内线性关系良好,不同产地莪术药材中挥发油及吉马酮含量均有一定差距。
[结论]灵山县产的莪术药材挥发油及吉马酮含量高于其他 8个地区。
关键词 莪术(RHIZOMA CURCUMAE);挥发油;吉马酮;含量比较
中图分类号 S567 文献标识码 A 文章编号 0517 -6611(2011)24 -14602 -02
Study on the Quality of RHIZOMA CURCUMAE from Different Producing Areas in Guangxi
QIN Bao et al (Guangxi Traditional Chinese Medical University,Nanning,Guangxi 530001)
Abstract [Objective] to compare the contents of volatile oil and of germacrone in RHIZOMA CURCUMAE from different producing area such
as Lingshan,Guiping and Guigang in Guangxi Province. [Method]The volatile oil was extracted from RHIZOMA CURCUMAE by steam distil-
lation. The content of germacrone was determined by high performance liquid chromatography method(HPLC),and its chromatograph conditions
were as follows:acetonitrile - water(V/V,70∶ 30),flow rate of 1 ml /min,column temperature of 35 ℃,detection wavelength of 215 nm and
sampling volume of 10 μl. [Result]The germacrone presented a good linear relation between the detection concentration of 0. 022 3 and 0. 139 8
mg /ml. The contents of volatile oil and of germacrone in RHIZOMA CURCUMAE varied for different producing area. [Conclusion]The contents
of volatile oil and of germacrone in RHIZOMA CURCUMAE from Lingshan were higher than that in other 8 areas.
Key words RHIZOMA CURCUMAE;Volatile oil;Germacrone;Content comparison
基金项目 广西科技攻关项目(桂科攻 0718002-4-3)。
作者简介 覃葆(1956 - ) ,男,广西象州人,副教授,从事中药饮片质量
及中药炮制研究,E-mail:bbythemoon@ yahoo. com. cn。* 通
讯作者,教授,硕士,硕士生导师,从事中药质量控制与管理
研究,E-mail:jhywe@ sina. com。
收稿日期 2011-04-21
莪术(RHIZOMA CURCUMAE)为姜科(Zingiberaceae)植
物蓬莪术(Curcuma phaeocaulis Val.)、广西莪术(Curcuma
kwangsiensis S. G. Lee et C. P. Liang)或温郁金(Curcuma we-
nyujin Y. H. Chen et C. Ling)的干燥根茎,具有行气破血、消
积止痛的功能,可用于治疗癥瘕痞块、淤血经闭、食积胀痛、
早期宫颈癌等疾病[1]。莪术主要产于广西的灵山、容县、贵
港等地,原药材一般冬季茎叶枯萎后采挖,洗净,蒸或煮至透
心,晒干或低温干燥后除去须根及杂质,其块根与根茎分别
是中药商品桂郁金(绿丝郁金)和桂莪术的来源。广西莪术
中主要含有挥发油,以桉油精、樟脑、异龙脑、β-榄香烯、莪术
烯、吉马酮、α-松油醇等含量为高,尚有姜黄素、脱甲氧基姜
黄素和双脱甲氧基姜黄素等成分。目前,广西莪术以挥发
油、吉马酮等作为莪术药材质量评价指标已逐渐被重视[2]。
鉴于此,笔者对广西不同产地莪术药材中的挥发油和吉马酮
含量进行比较,以期考察其药材质量。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 研究对象。广西莪术药材(RHIZOMA CURCUM-
AE) ,分别采自平南,邕宁,容县,灵山,贵港,钦州,桂平等地,
经药学院药用植物教研室王建教授鉴定为姜科植物(Zingib-
eraceae)广西莪术(Curcuma kwangsiensis S. G. Lee et C. P. Li-
ang)的干燥根茎。
1. 1. 2 主要试剂。吉马酮对照品(批号:111665-200401) ,购
自中国药品生物制品检定所。
1. 1. 3 主要仪器。美国 Agilent1100 Series型高效液相色谱
仪、Agilent1100 Series色谱工作站,购自美国安捷伦公司;LG-
16W型高速微量离心机,购自北京医用离心机厂;BP211D电
子分析天平,购自德国赛多利斯。
1. 2 方法
1. 2. 1 出油率测定。根据 2010年版中国药典一部附录 XD
挥发油测定甲法测定,读取挥发油量,并计算药材的出油率。
1. 2. 2 吉马酮含量测定。
1. 2. 2. 1 色谱条件的确定。色谱条件为:日本岛津公司
Shim-pack CLC-ODS 柱(6. 0ID × 15 mm) ,流动相为乙腈-水
(V /V,70∶ 30) ,流速为 1 ml /min,柱温为 35 ℃,检测波长为
215 nm,进样量为 10 μl。
1. 2. 2. 2 对照品溶液的制备。精密称取吉马酮对照品 6. 70
mg,置于 25 ml量瓶中,加色谱甲醇溶解、并定容至刻度,即
得吉马酮对照品储备液。
1. 2. 2. 3 供试品溶液的制备。各取不同产地莪术药材粉末
5 g,精密称定,置于锥形瓶中,精密加入甲醇 25 ml,称定重
量,超声提取 30 min,放冷至室温,用甲醇补足减失的重量,
摇匀,过滤,取续滤液,10 000 r /min离心 10 min,备用。
1. 2. 2. 4 线性关系考察。分别精密量取对照品液 2、4、6、8、
10 ml,置于 10 ml量瓶中,加色谱甲醇定容至刻度,即得 5个
浓度的对照品溶液。分别注入高效液相色谱仪,进样量为 10
μl,按照色谱条件“1. 2. 2. 1”进样,测定吉马酮峰面积。以峰
面积 A为纵坐标,样品浓度 C为横坐标绘制标准曲线,并进
行线性回归。
1. 2. 2. 5 精密度试验。取对照品溶液,连续进样 6 次,每次
进样 10 μl,对峰面积进行考察。
1. 2. 2. 6 稳定性试验。精密吸取供试品溶液,分别于 0、2、
4、8、12、24 h进样 10 μl进行分析,分别测定峰面积并计算其
含量。
1. 2. 2. 7 重复性试验。取桂平莪术药材粉末 6份,各取 5 g,
精密称定,分别按照“1. 2. 2. 3”制备供试品溶液,按照色谱条
件“1. 2. 2. 1”进样,测定峰面积并计算吉马酮的含量。
责任编辑 侯美灵 责任校对 况玲玲安徽农业科学,Journal of Anhui Agri. Sci. 2011,39(24):14602 - 14603,14606
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.24.138
1. 2. 2. 8 加样回收率试验。精密称取吉马酮对照品 3. 26
mg,置于 50 ml容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度。取桂
平产的莪术药材粉 6份,各约 2. 500 g,分别精密加入甲醇 20
ml及对照品溶液 5 ml,按照“1. 2. 2. 3”制备供试品溶液,按照
色谱条件“1. 2. 2. 1”进样,计算回收率和 RSD值。
1. 2. 2. 9 样品中吉马酮含量测定。取不同产地莪术样品,
按照“1. 2. 3”制备供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液
与供试品溶液各 10 μl,注入液相色谱仪,按照色谱条件
“1. 2. 1”进样,测定其峰面积,并计算样品中吉马酮的含量。
2 结果与分析
2. 1 出油率测定 按照“1. 2. 1”来测定出油率,结果显示产
自兴业、灵山、钦州、贵港、桂平、容县、平南、邕宁和横县的莪
术原药材挥发油出油率分别为 1. 3%、1. 68%、1. 56%、
1. 51%、1. 45%、1. 47%、1. 5%、1. 62%和 1. 41%。
2. 2 吉马酮测定
2. 2. 1 色谱分析结果。对照品吉马酮的色谱图见图 1。
2. 2. 2 线性关系考察。吉马酮的线性回归方程为:A =
31.298C +12.79,r =0.999 9,表明吉马酮在 9. 50 ~47. 50 μg /ml
范围内线形关系良好。
2. 2. 3 精密度试验。吉马酮峰面积的 RSD值为 0. 22%,表
明仪器操作过程中精密度良好。
2. 2. 4 稳定性试验。样品溶液在 24 h内吉马酮的平均含量
为 1. 172 mg /g,峰面积的 RSD值为 0. 57%(n =6) ,表明莪术
样品供试液在 24 h内稳定性良好。
图 1 对照品吉马酮 HPLC色谱图
Fig. 1 HPLC chromatogras of germacrone reference substance
2. 2. 5 重复性试验。吉马酮的平均含量为 0. 351 mg /g,RSD
值为 0. 55%(n =6) ,说明该法重复性良好。
2. 2. 6 加样回收率试验。由表 1可知,吉马酮的平均回收率
为 102. 38%,RSD值为 2. 56%,说明该方法检测准确度良好。
表 1 加样回收率结果(n =6)
Table 1 Results of recovery test (n =6)
编号
No.
取样量
Sample
amount∥g
原有量
Original
amount∥mg
加入量
Addition
amount∥mg
测得量
Measured
amount∥mg
加样回收率
Recovery
%
平均值
Average
%
RSD
%
1 2. 567 0. 298 5 0. 326 0 0. 636 4 100. 58
2 2. 504 0. 291 2 0. 326 0 0. 623 0 101. 78
3 2. 513 0. 292 3 0. 326 0 0. 636 0 105. 43 102. 38 2. 56
4 2. 567 0. 298 5 0. 326 0 0. 622 5 99. 39
5 2. 504 0. 291 2 0. 326 0 0. 636 0 105. 77
6 2. 490 0. 289 6 0. 326 0 0. 620 0 101. 35
表 2 样品测定结果(n =6)
Table 2 Determination of germacrone in samples(n =6)
产地
Producing
area
样品量
Sample
amount∥%
峰面积
Peak area
吉马酮含量
Germacrone
content∥mg /g
平南 Pingnan 1. 006 0 1 347. 2 1. 01
邕宁 Yongning 1. 030 7 1 361. 3 1. 13
容县 Rongxian 1. 004 0 1 208. 7 0. 99
灵山 Lingshan 1. 026 6 1 454. 5 1. 22
贵港 Guigang 1. 018 9 878. 7 0. 74
钦州 Qinzhou 1. 023 2 1 064. 5 0. 89
桂平 Guiping 1. 031 5 904. 3 0. 81
兴业 Xingye 1. 007 9 951. 6 0. 85
横县 Hengxian 1. 035 7 880. 7 0. 73
2. 2. 7 样品中吉马酮含量测定。按照“1. 2. 2. 9”操作,测定
样品中吉马酮的含量,结果见表 2。由表 2 可知,采自平南,
邕宁,容县,灵山,贵港,钦州,桂平,兴业,横县的莪术的吉马
酮含量分别为 1. 01、1. 13、0. 99、1. 22、0. 74、0. 89、0. 81、0. 85
和 0. 73 mg /g。
3 结论与讨论
(1)结果表明不同地区种植的莪术挥发油及吉马酮含量
存在一定的差异,9 个产地广西莪术中吉马酮平均含量为
0. 93 mg /g,灵山的莪术吉马酮含量为 1. 22 mg /g,明显高于
其他 8个产地,比最低的横县约高 40%。挥发油提取率以钦
州、灵山及平南县为高。
(2)吉马酮含量测定试验中,样品液的提取方法曾考察
了冷浸法、回流提取法及超声提取方法 3 种方法,以超声法
提取率及吉马酮含量为高,故选择超声法。吉马酮含量测定
结果与王建等[3]测定结果有所不同,可能是样品提取方法、
色谱条件有差异等因素带来的。
(3)广西莪术主产于广西、云南,是广西的地道药材。广
西钦州市灵山县为主产地,据灵山县农业招商项目介绍,全
县莪术种植面积达 2 000 hm2,年产量 3 800 t,已成为广西最
大的莪术种植基地。该研究可为完善广西莪术饮片质量标
准,以及上述产地的继续推广与应用提供试验科学依据。
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(下转第 14606页)
3064139 卷 24 期 覃 葆等 不同产地广西莪术的质量研究
3 讨论
栽培基质主要是从养分供应[12]和透气排水性[13]等方面
影响植物生长。野生石韦大多生长在林中树干或山岩、溪边
岩石面的腐殖质土上,土壤养分丰富且通透性良好。研究结
果表明,不同栽培基质对石韦有效成分含量的影响不尽相
同。甘蔗渣处理可明显石韦叶片的总黄酮、多糖、总皂苷、蒽
醌和绿原酸含量;木糠基质可极显著提高绿原酸含量,显著
提高多糖和总皂苷含量,但对总黄酮和蒽醌含量无显著影
响,蘑菇渣和炉渣基质可显著提高多糖和总皂苷含量,但同
时会降低总黄酮含量,且对蒽醌含量无显著影响。由此可
见,甘蔗渣处理是石韦人工栽培的较适宜的栽培基质,有利
于石韦各种有效成分的积累。黄建安等[14]的研究表明,腐
熟甘蔗渣含各种营养元素,与泥炭相比,其全氮含量较高而
C /N较低,含磷量是泥炭的 1. 6倍,速效磷是泥炭的 3. 1 倍,
速效钾和有效锌是泥炭的 2. 3倍和 4. 2 倍,且其酸性较泥炭
弱。甘蔗渣作为栽培基质可为作物生长提供良好的养分基
础。养分供应状况与植物光合碳代谢有密切的关系,而光合
碳代谢的产物又是黄酮等活性成分在植物体内合成的起初
源[15]。因此,适宜的养分供应可促进植物体内各活性成分
的合成[16 -17]。这可能也是甘蔗渣处理促进了石韦各有效成
分的积累的一个重要原因。此外,甘蔗渣还具有透气排水性
良好的特点。杨林等[12]的研究表明,基质透气排水性好可
促进植物根系的生长。进而可促进植物对养分的吸收。但
值得注意的是,黄建安[13]等指出植物的生长与蔗渣堆沤的
时间有密切的联系。龙明华[18]等的研究表明,在蔗渣堆沤
的过程中加入堆肥速效菌曲和尿素可使蔗渣在短时间内充
分腐熟。因此,在今后要加强这方面的研究,进一步选择出
对石韦活性成分积累效果最佳的甘蔗渣堆沤期和堆沤方法。
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