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二氧化氯对剑麻外植体材料消毒的应用研究



全 文 :ClO2(二氧化氯)是国际上公认的含氯消毒剂中
的一种高效消毒杀菌剂, 可杀灭一切微生物而不会
产生抗药性 [1]。 ClO2杀菌原理是其对微生物细胞壁
有较强的吸附穿透能力, 可有效地氧化细胞内含巯
基的酶, 还可快速地抑制微生物的蛋白质合成。 在
农业领域, ClO2 已广泛用于种养业生产和保鲜储
存处理 [1-3]。 植物组织培养外植体材料的消毒灭菌
多采用 1 000~2 000 mg/L HgCl2 溶液浸泡 [4], 但升
汞处理后很难彻底去除, 操作还繁琐, 其余杀菌剂
则效果较差。 国内 2006 年首先报道了 ClO2对无籽
西瓜种子进行表面消毒用于组培快繁研究 [5], 2009
年梁钾贤等 [6]用 ClO2对香蕉吸芽外植体进行消毒取
得了成功, 并在香蕉种苗生产中取得了很好的效
益。 目前, 国内外利用 ClO2 对剑麻外植体材料进
行消毒的研究尚未见报道。
剑麻(Agavee sisalana Perr.ex Engelm)是一种
热带多年生硬质纤维作物, 其纤维色泽洁白, 质地
坚韧, 拉力强, 耐磨擦, 广泛应用于渔业、 航海、
工矿等行业, 以及用于编织剑麻地毯、 剑麻布、 工
艺品等[7-8]。 同时也是宝贵的热作资源。
20 世纪 70 年代后期, 采用剑麻叶、 腋芽、 有
性杂交种子诱导愈伤组织再分化出完整植株 [9-10],
获得了少量组培苗, 但假植成活率低, 大田种植未
获成功, 随后相继有剑麻组织培养研究的报道 [11-13],
热带作物学报 2012, 33(10): 1819-1823
Chinese Journal of Tropical Crops
收稿日期: 2012-08-20 修回日期: 2012-10-08
基金项目: 湛江市科技计划项目(No. 2011C3109003)。
作者简介: 梁钾贤(1963年—), 男, 硕士, 讲师。 研究方向: 植物组织培养及品种改良。 E-mail: ljx0714001@163.com。
二氧化氯对剑麻外植体材料消毒的应用研究
梁钾贤 1, 揭 进 2, 刘伟清 2
1 广东海洋大学农业生物技术研究所, 广东湛江 524088
2 广东省湛江农垦科学研究所, 广东湛江 524086
摘 要 为建立高效、 环保的剑麻无菌繁殖技术, 以 H.11648剑麻的珠芽为外植体, 以 1 000 mg/L HgCl2溶液对
外植体材料浸泡消毒灭菌 20 min 作对照, 以不同浓度的 ClO2溶液对外植体材料进行不同时间的浸泡消毒灭菌试
验。 结果表明, 500~3 000 mg/L ClO2 溶液对剑麻珠芽外植体浸泡消毒 20~50 min, 可显著降低培养材料的污染
率, 外植体生长好, 腋芽萌动快, 腋芽萌发率在 14.175%~47.335%, 显著高于对照的 4.340%, 最初 3 次继代
的增殖率为 5.685~11.325倍, 显著高于对照的 3.040倍。 剑麻珠芽外植体材料消毒灭菌的最适宜方法是 1 000 mg/L
ClO2溶液浸泡消毒 30 min。
关键词 ClO2; 剑麻 H.11648; 珠芽; 外植体消毒灭菌; 组织培养
中图分类号 S339.4 文献标识码 A
Disinfection of Agavee sisalana Explant
Materials with Chlorine Dioxide
LIANG Jiaxian1, JIE Jin2, LIU Weiqing2
1 Institute of Agricultural Biotechnology, Guangdong Ocean University, Zhanjiang, Guangdong 524088, China
2 Research Institute, Zangjiang State Farm Bureau, Zhanjiang, Guangdong 524086, China
Abstract The bulbils of Agavee sisalana H.11648 were used as the explants which were sterilized by ClO2
soaking solution and tissue cultured in order to establish an efficient and environment -friendly technique. The
results of different treatments which explants were soaked for different times by different concentrations of ClO2
were compared with those of the control in which the explants were soaked in 1 000 mg/L HgCl2 for 20 min in
order to determine the best sterilization method for Agavee sisalana. The results showed it obviously reduced the
rates of microbial contamination of plantlets when the explants were soaked for 20~50 min by 500~3 000 mg/L
ClO2. The explants grew well and the axillary buds sprouted rapidly. The sprouting rates of axillary buds were
between 14.175%~47.335% which were obviously higher than that of 4.340% of the control treated by HgCl2
solution. The rates of reproduction of the 1~3 generation of subculture propagation treated by ClO2 were between
5.685~11.325 which were 4.34% higher than that of the control. The best sterilization method was that the bulbils
of Agavee sisalana were sterilized in 1 000 mg/L ClO2 solution for 30min.
Key Words ClO2; Agavee sisalana H.11648; Bulbil; Plantlet sterilization; Tissue Cculture
doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2012.10.019
第 33 卷热 带 作 物 学 报
也未形成规模繁育。 但 2005 年李愿萍等 [14]以剑麻
珠芽为组培材料的繁育研究获得成功。
剑麻组培快繁, 需建立以珠芽茎尖分生组织为
材料的无菌繁殖体。 为保证繁殖种苗质量, 必须建
立足够数量的无菌繁殖体, 因此要消毒的珠芽材料
较多, 杀菌剂及无菌水等用量大, 成本高, 工作量
大。 剑麻外植体的消毒通常采用 1 000 mg/L HgCl2
溶液浸泡 20 min, 无菌水冲洗 5 次, HgCl2消毒剂
的 Hg2+对环境和人体的毒性较大, 使用时需要做足
防护措施, 程序繁琐, 效率低, 且初代培养增殖率
低, 继代周期较长, 还因继代增殖时间延长而导致
繁殖体玻璃化程度显著增高, 再生种苗移栽成活率
低, 严重阻碍剑麻快繁种苗的产量和质量提高。 采
用 ClO2溶液对植物组织培养外植体材料消毒灭菌
具有程序简单、 环保无害、 工作效率高等优点。 为
探讨应用 ClO2建立高效、 环保的剑麻外植体消毒
灭菌方法, 笔者进行了本研究。
1 材料与方法
1.1 材料
试验材料是在种植已达 12 龄的 H.11648 高产
麻田中, 选择 600片叶以上产量高、 生长旺盛、 含
纤维率高、 抗病力强的健康优良单株作为母株, 采
其花轴中部生长健壮的珠芽, 经广东湛江农垦科学
研究所在原种圃荫棚假植培育出根后生长有 6~10
片叶的植株。
1.2 方法
1.2.1 消毒剂制备 ClO2溶液: 使用前将环凯牌
ClO2甲试剂和乙试剂分别按试剂 ∶水=1 ∶ 10 的比例
溶解配制成 ClO2甲溶液和乙溶液, 然后将甲溶液与
乙溶液按等体积混合, 经 20~30 min 活化后即制成
浓度为 20 000 mg/L 的 ClO2溶液, 再以无菌水稀释
至实际使用所需溶液的浓度(500、 1 000、 1 500、
2 000 mg/L或 3 000 mg/L), 随用随配。
1 000 mg/L 的 HgCl2溶液: 用感量为 0.01 g 的
分析天平称取 HgCl2 2.0 g, 用适量无菌水使之溶解
后, 定容 2 000 mL溶液, 摇匀备用。
1.2.2 培养基 外植体诱导培养基为 MS+6-BA
5 mg/L+NAA 0.3 mg/L+白砂糖 3%+琼脂 0.65%, 繁
殖体继代增殖培养基为 MS+6-BA 4 mg/L+IBA
0.3 mg/L+白砂糖 3%+琼脂 0.65%。
1.2.3 外植体的处理 选晴天将珠芽从原种圃中
取回组培准备工作间, 用自来水反复多次冲洗,
去掉泥土和杂物后, 切除根, 环剥除叶片, 保留
1.5 cm×2 cm大小的顶部生长锥(图 1-A)。
1.2.4 外植体消毒 将修整好的材料随机选取 10~
12 个为 1 组装入干净的无菌容器中, 移至无菌操
作间, 在洁净工作台环境下进行消毒灭菌。
对照组消毒: 取一组材料用 1 000 mg/L HgCl2
溶液将其浸没, 浸泡 20 min, 期间不断搅拌, 消毒
灭菌后沥干溶液, 用无菌水反复冲洗 5次, 将水沥
干后进行接种。 对照组消毒灭菌重复 2次。
ClO2 消毒灭菌试验: 随机选取一组材料用配
制好的 ClO2 溶液将其浸没, 浸泡期间不断搅拌,
消毒灭菌后沥干溶液即进行接种。 ClO2 消毒灭菌
采用不同浓度与浸泡时间的组合试验, 每试验处理
重复 2次。 试验处理组合为:(1)500 mg/L, 20 min;
(2)500 mg/L, 30 min; (3)500 mg/L, 40 min; (4)
500 mg/L, 50 min; (5)1 000 mg/L, 30 min; (6)
1 000 mg/L, 50 min; (7)1 500 mg/L, 20 min; (8)
1 500 mg/L, 40 min; (9)2 000 mg/L, 30 min; (10)
2 000 mg/L, 50 min; (11)3 000 mg/L, 30 min; (12)
3 000 mg/L, 50 min。
1.2.5 外植体的接种和培养 消毒完成后每个材
料纵切为 4块(图 1-B), 接种到剑麻诱导芽培养基中,
每袋接种 2 块, 置温度(28±2)℃, 光照 10~12 h/d、
图 1 剑麻外植体材料修整后(A)和消毒后分切(B)
A. 修整好的材料 B. 消毒后生长锥纵切分为四块
1820- -
第 10 期
1 000~1 500 lx, 相对湿度 50%~70%培养室内培
养。 培养 30 d 后, 转移接种到的增殖培养基中进
行继代培养, 培养条件与前述相同。
1.2.6 统计分析 接种材料培养 25 d 后, 统计污
染袋数并计算污染率; 记录每块外植体萌发腋芽个
数及统计各处理的腋芽萌发率; 追踪最初 3次继代
培养的增殖情况及计算不同处理的增殖倍率。 采用
Microsoft Office Excel 2003 进行数据整理计算, 用
SPSS10.0 统计软件对各处理的污染率、 腋芽萌发
率及最初 3次继代培养的平均增殖倍率等数据进行
统计分析和显著性分析, 显著水平 α=0.05, 用 Duncan
法进行多重比较。 评判指标:
①污染率=试验组观察到菌落的袋数/试验组接
种总袋数×100%;
②外植体腋芽萌发率 /%=培养 25 d 后试验组
非污染外植体的萌发腋芽数/试验组非污染外植体
接种总块数×100;
③繁殖体最初 3 次继代的平均增殖倍率=(初
代增殖倍率+2代增殖倍率+3代增殖倍率)/3;
④增殖倍率=培养后繁殖体的芽数/繁殖体培养
开始时的芽数。
2 结果与分析
2.1 ClO2溶液浸泡处理对剑麻外植体污染率的影响
外植体的消毒是植物组织培养成功的关键, 外
植体的消毒效果与消毒剂、 消毒剂浓度和消毒剂处
理时间有关。 不同浓度 ClO2溶液浸泡不同时间处
理剑麻外植体的污染率见表 1, 由表 1 可以看出:
用 HgCl2处理(常规处理)、 ClO2不同浓度和不同时
间对剑麻外植体处理后, 外植体的污染率不同, 各
处理的污染率在 1.250%~17.615%, 污染率最高是
处理(2), 最低是处理(8)。 对处理间污染率的显著
性测验结果表明: 处理(5)~(12)的污染率显著低于
CK、 处理(1)~(4)。 也就是说, 用 1 000~3 000 mg/L
ClO2溶液浸泡处理剑麻外植体材料 20~50 min 的初
代培养污染率显著低于用 HgCl2处理和 500mg/L ClO2
溶液浸泡处理剑麻珠芽外植体材料 20~50 min。 因
此 , 从降低培养材料污染率考虑 , 采用浓度为
1 000~3 000 mg/L ClO2溶液浸泡 20~50 min 对剑麻
珠芽外植体材料进行消毒处理, 均可获得初代培养
污染率较低的效果。
2.2 ClO2溶液浸泡处理对剑麻外植体腋芽萌发率
的影响
剑麻外植体腋芽能否快速萌发, 直接影响繁殖
体的增殖速度和种苗质量, 其腋芽萌发率同样与消
毒剂、 消毒剂浓度和消毒剂处理时间有关。 不同浓
度 ClO2溶液浸泡不同时间处理剑麻珠芽外植体材
料的腋芽萌发率见表 2, 由表 2可以看出, 用 HgCl2
处理(常规处理)、 ClO2 不同浓度和不同时间对剑
麻外植体处理后, 外植体的外植体腋芽萌发率不同,
各处理的外植体腋芽萌发率在 4.340%~47.335%,
腋芽萌发率最低为 CK, 最高为处理(5)。 对处理间
外植体腋芽萌发率的显著性测验结果表明: CK 的
腋芽萌发率显著低于处理(1)~(12), 而处理(5)腋
芽萌发率则显著高于其余各处理, 表明采用 ClO2
溶液浸泡剑麻珠芽外植体材料的消毒处理效果明显
比升汞好, 1 000 mg/L ClO2溶液浸泡剑麻珠芽外植
体材料 30 min 的腋芽萌发最高。 若以有利于增加
外植体的腋芽萌发率为评判标准, ClO2 溶液浸泡
消毒显著优于升汞溶液, 本试验以 1 000 mg/L ClO2
说明: 表中同列数据后的小写字母不同表示差异显著(р<0.05)。 下同。
表 1 不同浓度 ClO2溶液浸泡不同时间
处理剑麻外植体的污染率/%
处理组合 重复 1 重复 2 平均数
CK 12.00 18.75 (15.375±3.375)ab
(1) 15.79 19.05 (17.420±1.630)a
(2) 15.79 19.44 (17.615±1.825)a
(3) 11.90 12.50 (12.200±0.300)b
(4) 16.67 17.50 (17.085±0.415)a
(5) 5.00 2.63 (3.815±1.185)c
(6) 4.76 3.85 (4.305±0.455)c
(7) 5.00 5.00 (5.000±0.000)c
(8) 0.00 2.50 (1.250±1.25)c
(9) 2.94 0.00 (1.470±1.470)c
(10) 0.00 3.03 (1.515±1.515)c
(11) 4.76 2.50 (3.630±1.130)c
(12) 4.55 4.76 (4.655±0.105)c
处理组合 重复 1 重复 2 平均数
CK 2.27 6.41 (4.340±2.070)f
(1) 34.38 36.76 (35.570±1.190)b
(2) 28.13 25.86 (26.995±1.135)c
(3) 27.03 28.57 (27.800±0.770)c
(4) 18.33 19.70 (19.015±0.685)de
(5) 47.37 47.30 (47.335±0.035)a
(6) 45.00 36.00 (40.500±4.500)b
(7) 18.42 18.42 (18.420±0.000)de
(8) 16.25 17.95 (17.100±0.850)de
(9) 22.73 32.89 (27.810±5.08)c
(10) 14.29 14.06 (14.175±0.115)e
(11) 22.50 24.36 (23.430±0.930)cd
(12) 15.48 15.00 (15.240±0.240)e
表 2 不同浓度 ClO2溶液浸泡不同时间处理
剑麻珠芽外植体材料的腋芽萌发率/%
梁钾贤等: 二氧化氯对剑麻外植体材料消毒的应用研究 1821- -
第 33 卷热 带 作 物 学 报
溶液浸泡 30 min的处理组合最佳。
2.3 ClO2溶液浸泡消毒对剑麻繁殖体最初 3 次继
代的平均增殖倍率的影响
繁殖体的增殖倍率关系剑麻种苗组培快繁的生
产效益。 繁殖体最初 3次继代的平均增殖倍率也与
消毒剂、 消毒剂浓度和消毒剂处理时间有关。 不同
浓度 ClO2 溶液浸泡不同时间处理剑麻珠芽外植体
材料的繁殖体前 3 次继代平均增殖倍率见表 3, 由
表 3 可以看出, CK 最初 3 次继代的平均增殖倍率
最低, 为 3.040 倍, ClO2各处理最初 3 次继代的平
均增殖倍率为 5.685~11.325 倍, 最高是处理(5),
最低为(12); 同一浓度 ClO2 溶液的处理组合, 其
增值倍率呈现随浸泡时间延长而降低的趋势。 对处
理间繁殖体最初 3次继代的平均增殖倍率的显著性
测验结果表明: ClO2各处理显著高于 CK, 表明消
毒液处理对外植体增殖生长的不利影响是升汞显著
大于 ClO2; 处理(1)~(4)、 处理(7)和处理(8)之间
没有显著差异, 表明 1 500 mg/L 以下 ClO2 溶液浸
泡不同时间的处理组合对增殖倍率没有显著影响;
处理(5)和处理(6)显著高于其余各处理, 而处理
(11)和处理(12)则显著低于除 CK 以外的处理, 表
明采用 1 000 mg/L ClO2 溶液消毒较适合繁殖体最
初 3 次继代的快速增殖, 而 3 000 mg/L ClO2 溶液
处理则不利于繁殖体的低代增殖。 因此, 消毒剂
ClO2对剑麻外植体材料消毒的溶液浓度以 1 000mg/L
较为适宜, 浸泡处理 30 min的效果较佳。
3 讨论与结论
从杀菌机理分析, 升汞杀菌主要是重金属离子
Hg2+作用使细胞有生命功能的蛋白质变性所致 [15],
可作用于所有生物的组织细胞; ClO2 具很强的氧
化作用, 能迅速氧化破坏病毒、 细菌及其它微生物
蛋白质中的部分氨基酸, 最终导致病毒、 细菌等微
生物死亡。 在已知氨基酸中, 芳香族和含硫类氨基
酸最易受到 ClO2 的氧化破坏。 ClO2 能较好地杀灭
病毒、 细菌等微生物, 却不会对动植物机体产生损
伤, 原因在于病毒、 细菌等属原核细胞生物, 其大
多数酶系统分布于细胞膜近表面, 易受攻击; 而
动、 植物多属真核细胞生物, 其酶系统深入到细胞
里的细胞器中, ClO2 不易与它接触而得到保护 [16]。
因此, 用 ClO2 对剑麻外植体消毒灭菌, 除获得较
好效果外, 外植体的组织细胞也能够得到相对较好
的保护, 升汞则没有这种保护特性。 所以本研究采
用 ClO2 溶液消毒的外植体, 其腋芽萌发率、 低代
增殖率明显好于升汞。
由于升汞处理外植体后容易深入植物的细胞内
而难以完全清除, 对组织细胞伤害的持续时间较
长, 所以外植体经升汞浸泡后都要用大量的无菌水
进行反复冲洗, 以将残留的 Hg2+去除[15]。 ClO2的氧
化性活跃, 短时间内可自行分解为无害物质[1]。 因
此, 采用 ClO2 对外植体材料进行浸泡消毒, 对实
现高效、 环保的生产理念具有重要的现实意义。 目
前, 报道植物组织培养采用 ClO2 溶液对外植体进
行灭菌消毒的植物仅有西瓜[5]、 香蕉[6]、 番木瓜[17]和
小水榕 [18], 而能够成功应用于产业化规模生产的只
有香蕉。 本研究表明, 剑麻组培快繁种苗的外植体
材料采用 ClO2 溶液作为杀菌剂进行浸泡消毒后,
直接接种培养, 与升汞消毒相比较, 不仅可以明显
降低培养材料的微生物污染率, 而且腋芽萌发率显
著提高, 最初 3次继代培养的增殖率显著增加, 大
幅度地缩短继代增殖的时间, 提高了种苗的质量和
繁殖效率, 同时免除了无菌水冲洗, 减少了预防升
汞伤害的保护措施的繁琐操作, 可一次性消毒较多
数量的外植体材料, 明显地提高了工作效率。
本研究表明, 剑麻珠芽外植体材料采用消毒剂
ClO2 的消毒效果显著优于升汞, 1 000 mg/L ClO2
溶液浸泡消毒 30 min 的处理组合最优。 采用 ClO2
溶液不同浓度与不同浸泡时间的处理组合, 未经无
菌水冲洗直接接种培养, 其污染率、 腋芽萌发率和
繁殖体前 3 次继代的平均增殖倍率均存在显著差
异; 采用浓度 1 000~3 000 mg/L ClO2 溶液, 浸泡
消毒 20~50 min 的外植体材料, 其污染率在 5%以
内, 该浓度范围的处理组合之间的污染率没有显著
差异, 但显著低于升汞溶液的常规处理和 500 mg/L
处理组合 重复 1 重复 2 平均数
CK 3.13 2.95 (3.040±0.090)f
(1) 9.55 8.95 (9.250±0.300)b
(2) 8.81 8.58 (8.695±0.115)b
(3) 9.06 8.01 (8.535±0.525)bc
(4) 7.92 8.58 (8.250±0.330)bc
(5) 11.12 11.53 (11.325±205)a
(6) 10.14 11.12 (10.630±0.490)a
(7) 8.90 7.91 (8.405±600)bc
(8) 7.69 8.89 (8.290±0.575)bc
(9) 8.76 7.61 (8.185±0.470)bc
(10) 6.81 7.75 (7.280±0.370)cd
(11) 6.13 6.87 (6.500±0.135)de
(12) 5.55 5.82 (5.685±0.413)e
表 3 不同浓度 ClO2溶液浸泡不同时间处理剑麻珠芽外
植体材料的繁殖体前 3 次继代平均增殖倍率/%
1822- -
第 10 期
ClO2 溶液浸泡不同时间的处理组合; ClO2 消毒的
外植体材料, 其腋芽萌发率和繁殖体前 3次继代的
平均增殖倍率均显著高于升汞溶液处理, 并且随
ClO2溶液的浓度增大和浸泡消毒的时间延长而降低。
从试验结果看, 采用浓度 500 mg/L ClO2 溶液
浸泡 20~50 min 处理组合, 其外植体材料初代培养
的污染率较高, 与升汞溶液的常规处理污染率相
当, 但显著高于而 1 000~3 000 mg/L ClO2 溶液浸
泡消毒的污染率, 所以笔者认为决定初代培养材料
污染率高低的主要因素是 ClO2溶液的浓度。 仅从污
染率考虑, 剑麻外植体材料灭菌采用 500~3 000 mg/L
ClO2溶液浸泡 20~50 min, 都可获得较较好的消毒
效果, 其作用浓度和时间的适宜范围较宽, 方便操
作。 此结果与香蕉吸芽材料的外植体消毒灭菌试验
结果[6]相符。
有研究指出酒精消毒时间对外植体腋芽萌发率
影响较大[19], 在外植体材料完成消毒时, 用 GA3浸
泡后接种可以加速腋芽萌发、 提高腋芽萌发率 [20]。
讫今为止未见采用 ClO2 消毒能增进外植体腋芽萌
发的报道。 本研究表明, 升汞溶液对剑麻浸泡消毒
的外植体腋芽萌发率明显低于采用 ClO2 溶液的各
种浓度进行浸泡消毒不同时间的组合处理, 并且
1 000 mg/L ClO2 溶液浸泡消毒 30 min 的处理组合
的腋芽萌发率达到 47.335%, 是升汞消毒 4.340%
的 10.9 倍, 表明消毒剂 ClO2对增进剑麻外植体腋
芽萌发优于升汞, 适宜浓度的 ClO2 溶液浸泡消毒
适宜的时间可以大幅度提高剑麻外植体腋芽的萌发率。
剑麻无菌繁殖体的随继代时间延长容易形成玻
璃化苗, 其植株生根难, 种苗质量差, 移栽易死
亡。 多年生产实践表明, 剑麻最初三代繁殖体的增
值倍率较高, 四代以上丛芽的增殖倍率很少超过
2.5。 要实现缩短继代时间, 减少继代次数, 最好
的方法是提高繁殖体最初三代的增殖倍率。 本研究
表明: 采用 ClO2 溶液消毒的繁殖体前 3 次继代的
平均增殖倍率显著高于升汞溶液, 1 000 mg/L ClO2
溶液消毒的外植体材料, 其繁殖体平均增殖倍率达
到 10 倍以上。 至今为止, 未见剑麻珠芽材料的繁
殖体增殖倍率达到 10倍的报道。
综合考虑 ClO2溶液消毒对剑麻外植体污染率、 腋
芽萌发率和低代增殖倍率影响, 认为采用 1 000 mg/L
ClO2 溶液浸泡 30 min 处理的效果最优。 到目前为
止, 笔者已经应用该方法建立了 5 000 多个外植体
用于剑麻组培苗的生产, 为建立剑麻种苗优质高效
组培快繁生产技术体系的关键环节创造了成熟的技
术保障。 是继香蕉后, 又一个采用 ClO2 对外植体
材料消毒技术应用于植物种苗产业化生产的成功实例。
本研究仅针对剑麻的当家品种 H.11648, ClO2
对剑麻其它品种的珠芽外植体材料消毒效果有待验
证。 3 000 mg/L ClO2溶液对剑麻外植体的腋芽萌发
率影响与其它浓度的相比没有表现为显著差异, 而
对低代继代的增殖率的影响则表现了显著的差异,
其原因有待研究。 本试验设计上考虑不周, 无法明
确 ClO2 消毒灭菌的浓度与浸泡时间是否存在交互
作用效应, 是否还可能存在更优的浓度与时间组合
的消毒方法。 ClO2溶液浓度高于 3 000 mg/L或溶液
浸泡时间超过 50min的灭菌效果如何需进一步研究。
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责任编辑: 叶庆亮
梁钾贤等: 二氧化氯对剑麻外植体材料消毒的应用研究 1823- -