全 文 ：收稿日期:2015 － 12 － 05;修回日期:2016 － 08 － 19
基金项目:吉林省长白山动植物资源利用与保护重点实验室项
目(吉农院合字［2012］第 725 号);大学生科技创新项目
(［2014］第 2014103 号)
作者简介:姜 辉(1980 － )，女，讲师，硕士，研究方向为天
然物提取及配位化学，jianghui800729@ 163． com．
野生铃兰全株中有效成分的
抗氧化性研究
姜 辉，刘梦雪，马凤霞
(吉林农业科技学院 文理学院，吉林 吉林 132101)
中图分类号:Q94;Q505 文献标识码:B 文章编号:1004 － 7034(2016)11 － 0161 － 03
关键词:铃兰;提取物;抗氧化性;清除率;自由基;维生素 C
摘 要:为了探寻铃兰全株提取物抗氧化、清除活性自由基的能力，试验采用测定铃兰全株提取物对
1，1 －二苯基 － 2 －苦肼基(DPPH·)、羟基自由基(·OH)和超氧阴离子体外清除能力大小，并与维
生素 C的抗氧化能力做对比。结果表明:与维生素 C相比较，铃兰提取物表现出较好的抗氧化能力，
对 DPPH·、·OH表现出的清除能力在低浓度区略低于维生素 C，而在高浓度区域则表现出与维生
素 C相接近的抗氧化能力;对超氧阴离子的清除能力在整个浓度范围内与维生素 C 基本相同。说明
铃兰提取物有较好的抗氧化性。
生物体内过量的氧自由基会造成生物膜损伤、蛋
白质变性、酶失活等，从而引起生物体内各种疾病的
发生。有资料报道，癌症、心脑血管病等很多疾病都
与氧自由基的参与有关，由氧自由基参与反应所引起
的不良影响已经引起人们的高度重视。近年来，自由
基的产生和清除一直是生物、医药、环境和农学研究
的热点，许多高效、安全、天然的抗氧化剂不断被发
现，但有关铃兰抗氧化的研究少见报道［1 － 3］;而本试
验用常见的有机物提取方法提取铃兰有效成分，无化
学试剂残留、无污染，所得铃兰提取物较好地保留了
有效成分。李汉熙等［4］对铃兰的主要有效成分进行
了抗氧化试验，为进一步开发利用铃兰打下理论基
础。本试验选择吉林省左家产铃兰为研究材料，提取
其有效成分，测定铃兰全株提取物清除 1，1 － 二苯
基 － 2 －苦肼基(DPPH·)，羟基自由基(·OH)和过
氧化氢(H2O2)的能力。
1 材料
1． 1 主要药物与试剂
野生铃兰，采自吉林农业科技学院左家校区
后山。
DPPH·，TCI公司生产;95%乙醇、双氧水、邻苯
三酚，均购自天津市致远化学试剂有限公司;水杨酸，
购自北京化工厂;硫酸亚铁，购自天津市永大化学试
剂有限公司;盐酸，购自沈阳市新化试剂厂;三羟甲基
氨基甲烷(Tris)，购自天津市大茂化学试剂厂。
1． 2 主要仪器
紫外分光光度计(型号为 UV － 2450)，购自日本
岛津公司;电子分析天平、pH 值计，均购自梅特勒 －
托利多仪器上海有限公司。
2 方法
2． 1 野生铃兰抗氧化物质的提取
野生铃兰抗氧化物质的提取工艺详见参考文献
［5］。准确称取铃兰的提取物 1． 000 0 g，溶于一定量
的 95%乙醇中，然后定容至 100． 0 mL。分别移取上
述溶液 1． 00 mL、2． 00 mL、3． 00 mL、4． 00 mL、
5． 00 mL、6． 00 mL、7． 00 mL、8． 00 mL、9． 00 mL、
10． 00 mL 于 50． 0 mL容量瓶中定容，待测。
2． 2 DPPH·清除率的测定
0． 1 mmol /L DPPH· －乙醇溶液的配制:准确称
取 DPPH· 0． 003 95 g，用 95%的乙醇溶液溶解并定
容于 100 mL的容量瓶中。将 1． 5 mL 样品液添加到
1． 5 mL含 0． 1 mmol /L DPPH·的 95%乙醇溶液中，
混合震荡，在室温下放置 5 min，然后在波长 517 nm
处检测(A1)值［5］。清除率(S)计算公式:S(%)=
［1 －(A1 － A2)/A3］× 100%，其中 A1、A2 和 A3 分别
为样品管、对照管及空白管测定的吸光度值。
2． 3 ·OH清除率的测定［6］
在试管中依次加 9 mmol /L 水杨酸 －乙醇溶液
0． 5 mL、不同浓度的待测样品 1． 0 mL、9 mmol /L Fe-
SO4 溶液(现配)0． 5 mL，0． 01 mol /L H2SO4溶液
·161·
2016(11 下):161 － 163
DOI:10.13881/j.cnki.hljxmsy.2016.2016
2 mL，最后加入 9 mmol /L H2O2 溶液 0． 5 mL，启动芬
顿(Fenton)反应，摇匀后在 37 ℃的恒温水浴锅中加
热 30 min，在波长 510 nm处测定吸光值 A1。每个样
品重复 3 次，取平均值。另取 2 支试管，分别做空白
(A2)和样品对照(A0)。各待测样品对·OH 清除率
的计算公式为，S(%)=［1 － (A1 － A2)/A0］ ×
100%，其中 A1 为加入 9 mmol /L FeSO4 溶液测得的
吸光值;A2 为以 0． 5 mL纯化水代替 9 mmol /L FeSO4
溶液测得的吸光值;A0 为 1． 0 mL 60%乙醇 －水溶液
代替待测样品测得的吸光值。
2． 4 超氧阴离子清除率的测定［7］
邻苯三酚自氧化速率(V对照):对照组和空白对
照组加入纯化水 4 mL 和 0． 1 mol /L Tris － HCl 缓冲
溶液(pH值为 8． 2)4． 5 mL，25 ℃水浴 20 min 后，样
品组加入 0． 2 mL(或 0． 3 mL)3 mmol /L邻苯三酚溶
液，空白组以相同体积纯化水代替，震匀后马上在
320 nm处测定吸光值。迅速混匀并开始计时，每隔
30 s读取吸光值，4 min 后结束，以空白对照组调零。
做吸光度随时间变化的回归方程，其斜率为邻苯三酚
自氧 化 速 率 V 对 照 (V 对 照 应 在 0． 050 ～
0． 065 A /min 之间，否则应调整邻苯三酚加入量)。
样品自氧化速率(V样品):样品组和空白组均加
入一定浓度的样品溶液 4 mL，0． 1 mol /L Tris － HCl
缓冲溶液(pH值为 8． 2)4． 5 mL，25 ℃水浴 20 min后
样品组加入 0． 2 mL(或 0． 3 mL)3 mmol /L 邻苯三酚
溶液，空白组以相同体积纯化水代替，震匀后马上在
320 nm处测定吸光值。迅速混匀并开始计时，每隔
30 s读取吸光值，4 min后结束，以空白管调零。做吸
光度随时间变化的回归方程，其斜率为邻苯三酚自氧
化速率 V 样品，抑制率计算式为，S(%)=(V对照 －
V样品)/V对照 × 100%，其中 V 对照为对照组邻苯
三酚自氧化速率;V 样品为样品组邻苯三酚自氧化
速率。
3 结果与分析
3． 1 铃兰提取物对 DPPH·的清除作用
见图 1。
图 1 铃兰提取物对 DPPH·的清除作用
从图 1 可见:随提取物浓度的增加，其清除能力
增强，当浓度达到 7 mg /mL时，清除率与维生素 C 接
近。说明铃兰提取物是一种较好的 DPPH·清除剂。
3． 2 铃兰提取物对·OH的清除作用
见图 2。
图 2 铃兰提取物对·OH的清除作用
从图 2 可见:铃兰对·OH 的清除率很小，但是
也是存在的，并且同样是随着提取物浓度的增大而逐
渐上升。在提取物浓度达到 8 mg /mL 时清除率与维
生素 C 相当，为 74． 9%。说明铃兰提取物对
于·OH具有良好的清除能力。
3． 3 铃兰提取物对超氧阴离子的清除作用
见图 3。
图 3 铃兰提取物对超氧阴离子的清除作用
由图 3 可见:铃兰对超氧阴离子的清除能力随着
铃兰提取物的浓度的增大而不断增大，以维生素 C
作对比可以看出，维生素 C 的抗氧化能力较铃兰要
强。在 320 nm下浓度为 4 mg /mL 时铃兰提取物的
还原力几乎和维生素 C 相同，相关系数水平达到
0． 998 5。说明铃兰提取物对超氧阴离子有较好的清
除作用。
4 讨论
本 试 验 结 果 表 明:铃 兰 提 取 物 其 对
DPPH·、·OH 和超氧阴离子具有明显的清除及抑
制作用。在试验过程中对铃兰提取物的抗氧化性能
与维生素 C进行对比发现，铃兰提取物的抗氧化能
力随浓度的增加而增大，且在一定浓度后表现出与维
生素 C 相近的抗氧化能力。说明铃兰提取物具有很
好的抗氧化性。大量试验结果表明，氧自由基与冠心
病、高脂血症、干细胞损伤有关。因此，铃兰提取物
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№． 11，2016
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对上述疾病的治疗有一定意义;而铃兰提取物在防治
心脑血管疾病、护肝等方面的作用有待进一步研究。
参考文献:
［1］ 王有芳，孙继文，李桂莲，等． 铃兰的开发与展望［J］． 特种经济
动植物，2004，7(6):16．
［2］ 吴超，马正丽，刘 ，等．超临界萃取法提取铃兰有效成分精油的
研究［J］．吉林医药学院学报，2009，30(6):343 － 344．
［3］ 胡彦武，关颖丽，谢庆往．长白山区野生铃兰不同药用部位中总
黄酮含量的测定［J］．北方园艺，2011(8):191 － 192．
［4］ 李汉熙，杨香，张民锋，等． 铃兰抗氧化性研究［J］． 延边大学学
报(自然科学版)，2012，38(1) :64 － 66．
［5］ 刘梦雪，姜辉，陈剑锋，等． 野生铃兰全株中抗氧化物质提取的
工艺研究［J］．黑龙江科技信息，2016(1 上):154．
［6］ 王国庆，何小娟，孟博，等． 紫花苜蓿中主要黄酮类化合物抗氧
化活性研究［J］．黑龙江畜牧兽医，2015(01 上):109 － 111．
［7］ 张凯，王学智，张景艳，等．赤芍、何首乌和发酵黄芪提取物抗氧
化作用研究［J］．黑龙江畜牧兽医，2013(08 上):125 － 127．
(021)
收稿日期:2016 － 01 － 05;修回日期:2016 － 08 － 18
基金项目:黔东南州科技项目(黔东南科合 J字(2014)400 号)
作者简介:张 森(1982 － )，男，副教授，硕士，主要从事民
族兽医学研究和教学工作，zhangsen_cm@ 163． com．
通信作者:熊绍斌(1985 － )，男(苗族)，助理兽医师，本科，
主要从事畜禽养殖技术推广工作，281044893@ qq． com．
苗药复方母源疗法对新生仔猪
生长性能的影响
张 森1，欧 婧1，熊绍斌2，莘海亮1，刘晓东1，田 珂1，李桂兰1
(1．黔东南民族职业技术学院，贵州 凯里 556000;2．贵州雷山丹江镇农业
服务中心，贵州 雷山 557100)
中图分类号:S828;S816． 73 文献标识码:B 文章编号:1004 － 7034(2016)11 － 0163 － 03
关键词:苗药;母源疗法;仔猪生长性能;仔猪腹泻;催乳;无乳综合征
摘 要:为了验证苗药复方母源疗法对仔猪生长性能的影响，试验将待产母猪随机分为 4 组，分别为
第Ⅰ组、第Ⅱ组、第Ⅲ组及第Ⅳ组，其中第Ⅰ组、第Ⅱ组、第Ⅲ组分别将 0． 25%、0． 50%、0． 75%的苗药
复方添加于临产母猪基础日粮中，第Ⅳ组不添加任何药物，观察新生仔猪的生长性能。结果表明:第
Ⅱ组和第Ⅲ组仔猪 21 日龄平均体重和平均日增重均高于第Ⅳ组仔猪，差异显著(P ＜ 0． 05);第Ⅱ组
和第Ⅲ组的仔猪腹泻率和死亡率均低于第Ⅳ组，差异极显著(P ＜ 0． 01)。说明通过给母猪基础日粮
中添加苗药复方能提高新生仔猪的生长性能。
乳汁基本是哺乳阶段仔猪能量的唯一来源，母猪
泌乳量大，仔猪营养充足，生长发育快，免疫力高，成
活率也高;因此，母猪泌乳量直接决定着仔猪的生长
性能和成活率。在实际生产中母猪产后缺乳或无乳
时有发生，造成仔猪消瘦、虚弱，生长缓慢，死亡率高，
对养殖户造成较大的经济损失。中草药绿色天然，残
留量少，对母猪自身激素水平的影响也比较小，有利
于母猪的产后恢复，越来越受到人们的关注，临床也
有不少有关中兽药促进母猪产后泌乳的报道。在苗
医药中也有一些促进产妇催乳的药方，本试验将苗药
催乳药按一定比例添加到哺乳母猪的基础日粮中，观
察新生仔猪的生长性能，以评价其对母猪的催乳效
果，为苗医药的兽用开发提供参考。
1 材料
1． 1 试验动物
3 ～ 4 胎经产母猪(品种为长白 ×约克二元杂交
猪)32 头，凯里市三棵树猪场提供。
1． 2 试验药品
苗药复方，由王不留行、当归、通草、雷公菜根等
按一定比例配合，粉碎分装，待用。其中王不留行、当
归、通草，均购自黔东南州中药材公司;雷公菜根，于
2014 年 11 月份在黔东南自采，阴干。
1． 3 试验日粮
日粮配方以 NＲC(1998)中哺乳母猪的饲养标准
为依据，基础日粮组成及营养水平见表 1。
2 方法
2． 1 试验分组
将同一栋母猪舍预产期在 2014 年 11 月 1 日—
11 月 30 日的待产母猪随机分为 4 组，分别为第Ⅰ组
(低剂量药物组)，第Ⅱ组(中剂量药物组)， 第Ⅲ
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2016(11 下):163 － 165
DOI:10.13881/j.cnki.hljxmsy.2016.2017