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〔2011-06-27 收稿 2011-10-12 修回〕
(编辑 曹梦园)
独角莲醇提液对 H22 荷瘤鼠的抑瘤及抗氧化作用
江旭东 张义英 李 晶 张 涛 王国才1 刘伟新1 (佳木斯大学基础医学院，黑龙江 佳木斯 154007)
〔摘 要〕 目的 探讨独角莲醇提物对 H22 肝癌荷瘤鼠动物模型的抑瘤作用及其抗氧化机制。方法 以 H22 荷瘤鼠为研究对象，独角莲醇提
物灌胃给药，观察其对小鼠肿瘤的抑瘤率、体重增长率的影响。采用分光光度法检测血清中总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和
丙二醛(MDA)含量。结果 腹腔注射 5-Fu和经胃灌服独角莲醇提液对 H22 荷瘤鼠肿瘤组织均有抑制作用(P ＜ 0. 05) ，体重增长率、SOD 活性和
T-AOC水平较对照组明显增高(P ＜ 0. 05) ，而 MDA含量则显著下降(P ＜ 0. 05) ，独角莲醇提液与对照组比较有显著差异。结论 独角莲醇提液对
H22 荷瘤鼠肝癌组织生长具有抑制作用，其作用机制可能与提高 H22 荷瘤鼠抗氧化能力有关。
〔关键词〕 独角莲;荷瘤鼠;H22 肝癌细胞;抗氧化作用
〔中图分类号〕 R285，Q279 〔文献标识码〕 A 〔文章编号〕 1005-9202(2012)07-1415-02;doi:10. 3969 / j. issn. 1005-9202. 2012. 07. 041
基金项目:佳木斯大学科研课题(2007-S40)
1 佳木斯大学药学院 2 佳木斯大学第一临床学院
第一作者:江旭东(1972-) ，男，硕士，主要从事肿瘤发病机制及防治机
制的研究。
原发性肝细胞癌(HCC，简称肝癌) ，是临床上常见的发病
率很高的恶性肿瘤之一，具有起病隐匿、恶性化程度高、易转移
复发、预后差的特点，我国肝癌发病率占世界肝癌发病率的
50%〔1〕。目前，临床对肝癌的治疗尚缺乏疗效确实且副作用小
的理想药物。本课题采用体内 H22 肝癌荷瘤鼠动物模型，探讨
独角莲的抑瘤作用及可能的抗氧化作用机制。
1 材料与方法
1. 1 独角莲醇提液的制备 独角莲根茎采自黑龙江省绥滨县
中俄界河黑龙江中国侧，为野生独角莲根茎，由本校药学院进
行鉴定。用无水乙醇提取后，制成浓度为 2 mg 生药 /1 ml 的独
角莲醇提物水溶液。
1. 2 动物处理及给药 H22 荷瘤鼠模型的建立:H22 腹水瘤
模型鼠购自中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，－ 80℃冰箱中
取出 H22 肝癌细胞株，复苏后小白鼠腹腔种植，3 d 后，选取腹
水量大、状态佳的小白鼠，断髓处死;75%酒精全身消毒，无菌
操作腹腔穿刺吸取腹水，加入适量生理盐水，配成细胞悬液，倒
置显微镜下进行细胞计数及测定细胞活力，活细胞率达 95%;
调整细胞密度为 2 × 107 /ml 备用;昆明种清洁级小鼠，用 75%
乙醇对小鼠左腋下进行消毒，每只小鼠左腋下皮下注入 0. 2 ml
细胞悬液(含癌细胞 4 × 106 个) ，制成 H22 荷瘤鼠模型。造模
后，将 30 只 小 鼠 称 重，随 机 分 为 对 照 组、5-Fu 组
(25 mg·kg －1·d －1)和独角莲醇提物组(独角莲组 100 mg·
kg －1·d －1) ，每组 10 只。24 h 后按体重给药，隔日称量体重，
对照组每日给予一次生理盐水 1 ml 灌胃;5-Fu 组给予 5-Fu
25 mg /kg每日一次腹腔注射;独角莲醇提物组给予独角莲醇提
液 100 mg生药 /kg每日一次灌胃，连续 10 d，停药后第 2 天小
鼠摘眼球取血分离血清备用，小鼠断髓处死，剥离瘤体，称重。
1. 3 指标检测 动物体重增长率(%) (给药组增重 －对照组
增重)/对照组增重 × 100%;肿瘤抑制率 (%)=(1 －给药组平
均瘤重 /对照组平均瘤重)× 100%。血清总抗氧化能力
(T-AOC)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含
量的测定采用分光光度法，试剂盒由南京建成正洁科技有限公
司提供。
1. 4 统计学处理 实验数据以 x ± s 表示，应用 SAS9. 13 软
件，进行方差分析和组间 q检验。
·5141·江旭东等 独角莲醇提液对 H22 荷瘤鼠的抑瘤及抗氧化作用 第 7 期
2 结 果
2. 1 独角莲醇提液对 H22 荷瘤鼠体重增长及体重增长率的
影响 对照组、5-Fu 组、独角莲组荷瘤鼠的体重均明显增高，
5-Fu组和独角莲醇提液组增重明显高于对照组(P ＜ 0. 05)。5-
Fu组和独角莲组之间比较差异无统计学意义。表明独角莲醇
提液能够改善荷瘤鼠的恶病质体质，提高生存质量。见表 1。
表 1 独角莲醇提液对荷瘤鼠体重的影响(x ± s，n =10)
组别
动物体重(g)
给药前 给药结束后
增重(g)
体重增长
率(%)
对照组 20. 94 ± 0. 80 22. 58 ± 0. 94 1. 64 ± 0. 37 －
5-Fu组 20. 99 ± 0. 87 23. 17 ± 0. 77 2. 18 ± 1. 061) 72. 56
独角莲组 21. 08 ± 0. 81 23. 33 ± 0. 78 2. 25 ± 0. 531) 37. 20
与对照组比较:1)P ＜ 0. 05
2. 2 独角莲醇提物对 H22 荷瘤鼠的抑瘤作用 5-Fu 组、独角
莲醇提液组都能够使荷瘤鼠的平均瘤体湿重明显降低，与对照
组比较差异有统计学意义(P ＜ 0. 05) ;抑瘤率分别达到
62. 96%和 44. 45%;独角莲醇提液组对 H22 荷瘤鼠具有显著的
抑瘤作用，但效果不如 5-Fu显著(P ＜ 0. 05)。见表 2。
表 2 独角莲醇提液对 H22 荷瘤鼠
抑瘤率的影响(x ± s，n =10)
组别 平均瘤湿重(g) 抑瘤率(%)
对照组 1. 08 ± 0. 11 －
5-Fu组 0. 40 ± 0. 041) 62. 96
独角莲组 0. 60 ± 0. 031)2) 44. 45
与对照组比较:1)P ＜ 0. 05;与 5-Fu组比较:2)P ＜ 0. 05;下表同
2. 3 独角莲醇提液对 H22 荷瘤鼠血清中 SOD活性、T-AOC和
MDA水平的影响 与对照组比较，5-Fu组、独角莲醇提液组均
可降低 H22 荷瘤鼠血清中 MDA的含量，同时提高 T-AOC水平
和 SOD活性(均 P ＜ 0. 05) ，但 5-Fu 与独角莲醇提液组之间无
显著差别。见表 3。
表 3 独角莲醇提液对 H22 荷瘤鼠血清 SOD、T-AOC和
MDA水平的影响(x ± s，n =10)
组别 SOD(U /ml) T-AOC(U /ml) MDA(nmol /ml)
对照组 430. 69 ± 16. 22 4. 51 ± 0. 32 12. 10 ± 0. 66
5-Fu组 520. 19 ± 17. 251) 6. 03 ± 0. 271) 7. 14 ± 0. 271)
独角莲组 592. 67 ± 25. 421) 7. 04 ± 0. 251) 5. 89 ± 0. 131)
3 讨 论
独角莲是中国特有的天南星科(Araceae)犁头尖属(Typho-
nium Schott)植物的干燥块茎(禹白附) ，主治中风、抽搐、祛风
湿、逐寒湿、镇痉止痛、抑制结核菌、偏正头痛等症，常作为抗癌
中药配方的组分〔2〕。现代药理学研究表明独角莲具有明显抑
制小鼠 S180 肉瘤生长的作用，王顺启等研究发现独角莲水提
液可强烈抑制肝癌细胞系 SMMC27721 细胞的生长，并能诱导
其细胞凋亡〔3〕。本研究发现独角莲醇提液能明显抑制 H22 荷
瘤鼠实体瘤的生长，其抑瘤作用弱于 5-Fu，这可能与独角莲抑
瘤作用为多种成分共同作用有关〔4 ～ 6〕，而本文采用的醇提物中
主要含有多种氨基酸、有机酸、挥发油成分、酯类、微量元素等，
多种成分联合作用的结果加强了单一成分对肿瘤细胞的抑制
作用，其作用机制尚难以确定。但本实验结果表明，独角莲醇
提液能明显提高 H22 荷瘤鼠血清中 SOD 活性和 T-AOC 的水
平，降低 MDA的含量。独角莲醇提液对 H22 荷瘤鼠的抑瘤作
用之一是平衡机体的氧化和抗氧化水平，氧化损伤可致细胞死
亡、癌变，由于肿瘤启动子使细胞活性氧产生过多或清除能力
降低，引起 DNA损伤，而 DNA 分子的氧化性损伤又是突变和
癌变的始发原因;独角莲醇提液可通过提高细胞抗氧化防御体
系，保护机体正常细胞免受自由基的过度损伤实现抑瘤作
用〔7〕。但关于其作用的其他机制还有待进一步研究。有的学
者研究发现独角莲具有较强的毒性〔8〕，而本次实验未涉及独角
莲对肝肾的毒性作用，需在今后进一步研讨。
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〔2011-09-10 收稿 2011-12-15 修回〕
(编辑 徐 杰)
·6141· 中国老年学杂志 2012 年 4 月第 32 卷