全 文 ：［收稿日期］ 20140310(012)
［基金项目］ 国家自然科学基金项目(81160391，21362009，81360478);国家国际科技合作专项(2014DFA40850)
［第一作者］ 肖文琳，硕士，从事天然产物研究，Tel:0898-65884995，E-mail:vivelin0642@ gmail． com
［通讯作者］ * 韩长日，教授，从事天然产物研究，Tel:0898-65884995，E-mail:hchr116@ hainnu． edu． cn
假益智果实挥发油成分分析及其抑菌活性
肖文琳，宋小平，陈光英，陈文豪，刘鹤，高歌，韩长日*
(海南师范大学 热带药用植物化学教育部重点实验室，海口 571127)
［摘要］ 目的:对假益智果实挥发油进行化学成分研究，并进行抗菌活性测试，为进一步研究开发假益智提供实验依据。
方法:使用水蒸气蒸馏法从假益智的果实中提取出挥发油，运用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术进行分析;使用微量稀释法
测试挥发油的抗菌活性。结果:假益智果实挥发油提取率为 0. 17%，检测到 42 个化合物，鉴定出 31 个，占挥发油总成分的
94. 18%。挥发油对四联球菌具有很好的抑菌作用，最小抑制浓度为 12. 5 g·L －1，对白色葡萄球菌、蜡状芽孢杆菌、金黄色葡萄
球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌细菌具有中等强度的抑制作用。结论:本文对假益智果实进行挥发油提取鉴定，其主要成分
为萜类、长链烃类化合物。抗菌实验结果表明假益智果实挥发油对四联球菌具有较好的抗菌活性。
［关键词］ 假益智;挥发油;化学成分;抗菌活性
［中图分类号］ Ｒ284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2015)07-0047-04
［doi］ 10. 13422 / j． cnki． syfjx． 2015070047
Chemical Composition and Antibacterial Activity of Volatile Oil from Fruits of Alpinia maclurei
XIAO Wen-lin，SONG Xiao-ping，CHEN Guang-ying，CHEN Wen-hao，LIU He，GAO Ge，HAN Chang-ri*
(Key Laboratory of Tropical Medicinal Plant Chemistry of Ministry of Education，Hainan Normal University，Haikou
571127，China)
［Abstract］ Objective:To study the chemical constituents and antibacterial activity of volatile oil from
the fruits of Alpinia maclurei． Method:The volatile oils were extracted from fruits of A． maclurei by steam
distillation，and its ingredients were identified by GC-MS． The antibacterial activity of volatile oils was tested using
microdilution method． Ｒesult:42 chromatographic peaks were detected and 31 compounds were identified，which
constituted about 94. 18% of the total volatile oil． The volatile oil of A． maclurei showed inhibitory activity against
staphylococcus albus，bacillus cereus，staphylococcus aureus，bacillus subtilis，escherichia coli and exhibited
higher activity to inhibit pediococcus aureus，with minimum inhibitory concentration (MIC)value of 12. 5 g·L －1 ．
Conclusion:Volatile oil was extracted from A． maclurei and the compounds were identified for the first time，
containing many reactive components． The oil was found to possess antimicrobial activity against Pediococcus．
［Key words］ Alpinia maclurei;volatile oil;chemistry constituents;antibacterial activity
假益智产于我国广西、广东、海南等地区，一般
生长于海拔 240 ～ 1 300 m 的湿润疏林或密林下。
其根茎与果实有行气功能，在民间常用于治疗腹胀、
呕吐等［1］。红豆蔻为山姜属植物大高良姜的果实，
具有与假益智类似的散寒、燥湿、消食的功能［2］。
假益智的果实呈球形状，无毛，直径约 1 cm。果实
基本构造与红豆蔻相同，仅细胞的大小、形状、多寡
有所不同，由于一些历史原因以及收购中存在的技
术问题，一些地区常将假益智的果实误当做红豆蔻
使用，已有学者综述了红豆蔻与假益智果实等的性
状鉴别和显微鉴别［3］。崔兆杰等［4］报道，红豆蔻挥
发油主要成分为布黎烯、愈创烯、顺-γ-杜松烯和 1，
8-桉叶油素等;刘晓爽等［5］报道，红豆蔻挥发油主要
成分为 1，8-桉叶油素。β-石竹烯和 α-法尼烯;Ｒana
等［6］报道，红豆蔻挥发油成分为 1，8-桉叶油素，α-松
油醇和 β-蒎烯。而对于假益智果实挥发油的研究
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分析未见报道。本实验采用气相色谱-质谱(GC-
MS)联用方法分离并分析鉴定了假益智果实挥发油
化学成分，并用气相色谱面积归一法确定相对含量，
以期为区分红豆蔻与假益智提供依据。
1 材料
2013 年 7 月于海南省尖峰岭采得，经海南师范
大学生命科学院钟琼芯教授鉴定为姜科多年生草本
假益智 Alpinia maclurei的果实。其标本保存于海南
师范大学热带药用植物化学教育部重点实验室。
5975B /6890N型气相色谱-质谱联用仪，7890A /
5975C-GC-MSD型气质联用仪(美国安捷伦公司)，
Elx800 型酶标仪(美国宝特公司)。白色葡萄球菌
(Staphylococcus)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、金
黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆
菌(Bacillus subtilis)、大肠埃希菌(Escherichia coli)、
四联球菌(Pediococcus)均购于中国科学院微生物
研究所，ＲPMI1640 培养液(美国 Gibco 公司)，其他
所用试剂均为市售分析纯，水为蒸馏水。
2 方法与结果
2. 1 挥发油的提取 称取新鲜的假益智果实
100 g，捣碎，按 2010 年版《中国药典》一部附录 XD
挥发油测定法(不加二甲苯)，水蒸气蒸馏法提取
8 h，用乙醚萃取 3 次，加无水硫酸钠干燥，水浴旋蒸
回收乙醚，最后得到具有特殊香味的透明油状物，计
算提取率，密封保存于冰箱中。
2. 2 GC-MS条件 进样条件:样品瓶温度 100 ℃，
定量环(1. 0 mL)温度 110 ℃，传输线温度 120 ℃，
气相平衡时间 5. 5 min，样品平衡时间 7. 0 min，样品
瓶加压时间 0. 1 min，定量环增量时间 0. 5 min，样品
环平衡时间 0. 05 min，进样时间 1. 0 min。
GC 条 件［7］:HP-FFAP 石 英 毛 细 管 柱
(0. 25 mm ×30 m，0. 25 μm)，起始温度 40 ℃，保持
1 min，以5 ℃·min －1升温到 200 ℃，保持 5 min，再以
8 ℃·min －1升温到 280 ℃，保持至完成分析，载气
He(99. 99%)，柱流量 1. 0 mL·min －1，压力 28. 8
kPa，进样口温度 250 ℃，分流比 50∶ 1。
MS条件［8］:电离方式 EI，电子能量70 eV，接口
温度 280 ℃，离子源温度 230 ℃，四级杆温度 180
℃，溶剂延迟 2. 5 min，全扫描(Scan)采集模式，质量
范围 m/z 50 ～ 550，扫描间隔 0. 50 s，倍增器电压
1 200 V。
2. 3 假益智挥发油抗菌活性测试 采用微量稀释
法，测定微生物的最小抑菌浓度(MIC)。应用营养
肉汤培养，先将样品进行粗筛，再将活性好的样品测
定(MIC)。将粗筛效果好的药液在 96 孔微量稀释
板［9］作 2 倍递减浓度稀释，分装于微量稀释板孔内
或用微量加液器直接在稀释板孔内作 2 倍稀释，然
后接种稀释菌液，其中留一列孔作为药液对照，另一
孔仅加培养基和菌液作为菌对照，试验完毕后，用微
量搅拌器震荡混匀后，置 37 ℃培养 24 h，用酶标仪
630 nm测吸光度。能抑制试验菌生长的最低浓度，
即为该微生物的最小抑菌浓度。结果发现其对四联
球菌具有很好的抑菌作用，MIC为 12. 5 g·L －1;而对
白色葡萄球菌、蜡状芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、枯
草芽孢杆菌、大肠埃希菌具有中等强度的抑菌作用，
MIC均为 25 g·L －1。
2. 4 挥发油化学成分 通过上述方法制取假益智
果实挥发油，得到具有特殊香味无色透明油状物
0. 173 g，提取率 0. 17%。GC 分离出 42 个组分，根
据面积归一化法从总离子流图测得相对含量，见图
1。通过(Nist08)质谱数据库检索，鉴定了 31 种化
学成分，其相对含量占挥发油的 94. 18%，见表 1。
相对 质 量 分 数 较 高 的 成 分 为 (－ )-β-蒎 烯
(31. 03%)，正二十三烷 (12. 74%)，α-水 芹烯
(9. 75%)，α-榄香醇(9. 03%)，［3S-(3α，5α，8α) ］-
1，2，3，4，5，6，7，8-八氢化-α，α-3，8-四甲基-5-奥甲
醇(3. 60%)等。
图 1 假益智果实挥发油总离子流
Fig． 1 Total ion chromatogram of the volatile oil from fruits of
Alpinia maclurei
3 讨论
本实验对假益智果实进行挥发油提取并鉴定出
31 个化学成分，占挥发油总量的 94. 18%，主要成分
为萜类、长链烃类化合物。其中含量最高的 β-蒎烯
是香料工业的重要原料，高纯度的 β-蒎烯价格不亚
于黄金价［10］。α-水芹烯化学性质活泼，可以直接用
于加工香料或生物活性杀虫剂，通过化学反应，合成
高档香料、生理活性物质和功能材料等［11］。据文献
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表 1 假益智果实挥发油成分分析
Table 1 Chemical constituents in volatile oil from fruits of Alpinia maclurei
No． tＲ /min 化合物 相对分子质量 相对含量 /%
1 5. 65 (1Ｒ)-(+)-α蒎烯 136 3. 52
2 6. 00 莰烯 136 0. 40
3 6. 57 柏烯 136 0. 75
4 6. 66 (－)-β-蒎烯 136 31. 03
5 6. 97 月桂烯 136 1. 38
6 7. 32 α-水芹烯 136 9. 75
7 7. 84 间异丙基甲苯 134 0. 97
8 7. 95 未鉴定 136 1. 70
9 8. 44 (Z)-3，7-二甲基-1，3，6-十八烷三烯 136 0. 51
10 9. 86 芳樟醇 154 1. 06
11 11. 72 未鉴定 154 0. 39
12 12. 01 4-萜烯醇 154 0. 47
13 12. 39 α-松油醇 154 0. 58
14 14. 93 乙酸冰片酯 196 0. 50
15 17. 77 未鉴定 132 2. 07
16 18. 41 1-石竹烯 204 0. 57
17 19. 08 3-苯基-2-丙烯-1-醇乙酸酯 176 0. 64
18 19. 94 大根香叶烯 204 0. 56
19 20. 92 杜松烯 204 0. 45
20 21. 59 α-榄香醇 222 9. 03
21 21. 85 S-(Z)-3，7，11-三甲基-1，6，10-十二烷三烯-3-醇 222 0. 37
22 22. 71 ［3S-(3α，5α，8α)］-1，2，3，4，5，6，7，8-八氢化-α，α-3，8-四甲基-5-奥甲醇 222 3. 59
23 23. 50 凤蝶醇 222 0. 93
24 23. 93 β-桉叶醇 222 1. 08
25 23. 99 α-桉叶醇 222 1. 45
26 24. 29 ［3S-(3α，3Aβ，5α)］-1，2，3，3A，4，5，6，7-八氢化-α，α-3，8-四甲基-5-奥甲醇 222 2. 63
27 25. 41 3，7，11-三甲基-2，6，10-十二烷三烯-1-醇 222 2. 05
28 25. 84 (2E，6E)-金合欢醛 220 0. 72
29 36. 16 正二十三烷 324 0. 50
30 41. 84 正二十三烷 324 12. 24
31 42. 26 二十烷 282 1. 28
32 42. 30 二十烷 282 0. 89
33 44. 15 1-二十六烯 364 0. 12
报道，红豆蔻挥发油的化学成分主要为布黎烯，顺-
γ-杜松烯，愈创烯，α-松油醇，β-蒎烯，1，8-桉叶油素，
β-石竹烯和 α-法尼烯，显然与假益智果实挥发油主
要成分 β-蒎烯，正二十三烷，α-水芹烯和 α-榄香醇
存在明显差异。本实验结果可为更准确地区分红豆
蔻与假益智果实提供理论依据，为进一步开发利用
该植物资源提供科学依据。
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［责任编辑 顾雪竹
檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶
］
《中国实验方剂学杂志》入选“2015—2016 ＲCCSE 中国核心学术期刊”
由武汉大学中国科学评价研究中心(ＲCCSE)、武汉大学图书馆、中国科教评价网(www． nseac． com)共同
研制的第 4 版《ＲCCSE 中国学术期刊评价研究报告———权威、核心学术期刊排行榜(2015—2016)》已于
2015 年 1 月 13 日公布，《中国实验方剂学杂志》被评定为“ＲCCSE 中国核心学术期刊(A )”，在参评的 112
本中医学与中药学类期刊中综合排名第 15 名。
本次学术期刊评价在重点突出期刊学术影响力的同时，也注重了对期刊网络传播效率和期刊即时反应
速率的考察，主要评价指标有:总被引频次、2 年影响因子、即年指标、基金论文比、Web 即年下载率、二次文
献转载量(或国外重要数据 库收录情况)和专家定性评价。参评期刊共 6201 种，排名前 5%的“ＲCCSE 中国
权威学术期刊”(A +)316 种 ，排名前 5% ～ 20%的“ＲCCSE 中国核心学术期刊”(A )和排名前 20% ～
30%的“ＲCCSE 中国核心学术期刊(扩展版)”(A －)共 1572 种，准核心的学术期刊 1848 种(B +)，一般期
刊 1828(B)种，较差期刊 637 种(C)。
“ＲCCSE 中国核心学术期刊”是继“中文核心期刊(北大)”和“中国科技核心期刊”之后国内推出的又一
核心期刊评价体系。
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