全 文 ：＊基金项目：广西２０１１年研究生教育创新计划资助项目
（Ｎｏ．２０１１１０５９８１００７Ｍ１７４）
１与蒋兴明并列第一作者
△通信作者，Ｔｅｌ：０７７１－５３５０４４１，Ｅ－ｍａｉｌ：ｇｘｓｏｎｇｈｕｉ＠１６３．ｃｏｍ
收稿日期：２０１２－０２－２０
广西莪术中提取姜黄素及联合顺铂诱导人卵巢癌细胞凋亡的研究＊
蒋兴明　黄兴振１　苏延旭　宋　慧△　黄　静　徐星新
（广西医科大学药学院药理学教研室　南宁　５３００２１）
摘要　目的：利用表面活性剂提高广西莪术中姜黄素提取的含量，并观察姜黄素联合顺铂对人卵巢癌ＳＫＯＶ３细胞凋亡的影
响。方法：适量表面活性剂润湿后，醇提法提取姜黄素，用高效液相色谱法测定得到提取率。再取对数生长期的ＳＫＯＶ３细胞
接种，分别给以２５，５０，１００μｍｏｌ／Ｌ姜黄素和联合用药组以２５，５０，１００μｍｏｌ／Ｌ姜黄素与１０μｍｏｌ／Ｌ顺铂联用，培养４８ｈ用
ＭＴＴ法测定吸光度，计算细胞生长抑制率；并设正常对照组、５０μｍｏｌ／Ｌ姜黄素组、１０μｍｏｌ／Ｌ顺铂组和５０μｍｏｌ／Ｌ姜黄素与
１０μｍｏｌ／Ｌ顺铂联合用药组做细胞ＡＯ／ＥＢ染色，观察细胞凋亡情况。结果：每１０ｇ莪术原料加入１０ｍＬ　１％十二烷基硫酸钠
（ＳＤＳ）润湿３０ｍｉｎ，８０％乙醇回流提取２次，每次１．５ｈ得到最大收益；ＭＴＴ结果与荧光染色观察均表明姜黄素联合顺铂可
协同诱导ＳＫＯＶ３细胞凋亡。结论：ＳＤＳ对莪术中姜黄素的提取率有较大影响，从广西莪术中提取的姜黄素联合顺铂可协同诱
导ＳＫＯＶ３细胞凋亡。
关键词　莪术；姜黄素；表面活性剂；人卵巢癌细胞
中图分类号：Ｒ７３７．３１　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００５－９３０Ｘ（２０１２）０５－０６６９－０４
ＥＦＦＥＣＴＳ　ＯＦＣＵＲＣＵＭＩＮ　ＥＸＴＲＡＣＴ　ＣＯＭＢＩＮＥＤ　ＷＩＴＨ　ＣＩＳＰＬＡＴＩＮ　ＯＮ　ＡＰＯＰＴＯＳＩＳ　ＯＦ　ＳＫ－
ＯＶ３　ＣＥＬＬＳ
Ｊｉａｎｇ　Ｘｉｎｇｍｉｎｇ，Ｈｕａｎｇ　Ｘｉｎｇｚｈｅｎ，Ｓｕ　Ｙａｎｘｕ，Ｓｏｎｇ　Ｈｕｉ，Ｈｕａｎｇ　Ｊｉｎｇ，Ｘｕ　Ｘｉｎｇｘｉｎ．（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｂｉｏ－
ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，ｔｈｅ　Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ　ｏｆ　Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｎｉｎｇ　５３００２１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｉｍｐｒｏｖｅ　ｔｈｅ　ｃｕｒｃｕｍｉｎ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｃｕｒｃｕｍａ　ｋｗａｎｇｓｉｅｎｓｉｓ　ｗｉｔｈ　ｓｕｒｆａｃ－
ｔａｎｔ　ａｎｄ　ｓｔｕｄｙ　ｉｔｓ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｔｈｅ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｏｖａｒｉａｎ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ＳＫＯＶ３ｃｏｍｂｉｎｅｄ　ｗｉｔｈ　ｃｉｓｐｌａｔｉｎ．
Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｍｏｉｓｔｅｎｅｄ　ｗｉｔｈ　ａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅ　ｑｕａｎｔｉｔｙ　ｏｆ　ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ，ｔｈｅ　ｃｕｒｃｕｍｉｎ　ｗａｓ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｂｙ　ａｌｃｏｈｏｌ　ａｎｄ　ａｓ－
ｓａｙｅｄ　ｂｙ　ＨＰＬＣ　ｆｏｒ　ｉｔｓ　ｒａｔｉｏ．Ｔｈｅ　ｃｅｌｓ　ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｏｇａｒｉｔｈｍ　ｐｈａｓｅ　ｗｅｒｅ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　２５，５０，
ａｎｄ　１００μｍｏｌ／Ｌ　ｏｆ　ｃｕｒｃｕｍｉｎ　ｏｒ　ｃｏｍｂｉｎｅｄ　ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ：２５，５０，ａｎｄ　１００μｍｏｌ／Ｌ　ｏｆ　ｃｕｒｃｕｍｉｎ　ｗａｓ　ｃｏｍｂｉｎｅｄ
ｗｉｔｈ　１０μｍｏｌ／Ｌ　ｏｆ　ｃｉｓｐｌａｔｉｎ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｆｏｒ　４８ｈａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ａｂｓｏｒｂａｎｃｅｓ　ｗａｓ　ａｓｓａｙｅｄ　ｂｙ　ＭＴＴ
ｍｅｔｈｏｄ　ｔｏ　ｃａｌｃｕｌａｔｅ　ｔｈｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｅｌ　ｇｒｏｗｔｈ．Ｔｈｅ　ｎｏｒｍａｌ　ｃｏｎｔｒｏｌｓ，ｔｈｅ　５０μｍｏｌ／Ｌ　ｏｆ　ｃｕｒｃｕｍｉｎ
ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ　１０μｍｏｌ／Ｌ　ｏｆ　ｃｉｓｐｌａｔｉｎ　ｇｒｏｕｐ，ａｎｄ　ｔｈｅ　５０μｍｏｌ／Ｌ　ｏｆ　ｃｕｒｃｕｍｉｎ　ｃｏｍｂｉｎｅｄ　ｗｉｔｈ　１０μｍｏｌ／Ｌ　ｏｆ　ｃｉｓ－
ｐｌａｔｉｎ　ｗａｓ　ＡＯ／ＥＢ　ｓｔａｉｎｅｄ　ｔｏ　ｏｂｓｅｒｖｅ　ｔｈｅｉｒ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ａ　ｍａｘｉｍｕｍ　ｙｉｅｌｄ　ｗａｓ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｆｒｏｍ　ｅａｃｈ　１０
ｇ　ｏｆ　Ｃｕｒｃｕｍａ　ｂｕｌｋ　ｍａｔｅｒｉａｌ　ｍｏｉｓｔｅｎｅｄ　ｂｙ　１０ｍＬ　１％ｏｆ　Ｓｏｄｉｕｍ　ｄｏｄｅｃｙｌ　ｓｕｌｆａｔｅ（ＳＤＳ）ｆｏｒ　３０ｍｉｎ，ｅｘｔｒａｃｔｅｄ
ｗｉｔｈ　ｄｏｕｂｌｅ　ｒｅｆｌｕｘｅｄ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｆｏｒ　１．５ｈｐｅｒ　ｔｉｍｅ．Ｔｈｅ　ＭＴＴ　ｏｕｔｃｏｍｅ　ａｎｄ　ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ　ｓｔａｉｎｉｎｇ
ｉｎｄｉｃａｔｅｄ　ａ　ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｔｏ　ＳＫＯＶ３ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｂｙ　ｃｕｒｃｕｍｉｎ　ａｎｄ　ｃｉｓｐｌａｔｉｎ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：
ＳＤＳ　ａｆｆｅｃｔｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｃｕｒｃｕｍｉｎ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｆｒｏｍ　ｃｕｒｃｕｍａ．ＳＫＯＶ３ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｃａｎ　ｂｅ　ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃａｌｙ
ｉｎｄｕｃｔｅｄ　ｂｙ　ｃｕｒｃｕｍｉｎ　ｉｎ　Ｃｕｒｃｕｍａ　ｋｗａｎｇｓｉｅｎｓｉｓ　ａｎｄ　ｃｉｓｐｌａｔｉｎ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　Ｃｕｒｃｕｍａ；ｃｕｒｃｕｍｉｎ；ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ；ｏｖａｒｉａｎ　ｃａｎｃｅｒ
　　莪术为姜科植物蓬莪术（Ｃｒｃｕｍａ　ｐｈａｅｏｃａｕｌｉｓＶａｌ．）、广西
莪术（Ｃｕｒｕｍａ　ｋｗａｎｇｓｉｅｎｓｉｓＳ．Ｇ．Ｌｅｅ　ｅｔ　Ｃ．Ｆ．Ｌｉａｎｇ）或者温郁
金（Ｃｕｒｃｕｍａ　ｗｅｎｙｕｊｉｎ　Ｙ．Ｈ．Ｃｈｅｎ　ｅｔ　Ｃ．Ｌｉｎｇ）的干燥块茎。
后者习称“温莪术”。具有行气破血，消积止痛的功效，用于
癥瘕痞块，瘀血经闭，食积胀痛等。
广西莪术又名毛莪术、桂莪术，其根茎是中药莪术的一
种，是广西地道的药材之一，是商品桂莪术与桂郁金的来源，
也是中药莪术与郁金的主要来源；广西莪术其块根称“桂郁
金”，具有行气解郁、破瘀、止痛的功效。广西莪术中主要化
学成分为莪术油及姜黄素类，姜黄素在乙醇中有较好的溶解
性能，且加入合适的表面活性剂能提高其提取得率［１］。莪术
作为抗肿瘤中药已在治疗卵巢癌方面取得了显著成效，但其
作用成分尚未明确。姜黄素药理作用广泛，具有良好的抗
·９６６·
广 西 医 科 大 学 学 报
ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＧＵＡＮＧＸＩ　ＭＥＤＩＣＡＬ　ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ
　２０１２Ｏｃｔ；２９（５）
DOI:10.16190/j.cnki.45-1211/r.2012.05.049
炎、抗氧化、抗肿瘤等作用［２］。已有研究表明其对人胃癌细
胞 ＭＧＣ８０３、人肝癌细胞Ｂｅｌ７４０２、鼻咽癌细胞、宫颈癌细胞、
及卵巢癌ＳＫＯＶ３细胞等有良好的抑制和诱导凋亡作用［３，４］。
本研究利用表面活性剂提高广西莪术中姜黄素提取的含量，
并观察姜黄素联合顺铂对人卵巢癌ＳＫＯＶ３细胞凋亡的影
响。
１　材料与方法
１．１　仪器：回流提取装置；日本岛津ＬＣ－２０Ａ高效液相色谱
仪（日本岛津公司）；倒置荧光显微镜（Ａｘｉｏｖｅｒｔ　２００）（日本奥
林巴斯公司）；酶标仪（南京华东电子集团医疗装备有限责任
公司）等。
１．２　试剂：甲醇（美国Ｔｅｄｉａ公司）、乙腈（美国Ｔｅｄｉａ公司）
为色谱纯，醋酸（北京化工厂）、乙醇（北京化工厂）均为分析
纯；姜黄素对照品由中国食品药品检验研究院提供。甲基噻
唑蓝（ＭＴＴ）：法国 ＭＰ公司原装，二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）：法
国 ＭＰ公司原装，吖啶橙（ＡＯ）：晶欣生物科技公司，ＥＢ替代
染料：北京普利莱基因技术有限公司，胎牛血清、ＲＰＭＩ１６４０
培养基均为ＧＩＢＣＯ公司，注射用顺铂（冻干型）：齐鲁制药有
限公司。人卵巢癌ＳＫＯＶ３细胞株：广西医科大学实验中心
提供。莪术购自广西灵山（经鉴定，为姜科植物广西莪术
Ｃｕｒｃｕｍａ　ｋｗａｎｇｓｉｅｎｓｉｓ　Ｓ．Ｇ．Ｌｅｅ　ｅｔ　Ｃ．Ｆ．Ｌｉａｎｇ的根茎。）。
１．３　试验方法
１．３．１　姜黄素的提取及含量测定
１．３．１．１　色谱条件：用ＹＷＧ－Ｃ１８［１５０×４．６ｍｍ（内径）］；乙
腈—水（含５％冰醋酸）（４５∶５５）为流动相；流速为１．０ｍＬ／ｍｉｎ；
柱温３０℃；检测波长为４２０ｎｍ。
１．３．１．２　标准曲线的制备：精密称取姜黄素对照品０．５ｍｇ，
加入甲醇定溶至１０ｍＬ，作为对照品溶液。精密吸取姜黄素
对照品溶液２，４，６，８，１０ｍＬ分别加入甲醇定溶至１０ｍＬ，在
上述色谱条件下重复进样３次，每次１０μＬ，测定峰面积值，
以峰面积平均值和浓度进行回归处理，得回归方程为：Ｙ ＝
４６　４９２．４２７　Ｘ－８　５００．９２７５，ｒ２＝０．９９９　９。线性范围在０．１０
～０．５０μｇ呈良好的线性关系。
１．３．２　正交试验法优选莪术处理工艺
１．３．２．１　正交因素水平：根据姜黄素成分性质及现有文献
成果，选择十二烷基硫酸钠（ＳＤＳ）用量、润湿时间，提取次数
及提取时间为因素，选用Ｌ９（３４）因素水平表安排正交实验，
各因素水平见表１。
表１　正交设计ＳＤＳ提取莪术中姜黄素工艺的因素水平表
水平
因素
ＳＤＳ用量
（Ｖ／ｍＬ）
Ａ
润湿时间
（ｔ／ｍｉｎ）
Ｂ
提取次数
Ｃ
提取时间
（ｔ／ｈ）
Ｄ
１　 ５　 １０　 １　 １
２　 １０　 ２０　 ２　 １．５
３　 １５　 ３０　 ３　 ２
１．３．２．２　正交试验样品制备及测定：精密称取９份莪术样
品粉末各１０ｇ，以表２的９种工艺条件组合以８０％乙醇回流
提取，再将提取液减压浓缩成稠膏，加入硅藻土拌匀后水浴
蒸干，再置离心管中，加入甲醇２０ｍＬ，超声提取３０ｍｉｎ，离
心（３　０００ｒ／ｍｉｎ，２０ｍｉｎ）取上清液，如此重复提取３次，提取
液合并，挥干溶剂，以甲醇定容至１０ｍＬ。ＨＰＬＣ测定，色谱
条件同上述，每次进样量为１０μＬ，每组样品进样３次取平均
值。
表２　莪术ＳＤＳ提取Ｌ９（３４）正交试验数据表
序号 Ａ　 Ｂ　 Ｃ　 Ｄ 姜黄素含量（％）
１　 １　 １　 １　 １　 ０．００８　９
２　 １　 ２　 ２　 ２　 ０．０２０　２
３　 １　 ３　 ３　 ３　 ０．０１９　８
４　 ２　 １　 ２　 ３　 ０．０２５　５
５　 ２　 ２　 ３　 １　 ０．０２６　１
６　 ２　 ３　 １　 ２　 ０．０２４　７
７　 ３　 １　 ３　 ２　 ０．０２３　１
８　 ３　 ２　 １　 ３　 ０．０２１　５
９　 ３　 ３　 ２　 １　 ０．０２４　２
Ｋ１ ０．０４８　９　 ０．０５７　５　 ０．０５５　１　 ０．０５９　２
Ｋ２ ０．０７６　３　 ０．０６７　８　 ０．０６９　９　 ０．０６８　０
Ｋ３ ０．０６８　８　 ０．０６８　７　 ０．０６９　０　 ０．０６６　８
Ｒ　 ０．０２７　４　 ０．０１１　２　 ０．０１４　８　 ０．００７　６
１．３．２．３　最佳工艺验证试验：由表２的结果采用综合加权
评分法可知水蒸莪术的最佳工艺组合为Ａ２Ｂ３Ｃ２Ｄ２。精密称
取莪术原药材粉末３份各１０ｇ，按照最佳提取工艺进行提
取，上述同样方法条件测定姜黄素含量，结果测定平均姜黄
素含量为０．０２６１％，ＲＳＤ＝１．８６％。
１．３．３　姜黄素联合顺铂诱导ＳＫＯＶ３细胞凋亡作用
１．３．３．１　ＭＴＴ法检测肿瘤细胞的增殖：（１）细胞培养和药
物处理：取对数生长期的细胞株，用０．２５％胰蛋白酶消化分
散后，用含１０％胎牛血清的ＲＰＭＩ－１６４０培养基调整细胞浓
度约为１．０×１０５ 个／ｍＬ的细胞悬液，每孔加２００μＬ的细胞
悬液，每组设８个平行孔。细胞分组：①空白组：不加药物干
预；②顺铂组：加１０μｍｏｌ／Ｌ顺铂；③姜黄素组：分别给以２５，
５０，１００μｍｏｌ／Ｌ姜黄素；④联合组：分别以２５，５０，１００μｍｏｌ／Ｌ
姜黄素与１０μｍｏｌ／Ｌ顺铂联用。继续置３７℃、５．０％ＣＯ２ 的
培养箱培养４８ｈ后进行 ＭＴＴ测定抑制率。（２）测定：培养
结束后每孔加入５ｇ／Ｌ　ＭＴＴ溶液２０μＬ，置于３７℃、５．０％
·０７６· 广西医科大学学报　２０１２Ｏｃｔ；２９（５）
ＣＯ２ 的培养箱中继续培养４ｈ后吸去上清液，加入 ＤＭＳＯ
１５０μＬ／孔。在５９２ｎｍ下用酶标仪测定每孔吸光度，重复实
验５次，计算细胞生长抑制率。抑制率（ＩＲ％）＝（１－实验孔
Ａ值／空白对照孔Ａ值）×１００％。
１．３．３．２　ＡＯ／ＥＢ荧光法观察细胞凋亡：取对数生长期的
ＳＫＯＶ３细胞株，用０．２５％胰蛋白酶消化分散后，用含１０％
胎牛血清的ＲＰＭＩ－１６４０培养基调整细胞浓度约为１．０×１０５
个／ｍＬ的细胞悬液，每孔加２ｍＬ的细胞悬液置６孔板，置
３７℃、５．０％ＣＯ２ 的培养箱中培养。待细胞贴壁后吸去旧培
养基，Ａ组不加药物干预，Ｂ组给５０μｍｏｌ／Ｌ姜黄素，Ｃ组给
１０μｍｏｌ／Ｌ顺铂，Ｄ组给５０μｍｏｌ／Ｌ姜黄素＋１０μｍｏｌ／Ｌ顺
铂。继续培养４８ｈ后，吸去旧培养基，加适量多聚甲醛固定
液固定１０ｍｉｎ，将 ＡＯ（１００ｍｇ／Ｌ）及ＥＢ（１００ｍｇ／Ｌ）染液临
用前按１∶１混合均匀，每孔加入２０μＬ　ＡＯ／ＥＢ混合液，室温
下避光染色５ｍｉｎ，置荧光显微镜下观察、拍照。
１．３．４　统计学方法：采用ＳＰＳＳ１３．０进行统计学分析，各组
数据用珚ｘ±ｓ表示，组间比较采用ｔ检验；Ｐ＜０．０５为差异有
统计学意义。
２　结　果
２．１　姜黄素的提取工艺：由表２的结果可知ＳＤＳ可大大提
高广西莪术中姜黄素的提取率，采用综合加权评分法可得水
蒸莪术的最佳工艺组合为Ａ２Ｂ３Ｃ２Ｄ２，即最佳提取工艺为：每
１０ｇ莪术加１％ ＳＤＳ　１０ｍＬ，润湿３０ｍｉｎ，加入１５０ｍＬ的
８０％乙醇回流提取２次，每次提取１．５ｈ。
２．２　姜黄素联合顺铂诱导ＳＫＯＶ３细胞凋亡作用
２．２．１　ＭＴＴ法检测肿瘤细胞的增殖：如表３所示，低、中、
高剂量组姜黄素处理ＳＫＯＶ３细胞４８ｈ后，不同浓度组随着
用药浓度的增加，ＳＫＯＶ３细胞增殖抑制率逐渐上升，各组间
比较，差异有统计学意义（Ｐ ＜０．０５）。低、中、高剂量姜黄素
分别联合１０μｍｏｌ／Ｌ顺铂作用ＳＫＯＶ３细胞４８ｈ后，与单用
同浓度姜黄素及单用１０μｍｏｌ／Ｌ顺铂比较，ＳＫＯＶ３细胞增
殖抑制率都明显增加，两样本配对分析比较差异有统计学意
义（均Ｐ ＜０．０５）。说明姜黄素与顺铂联合用药可协同抑制
ＳＫＯＶ３细胞的增殖。
　表３　姜黄素与顺铂联合用药对ＳＫＯＶ３细胞增殖的抑制
（珚ｘ±ｓ）
组别 姜黄素组抑制率（％）
联合１０μｍｏｌ／Ｌ顺
铂组抑制率（％）
空白对照 ０　 ５１．０８±１．２８
２５μｍｏｌ／Ｌ姜黄素 １０．２５±１．１２　 ５７．８６±１．４６
５０μｍｏｌ／Ｌ姜黄素 ２２．０８±１．５１　 ６９．６２±１．８８
１００μｍｏｌ／Ｌ姜黄素 ４０．３８±１．４５　 ８６．２１±２．２３
２．２．２　ＡＯ／ＥＢ荧光法观察细胞凋亡：从图１可见，对照组
细胞形态均一，细胞的胞核及胞质呈均匀的绿色荧光无明显
凋亡（图１－Ａ）；姜黄素组可见早期凋亡细胞，表现为细胞核为
ＡＯ染色呈黄绿色荧光，浓聚成新月形或颗粒状，位于细胞的
一侧（图１－Ｂ）；顺铂组晚期凋亡细胞较多，细胞胞核为ＥＢ染
色呈桔红色（图１－Ｃ）；联合用药组大部分细胞晚期凋亡，细胞
胞核为ＥＢ染色呈桔红色并致密浓缩或呈碎片状（图１－Ｄ）。
表明姜黄素与顺铂联合用药可协同诱导ＳＫＯＶ３细胞凋亡。
图１　荧光显微镜下观察经ＡＯ／ＥＢ染色处理的ＳＫＯＶ３细胞（×１００）
Ａ：正常组；Ｂ姜黄素组；Ｃ：顺铂组；Ｄ：联合用药组
·１７６·蒋兴明，等 ．广西莪术中提取姜黄素及联合顺铂诱导人卵巢癌细胞凋亡的研究
３　讨　论
莪术中姜黄素成分含量较低，而在８０％乙醇中有较好的
溶解性能。表面活性剂能润湿植物粉末，能促进提取溶剂的
渗透作用，不同表面活性剂用量和提取时间和润湿时间对提
取的得率有较大影响。本实验在已有的研究基础上选用良
好的表面活性剂进行工艺优化，提取得率显著提高。
姜黄素为从植物姜黄或莪术等植物中提取得的中药成
分，其毒副作用较低、且价格低廉，在食品工业广泛应用。同
时姜黄素药理作用广泛，具有良好的抗炎、抗氧化、抗肿瘤等
作用，是有效的抗致突变剂和抗促癌剂。姜黄素作为一种具
有良好应用前景的抗癌药物，已有较多的研究表明其对人胃
癌细胞 ＭＧＣ８０３、人肝癌细胞Ｂｅｌ７４０２、小鼠黑色素瘤Ｂ１６、人
白血病细胞Ｋ５６２及卵巢癌ＳＫＯＶ３等有良好的抑制和诱导
凋亡作用［５～７］。本实验通过体外培养ＳＫＯＶ３细胞的诱导凋
亡作用研究，结果发现，广西莪术中提取得到的姜黄素与顺
铂联合用药可以协同诱导ＳＫＯＶ３细胞凋亡，具有良好的开
发应用前景。
参考文献：
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取率的研究［Ｊ］．中成药，２００４，２６（４）：２６９－２７１．
［２］　安继红，陈　鹏，辛秀芹，等．姜黄素体外抗肿瘤作用的
观察［Ｊ］．实用临床医药杂志，２００７，１１（３）：２４－２５．
［３］　霍　森，史小荣．姜黄素对人卵巢癌细胞株ＳＫＯＶ－３增
殖和凋亡的影响［Ｊ］．中国药物与临床，２０１１，１１（４）：
４０６－４０８．
［４］　黄赞松．姜黄素对消化系肿瘤作用的研究进展［Ｊ］．时珍
国医国药，２００９，２０（２）：３８３－３８５．
［６］　崔淑香，金东庆，周　玲，等．姜黄素抗肿瘤作用试验观
察［Ｊ］．肿瘤防治杂志，２００２，９（１）：５０－５２．
［６］　Ｌｉｎ　ＪＫ，Ｌｉｎ－Ｓｈｉａｕ　ＳＹ．Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｏｆ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｈｅｍｏｐｒｅ－
ｖｅｎｔｉｏｎ　ｂｙ　ｃｕｒｃｕｍｉｎ［Ｊ］．Ｐｒｏｃ　Ｎａｔｌ　Ｓｃｉ　Ｃｏｕｎｃ　Ｒｅｐｕｂ
Ｃｈｉｎａ　Ｂ，２００１，２５（２）：５９－６６．
广西医科大学学报　２０１２Ｏｃｔ；２９（５）
＊基金项目：国家自然科学基金资助项目（Ｎｏ．３０７６０３１０）；
广西自然科学基金资助项目（Ｎｏ．２０１０ＧＸＮＳＦＤ０１３０４３）
△通信作者，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉａｎｇｇａｎｇ２２＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
１广西中医药大学药学院　南宁　５３０００１
收稿日期：２０１２－０５－０９
ＥＧＣＧ衍生物在高温和低温强光照射下的稳定性研究＊
欧冰凝　周焕第１　梁　钢△　孙悦文
（广西医科大学药学院　南宁　５３００２１）
摘要　目的：了解表没食子儿茶素没食子酸酯（ＥＧＣＧ）衍生物的稳定性。方法：用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）测定ＥＧＣＧ及其衍生
物在６０℃和低温强光照射下的稳定性。结果：在６０℃和低温强光照射１０ｄ后，全乙酰化ＥＧＣＧ（ＡｃＥＧＣＧ）和丙基化ＥＧＣＧ
（２ｃ）的含量均基本不变，而ＥＧＣＧ的含量分别约为５％和１０％。结论：在高温和低温强光照射下，固体 ＡｃＥＧＣＧ和２ｃ均比
ＥＧＣＧ稳定。
关键词　ＥＧＣＧ；衍生物；稳定性；ＨＰＬＣ
中图分类号：Ｒ－３３２　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００５－９３０Ｘ（２０１２）０５－０６７２－０３
ＳＴＵＤＹ　ＯＮ　ＴＨＥ　ＴＨＥＲＭＡＬ　ＳＴＡＢＩＬＩＴＹ　ＡＮＤ　ＬＩＧＨＴ　ＰＨＯＴＯＳＴＡＢＩＬＩＴＹ　ＯＦ　ＥＧＣＧ　ＤＥＲＩＶ－
ＡＴＩＶＥＳ
Ｏｕ　Ｂｉｎｇｎｉｎｇ，Ｚｈｏｕ　Ｈｕａｎｄｉ，Ｌｉａｎｇ　Ｇａｎｇ，Ｓｈｕｎ　Ｙｕｅｗｅｎ．（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕ－
ｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｎｉｎｇ　５３００２１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ（－）－ｅｐｉｇａｌｏｃａｔｅｃｈｉｎ　ｇａｌａｔｅ　ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ　ｓｔａｂｉｌｉ－
ｔｙ　ｏｆ　ＡｃＥＧＣＧ，２ｃａｎｄ　ＥＧＣＧ　ｓｏｌｉｄ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ＨＰＬＣ．Ｔｈｅ　ｏｐｅｎ　ｗｅｉｇｈｉｎｇ　ｂｏｔｔｌｅ　ｗｉｔｈ　ｐｏｗｄｅｒ　ｏｆ
ＡｃＥＧＣＧ，２ｃｏｒ　ＥＧＣＧ　ｗａｓ　ｐｕｔ　ａｔ　６０℃ａｎｄ　ｉｎ　ｌｉｇｈｔ　ｂｏｘ（６～７℃，４５００ＬＸ），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，５ｍｇ　ＡｃＥＧＣＧ，
２ｃｏｒ　ＥＧＣＧ　ｗａｓ　ｔａｋｅｎ　ｏｕｔ　ｏｆ　ｗｅｉｇｈｉｎｇ　ｂｏｔｔｌｅ　ａｔ　０，５，
１０ｄ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ＡｃＥＧＣＧ　ｏｒ　ＥＧＣＧ　ｗａｓ
ａｎａｌｙｚｅｄ　ｂｙ　ＨＰＬＣ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｆｒｏｍ　０ｔｏ　１０ｄ，ｔｈｅ　ｃｏｎ－
ｔｅｎｔ　ｏｆ　ＡｃＥＧＣＧ　ｏｒ　２ｃｄｉｄ　ｎｏｔ　ｃｈａｎｇｅ　ｂｏｔｈ　ａｔ　６０℃
ａｎｄ　ｉｎ　ｌｉｇｈｔ　ｂｏｘ，ｂｕｔ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ＥＧＣＧ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ
ｂｙ　５％ａｔ　６０℃ａｎｄ　１０％ｉｎ　ｌｉｇｈｔ　ｂｏｘ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．
·２７６· 广西医科大学学报　２０１２Ｏｃｔ；２９（５）