全 文 ：书第 30 卷 第 4 期
2014 年 8 月
哈 尔 滨 商 业 大 学 学 报( 自然科学版)
Journal of Harbin University of Commerce ( Natural Sciences Edition)
Vol． 30 No． 4
Aug． 2014
收稿日期:2014 － 02 － 27．
基金项目:黑龙江省教育厅科学技术研究项目(12531655)．
作者简介:徐 暘(1977 －)，博士，讲师，研究方向:药物分析方向．
通讯作者:闫 静(1962 －)，博士，教授，硕士生导师，研究方向:有机药物合成和药物质谱学．
虎眼万年青体内抗氧化性的研究
徐 暘，何滟澦，闫 静
(黑龙江中医药大学 药学院，哈尔滨 150040)
摘 要:研究虎眼万年青乙醇提取物体内抗氧化性的作用．利用加热回流提取方法提取虎眼万年青总
皂苷，分别以高中低( 30、15、7． 5 mg /kg) 三种不同剂量的虎眼万年青乙醇提取物，对小鼠灌胃给药 14
d，并以 Vc 和水分别作阳性对照和阴性对照．通过测定小鼠血清和肝组织中的超氧化歧化酶( SOD) 和
丙二醛( MDA) 值来研究虎眼万年青乙醇提取物体内抗氧化活性．结果表明，与阴性对照( 蒸馏水) 相
比，虎眼万年青乙醇提取物能明显提高小鼠血清和肝组织中 SOD 的活力，降低 MDA 的含量( P ＜ 0．
01) ; 与阳性对照 Vc相比，高剂量组血清中 SOD的活力显著高于对照组( P ＜ 0． 01) ，且肝组织中 MDA
的含量显著低于对照组( P ＜ 0． 05) ．虎眼万年青乙醇提取物具有较强的体内抗氧化活性．
关键词:虎眼万年青;抗氧化; SOD; MDA
中图分类号:Ｒ285 文献标识码:A 文章编号:1672 － 0946(2014)04 － 0402 － 03
Study on antioxidant activity of Ornithogalum caudatum Ait in vivo
XU Yang，HE Yan-yu，YAN Jing
(School of Pharmacy，Heilongjiang University of Traditional Chinese Medicine，Harbin 150040，China)
Abstract:To study the antioxidant effect of ethanol extract of Ornithogalum caudatum Ait in
vivo，total saponins of Ornithogalum caudatum Ait was extracted by heat reflux extraction．
ethanol extracts of three different doses (30，15，7． 5mg /kg)feed mice for 14 days． Vc solu-
tion and water were used as positive control and negative control． Detecting numerical chan-
ges of the mice serum，liver tissue of malondialdehyde (MDA)and super oxide dismutase
(SOD)，experimental data was used to analyze and study the tiger yield of ethanol extracts of
antioxidant activity in the body． The results showed that compared with negative control (dis-
tilled water) ，ethanol extract of Ornithogalum caudatum Ait could increase serum and liver
tissue SOD，decrease MDA content (P ＜ 0． 01)． Compared with the positive control Vc
group，a higher concentration of SOD in serum (P ＜ 0． 05)and MDA in liver tissue (P ＜
0． 05)was detected in high dose group (30 mg /kg)． The results showed that the ethanol ex-
tract of Ornithogalum caudatum Ait showed good antioxidant activity．
Key words:Ornithogalum caudatum Ait;antioxidant;SOD;MDA
虎眼万年青(Ornithogalum caudatum Ait)为百
合科虎眼万年青属常绿多年生草本植物的干燥全
草，又名胡连万年青、海葱、葫芦兰、珍珠草、鸟乳
花，属常见的观赏花卉，原产于非洲南部，我国各地
广泛栽培［1 － 2］．虎眼万年青味甘、性微寒，归肝、脾
经，具有清热解毒，消坚散结的功能，是民间常用中
药材，将其茎叶捣碎外敷可以消除疔疮痈疖、无名
肿痛，内服则能化瘀解毒，治疗肝硬化、肝炎等疾
病［3］，近年研究发现其有很强的抗癌活性［4 － 6］，目
前对于虎眼万年青的研究主要集中在抗肿瘤及其
对机体调节免疫方向和化学成分方向，对于其抗氧
化作用的实验研究尚未见报道． 因此，本文用虎眼
万年青乙醇提取物中粗总皂苷对小鼠体内抗氧化
功能进行了研究，为进一步深入探讨虎眼万年青具
有抗癌、镇痛抗炎和提高免疫力等生物活性提供理
论和技术支持．
1 材料和方法
1． 1 仪器
Ｒ － 202 旋转蒸发器(上海申胜生物技术有限
公司);JY系列药物电子天平(上海民桥精密科学
仪器有限公司);UV160 型紫外可见光分光光度计
(岛津公司)．
1． 2 材料
虎眼万年青购买于吉林省白山市长白县;昆明
种小鼠购买于黑龙江中医药大学动物实验中心;
SOD、MDA试剂盒购于南京建成生物试剂公司．
1． 3 方法
1． 3． 1 药物的提取与分离
称取虎眼万年青干燥粗粉适量，用 70 %乙醇
加热回流提取，提取 3 次，合并提取液，抽滤后 55
℃低压浓缩，得到虎眼万年青乙醇提取物的水溶液
依次用乙醚和水饱和的正丁醇萃取，正丁醇层进行
浓缩、烘干，得虎眼万年青粗总皂苷浸膏，放置 4 ℃
冰箱中备用．
1． 3． 2 动物处理
取昆明种小鼠 50 只，雌雄各半，体重 18 ～ 22
g，在实验室适应性喂养 7 d，随机分成 5 组，每组
10 只，灌胃给药，灌胃前小鼠禁食不禁水 12 h．
第一组空白对照组给予蒸馏水(10 mL /kg)，
第二组阳性对照组(Vc 组)给予 Vc 水溶液(10
mL /kg、15 mg /kg)，现用现配;第三组高剂量组给
予虎眼万年青总皂苷(20 mL /kg、30 mg /kg)，第四
组中剂量组给予虎眼万年青总皂苷(10 mL /kg、15
mg /kg)，第五组低剂量组给予虎眼万年青总皂苷
(5 mL /kg、7． 5 mg /kg)．
1． 3． 3 SOD和 MDA的含量测定
每天灌胃给药 1 次，连续灌胃 14 d，最后一次
灌胃后 30 min 后摘眼球取血，血液凝固后，4 ℃，
3 000 r /min离心 10 min，制成血清待用． 将采完血
的小鼠颈椎脱臼法处死，取出肝脏，用冰冷的生理
盐水洗涤数次，滤纸吸干水分，称取 1 g 放入小烧
杯中剪碎，转入玻璃匀浆器中，用 0． 86 %的生理盐
水配成 10 %的肝组织匀浆，充分研磨数次后使组
织匀浆化后以 4 000 r /min 离心 10 min，收集上清
液待用．
SOD活性检测:分别轻取血清 10 μL 和 10%
的肝组织匀浆液 30 μL，按照检测试剂盒说明书操
作，依次加入各种试剂，混匀，置 37 ℃恒温水浴锅
加热 40 min 后，加入显色剂，混匀，室温放置 10
min，于 550 nm 波长处，1 cm 光径比色杯，蒸馏水
调零，比色，测定测试管及对照管的吸光度值．
血清中总 SOD活力(U /mL)=［(对照管吸光
度值一测定管吸光度值)/对照管吸光度值］/50%
×反应体系的稀释倍数 ×样本测试前的稀释倍数
组织匀浆中 SOD活力(U /mL)=［(对照管吸
光度值一测定管吸光度值)/对照管吸光度值］/
50% ×反应液总体积 /取样量(mL)/待测样本蛋白
浓度(mgproL /mL)
MDA含量检测:分别轻取血清 10 μL和 10 %
的肝组织匀浆液 10 μL，按照检测试剂盒说明书，
将试剂依次加入各个试管，涡旋混匀器混匀，试管
口用保鲜膜扎紧，用针头刺一小孔，95 ℃水浴 40
min，取出后流水冷却，532 nm波长处，l cm 光径比
色杯，蒸馏水调零，比色，测定各管的吸光度．
血清中 MDA 含量 =［(测定管吸光度值 －测
定空白管吸光度值)/(标准管吸光度值 －标准空
白管吸光度值)］×标准品浓度(10 nmol /mL)
组织中 MDA 含量 =［(测定管吸光度值 －测
定空白管吸光度值)/(标准管吸光度值 －标准空
白管吸光度值)］×标准品浓度(10 nmol /mL)/待
测样品蛋白浓度(mgproL /mL)
1． 3． 4 数据分析
结果用 x ± S 表示，用 Spss Statistics V17． 0 法
进行 t检验．
2 结果分析
虎眼万年青粗总皂苷浓度为高、中、低(30、
15、7． 5 mg /kg)时小鼠血清中 SOD 的活力均显著
高于空白组中 SOD的活力;小鼠血中 MDA的含量
极显著的低于空白组(P ＜ 0． 01)． 与空白组相比，
高、中、低各剂量组中 MDA 的含量均存在显著性
差异，高、中剂量组中 SOD的活力存在显著性差异
(P ＜ 0． 01)，低剂量组中 SOD 的活力存在显著性
·304·第 4 期 徐 暘，等:虎眼万年青体内抗氧化性的研究
差异(P ＜ 0． 05);与 Vc对照组(15 mg /kg)相比，高
剂量组血中 SOD 的活力显著高于对照组(P ＜
0． 01)，高剂量组血中 MDA 的含量无显著性差异．
实验组血中 SOD 的活力随着浓度的增高而提高，
MDA 的含量也随着浓度的增高而降低．
虎眼万年青乙醇提取物中粗总皂苷浓度的高、
中、低(30、15、7． 5 mg /kg)在小鼠肝组织中 MDA
的含量极显著的低于空白组(P ＜ 0． 01)，SOD的活
力均显著高于空白组中的 SOD 的活力(P ＜
0． 01)．与空白组相比，高剂量组中 MDA 的含量与
SOD的活力均有显著性差异(P ＜ 0． 01)，中、低剂
量组中 MDA的含量存在显著性差异(P ＜ 0． 05);
与 Vc 对照组(15 mg /kg)相比，高剂量组中 MDA
的含量显著低于 Vc 对照组(P ＜ 0． 05)，SOD 的活
力无显著性差异．虎眼万年青乙醇提取物可以显著
的提高小鼠体内 SOD 的活力和显著的降低体内
MDA的含量，尤其是高剂量组中 SOD 的活力显著
高于空白组(P ＜ 0． 01)，MDA 的含量极显著的低
于空白组(P ＜ 0． 01)． 实验中肝组织中 SOD 的活
力随着浓度的增高而提高，MDA 的含量也随着浓
度的增高而降低．
表 1 虎眼万年青提取物对小鼠血清
和肝组织 MDA含量的影响(x ± S，n = 10)
血中 MDA的含量 /% 肝组织中 MDA的含量 /%
空白组 4． 062 8 ± 0． 549 0 3． 646 9 ± 0． 609 3
Vc对照组 2． 229 8 ± 0． 814 9 2． 814 1 ± 0． 580 4
高剂量组 2． 087 3 ± 0． 553 3 2． 557 2 ± 0． 119 1
中剂量组 2． 353 6 ± 0． 589 6 2． 896 1 ± 0． 479 6
低剂量组 2． 604 2 ± 0． 436 5 2． 937 9 ± 0． 464 6
表 2 虎眼万年青提取物对小鼠血清
和肝组织 SOD活力的影响(x ± S，n = 10)
血中 SOD的活力
/(U·mL －1)
肝组织中 SOD的活力
/(U·mL －1)
空白组 99． 171 ± 10． 399 4 85． 039 8 ± 3． 989 4
Vc对照组 294． 407 ± 11． 298 0 101． 478 6 ± 3． 431 1
高剂量组 314． 534 0 ± 19． 288 3 102． 976 0 ± 3． 336 0
中剂量组 190． 583 ± 15． 590 5 87． 423 0 ± 4． 562 7
低剂量组 113． 58 ± 16． 013 2 85． 735 0 ± 5． 248 6
3 讨 论
丙二醛(MDA)是动物体内多元不饱和脂质氧
化的终产物之一，其含量的高低可以反映体内不饱
和脂质的过氧化程度，间接地反映出细胞膜的损伤
程度．从表 1 可以看出，虎眼万年青乙醇提取物中
粗总皂苷可以有效的降低 MDA 在血液和肝脏中
的数量，降低机体被脂质过氧化，减轻机体被自由
基损坏的程度．超氧化物歧化酶(SOD)是体内一种
重要的氧自由基清除剂，能够平衡机体的氧自由
基，从而避免当体内超氧阴离子自由基浓度过高时
引起的不良反应，对机体的氧化与抗氧化平衡有着
重要的作用．当体内自由基水平失衡时会导致各种
疾病(肿瘤、衰老、炎症等)，SOD 能清除超氧离子
自由基 O2
－·，保护细胞免受损伤．因此 SOD 活力
的高低与衰老、肿瘤、炎症等有着密切的关系． 如
表 2 可以看出虎眼万年青乙醇提取物可以显著的
增加体内 SOD 的数量，提高体内 SOD 的活力，其
高剂量组(30 mg /kg)的抗氧化能力可以与 Vc(15
mg /kg)对照组抗氧化的能力相仿，随着药物浓度
的增高，体内的 SOD的活力也随之增大．
虎眼万年青乙醇提取物中含有皂苷、生物碱、
黄酮、香豆素类等多种成分，本实验采用 70 %乙醇
加热回流提取虎眼万年青总皂苷进行动物实验，高
剂量组(30 mg /kg)的抗氧化能力可以与 Vc(15
mg /kg)对照组抗氧化的能力相近，通过 SOD 和
MDA的结果分析得知虎眼万年青总皂苷成分具有
一定的抗氧化效果，可以有效的提高体内清除超氧
阴离子自由基的能力和降低 MDA 在血液和肝脏
中的数量，有助于增强机体清除自由基的能力，具
有一定的抗氧化作用，这对保护细胞，延缓衰老具
有重要意义，但其作用机理和有效活性成分则有待
于进一步研究．
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·404· 哈 尔 滨 商 业 大 学 学 报 (自 然 科 学 版 ) 第 30 卷