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3味山姜属中药不同提取物对胃实寒证大鼠胃黏膜的保护作用



全 文 :[收稿日期] 20120720(004)
[基金项目] 广西中医药大学课题(P2009043) ;广西中医药大学中药药效研究重点实验室开放课题(09-007-06-03)
[第一作者] 柳俊辉,硕士,讲师,从事中药理论与中药药效研究,Tel:13471197982,E-mail:liujunhui601@ 163. com
[通讯作者] * 秦华珍,博士,教授,从事中药理论与中药药效研究,Tel:13807816597,E-mail:qinhuazhen@ 126. com
3 味山姜属中药不同提取物
对胃实寒证大鼠胃黏膜的保护作用
柳俊辉,秦华珍* ,刘磊,王晓倩,余腾飞,刘颖,李文强
( 广西中医药大学,南宁 530001)
[摘要] 目的:研究山姜属中药高良姜、草豆蔻、红豆蔻对胃实寒证模型大鼠胃黏膜保护作用,揭示它们所含挥发油与温
中散寒功效的相关性,以及以水煎剂入药的科学性。方法:将 220 只大鼠随机分为空白组,模型对照Ⅰ、Ⅱ组,阳性对照组,受
试药物(高良姜、草豆蔻、红豆蔻)挥发油高、低剂量组,水煎液高、低剂量组,去挥发油水液高、低剂量组,共 22 组,每组 10 只。
采用灌服寒凉药(石膏、知母、黄柏、龙胆草)的方法造模,给药剂量为 30 g·kg -1,每日 2 次,连续给药 2 d。分别予以高良姜、草
豆蔻、红豆蔻挥发油、水煎液、去挥发油水液灌胃,分高(60 g·kg -1)、低(20 g·kg -1)剂量组,每隔 12 h 给药 1 次,连续给药 3
次。阳性对照药选用附子水煎液 8 g·kg -1。光镜下观察胃黏膜的病理学改变,采用 Mann-whitney秩和检验进行统计分析。结
果:高良姜挥发油高、低剂量组,水煎液高剂量组,去挥发油高剂量组,草豆蔻 3 种提取物各剂量组,红豆蔻 3 种提取物各剂量
组对炎细胞浸润有显著改善作用(P < 0. 01 或 P < 0. 05) ;高良姜挥发油高剂量组、水煎液高剂量组、去挥发油高剂量组,草豆
蔻挥发油高、低剂量组,水煎液高剂量组,去挥发油高、低剂量组,红豆蔻挥发油高、低剂量组,水煎液高、低剂量组,去挥发油
高剂量组对腺体减少或破坏有显著改善作用(P < 0. 01 或 P < 0. 05) ;高良姜挥发油高、低剂量组,水煎液高、低剂量组,草豆蔻
3种提取物各剂量组,红豆蔻挥发油高、低剂量组,水煎液高剂量组,去挥发油高剂量组对黏膜充血水肿有显著改善作用(P <
0. 01 或 P < 0. 05)。结论:高良姜、草豆蔻、红豆蔻各给药组对胃实寒证大鼠胃黏膜有不同程度的保护作用,这 3 味药的主要活
性成分是挥发油,水煎液、去挥发油水提液中也含有有效成分,以水煎液入药具有科学依据。
[关键词] 山姜属;挥发油;水煎液;去挥发油水液;实寒证;高良姜
[中图分类号] R285. 5 [文献标识码] A [文章编号] 1005-9903(2013)05-0225-05
Protective Effects of Different Extractions from Three Kinds Alpinia
of Traditional Chinese Medicines on Stomach Mucous
Membrane in Rat Stomach Cold Models
LIU Jun-hui,QIN Hua-zhen* ,LIU Lei,WANG Xiao-qian,YU Teng-fei,LIU Ying,LI Wen-qiang
(Guangxi University of Traditional Chinese Medicine,Nanning 530001,China)
[Abstract] Objective:To study the protective effects of Alpiniae Officinarum Rhizome,Alpiniae
Katsumadai Semen and Galangae Fructus on stomach mucous membrane in rat stomach cold models,revealing the
correlation between the volatile oil in these Chinese medicine and the efficacy of warming middle-jiao to dispel cold,
explaining the scientific connotation of medication by boiling water extracts. Method:Two hundred and twenty rats
were randomly divided into 22 groups:blank group,model groupⅠand Ⅱ,positive group,high and low dose
volatile oil groups,high and low dose boiling water extract groups,high and low dose boiling water extract without
volatile oil groups. All rats except blank group were fed cold drugs in the dose of 30 g·kg -1 twice a day for two
days. Then they were given different volatile oil,boiling water extract and boiling water extract without volatile oil
of the three kinds of Chinese medicines. The pathological changes of the stomach mucous membrane were observed
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2013 年 3 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 19,No. 5
Mar.,2013
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2013.05.080
under optical microscope. Result:The high and low dose volatile oil groups and high dose boiling water extract
group and high dose boiling water extract without volatile oil group of Lesser Galangal Rhizome,all the groups of
Katsumada Galangal Seed and Galanga Galangal Fruit could significantly improve the inflammatory cell infiltration
(P < 0. 05 or P < 0. 01). The high dose volatile oil group,high dose boiling water extract group and high dose
boiling water extract without volatile oil group of Lesser Galangal Rhizome,high and low dose volatile oil groups,
high dose boiling water extract group,high and low dose boiling water extract without volatile oil groups of
Katsumada Galangal Seed,high and low dose volatile oil groups,high and low dose boiling water extract groups,
high dose boiling water extract without volatile oil group of Galanga Galangal Fruit could significantly improve
glandular reduction or glandular destruction (P < 0. 05 or P < 0. 01). The high and low dose volatile oil groups,
high and low dose boiling water extract groups of Lesser Galangal Rhizome,all the groups of Katsumada Galangal
Seed,high and low dose volatile oil groups,high dose boiling water extract group,high dose boiling water extract
without volatile oil group of Galanga Galangal Fruit could significantly improve mucosal congestion and edema(P <
0. 05 or P < 0. 01). Conclusion:The treatment groups of Lesser Galangal Rhizome,Katsumada Galangal Seed
and Galanga Galangal Fruit all have the protection on stomach mucous membrane in rat stomach cold models,the
main active ingredients are volatile oil,the boiling water extract and boiling water extract without volatile oil also
contained active ingredient,the medication by boiling water extracts was scientific.
[Key words] Alpinia;volatile oil;boiling water extract;boiling water extract without volatile oil;
excessive-cold syndrome;Alpiniae Officinarum Rhizoma
高良姜 Alpinia officinarum Hance、草豆蔻 Alpinia
katsumadai Hayata、红豆蔻 Alpinia galanga (L.)
willed.均为姜科山姜属药物,主产于广西,性味辛热
(温) ,主归脾胃经,皆有温中散寒功效,主要用于脾
胃寒证,它们的主要有效成分均为挥发油[1],传统
用法以入汤剂为主。因挥发油在水中的溶解度很
小,为了探讨亲缘关系相同的 3 味药物挥发油与温
中散寒功效的相关性,为其入煎剂寻求科学依据,笔
者以高良姜、草豆蔻、红豆蔻挥发油、去挥发油水液、
水煎液为观察对象,建立大鼠胃实寒证模型,对这 3
味药的 3 种不同提取物对胃实寒证大鼠胃黏膜保护
作用进行了实验研究。
1 材料
1. 1 药材 高良姜 Alpiniae Officinarum Rhizoma、
草豆蔻 Alpiniae Katsumadai Semen、红豆蔻 Galangae
Fructus产地皆为广西,批号分别是 100610,100717,
100628,均购买于南宁生源中药饮片有限责任公司。
造模 药 物:石 膏 (Gypsum Fibrosum)、龙 胆 草
(Gentianae Radix et Rhizoma)产地广西,批号分别是
100810,100724;知母(Anemarrhenae Rhizoma)产地
山西,批号 100703;黄柏 (Phellodendri Chinensis
Cortex)产地四川,批号 100830。阳性药附子
(Aconiti Lateralis Radix Praeparata)产地四川,批号
070906。以上药物经广西中医药大学中药鉴定学教
研室蔡毅教授鉴定均为 2005 年版《中国药典》收载
的相应品种。
1. 2 动物 健康 SD 大鼠,SPF 级,体重(200 ± 20)
g,雌雄兼用,湖南斯莱克景达实验动物有限公司提
供,许可证号 SCXK(湘)2009-0004。
1. 3 试剂 聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯(吐温-
80,上海化学试剂公司,批号 F990622) ,生理盐水
(昆明市宇斯药业有限责任公司,批号 10083020) ,
水合氯醛(上海化学试剂公司,批号 20100125) ,乙
醇(95%,国药集团化学试剂有限公司,批号
20100318)。
1. 4 仪器 BP211D 1 /万电子天平(德国赛多利斯
生产) ,HH-4 数显恒温水浴锅(国华电器有限公
司) ,YKKYFM40 制冰机(北京长流科学仪器公司) ,
LD4-18 型台式低速离心机(北京离心机有限公司) ,
RE-52A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)。
2 方法
2. 1 药物的制备
2. 1. 1 高良姜、草豆蔻、红豆蔻挥发油的提取 取
高良姜、草豆蔻、红豆蔻饮片各 1 kg,粉碎成粗粉,分
别加 10 倍量水浸透,按 2005 年版《中国药典》一部
附录 XD中规定[2]的挥发油测定法进行,连续回流
至油量不再增加为止,收集挥发油,用棕色瓶装,密
封,于 4 ℃冰箱保存,用时以 5%吐温-80 配制成所
需浓度。
2. 1. 2 高良姜、草豆蔻、红豆蔻水煎液的制备 取
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中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 19,No. 5
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高良姜、草豆蔻、红豆蔻饮片各 1 kg,粉碎成粗粉,分
别加 10 倍量水浸透,密闭煎煮 30 min,残渣加 8 倍
量水,密闭煎煮 20 min,趁热过滤,合并 2 次滤液,摇
匀,冷却,加入 2 倍量的乙醇进行醇沉,回收乙醇,浓
缩成浸膏,密封,于 4 ℃冰箱保存,用时以蒸馏水配
制成所需浓度。
2. 1. 3 高良姜、草豆蔻、红豆蔻去挥发油水液的制
备 趁热过滤 2. 1. 1 中提取挥发油后的去挥发油水
液,加 2 倍量的乙醇进行醇沉,静置,过滤,回收乙
醇,浓缩成浸膏,密封,于 4 ℃冰箱保存,用时以蒸馏
水配制成所需浓度。
2. 1. 4 造模用寒凉药的制备 石膏、知母、黄柏、龙
胆按 2∶ 1. 5∶ 1∶ 1的比例混合均匀(石膏打碎包煎) ,
加 10 倍量水浸透,用武火煮沸后,保持微沸煎煮
1 h,趁热过滤,残渣加入 8 倍量水再煎,沸腾后保持
微沸煎煮 1 h,过滤,合并 2 次药液,浓缩成相当于生
药量 1. 5 g·mL -1的药液,密封,于 4 ℃冰箱保存
备用。
2. 1. 5 阳性药附子水提液的制备 取 1 kg 生附子
加入 10 倍量水浸透,武火煮沸后,保持微沸煎煮
1 h,过滤。残渣加入 8 倍量的沸水保持微沸煎煮
1 h,过滤,合并 2 次滤液,摇匀,于 4 ℃冰箱静置过
夜。取附子水煎液上清液减压浓缩至质量浓度为
1. 05 g·mL -1(20 ℃) ,按水煎液∶乙醇(1∶ 2)加入相
应体积的乙醇,混合均匀,密闭静置过夜,析出沉淀。
次日药液抽滤,减压回收乙醇,浓缩药液至无醇味,
加蒸馏水配制成质量浓度为 4 g·mL -1的药液,于 4
℃冰箱密闭储存备用。
2. 2 药效学比较
2. 2. 1 动物分组 取大鼠 220 只,随机取 10 只作
为空白对照组,其余大鼠用于胃实寒证造型。造模
结束后随机分为模型Ⅰ组(生理盐水对照组) ,模型
Ⅱ组(吐温-80 对照组) ,阳性对照组,高良姜挥发油
高、低剂量组、高良姜水煎液高、低剂量组、高良姜去
挥发油高、低剂量组,草豆蔻挥发油高、低剂量组、草
豆蔻水煎液高、低剂量组、草豆蔻去挥发油高、低剂
量组,红豆蔻挥发油高、低剂量组、红豆蔻水煎液高、
低剂量组、红豆蔻去挥发油高、低剂量组,共 22 组,
每组 10 只。
2. 2. 2 造模 根据前期工作基础[3-4]并参考文
献[5-6]给予造模组大鼠灌服寒凉药复制胃实寒证模
型,给药剂量为 30 g·kg -1,每日 2 次,连续给药 2 d。
空白组给等容积蒸馏水。
2. 2. 3 给药 造模结束后灌胃给药,各受试药物低
剂量为 20 g·kg -1,高剂量为 60 g·kg -1,空白与模型
Ⅰ组均给等容积生理盐水,模型Ⅱ组给等容积 5%
吐温-80 溶液,阳性组给予附子水提液,剂量为 8 g·
kg -1。每隔 12 h给药 1 次,连续给药 3 次。
2. 2. 4 标本采集 末次给药后各组大鼠禁食不禁
水 4 h,10%水合氯醛麻醉大鼠,腹主动脉取血,血液
流变学检测仪检测血液流变学指标(另文发表) ;而
后处死动物,剖腹取胃,去胃内食物残渣,肉眼观察
胃黏膜的形态学改变;然后取肉眼观察部位胃组织,
用 10%甲醛固定,进行常规石蜡包埋切片,HE 染
色,光镜下观察胃黏膜的病理学改变。
2. 2. 5 病变分级标准 将每 1 种病理改变分为正
常、轻度、中度、重度 4 个等级,每个等级的评分分别
为 0,1,2,3 分(表 1)。
表 1 胃组织病理改变的分级评分标准
观察项目 分级 评分 观察项目 分级 评分 观察项目 分级 评分
炎细胞浸润 正常 0 腺体破坏 正常 0 充血水肿 正常 0
轻度 1 轻度 1 轻度 1
中度 2 中度 2 中度 2
重度 3 重度 3 重度 3
2. 3 统计学方法 采用 Mann-whitney秩和检验,以
P < 0. 05 为有统计学意义。
3 结果
造模后,模型大鼠胃体肉眼观察可见胃肿胀、颜
色变浅,有散在的出血点。光镜下观察胃组织出现
不同程度的炎细胞浸润、腺体减少或破坏、黏膜充血
水肿等病理改变。各组大鼠胃组织病理改变见图
1,评分积分值见表 2。
表 2 显示:各给药组对胃组织炎细胞浸润、腺体
减少或破坏、胃黏膜充血水肿都有不同程度的改善,
分别与模型Ⅰ组、模型 II 组比较。高良姜挥发油与
水煎液高剂量组对胃组织炎细胞浸润、腺体减少或
破坏、胃黏膜充血水肿均有非常显著的改善作用
(P < 0. 01) ;而挥发油低剂量组对胃组织炎细胞浸
润、胃黏膜充血水肿有显著或非常显著的改善作用
(P < 0. 01 或 P < 0. 05) ,对腺体减少或破坏的改善
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柳俊辉,等:3 味山姜属中药不同提取物对胃实寒证大鼠胃黏膜的保护作用
A.空白组:B.模型 I 组:C.模型 II 组;D.阳性药附子水煎液 8 g·
kg -1组;E.高良姜挥发油 60 g·kg -1组;F.高良姜挥发油 20 g·kg -1
组;G.高良姜水煎液 60 g·kg -1组;H.高良姜水煎液 20 g·kg -1组;
I.高良姜去挥发油 60 g·kg -1组;J. 高良姜去挥发油 20 g·kg -1组;
K.草豆蔻挥发油 60 g·kg -1组;L. 豆蔻挥发油 20 g·kg -1组;M. 草
豆蔻水煎液 60 g·kg -1组;N.草豆蔻水煎液 20 g·kg -1组;O.草豆蔻
去挥发油 60 g·kg -1组;P.草豆蔻去挥发油 20 g·kg -1组;Q.红豆蔻
挥发油 60 g·kg -1组;R.红豆蔻挥发油 20 g·kg -1组;S. 红豆蔻水
煎液 60 g·kg -1组;T. 红豆蔻水煎液 20 g·kg -1组;U.红豆蔻去挥发
油 60 g·kg -1组;V.红豆蔻去挥发油 20 g·kg -1组
图 1 各组胃组织病理切片(HE,×100)
作用不明显;水煎液低剂量组对胃黏膜充血水肿有
非常显著的改善作用(P < 0. 01) ,对胃组织炎细胞
浸润、腺体减少或破坏的改善作用不明显;高良姜去
挥发油水提液高剂量组对胃组织炎细胞浸润、腺体
减少或破坏有显著的改善作用(P < 0. 05) ,对胃黏
膜充血水肿的改善作用不明显,而低剂量组对胃组
织病理变化无保护作用。草豆蔻挥发油与去挥发油
水液高低剂量组、水煎液高剂量组对胃组织炎细胞
浸润、腺体减少或破坏、胃黏膜充血水肿均有非常显
著或显著的改善作用(P < 0. 01 或 P < 0. 05) ;水煎
液低剂量组对胃组织炎细胞浸润、胃黏膜充血水肿
有非常显著的改善作用(P < 0. 01) ,而对腺体减少
或破坏的改善作用不明显。红豆蔻挥发油高低剂量
组、水煎液与去挥发油高剂量组对胃组织炎细胞浸
润、腺体减少或破坏、胃黏膜充血水肿均有非常显著
或显著的改善作用(P < 0. 01 或 P < 0. 05) ;水煎液
低剂量组对胃组织炎细胞浸润、腺体减少或破坏有
非常显著的改善作用(P < 0. 01) ,而对胃黏膜充血
水肿的改善作用不明显;去挥发油低剂量组对炎细
胞浸润有非常显著的改善作用,而对腺体减少或破
坏、胃黏膜充血水肿的改善作用不明显。
表 2 胃组织病理改变的分级评分(珋x ± s,n = 10)
组别
剂量
/ g·kg -1
病变评分积分 /分
炎细胞浸润
腺体减少
或破坏
黏膜充血
水肿
空白 - 0. 00 ± 0. 00 0. 00 ± 0. 00 0. 00 ± 0. 00
模型Ⅰ - 2. 30 ± 0. 482) 1. 50 ± 0. 532)2. 00 ± 0. 002)
模型 II - 2. 20 ± 2. 422) 1. 60 ± 0. 522)2. 10 ± 0. 322)
附子水煎液 8 0. 40 ± 0. 704) 0. 10 ± 0. 324)0. 50 ± 0. 714)
高良姜挥发油 60 0. 30 ± 0. 486) 0. 30 ± 0. 486)0. 20 ± 0. 426)
20 1. 50 ± 0. 536) 1. 60 ± 0. 52 1. 70 ± 0. 485)
高良姜水煎液 60 0. 50 ± 0. 534) 0. 40 ± 0. 704)0. 70 ± 0. 674)
20 2. 10 ± 0. 32 1. 60 ± 0. 70 1. 30 ± 0. 674)
高良姜去挥发油 60 1. 80 ± 0. 423) 0. 90 ± 0. 573)1. 00 ± 0. 00
20 2. 10 ± 0. 32 1. 40 ± 0. 52 1. 00 ± 0. 00
草豆蔻挥发油 60 0. 50 ± 0. 536) 0. 50 ± 0. 716)0. 60 ± 0. 526)
20 1. 10 ± 0. 576) 1. 00 ± 0. 006)1. 10 ± 0. 326)
草豆蔻水煎液 60 0. 40 ± 0. 524) 0. 80 ± 0. 633)0. 80 ± 0. 424)
20 1. 20 ± 0. 924) 1. 30 ± 0. 48 0. 80 ± 0. 424)
草豆蔻去挥发油 60 1. 10 ± 0. 574) 1. 10 ± 0. 323)0. 90 ± 0. 574)
20 1. 00 ± 0. 004) 1. 10 ± 0. 743)1. 20 ± 0. 424)
红豆蔻挥发油 60 0. 50 ± 0. 856) 0. 50 ± 0. 536)0. 50 ± 0. 716)
20 0. 40 ± 0. 526) 0. 60 ± 0. 526)0. 70 ± 0. 486)
红豆蔻水煎液 60 0. 70 ± 0. 824) 0. 60 ± 0. 524)1. 30 ± 0. 484)
20 1. 10 ± 0. 574) 1. 00 ± 0. 004)1. 70 ± 0. 95
红豆蔻去挥发油 60 1. 10 ± 0. 324) 0. 90 ± 0. 573)0. 90 ± 0. 574)
20 0. 90 ± 0. 884) 1. 60 ± 0. 84 1. 80 ± 0. 63
注:与空白组比较1)P < 0. 05,2)P < 0. 01;与模型Ⅰ组比较3)P <
0. 05,4)P < 0. 01;与模型Ⅱ组比较5)P < 0. 05,6)P < 0. 01。
4 讨论
实验结果显示:高良姜、草豆蔻、红豆蔻挥发油
与水煎液对胃实寒证大鼠胃组织炎细胞浸润、腺体
减少或破坏、黏膜充血水肿均有不同程度的改善作
用,其中挥发油的作用更为显著,说明挥发油确为这
3 味药的主要活性成分;水煎液中也含有有效成分,
以水煎液入药具有科学依据;而高良姜、草豆蔻、红
豆蔻去挥发油水液对胃实寒证大鼠胃黏膜也有一定
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檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶
的保护作用,说明这 3 味药的活性成分除了挥发油
之外,还有其他化学成分。据文献报道[1]:山姜属
药物化学成分除了主要含挥发油之外,还有黄酮类、
二苯庚烷类、萜类、糖苷类、苯丙素类和甾体类等。
其中哪种成分对胃实寒证大鼠胃黏膜也有保护作
用,值得进一步研究。
[参考文献]
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[责任编辑 聂淑琴]
[收稿日期] 20121111(005)
[基金项目] 天津市卫生局科技基金(2012KY30)
[第一作者] 赵永安,在读硕士,从事天然产物的提取分离、天然产物单体的结构改造,Tel:13821157112,E-mail:1356471728@ qq. com
[通讯作者] * 陶遵威,研究员,硕士生导师,Tel:022-27236182
苦豆子多糖及其衍生物的体外抗氧化活性
赵永安1,2,陈冠2,陶遵威2*
( 1. 天津医科大学,天津 300070; 2. 天津市医药科学研究所,天津 300020)
[摘要] 目的:对苦豆子多糖及其衍生物的体外抗氧化活性进行了研究。方法:将苦豆子多糖硫酸化、磷酸化修饰后,以
维生素 C(VC)为对照,分别测定苦豆子多糖(SAP)、硫酸化苦豆子多糖(SAPS)和磷酸化苦豆子多糖(SAPP)3 种多糖对二苯
代苦味酰自由基(DPPH)、羟自由基(·OH)、超氧自由基(O -2·)的体外抗氧化活性及还原力。结果:SAPS和 SAPP表现出不同
程度抗氧化活性,并随浓度增加,活性增强,其中 SAPS 和 SAPP 清除 DPPH 能力(IC50分别是 4. 573,6. 542 mg·L
-1)与 SAP
(IC5010. 233 mg·L
-1)相比,有显著提高;SAPP清除羟自由基(IC50 4. 368 mg·L
-1)和 SAPS 清除超氧自由基(IC50 2. 651 mg·
L -1)能力显著提高。结论:硫酸化和磷酸化修饰能提高苦豆子多糖的体外抗氧化活性。
[关键词] 苦豆子多糖;分离纯化;结构修饰;体外抗氧化
[中图分类号] R285. 5 [文献标识码] A [文章编号] 1005-9903(2013)05-0229-04
Antioxidative Effects in vitro of Polysaccharides in
Sophora alopecuroides and its Derivatives
ZHAO Yong-an1,2,CHEN Guan2,TAO Zun-wei2*
(1. Tianjin Medical University,Tianjin 300070,China;
2. Tianjin Institute of Medical and Pharmaceutical Sciences,Tianjin 300020,China)
[Abstract] Objective:To investigate the antioxidant effect in vitro of polysaccharides in Sophora
alopecuroides (SAP)and its derivatives. Method:After sulfation and phosphorylation of the SAP,the scavenging
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第 19 卷第 5 期
2013 年 3 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 19,No. 5
Mar.,2013