全 文 :天然产物研究与开发 Nat Prod Res Dev 2013,25:681-683
文章编号:1001-6880(2013)5-0681-03
收稿日期:2012-08-07 接受日期:2012-12-20
基金项目:河南省科技厅重点项目(122102310272;122102310170)
* 通讯作者 E-mail:kangweny@ hotmail. com
玉蜀黍轴及苞叶对凝血作用的影响
顾海鹏1,周大鹏1,顾雪竹2,康文艺1*
1 河南大学中药研究所,开封 475004;2中国中医研究院中药研究所,北京 100700
摘 要:采用体外血浆复钙时间法,以维生素 k1 作为促凝血和灯盏花素作为抗凝血作用阳性对照,对玉蜀黍轴
及苞叶石油醚、乙酸乙酯和正丁醇提取物及玉蜀黍苞叶甲醇总浸膏对体外血浆复钙时间的影响进行测定。结
果显示玉蜀黍轴正丁醇及苞叶乙酸乙酯提取物,均可显著缩短体外血浆复钙时间(P < 0. 001) ;玉蜀黍苞叶石
油醚提取物可显著延长体外血浆复钙时间(P < 0. 001)。提示玉蜀黍轴正丁醇及苞叶乙酸乙酯提取物具有较
好的促凝血活性,玉蜀黍苞叶石油醚提取物具有较好的抗凝作用。
关键词:玉蜀黍;苞叶;血浆复钙时间;凝血作用
中图分类号:R293 文献标识码:A
Effects of the Bracts and Bars of Zea mays L. on Blood Coagulation
GU Hai-peng1,ZHOU Da-peng1,GU Xue-zhu2,KANG Wen-yi1*
1 Institution of Natural Products,Henan University,Kaifeng 475004,China;2 Institute of
Chinese Materia Medica,Traditional Chinese Medical Research Institute,Beijing,100700,China
Abstract:The effect of extracts of the bracts and bars of Zea mays L. on blood coagulation was investigated using Vita-
min K1 as coagulant control and breviscapine as anti-coagulant control. Petroleum ether,ethyl acetate and n-butanol ex-
tracts of Z. mays bracts and bars and the total methanol extract of bracts were assayed using plasma recalcification time
method in vitro. n-Butanol extract of bars and ethyl acetate extract of bract significantly reduced the plasma recalcifica-
tion time(P < 0. 001). Petroleum ether extract of the bracts significantly prolonged the plasma recalcification time(P
< 0. 001). The results indicated that the n-butanol extract of bars and bract ethyl acetate extract had better procoagulant
effect,and the petroleum ether extract of the bracts had good anticoagulant effect.
Key words:Zea mays L.;bract;plasma recalcification time;coagulation of the blood
玉蜀黍轴为禾本科植物玉蜀黍(Zea mays L.)
的穗轴,具有健脾利湿之功效,主治消化不良、泻痢、
小便不利、水肿、脚气、小儿夏季热和口舌糜烂。其
鞘状苞叶即玉蜀黍苞叶,具有消热利尿、和胃之功
效,主治尿路结石、水肿和胃痛吐酸[1]。文献检索
发现玉蜀黍轴及苞叶的化学成分和药理活性研究报
道较少,仅有玉蜀黍轴水溶性多糖及木聚糖硫酸酯
抗凝血活性[2-5];玉米须多糖的止血作用研究[6];玉
蜀黍苞叶和玉蜀黍轴黄酮类成分具有抗氧化作
用[7]和玉蜀黍苞叶和玉米棒的 α-葡萄糖苷酶抑制
活性的报道[8],而玉蜀黍轴及苞叶对促血凝和抗血
凝的研究未见报道。
1 材料与方法
1. 1 试剂与仪器
TGL-16 高速离心机(江苏金坛中大仪器厂) ;秒
表计时器;LRH-150 生化培养箱(上海一恒科技有
限公司) ;注射生理盐水(山东齐都药业有限公司,
2012053107) ;38 g /L 枸橼酸钠溶液、2. 775 g /L 氯
化钙溶液、维生素 k1 注射液(天津药业集团新郑股
份有限公司,1109051) ;注射用灯盏花素(湖南恒生
制药有限公司,20110202)。
1. 2 动物与材料
獭兔,雄性,体重 2. 0 ~ 2. 5 kg,由河南大学药
学院中药研究所提供(医动字 09-1-2 号)。
玉蜀黍苞叶和轴均于 2011 年 5 月种植于河南
省开封市河南大学药用植物园,同年 9 月采集,由河
南大学中药研究所李昌勤副教授鉴别为禾本科植物
玉蜀黍 Zea mays L.的鞘状苞叶和轴,标本存于河南
大学中药研究所。
DOI:10.16333/j.1001-6880.2013.05.023
1. 3 实验方法
1. 3. 1 玉蜀黍苞叶和玉米棒浸膏的提取
将新鲜玉蜀黍苞叶和轴切碎,用甲醇加热回流
提取 2 次,每次 2 h和 1 h,合并提取滤液后浓缩,得
到甲醇总浸膏。总浸膏分散于水中,依次用石油醚、
乙酸乙酯和正丁醇萃取,减压浓缩得到玉蜀黍苞叶
和玉蜀黍轴石油醚、乙酸乙酯和正丁醇提取物。
1. 3. 2 对家兔体外血浆覆盖时间的影响
取家兔耳缘静脉取血 3. 6 mL,加至含 38 g /L枸
橼酸钠 400 μL的 4 mL离心管中,混匀,1 000 r /min
离心 15 min,取上清液备用。取 1. 5 mL 道夫管,样
品组加入血浆 0. 1 mL 及样品溶液各 0. 1 mL,阳性
对照组加入血浆 0. 1 mL 及药品溶液 0. 1 mL,空白
组加入血浆 0. 1 mL及空白溶剂 0. 1 mL 于 37 ℃温
育 1 min后分别向每管加入 2. 775 g /L CaCl2 溶液
0. 1 mL,计时,直到检测到纤维蛋白丝时停止计时,
维生素 K1、灯盏花素对照组重复 3 次,样品组重复 6
次,求算术平均值和标准差,即为血浆复钙时间。结
果采用算术平均值和标准差表示,数值统计采用
SPSS17. 0 软件单因素方差分析法(One-Way ANO-
VA)比较其显著性差异。
2 结果与讨论
玉蜀黍苞叶和轴提取物对体外血浆复钙时间的
影响结果见表 1。
表 1 玉蜀黍苞叶和轴提取物对体外血浆复钙时间的影响
Table 1 Effects of extracts from the bracts and bars of Zea mays L. on plasma recalcificatic time in vitro
组别
Group
样品
Sample(s)
维生素 k1
Vitamin k1(s)
灯盏花素
Breviscapine(s)
空白
Control(s)
玉蜀黍轴
Bars of Zea mays L. 乙酸乙酯相 Ethyl acetate 226. 0 ± 3. 7 165. 7 ± 4. 7
### 247. 9 ± 4. 2xx 214. 7 ± 0. 1*
石油醚相 Petroleum ether 282. 7 ± 9. 2 222. 5 ± 6. 5### 346. 6 ± 4. 7xxx 284. 9 ± 2. 7
正丁醇相 N-butanol 134. 6 ± 4. 2 159. 9 ± 4. 5 401. 9 ± 5. 4xx 269. 3 ± 1. 9***
玉蜀黍苞叶
Bracts of Zea mays L. 总甲醇 Total methanol 158. 1 ± 5. 3 75. 4 ± 5. 3
### 275. 5 ± 2. 3xxx 154. 6 ± 2. 8
石油醚相 Petroleum ether 244. 6 ± 6. 0 75. 4 ± 5. 3### 275. 5 ± 2. 3 154. 6 ± 2. 8***
乙酸乙酯相 Ethyl acetate 148. 9 ± 8. 3 143. 0 ± 8. 8 259. 0 ± 4. 7xx 217. 5 ± 1. 6***
正丁醇相 N-butanol 263. 7 ± 4. 7 219. 9 ± 4. 5# 401. 9 ± 5. 4xx 269. 3 ± 1. 9
注:与维生素 K1 比较,###P < 0. 001;0. 01 < #P < 0. 05;与灯盏花素比较,xxxP < 0. 001;0. 001 < xxP < 0. 01;与空白比较,*** P < 0. 001;0. 001
< **P < 0. 01;0. 01 < * P < 0. 05。
Note:Compared with vitamin K1,###P < 0. 001;0. 01 < #P < 0. 05;Compared with Breviscapine,xxxP < 0. 001;0. 001 < xxP < 0. 01;Compare with con-
trol,***P < 0. 001;0. 001 < **P < 0. 01;0. 01 < * P < 0. 05.
由表 1 可看出,玉蜀黍轴正丁醇及苞叶乙酸乙
酯提取物均可显著缩短体外血浆复钙时间(P <
0. 001) ,与维生素 K1 组比较无显著性差异(P >
0. 05) ,可提示玉蜀黍轴正丁醇提取物及苞叶乙酸
乙酯提取物具有体外促凝血作用。玉蜀黍苞叶石油
醚相可显著延长体外血浆复钙时间(P < 0. 001) ,
与灯盏花素组比较无显著性差异(P > 0. 05) ,可提
示苞叶石油醚提取物具有体外抗凝血活性。玉蜀黍
轴石油醚相、玉蜀黍苞叶总浸膏和正丁醇提取物体
外血浆覆盖时间与空白组无显著性差异(P > 0.
05) ,提示其没有体外抗凝血或促凝血作用。
血液凝固过程是血浆中凝血因子受到内源性或
外源性激活引起的一系列化学连锁反应,血浆复钙
时间反应的是内源性凝血系统功能。维生素 k1 为
人体合成凝血因子的重要来源,临床可用做维生素
k1 缺乏性出血,及逆转抗凝血药物过量引起的出血
症。灯盏花素为中药提取制剂,有效成分为野黄芩
苷,主要有抗凝血、抗血栓形成,改善血液流变性及
微循环,增加脑血流量,抗心肌缺血,提高机体耐缺
氧能力等作用。
本文研究发现玉蜀黍轴正丁醇提取物具有止血
作用;玉蜀黍叶石油醚及乙酸乙酯提取物具有抗凝
血作用并与阳性对照比较无显著性差异(P >
0. 05)。由体外实验结果表明,玉蜀黍轴及苞叶提
取物对内源性凝血系统有明显的凝血或抗凝血作
用。血浆复钙时间可较好的评价提取物的凝血活
性,由于其反应对内源性凝血系统作用,仍存在一定
的片面性,因此应进行多方面综合评价。
3 结论
玉蜀黍轴及苞叶活性部位的筛选对于分离提取
其具有凝血或抗凝血活性有效成分具有指导意义,
286 天然产物研究与开发 Vol. 25
而玉蜀黍石油醚相、正丁醇相中是否含凝血或抗凝
血成分,还有待进一步药理实验和证明。
参考文献
1 State Administration of Traditional Chinese Medicine of
“Chinese herbal medicine”Editorial Board(国家中医药管
理局《中华本草》编委会). Chinese Herbal Medicine(中华
本草). Shanghai:Shanghai Science and Technology Press,
1999,23:7571-7578.
2 Zhao R(赵锐) ,Guo C X(郭彩霞) ,Zhang O(张鸥) ,et al.
Anticoagulant activities of polysaccharide and its sulfated
polysaccharide form corn-cob and mechanism. J Jinzhou
Univ,Med Ed(吉林大学学报,医学版) ,2012,1:62-65.
3 Xu HY(许浤瑜) ,Han L(韩亮). Anticoagulant activity and
its mechanism of Corn Cob Xylan Sulfate. Nat Prod Res Dev
(天然产物研究与开发) ,2006,18:545-548.
4 Xu HY(许浤瑜) ,Han L(韩亮). Study on anticoagulant
and antiplatelet aggregation activity of Corn Cob Xylan Sul-
fate. Cellul Sci Technol(纤维素科学与技术) ,2008,16
(3) :28-33.
5 Sun SL(孙姝兰) ,Wan S(万珄) ,Liu D(刘丹) ,et al. The
anti-coagulant effect of water soluble polysaccharides purified
from corn-cob. J Mol sci(分子科学学报) ,2006,22:131-
134.
6 Du J(杜鹃) ,Xu QT(许启泰). A study on hemostatic effect
of stogma maydis polysacc haride. Henan Med Res(河南医学
研究) ,2011,20:398-403.
7 Xu G(许刚). Comparison anti-oxidation activity of extracts
from different parts of Corn. Food Fermen Ind(食品与发酵
工业) ,2004,30(4) :88-91.
8 Yin ZH(尹震花) ,Gu XZ(顾雪竹) ,Gu HP(顾海鹏) ,et
al. α-Glucosidase inhibitory activity of extracts from the
bracts and bars of Zea mays L. . J Henan Univ,Med Sci(河
南大学学报,医学版) ,2012,31(2) :
櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵櫵
88-90.
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6 Gao HN(高海宁) ,Li CX(李彩霞) ,Zhang Y(张勇) ,et
al. Study on antioxidant activity of pigment from “Black
Beauty”potato in vitro. Nat Prod Res Dev(天然产物研究与
开发) ,2012,24:224-228.
7 Re B,Pellegrini N,Proteggente A,et al. Antioxidant activity
applying an improved ABTS redical cation decolorization as-
say. Free Radical Biol Med,1999,26:1231-1237.
8 Liu XL,Cui C,Zhao MM,et al. Identification of phenolics in
the fruit of emblica(Phyllanthus emblica L.)and their an-
tioxidant activityes. Food Chem,2008,109:905-915.
9 Chang LX(常丽新) ,Zhang LF(张丽芳) ,Du MY(杜密
英) ,et al. Study on stablity and clearing nitrite function of
rose flowers pigment. Food Sci(食品科学) ,2005,26:99-
102.
10 Gao YN(高亚妮) ,Tian CR(田呈瑞) ,Kang YX(康宇新) ,
et al. Optimization of ultrasonic-assisted extraction and an-
tioxidant activity of total flavonoids from Zanthoxylum bun-
geanum Maxim Fruit Peel. Food Sci(食品科学) ,2012,33:
77-82.
11 Senthil KR,Rajkapoor B,Perumal P. Antioxidant activities of
Indigofera cassioides Rottl. Ex. DC. using various in vitro as-
say models. Asian Pacific J Trop Boimed,2012,2:256-261.
12 Cheng C(程超) ,Li W(李伟) ,Wang XP(汪兴平). Study
on the structure analysis and antioxidation effect in vitro of
water soluble polysaccharide of Pleurotus ostreatus. Food Sci
(食品科学) ,2005,26:55-56.
13 Liu J,Lin SY,Wang ZZ,et al. Supercritical fluid extraction of
flavonoids from Maydis stigma and its nitrite-scavenging abil-
ity. Food Bioprod Process,2011,89:333-339.
386Vol. 25 顾海鹏等:玉蜀黍轴及苞叶对凝血作用的影响