全 文 :第 7卷 第 2期 广 东 轻 工 职 业 技 术 学 院 学 报 Vol.7 No.2
2008年 6月 JOURNALOFGUANGDONGINDUSTRYTECHNICALCOLLEGE Jun. 2008
收稿日期:2008-05-08
作者简介:刘晓蓉(1973-), 女 ,讲师。
淡竹叶提取物抑菌防腐作用的研究
刘晓蓉
(广东轻工职业技术学院 食品与生物工程系 ,广东 广州 510300)
摘 要:研究了淡竹叶提取物的抑菌性能 。结果表明:提取物对所试细菌有较强的抑制
作用 ,而对霉菌的抑制效果不明显;对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为 6.2%,对溶血
性链球菌 、绿脓杆菌和大肠杆菌的最低抑菌浓度都是 12.5%;耐热性好;抑菌 pH范围在
pH4 ~ 9之间;具有良好的防腐保鲜效果 。
关键词:淡竹叶;提取物;抑菌作用
中图分类号:Q93 文献标识码:A 文章编号:1672-1950(2008)02-0020-04
食品的腐败变质主要由微生物引起[ 1] 。食品
生产 、加工和贮藏过程中 ,防腐剂有很重要的应用价
值 。由于某些合成防腐剂具有一定的毒副作用 ,人
们趋向于使用天然物质作为食品防腐剂 。目前 ,筛
选具有抑菌作用的天然食品防腐剂已成为食品科学
领域研究的一个热点 。
淡竹叶 ,为禾本科多年生草本植物淡竹叶(Lo-
phatherumgracileBrongn.)的茎叶。野生于山坡林
下或沟边阴湿处 ,分布于长江流域和华南 、西南地
区 [ 2] 。据 《现代实用中药》,淡竹叶具有 “清凉解热 ,
利尿。治热病口渴 ,小便涩痛 ,烦热不寐 ,牙龈肿痛 ,
口腔炎 ”的功效。
本文对淡竹叶提取物的抑菌效果作一些探索 ,
以讨论其作为天然防腐剂的应用前景 。
1 材料和方法
1.1 材料
淡竹叶购自中药店;供试果蔬为色泽均匀 、新
鲜 、表面无破损的葡萄 、青椒和番茄。
金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、溶血
性链球 菌 (Streptococcushaemolyc)、绿 脓杆菌
(Pseudomonasaeruginosa)、大肠杆菌 (Escherichia
coli)、黑曲霉(Aspergilusniger)、常见青霉(Penicil-
liumfrequentans)均由广东省微生物研究所提供 。
细菌用营养肉汤和营养琼脂培养;霉菌采用 PDA培
养基 。
1.2 方法
1.2.1 淡竹叶提取物的制备
淡竹叶茎叶 1g干燥 ,粉碎※乙醇 20mL回流提
取 3次※减压浓缩成 1mL※提取物。
1.2.2 菌悬液的制备
将上述菌用相应斜面培养基活化 2次 ,以无菌
生理盐水配制成菌体或孢子浓度为 106 ~ 107cfu/mL
的菌悬液 ,备用 。
1.2.3 抑菌作用的测定 [ 3]
选用直径为 9cm的培养皿 ,每皿加 15mL培养
基 ,凝固后 ,移取各种菌悬液 0.5mL分别加入各平
板上 ,涂布均匀 ,每皿平稳 、等距离放置 3个灭菌牛
津杯 ,于其中滴加提取物 ,对照加无菌生理盐水。每
菌 5个重复 。霉菌 28℃培养 72h, 细菌 37℃培养
24h。移去牛津杯 ,量取各抑菌圈直径。
1.2.4 最低抑菌浓度(MIC)的测定 [ 4]
提取物进行二倍稀释。取 10支无菌试管 ,各加
灭菌营养肉汤 1mL,第 1管加原提取液 1mL,混匀后
吸取 1mL于第 2管 ,混匀后吸取 1mL于第 3管 ,依
次类推到第 9管 ,弃去 1mL,第 10管改加 1mL无菌
生理盐水作为对照 ,然后每管内加入菌悬液 0.1mL,
摇匀 , 37℃培养 24h。结果判定:肉汤清亮透明表示
无细菌生长(-),肉汤浑浊表示有细菌生长(+),
以能抑制细菌生长的提取物最高稀释度作为其最低
抑菌浓度 。
DOI :10.13285/j.cnki.gdqgxb.2008.02.003
第 2期 刘晓蓉:淡竹叶提取物抑菌防腐作用的研究 21
1.2.5 耐热性的测定
将提取物分别在 60℃、 80℃、 100℃下处理
15min,按 1.2.3量取抑菌圈直径。
1.2.6 抑菌 pH范围的测定[ 5]
用自来水配制细菌培养液 ,分装试管 ,配成 2份
pH4 ~ 9系列培养基 ,分别取 pH4, 4.5, 5, 5.5, 6, 6.
5, 7, 7.5 , 8, 8.5, 9,称为系列 1、系列 2;用提取物代
替自来水 ,同法配制 2份 pH4 ~ 9系列培养基 ,称为
系列 3、系列 4。
上述培养基均不灭菌 ,系列 1、3放入冰箱冷藏 ,
系列 2、4放入 37℃恒温箱培养 48h。
以系列 1、3作对照 ,蒸馏水为空白试剂 (吸光
度 A吸 =0),用分光光度计分别测定相应 pH下的吸
光度 A吸 系列值。
1.2.7 防腐保鲜初步试验
样品处理:供试葡萄 、青椒和番茄洗净 、沥干。
防腐初试:将果蔬样品放入提取物中浸泡
2min,取出晾干;装入无菌 、干燥的一次性碗中 。每
处理 5个重复 , 33℃阴凉处存放 8d。肉眼观察样品
的变化情况 。
2 结果与讨论
2.1 提取物抑菌效果的测定
淡竹叶提取物的抑菌情况见表 1。
表 1 淡竹叶提取物的抑菌效果 单位:mm
供试菌株 抑菌圈直径
金黄色葡萄球菌 25
溶血性链球菌 23
绿脓杆菌 20
大肠杆菌 16
黑曲霉 -
常见青霉 -
注:抑菌圈直径为 5个重复的平均值;
“ -”表示没有抑菌效果或直径小于 10mm。
由表 1可知 ,淡竹叶提取物对所试细菌都具有
一定的抑菌效果 ,抑制作用的强弱顺序为:金黄色葡
萄球菌 >溶血性链球菌 >绿脓杆菌 >大肠杆菌;而
对黑曲霉和常见青霉的抑菌效果不明显。
2.2 最低抑菌浓度(MIC)的测定
提取物对供试细菌的最低抑菌浓度(MIC)见表
2。
从表 2可以看出 ,随着提取物浓度的增大 ,抑菌
能力也逐渐增强;不加提取物的对照试管内 ,肉汤培
养基很浑浊;提取物对金黄色葡萄球菌的最低抑菌
浓度最小 ,为 6.2%,对溶血性链球菌 、绿脓杆菌和
大肠杆菌的最低抑菌浓度都是 12.5%。
表 2 淡竹叶提取物的最低抑菌浓度(MIC)
提取物浓度 供试菌株金葡菌 链球菌 绿脓杆菌 大肠杆菌
1 /2 - - - -
1 /4 - - - -
1 /8 - - - -
1 /16 - + + +
1 /32 + + + 2+
1 /64 + 2+ 2+ 2+
1 /128 2+ 2+ 2+ 3+
1 /256 2+ 3+ 3+ 3+
1 /512 3+ 3+ 3+ 3+
不加提取物 3+ 3+ 3+ 3+
MIC(%) 6.2 12.5 12.5 12.5
注:“ +”表示肉汤浑浊 , “ +”前数值越大表示越浑浊;“ -”表示
肉汤澄清。
2.3 耐热性的测定
提取物分别在 60℃、80℃、100℃下处理 15min
后 ,测得其抑菌圈直径如表 3所示 。
表 3 不同温度处理淡竹叶提取物的抑菌效果 单位:mm
供试菌株 对照 60℃ 80℃ 100℃
金葡菌 26 25 25 24
链球菌 24 23 24 22
绿脓杆菌 20 22 23 20
大肠杆菌 15 15 13 14
注:对照为不经处理的提取物;抑菌圈直径为 5个重复的平均值。
由表 3可得 ,经过高温处理的提取物 ,抑菌效果
与对照比较无显著差异 ,表明提取物对热具有良好
的稳定性 。
2.4 抑菌 pH范围的测定
培养 48h后 ,系列 2、4的 A吸 值和培养现象见
表 4,空白对照分别为系列 1、3。
22 广 东 轻 工 职 业 技 术 学 院 学 报 第 7卷
表 4 不同 pH系列培养物的吸光度值和培养现象
pH值 系列 2A吸 培养现象
系列 4
A吸 培养现象
4 0.015 澄清 0.012 澄清
4.5 0.449 浑浊 0.012 澄清
5 0.455 浑浊 、有沉淀 0.150 澄清
5.5 0.485 很浑浊 、有沉淀 0.156 澄清
6 0.533 很浑浊 、有大量沉淀 、有菌膜 0.181 较澄清
6.5 0.544 很浑浊 、有大量沉淀 、有菌膜 0.184 较澄清 ,稍有沉淀
7 0.492 很浑浊 、有大量沉淀 、有菌膜 0.157 澄清
7.5 0.482 很浑浊 、有沉淀 0.125 澄清
8 0.469 浑浊 、有沉淀 0.093 澄清
8.5 0.454 浑浊 、有沉淀 0.031 澄清
9 0.411 浑浊 、有沉淀 0.026 澄清
由表 4可见 ,系列 4的吸光度值小于同 pH值
的系列 2 ,且系列 4的浑浊度 、沉淀量都小于同 pH
值的系列 2,系列 4的各试管都未出现菌膜 ,而系列
2在 pH6 ~ 7范围内均出现菌膜。说明了系列 4中
杂菌生长浓度明显低于系列 2,表明提取物在 pH4
~ 9条件下都具有较好的抑菌效果 。此外 ,多数菌
在 pH7附近生长旺盛 ,而在 pH较低范围内生长不
好 ,是因为低 pH本身对细菌已具有一定的抑制作
用。
2.5 防腐保鲜结果
根据食品的不同性质 ,腐烂速度的不同 ,选用葡
萄 、青椒和番茄作为研究对象 ,观察其外观形态的变
化。结果见表 5。
表 5 提取物对几种常见果蔬的防腐保鲜情况
时间(d) 食品 对照 处理
0
葡萄 果实饱满 ,呈光亮的紫色 果实饱满 ,呈光亮的紫色
青椒 果硬 ,光滑 ,呈深青色 果硬 ,光滑 ,呈深青色
番茄 果硬 ,光滑 ,色彩鲜艳 果硬 ,光滑 ,色彩鲜艳
4
葡萄 有失水现象 ,枝干枯 ,枝果连接松散 果硬,枝果连接紧密
青椒 果轻微失水 ,略呈黄色 稍变软 ,色泽不变化
番茄 表皮微皱缩 ,色彩鲜艳 果硬 ,光滑 ,色彩鲜艳
8
葡萄 软腐 ,颜色黑紫 ,汁液渗出 ,枝果分离 变软 ,颜色深紫
青椒 严重软腐 ,汁液渗出 ,黄红色 褐斑 ,松软 ,无汁渗出
番茄 变软 ,颜色变深 ,梗脱落 稍萎蔫 ,仍保持硬度
注:对照为不浸泡提取物的样品。
由表 5可得 ,经过提取物处理的果蔬贮藏效果
明显优于未经处理的 。未处理的葡萄已经出现腐
烂 ,果枝分离;而经过保鲜的葡萄仅松软 ,尚未出现
褐斑。同样 ,未处理的青椒已经腐烂;而经过保鲜的
虽然出现褐斑 ,却未腐烂。番茄在贮藏过程中 ,外观
形态变化不是很大 ,未处理的变软了 ,梗脱落;而经
过处理的仍保持硬度 。
3 结论
(1)本实验中 ,淡竹叶提取物对所试四种细菌
具有比较好的抑制作用 ,而对所试霉菌的抑菌效果
不明显;抑菌浓度较低 ,对金黄色葡萄球菌的最低抑
菌浓度(MIC)为 6.2%,对其他三种细菌的 MIC都
是 12.5%;在 pH4 ~ 9范围内都具有较好的抑菌防
腐效果;热稳定性好 , 100℃处理 15min对细菌仍具
有良好的抑制作用;对供试果蔬的初步保鲜效果明
显 ,可以延长食品的贮藏期。
(2)植物中的某些提取物如萜烯类 、生物碱 、类
黄酮 、甾类 、酚类 、独特的氨基酸和多糖等都具有杀
虫和抗菌活性 。资料表明 ,至少有 1389种植物可能
作为杀菌剂[ 6] 。淡竹叶提取物的抑菌机理有待进
一步研究 ,食品在保鲜过程中生理特征的变化有待
深入探讨 。
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责任编辑:张赣霞
StudyonAntimicrobialEfectoftheExtractfrom
LophatherumGracileBrongn
LIUXiaorong
(DepartmentofFoodandBiologyEngineerhg, GuangdongIndustryTechnicalColege, Guangzhou510300, China)
Abstract:AntimicrobialcharacteroftheextractfromLophatherumgracileBrongn.wasstudiedinthispaper.The
resultsshowedthattheextractcouldefectivelyinhibitthegrowthofbacterium, butnotobviouslytofungi.TheMIC
(MinimumInhibitionConcentration)wasasfolows:6.2% toStaphylococcusaureus, 12.5% toStreptococcus
haemolyc, PseudomonasaeruginosaandEscherichiacoli.Theextractalsohadverygoodtemperaturestabilityandit
couldbeefectivefrompH4 ~ 9.Antimicrobialefectonseveralcommonfoodofextractwasobvious.
Keywords:LophatherumgracileBrongn;extract;antimicrobe
(上接第 19页)
TheInfluencingFactorsonBlank-glazeBobyFitingofCeramics
MAORui
(DepartmentofChemicalEngineering, GuangdongIndustryTechnicalCollege, Guangzhou, 510300, China)
Abstract:Theinfluencingontheblank-glacebodyfitingofceramicswerediscussed.Theywere:expansionco-
eficient;theformationofblank-glazemiddlelayer;theflexibiligyandstrengtheofblazebody;thicknessof
glaze.
Keywords:ceramics;blank-glazebodyfiting;expansion;coeficient