全 文 ：第３１卷 第２期 河南大学学报（医学版） Ｖｏｌ．３１　Ｎｏ．２
２０１２年５月 Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｅｎａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ） Ｍａｙ　２０１２
玉蜀黍苞叶和玉米棒提取物α－糖苷酶抑制活性
尹震花１，顾雪竹２，顾海鹏１，康文艺１＊
（１．河南大学 中药研究所，河南 开封４７５００４；２．中国中医研究院 中药研究所，北京１００７００）
摘　要：目的　评价玉蜀黍苞叶和玉米棒各提取物的α－葡萄糖苷酶抑制活性。方法　通过建立体外α－葡萄糖苷酶
抑制模型，对玉蜀黍苞叶和玉米棒各提取物进行活性筛选，并对提取物浓度与抑制活性关系进行研究。结果　玉
蜀黍苞叶和玉米棒乙酸乙酯部位抑制α－葡萄糖苷酶活性（ＩＣ５０＝２７５．５和２３３．５ｍｇ／Ｌ）均高于阳性对照阿卡波糖
（ＩＣ５０＝１　１０３．１ｍｇ／Ｌ），且苞叶乙酸乙酯部位抑制活性低于玉米棒乙酸乙酯部位。结论　玉蜀黍苞叶和玉米棒乙
酸乙酯部位均有好的α－葡萄糖苷酶抑制活性。
关键词：玉蜀黍；α－葡萄糖苷酶；抑制活性
中图分类号：Ｒ２８４．２　　　文献标识码：Ａ 文章编号：１６７２－７６０６（２０１２）０２－００８８－０３
　收稿日期：２０１２－０１－２５
　基金项目：河南省科技厅重点项目（１０２１０２３１００１９）。
　作者简介：尹震花（１９８６－），女，河南新乡人，硕士研究生，从事天然药物活性成分的科研工作。
　＊通讯作者：康文艺（１９７１－），男，黑龙江尚志人，博士，教授，从事天然药物活性成分的研究工作。
α－Ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｂｒａｃｔｓ　ａｎｄ　ｂａｒｓ　ｏｆ
Ｚｅａ　ｍａｙｓ　Ｌ．
ＹＩＮ　Ｚｈｅｎ－ｈｕａ１，ＧＵ　Ｘｕｅ－ｚｈｕ２，ＧＵ　Ｈａｉ－ｐｅｎｇ１，ＫＡＮＧ　Ｗｅｎ－ｙｉ　１＊
（１．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍａｔｅｒｉａ，Ｈｅｎａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｋａｉｆｅｎｇ，Ｈｅｎａｎ　４７５００４，Ｃｈｉｎａ；２．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍａ－
ｔｅｒｉａ　Ｍｅｄｉｃａｌ，Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００７００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅαｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｂｒａｃｔｓ　ａｎｄ　ｂａｒｓ　ｏｆ　Ｚｅａ　ｍａｙｓ
Ｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｂｙ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇα－ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｍｏｄｅｌ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ，ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｂｒａｃｔｓ　ａｎｄ　ｂａｒｓ
ｏｆ　Ｚ．ｍａｙｓ　Ｌ　ｗｅｒｅ　ｓｃｒｅｅｎｅｄ．Ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｏｆ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｒａｔｉｏ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ａｌｓｏ　ｓｔｕｄｉｅｄ．
Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｂｒａｃｔｓ　ａｎｄ　ｂａｒｓ　ｏｆ　Ｚ．ｍａｙｓ　Ｌ　ｈａｄ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｒ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ　ａｃｔｉｖｉｔｙ（ＩＣ５０＝
２７５．５ａｎｄ　２３３．５ｍｇ／Ｌ）ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｏｆ　ａｃａｒｂｏｓｅ（ＩＣ５０＝１　１０３．０１ｍｇ／Ｌ），ａｎｄ　ｔｈｅ　ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｒｏｍ　ｂｒａｃｔｓ
ｈａｄ　ｌｏｗｅｒ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｔｈａｎ　ｔｈｅ　ｂａｒｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｂｒａｃｔｓ　ａｎｄ　ｂａｒｓ　ｏｆ　Ｚ．
ｍａｙｓ　Ｌ　ｈａｖｅ　ｇｏｏｄα－ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ａｃｔｉｖｉｔｙ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｚｅａ　ｍａｙｓ　Ｌ；α－ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ；Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ａｃｔｉｖｉｔｙ
　　玉蜀黍苞叶为禾本科植物玉蜀黍（Ｚｅａ　ｍａｙｓ　Ｌ．）
的鞘状苞叶，具有消热利尿、和胃之功效，主治尿路结
石、水肿、胃痛吐酸。玉蜀黍为禾本科植物玉蜀黍
（Ｚ．ｍａｙｓ　Ｌ．）的种子，全国各地广泛栽培，具有调中
开胃、利尿消肿之功效，主治食欲不振、小便不利、水
肿、尿路结石；玉米轴为禾本科植物玉蜀黍（Ｚ．ｍａｙｓ
Ｌ．）的穗轴，具有健脾利湿之功效，主治消化不良、泻
痢、小便不利、水肿、脚气、小儿夏季热、口舌糜烂［１］；
玉蜀黍和玉米轴组成玉米棒［１］。检索文献发现，国内
外关于玉蜀黍苞叶和玉米棒的化学成分和药理作用
的报道甚少，主要集中在玉米须的研究，只有许钢［２］
报道了玉蜀黍苞叶和玉米轴含有黄酮类化合物且具
有抗氧化作用，玉米粒没有抗氧化活性。关于玉蜀黍
苞叶和玉米棒的α－葡萄糖苷酶抑制活性研究未见报
道。
α－葡萄糖苷酶抑制剂可有效降低餐后高血糖，如
今已作为治疗Ⅱ型糖尿病的有效药物类型［３］。我们利
用体外α－葡萄糖苷酶抑制筛选模型对玉蜀黍苞叶和玉
DOI:10.15991/j.cnki.41-1361/r.2012.02.005
尹震花，等：玉蜀黍苞叶和玉米棒提取物α－糖苷酶抑制活性 ８９　
米棒提取物进行了α－葡萄糖苷酶的抑制活性研究，以
期为玉蜀黍苞叶和玉米棒的开发利用提供科学依据。
１　仪器与材料
１．１　仪器
Ｍｕｌｔｉｓｋａｎ　ＭＫ３酶标仪（美国Ｔｈｅｒｍｏ　Ｅｌｅｃｔｒｏｎ
公司）；ＬＲＨ－１５０恒温培养箱（上海一恒科技有限公
司）；ＤＥＬＴＡ　３２０型ｐＨ 计和电子天平（美国 Ｍｅｔｔ－
ｌｅｒ－Ｔｏｌｅｄｏ公司）。
１．２　材料
α－葡萄糖苷酶（α－ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ，ＥＣ　２３２－６０４－７）、
４－硝基苯－α－Ｄ－吡喃 葡 萄 糖 苷 （４－Ｎ－ｔｒｏｐｈｅｎｙｌ－α－Ｄ－
ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ，ＰＮＰＧ，０２６－Ｋ１５１６）、阿 卡 波 糖
（Ａｃａｒｂｏｓｅ，Ｌｏｔ　１６８６９）、二甲亚砜（ＤＭＳＯ）均购自美
国Ｓｉｇｍａ公司。
玉蜀黍苞叶和玉米棒均于２０１０年９月采集于河
南大学药用植物园，由河南大学中药研究所李昌勤副
教授鉴别为禾本科植物玉蜀黍（Ｚｅａ　ｍａｙｓ　Ｌ．）的鞘
状苞叶和玉米棒，标本存于河南大学中药研究所。
２　实验方法
２．１　玉蜀黍苞叶和玉米棒浸膏的提取
将新鲜玉蜀黍苞叶和玉米棒分别切碎，用甲醇加
热回流提取２次，分别为２ｈ、１ｈ，合并提取滤液后浓
缩，得到甲醇总浸膏。总浸膏分散于水中，依次用石
油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，减压浓缩得到玉蜀黍苞
叶石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和玉米棒
石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位。
２．２　α－葡萄糖苷酶抑制活性的筛选方法
２．２．１　标准曲线制作　根据采用的反应体系，用磷
酸缓冲液（ｐＨ　６．８）配制１　０００μｍｏｌ／Ｌ　ＰＮＰ，稀释成
４００、３００、２００、１５０、１００、５０、２５、５、０μｍｏｌ／Ｌ。分别取
９种不同浓度的ＰＮＰ溶液各１６０μＬ，加入０．２ｍｏｌ／Ｌ
Ｎａ２ＣＯ３ 溶液８０μＬ，混匀，在４０５ｎｍ下测定ＯＤ值，
测３组取平均值。以ＯＤ值为纵坐标，对硝基苯酚浓
度为横坐标，做出标准曲线。
２．２．２　α－葡萄糖苷酶活力的测定　根据所采用的反
应体系：１１２μＬ磷酸钾缓冲液（ｐＨ　６．８），加入２０μＬ
２００Ｕ／Ｌα－葡萄糖苷酶，８μＬ　ＤＭＳＯ，３７℃恒温１５
ｍｉｎ后加入２．５ｍｍｏｌ／Ｌ　ＰＮＰＧ　２０μＬ，摇匀，３７℃恒
温反应１５ｍｉｎ。再加入８０μＬ　０．２ｍｏｌ／Ｌ的Ｎａ２ＣＯ３
溶液，于４０５ｎｍ波长处测ＯＤ值。
酶活力单位定义：３７℃、ｐＨ　６．８条件下，１ｍｉｎ
水解底物所产生１μｍｏｌ对硝基苯酚的酶量，规定为
一个酶活力单位（Ｕ）［４］。
２．２．３　检测方法　将玉蜀黍苞叶和玉米棒各提取物
以ＤＭＳＯ溶解，并存储于４℃冰箱中。以张丽等［５－７］
建立的９６微孔板筛选方法，４０５ｎｍ处检测其ＯＤ
值。同时做相同体系下的样品空白组，不加样品、酶
与底物的空白对照组、不加样品的阴性对照组和以阿
卡波糖为抑制剂的阳性对照组。并用Ｏｒｉｇｉｎ　６．０软
件求出相应的ＩＣ５０值。酶活性抑制率 （％ ）＝
（ＯＤ样品阴性－ＯＤ样品空白）／（ＯＤ阴性－ＯＤ空白）×１００％。
３　结果与讨论
３．１　不同提取部位的活性比较分析
图１显示，在初筛浓度１　５００ｍｇ／Ｌ下，玉蜀黍苞
叶和玉米棒不同提取部位及阿卡波糖对α－葡萄糖苷
酶抑制率从大到小依次为苞叶乙酸乙酯部位＞玉米
棒乙酸乙酯部位＞阿卡波糖＞苞叶石油醚部位＞玉
米棒正丁醇部位＞玉米棒石油醚部位＞苞叶石油醚
部位。
图１　不同提取物α－葡萄糖苷酶抑制活性比较
９０　 河南大学学报（医学版），２０１２年，第３１卷第２期
　　表１表明，玉蜀黍苞叶和玉米棒的乙酸乙酯部位
抑制α－葡萄糖苷酶活性较好（ＩＣ５０分别为２７５．５和
２３３．５ｍｇ／Ｌ），远高于阳性对照阿卡波糖（ＩＣ５０＝
１　１０３．１ｍｇ／Ｌ），且玉米棒乙酸乙酯部位的活性（ＩＣ５０
为２３３．５ｍｇ／Ｌ）大于玉蜀黍苞叶乙酸乙酯部位（ＩＣ５０
为２７５．５ｍｇ／Ｌ），石油醚部位和正丁醇部位初筛抑制
率均低于５０％，均未进入复筛，ＩＣ５０未测定。
以上结果分析说明，不同提取部位α－葡萄糖苷
酶抑制活性有很大差别，不同溶剂提取对植物活性有
影响，且初筛活性与ＩＣ５０值评价时活性不同。初筛时
玉蜀黍苞叶乙酸乙酯部位的抑制率高于玉米棒乙酸
乙酯部位，但复筛ＩＣ５０值显示，苞叶乙酸乙酯提取部
位抑制α－葡萄糖苷酶活性小于玉米棒乙酸乙酯部
位；玉米棒乙酸乙酯部位的抑制率与阳性对照阿卡波
糖接近，但玉米棒乙酸乙酯部位抑制α－葡萄糖苷酶
活性是阿卡波糖的４．７５倍。因此评价活性时应采用
较为客观的ＩＣ５０值作为指标。
表１　各提取物α－葡萄糖苷酶抑制活性
样品 提取物 初筛浓度／（ｍｇ／Ｌ） 抑制率／％ ＩＣ５０
玉蜀黍苞叶 石油醚部位 １　５００　 ３８．０９ －
乙酸乙酯部位 １　５００　 ８３．２９　 ２７５．５
正丁醇部位 １　５００　 １０．６３ －
玉米棒 石油醚部位 １　５００　 １７．７３ －
乙酸乙酯部位 １　５００　 ５９．０３　 ２３３．５
正丁醇部位 １　５００　 ２９．８２ －
阳性对照 阿卡波糖 １　５００　 ５５．６３　 １　１０３．０１
　　　　　　　　注：－表示未测定。
３．２　提取物质量浓度对α－葡萄糖苷酶抑制活性的
影响
图２　提取物浓度对α－葡萄糖苷酶活性的影响
图２显示，在一定实验浓度范围内，玉蜀黍苞叶
和玉米棒乙酸乙酯部位对α－葡萄糖苷酶抑制率均随
浓度增加而增大，且呈剂量依赖性，当质量浓度为
０．７５ｇ／Ｌ时，抑制率分别增加到７７．９８％和８４．７６。
此后再增加提取物浓度苞叶乙酸乙酯部位抑制率缓
慢增加，而玉米棒乙酸乙酯部位抑制率开始下降。
以上说明苞叶和玉米棒乙酸乙酯部位具有较好
的α－葡萄糖苷酶抑制活性，活性成分可能存在于乙酸
乙酯部位，具有进一步开发的价值，可以采用活性追
踪方法对这部分进行分离纯化研究。
参考文献：
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α－ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ａｎｄ　ａｎｔｉｈｙｐｅｒｇｌｙｃｅ－
ｍｉｃ　ｏｆ　Ｔｒａｐａ　ａｃｏｒｎｉｓ　ｓｈｅｌ　ｉｎ　ａｌｏｘａｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｒａｔｓ
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［责任编辑　姬　荷］