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薏苡非种仁部位及不同产地不同采收期茎中多糖的含量测定



全 文 :收稿日期:2008-09-11; 修订日期:2008-12-30
基金项目:国家科技支撑计划重点项目(No.2007BAI25B05);
国家中医药管理局(No.06-07ZP43);
四川省青年基金项目(No.07ZQ026-011)
作者简介:李厚聪(1984-),男(土家族), 湖北巴东人, 现为西南民族大学
在读硕士研究生 ,主要从事民族药物研究工作.
*通讯作者简介:刘 圆(1968-), 女(汉族),重庆忠县人 , 现任西南民族
大学化学与环境保护工程学院副教授 ,博士学位 ,主要从事少数民族药物
的研究工作.
薏苡非种仁部位及不同产地
不同采收期茎中多糖的含量测定
李厚聪 ,刘 圆* ,李 莹
(西南民族大学少数民族药物研究所 ,四川 成都 610041)
摘要:目的 对薏苡非种仁部位(根 、茎和叶)及不同产地 、不同采收期茎的多糖进行含量测定 ,并进行品质评价 , 寻找薏
苡新的药用部位。方法 采用苯酚 -硫酸法。结果 非种仁部位中多糖含量分别为:根 54.374mg· g-1 ,茎 56.932 2mg·
g-1和叶 52.754 9 mg· g-1;不同产地茎中多糖含量分别为:陕西汉中汉台区 82.775 9 mg· g-1 , 广西恭城 79.766 1 mg·
g-1 , 云南大度岗 74.305 2mg· g-1 ,四川峨眉山 69.89mg· g-1 ,四川成都中医药大学植物园 63.378 4mg· g-1 , 四川新津
59.698 6 mg· g-1 , 云南景洪 55.782 9 mg· g-1 ,湖北恩施 52.754 9mg· g-1 ,四川大学华西植物园 38.585 1mg· g-1;不
同采收期(6 ~ 11月)茎中多糖含量呈递增趋势。结论 非种仁部位多糖含量中 ,根 、茎和叶的含量差异不大 , 并稳定在比
较高的水平上 , 从资源的综合和可持续利用的角度考虑 , 建议薏苡的非种仁部位可作为薏苡多糖的稳定来源 , 可以入药;
不同产地中薏苡茎的多糖含量差异较大 ,说明产地的气候 、土壤等条件对薏苡多糖含量有明显影响;不同采收期(6 ~ 11
月)中薏苡茎的多糖含量随着时间的推移而逐渐增加 , 表明薏苡花期(7 ~ 9月)、果期(8 ~ 10月)间多糖积累增多。
关键词:薏苡; 根; 茎; 叶; 多糖; 含量
中图分类号:R284.2  文献标识码:A  文章编号:1008-0805(2009)07-1601-02
DeterminationofPolysaccharidesinRoot, StemandLeaf, DifferentPlacesandDiferent
ColectingTimefromCoixlacryma-jobiL.var.mayuen(Roman.)Stapf
LIHou-cong, LIUYuan* , LIYing
(EthnicPharmaceuticalInstituteofSouthwestUniversityforNationalities, Chengdu610041 , China)
Abstract:ObjectiveTodeterminepolysaccharidesfromroot, stemandleafofC.lacryma-jobiL.var.mayuen(Roman.)Stapf, evaluateitsqualityandfindnewmedicalrecource.MethodsThephenol-sulfuricacidmethodwasadopted.ResultsThe
contentofpolysaccharidesfromroot, stemandleafofC.lacryma-jobiL.var.mayuen(Roman.)Stapfwas54.374 mg· g-1 ,
56.932 2mg· g-1and52.754 9 mg· g-1 respectively.Thecontentofpolysaccharidesindiferentplaceswasasfolow:Hantaiof
HanzhonginShanxiProvinceof82.775 9mg· g-1 , GongchenginGuangxiProvinceof79.766 1mg· g-1 , DaduganginYunnan
Provinceof74.305 2mg· g-1 , EmeiMountaininSichuanProvinceof69.89mg· g-1 , theMedicalPlantGardenofTraditional
ChineseMedicalUniversityinSichuanProvinceof63.378 4 mg· g-1 , XinjininSichuanProvinceof59.698 6 mg· g-1 , Jing-
honginYunnanProvinceof55.782 9 mg· g-1 , EnshiinHubeiProvinceof52.754 9mg· g-1 , theWestChinaMedicalyPlant
GardenofSichuanUniversityinSichuanProvinceof38.585 1 mg· g-1.Thecontentofpolysaccharidesindiferentcolecting
time(fromJunetoNovember)wasincreased.ConclusionThismethodissimple, accurate, reproducibleandsuitableforthede-
terminationofpolysaccharidesinC.lacryma-jobiL.var.mayuen(Roman.)Stapf.Consideredthepolysaccharides, theroot,
stemandleafofC.lacryma-jobiL.var.mayuen(Roman.)Stapfcanbemedicalusedforpolysaccharideresources.Thecon-
tentofpolysaccharidesindiferentplacesisdifferent, anditscontentcanbeobviouslyinfluencedbyitssurroundings.Theresults
indiferentcollectingtime(fromJunetoNovember)showedthatthecontentpolysaccharidesfromitsflowerphase(fromJulyto
September)andfruitphase(fromAugusttoOctober)isincreasing.
Keywords:C.lacryma-jobiL.var.mayuen(Roman.)Stapf; Root; Stem; Leaf; Polysaccharides; Content
  薏苡为禾本科薏苡属植物薏苡 Coixlachrymal-jobiL.的干
燥全草 、果实和种仁。 《中国药典 》从 1963年版开始收载禾本科
植物薏苡 Coixlacryma-jobiL.var.mayuen(Roman.)Stapf的干
燥成熟种仁;2005年版《中国药典》记载薏苡仁粉末的鉴别 、油脂
类成分的薄层鉴别和甘油三油酸酯的含量测定项;其功效为健脾
渗湿 、除痹止泻 、清热排脓;主要用于水肿 、脚气 、小便不利 、湿痹
拘挛 、脾虚泄泻 、肺痈 、肠痈 、扁平疣的治疗 [ 1] 。 薏苡根被收载于
1994年版《上海市中药材标准》中。
薏苡仁及薏苡根中含有丰富的多糖成分。 国内外学者从薏
苡中分离得到多糖成分 ,经现代药理学研究证明这些多糖成分具
有免疫兴奋 、抗补体活性以及降血糖等多种药理作用 [ 2 ~6] 。
薏苡的根 、茎 、叶 、果实 、种仁等药用部位在蒙古族 、藏族 、苗
族 、彝族 、侗族 、佤族 、傈僳族 、傣族 、壮族 、毛难族、瑶族 、哈尼族 、景
颇族 、水族 、基诺族等民族中均有大量使用, 薏苡根功用与薏苡仁
基本相同 ,清热 ,利尿并有驱虫作用 ,能治虫积腹痛 , 薏苡叶具有降
压等作用 [ 7] , 而现有文献中 ,薏苡根 、茎、叶的研究涉及较少。
目前对薏苡非种仁部位中多糖的研究报道很少 ,仅见于刘春
兰等 [ 8]对薏苡根中水溶性多糖的研究 , 发现其单糖组成为阿拉
伯糖 、鼠李糖 、甘露糖 、半乳糖和葡萄糖。本课题拟以多糖为指
标 , 对薏苡非种仁药用部位及不同产地 、不同采收期茎进行品质
评价 , 以期能寻找到薏苡新的药用部位。
1 仪器与试剂
UnicamUV-500(Thermoelectroncorporation)紫外 -可见分
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2009VOL.20NO.7 时珍国医国药 2009年第 20卷第 7期
光光度计;METTLERAE240电子分析天平(梅特勒 -托利多仪
器(上海)有限公司);SHB-3循环多用真空泵(郑州杜甫仪器
厂);SENCO·R系列旋转蒸发仪(上海申生科技有限公司);
DHG-9240A型电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公
司);800型离心沉淀器(上海手术器械厂)。
(+)葡萄糖(AR, 105 ℃干燥至恒重);4%重蒸苯酚溶液(使
用前配制);其他试剂均为国产分析纯。 薏苡药材样品来源见
表 2,经刘圆 、戴斌 、彭朝忠副教授鉴定。
2 方法与结果
2.1 葡萄糖标准曲线的绘制 称取干燥至恒重的葡萄糖标准品
28.11mg,精密称定 , 置 100 ml容量瓶中 ,加蒸馏水稀释至刻度 ,
配成浓度为 281.1μg· ml-1的对照品溶液 ,贮藏备用。精密吸取
3.0 , 5.0 , 7.0 , 9.0 , 11.0 , 13.0ml的葡萄糖标准溶液分别置于
50 ml容量瓶中 , 稀释至刻度 ,再精密吸取 1.0 ml于具塞试管中。
分别滴加 4.0 %苯酚溶液 1.0 ml,摇匀 ,迅速分别滴加浓硫酸 5.0
ml, 摇匀后置沸水浴中加热 30 min, 取出用冰水浴迅速冷却至室
温后 , 以蒸馏水显色溶液为空白 ,于 490 nm处测定吸光度值。以
取样量 X(mg)为横坐标 , 吸光度 Y为纵坐标绘制标准曲线 , 得回
归方程为:Y=4.991 1X-0.025 1(r=0.999 8)。结果表明 , 在
0.016~ 0.064 mg范围内 , 葡萄糖取样量与吸收度呈良好线性
关系。
2.2 换算因子的测定 精密称取 40℃干燥至恒重的薏苡多糖 50
mg,置 100 ml容量瓶中 , 用水稀释至刻度 , 摇匀。经脱蛋白 、脱
色 、去小分子等处理后 ,精密量取处理后溶液的体积 ,精密吸取处
理液 0.5 ml按标准曲线项下操作 , 测定吸光度 , 求出薏苡多糖供
试液中葡萄糖浓度 , 按公式 f=W/C×D计算换算因子 , 式中 W
为多糖质量(g), C为多糖液中葡萄糖的浓度(μg· ml-1), D为
多糖的稀释倍数。结果 f=2.153。
2.3 样品溶液的制备 按照前期优化的薏苡多糖的提取工艺 ,分
别精密称取薏苡药材粉末(过 2号筛)0.5 g,置 100 ml圆底烧瓶
中 , 分别加入 15 ml石油醚脱脂 30 min, 回收石油醚 , 蒸干得残
渣 , 加 20倍蒸馏水回流提取 2次 , 1.5 h/次。合并滤液 ,稀释 ,定
容至 500 ml的容量瓶中 ,作为样品溶液。
2.4 精密度实验 取同批样品溶液 , 重复测定吸光度 5次 , RSD
为 1.06 %。结果表明精密度良好。
2.5 稳定性实验 取样品溶液适量 , 显色后每隔 0.5 h测定 1次
吸光度 , 共 6次 ,结果薏苡多糖在显色后 3.0 h内稳定性良好。
2.6 重复性实验 分别取同一批样品 , 制备样品溶液 , 分别测定
吸光度 , 结果 RSD为 0.86 %(n=5)。结果表明重复性良好。
2.7 加样回收率实验 精密吸取 1 ml样品液分别置于 5个容量
瓶中 , 分别精密吸取 0.1, 0.2 , 0.3 , 0.4 , 0.5 ml葡萄糖标准溶
液 , 按标准曲线项下方法 , 自 “加苯酚试剂 1 ml”起操作 , 测定吸
收度 , 计算多糖回收率为 98.62 %, RSD为 1.27%(n=5)。
2.8 样品含量测定 精密称取不同部位及不同产地和不同采收
期茎的 19批薏苡药材 0.5 g, 按 “ 2.3”项下方法制备样品溶液。
精确量取样品液 0.5 ml, 按 “ 2.1”项下方法 , 自 “加苯酚试剂 1
ml”起操作 ,测定吸收度 , 按下式计算多糖含量。结果见表 1 ~ 3。
多糖含量(%)=C×D×f/W×100%
式中:C为样品溶液的葡萄糖的浓度(μg);D为样品溶液的
稀释倍数 , f为换算因子 , W为样品的重量(μg)。
表 1 不同药用部位的薏苡多糖含量(湖北恩施海拔 950m)
mg· g-1
部位 多糖含量
根 54.374 0
茎 56.932 2
叶 52.754 9
实验结果表明 , 根 、茎和叶的含量差异不大 , 但含量均比
较高。
表 2 不同产地茎中的薏苡多糖含量
产地 海沷l/m 多糖含量 C/mg· g-1
陕西汉中汉台区 1 300 82.775 9
四川峨眉山 1 200 69.89
四川新津 470 59.698 6
广西恭城 500 79.766 1
云南大度岗 1 300 74.305 2
四川成都中医药大学植物园 524 63.378 4
四川大学华西植物园 494 38.585 1
湖北恩施 950 52.754 9
云南景洪 570 55.782 9
  
实验结果表明 ,不同产地间薏苡茎的多糖含量差异较大 。
表 3 不同采收期茎中的薏苡多糖含量(华西药用植物园海拔 494m)
采收期 多糖含量 C/mg· g-1
6月 56.932 2
7月 59.354 2
8月 61.080 4
9月 67.546 8
10月 67.795 2
11月 74.364 5
结果表明 ,不同采收期(6 ~ 11月)的薏苡多糖含量呈递增的
趋势。
3 讨论
用热水浸提薏苡多糖时 , 很容易使部分多糖发生水解 , 从而
破坏多糖的活性结构 ,所以用水反复浸提比较合适。还有报道提
取多糖时采用不同 pH值的水溶液提取 , 但是不同 pH值的水溶
液对多糖结构和药理的影响不清楚 ,所以我们采取的是中性水溶
液提取 。
用透析袋除去小分子后的多糖溶液经显色后 ,测定吸光度值
出现负值 , 可能是选择的透析袋规格不对 , 而薏苡多糖的分子量
比较小 ,使大量的多糖被透析损失掉。
不同药用部位多糖含量中 ,根 、茎和叶的含量差异不大 ,并稳
定在比较高的水平上 ,从资源的综合和可持续利用的角度考虑 ,
建议:薏苡的非种仁部位可作为薏苡多糖的稳定来源 , 可以入药。
不同产地中薏苡茎的多糖含量差异较大 , 说明产地的气候 、
土壤等条件对薏苡多糖含量有明显影响;由于大多数样品均是野
生 , 很难控制其正确的生长期 , 所以正在进行栽培种的进一步
研究。
不同采收期(6 ~ 11月)中薏苡茎的多糖含量随着时间的推
移而逐渐增加 ,表明薏苡花期(7 ~ 9月)、果期(8 ~ 10月)间多糖
积累增多。由于采样不全的原因 , 其它月份正在进一步的研究
之中。
参考文献:
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时珍国医国药 2009年第 20卷第 7期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2009VOL.20NO.7