全 文 ：Tianjin Med J, November 2015, Vol. 43 No. 11
薏苡茎醇提取物对荷 H22小鼠体内抗肿瘤作用
黄挺章 1，李远辉 1，郭圣奇 1，卢善善 2，齐梁煜 1，冯雪萍 3，黄锁义 4△
摘要：目的 研究薏苡茎醇提取物对荷 H22小鼠体内抗肿瘤作用。方法 采用小鼠肝癌 H22腹水型瘤细胞建立
荷瘤小鼠动物模型，将 84只模型小鼠随机均分为薏苡茎醇提取物剂量 1~5组、模型对照组、环磷酰胺组，分别灌胃
薏苡茎醇提取液 10、8、6、4、2 g/kg，等体积生理盐水和环磷酰胺 0.02 g/kg，每日 1次，连续 8 d。观察小鼠的活动能
力、腹部膨隆大小及出现的时间、毛发和摄食、饮水量变化等情况。测量荷 H22小鼠的实体瘤质量，计算抑瘤率，并计
算肝脏指数、脾脏指数和胸腺指数。结果 模型对照组最先出现腋下肿瘤鼓起且生长最快，自主活动减少、食欲下
降、毛色开始暗淡等反应，剂量 1、2组次之，剂量 5组和环磷酰胺组最慢。薏苡茎醇提取物剂量 1~5组瘤质量[分别
为（0.47±0.18）、（0.37±0.13）、（0.34±0.10）、（0.30±0.11）、（0.28±0.09）mg]均低于模型对照组(0.60±0.21)mg[F=5.700，P＜
0.05]，薏苡茎醇提取物剂量 1~5组、环磷酰胺组抑瘤率依次升高（分别是 21.67%、38.33%、43.33%、50.00%、53.33%和
60.00%）。环磷酰胺组和薏苡茎醇提取物组的肝脏指数、脾脏指数和胸腺指数均低于模型对照组（剂量 1组脾脏指
数除外）；薏苡茎醇提取物各剂量组的肝脏指数低于环磷酰胺组，脾脏指数、胸腺指数与环磷酰胺组差异无统计学意
义。结论 薏苡茎醇提取物对荷 H22小鼠体内肿瘤和肝脏损害有抑制作用。
关键词：抗肿瘤药(中药)；薏苡；薏苡茎；醇提取物；H22；体内抗肿瘤；环磷酰胺
中图分类号：R285.5 文献标志码：A DOI：10.11958/j.issn.0253-9896.2015.11.015
The anti-tumor effect of Coix stalk alcohol extraction on H22 tumor-bearing mice
HUANG Tingzhang1, LI Yuanhui1, GUO Shengqi1, LU Shanshan2, QI Liangyu1, FENG Xueping3, HUANG Suoyi4△
1 School of Clinical Medicine, 2 College of Nursing, 3 Experimental Animal Center,
4 School of Pharmacy, Youjiang Medical University for Nationalities, Baise, Guangxi 533000, China
△Corresponding Author E-mail:huangsuoyi@163.com
Abstract: Objective To study the anti-tumor effects of alcohol extraction of Coix stalk objects on H22 tumor-bearing mice.
Methods The animal model of tumor bearing mice with H22 ascitic tumor cells was established. Eighty-four model mice were
randomly and equally divided into Coix stalk extract groups 1-5 (10, 8, 6, 4 and 2 g/kg), model control group and cyclophosphamide
group. Mice were treated orally with Coix stalk alcohol extraction solution (10, 8, 6, 4 and 2 g/kg), cyclophosphamide 0.02 g/kg
and normal saline once a day for 8 days for Coix stalk extract group, cyclophosphamide group and model control group. The mouse
activity, the size and the appearance of time of abdominal swelling, and changes of hair, feeding and drinking water quantity were
observed in groups of mice. The solid tumor mass was measured in H22 tumor-bearing mice. The tumor inhibitory rate, liver index,
spleen index and thymus index were calculated. Results The axillary tumor muster was found first in model control group with
the fastest growth, reduced independent activity, decreased appetite and dim in hair color, followed by the Coix stalk extract group
1 and group 2. The last was Coix stalk extract group 5 and cyclophosphamide group. The solid tumor mass were (0.47±0.18), (0.37±
0.13), (0.34±0.10), (0.30±0.11) and (0.28±0.09) mg for Coix stalk alcohol extract groups 1-5, which were significantly lower than
those of model control group (0.60 mg±0.21 mg, F=5.700，P＜0.05). The tumor inhibition rates were 21.67%, 38.33%, 43.33%,
50.00%, 53.33% and 60.00% in Coix stalk extract groups 1-5 and cyclophosphamide group. The liver index, spleen index and
thymus index were lower in cyclophosphamide group and Coix stalk alcohol extract groups than those of model control group (except
for the spleen index of Coix stalk extract group 1). The liver index was lower in Coix stalk ethanol extract groups than that of
cyclophosphamide group. There were no significant differences in the spleen index, thymus index between Coix stalk ethanol extract
groups and cyclophosphamide group. Conclusion Coix stalk alcohol extract has inhibitory effects on the tumor and liver damage
in H22 mice.
Key words: Antineoplastic Drugs (TCD); COIX LACRYMA-JOBI L; Coix stalk; alcohol extract; H22; anti tumor in vivo;
cyclophosphamide
基金项目：国家自然科学基金资助项目（81360684）；广西自然科学基金资助项目（2011GXNSFA018046）；广西中医药科技专项资助课题（GZKZ10-
128）；广西教育厅课题（201106LX425）；广西中医药管理局课题（gzzc1047）；广西医学科学实验中心开放基金专项资助项目（KFJJ2011-04）
作者单位：1广西百色市右江区，右江民族医学院临床学院（邮编533000），2护理学院，3实验动物中心，4药学院
作者简介：黄挺章(1988)，男，大学本科在读，主要从事天然产物化学、药物化学、中药药理学等研究
△通讯作者 E-mail: huangsuoyi@163.com
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天津医药2015年11月第43卷第11期
薏苡(Coix lacryma-jobiL.)属禾本科薏苡属，为禾
本科 1 年生或多年生草本。而薏苡仁(SemeCoicis)
为薏苡的干燥成熟种仁，其味甘、淡，性微寒，有健脾
利湿、清热排脓功能。薏苡是一种中草药，有很多药
用功效，其全身是宝，薏苡根功用与薏苡仁基本相
同，清热、利尿并有驱虫作用、能治虫积腹痛，薏苡叶
具有降压等作用[1]；薏苡茎可防治麻疹、湿疹等[2]。近
年来，对于薏苡抗肿瘤的作用已被世人关注，但是，
目前国内外对于薏苡抗肿瘤的研究主要集中于薏苡
仁上[3-4]，而对薏苡仁以外的其他部分的抗肿瘤作用
研究较少，特别是薏苡茎的抗肿瘤作用仅见于相关
体外抗肿瘤作用研究[5]，而未见其体内抗肿瘤作用的
报道。本实验采用 H22肝癌细胞制备荷 H22小鼠肿
瘤模型，研究薏苡茎醇提取物的体内抗肿瘤作用。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 药材 薏苡茎购自广西百色市西林县,经右江民族医
学院民族医药教研室覃道光副教授鉴定为禾本科薏苡属薏
苡 Coix lacryma - jobiL. var. mayuen ( Roman. ) Stapf药材。
1.1.2 试剂与仪器 环磷酰胺(CTX)购自山西普德药业股份
有限公司（批号：04131203,规格：0.2 g）；EL-204型万电子天
平购自梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司，BCW-1000型生
物净化工作台、BW-CJ-1K型空气净化器均购自苏州华宏净
化技术有限公司。
1.1.3 动物与瘤细胞株 清洁级健康昆明种小鼠，雌雄不
限，6~8周，平均体质量（20±2）g，由我院实验动物中心提供
（生产许可证：SCXK桂 2012-0003），适应性喂养 1周后用于
实验；小鼠腹水型 H22肝癌细胞株由广西医科大学基础医学
院微生物教研室提供，小鼠腹水传代，每 7~9 d传代 1次。
1.2 方法
1.2.1 薏苡茎醇提取物的制备 参考文献[6]，称取薏苡茎粉
末 200 g，加 10倍质量 75%乙醇，密闭室温侵泡 2 h后，冷凝
回流 1 h，过滤取滤液；滤渣再加 75%乙醇（量为第 1次的一
半），冷凝回流 1 h，过滤取滤液，合并 2次滤液，并将乙醇挥
发直到不再闻到乙醇气味再浓缩至 200 mL（1 mL 含生药
1.00 g），为薏苡茎醇提取液，置于 4 ℃冰箱保存备用。
1.2.2 肝癌 H22细胞的选取及保种 参考文献[7]，在选取原
肝癌 H22细胞时，应当挑选腹水为乳白色无絮状沉淀物者为
佳，如腹水为血性则不能进行下述实验。用成乳黄色的原肝
癌 H22细胞来进行保种。将原肝癌 H22细胞接种到正常的小
白鼠腹腔中，培养几天后，肝癌细胞数增加，再从该小鼠腹腔
中取腹水，腹水中就包含有癌细胞，即肝癌细胞液。
1.2.3 荷 H22瘤小鼠模型的建立 参考文献[8]，取健康昆明
小鼠，采用小鼠肝癌 H22腹水型瘤细胞株，选择腹腔接种 7~9
d，取生长良好的肝癌 H22的小鼠，颈椎脱臼处死，在无菌条件
下，用碘酒、乙醇消毒小鼠腹部皮肤，抽取腹水，按常规方法
用无菌生理盐水稀释成含细胞数约为 1.0×107 /mL的 H22瘤
细胞悬液，采用台盼蓝染色法，显微镜下计数细胞存活率不
低于 95%。将稀释好的 H22瘤细胞悬液接种于健康小鼠右前
腋皮下，每只接种 0.2 mL，造成荷 H22瘤小鼠模型。
1.2.4 动物分组与给药 参考文献[9]，将接种 24 h后的荷
H22瘤小鼠按随机单位组设计分组法分成薏苡茎醇提取物剂
量 1~5组、模型对照组、环磷酰胺组共 7组，每组 12只，雄雌
各半。其中薏苡茎醇提取物剂量 1~5 组分别灌胃剂量为
10、8、6、4、2 g/kg，环磷酰胺组灌胃环磷酰胺 0.02 g/kg，模型
对照组灌胃等体积生理盐水，每日 1次，连续 8 d。
1.2.5 荷 H22小鼠生活状况的观察 每日观察小鼠活动能力、
腹部膨隆大小及出现时间、毛发和摄食、饮水量变化等情况。
1.2.6 薏苡茎醇提取物对荷 H22小鼠肉瘤的影响 参考文献
[9]，末次给药 24 h后对每只小鼠进行称质量，然后颈椎脱臼
处死，剥离瘤块，取肿瘤组织，用滤纸吸净其上液体，称瘤块
质量，计算抑瘤率：抑瘤率(%) = (对照组平均瘤质量-给药组
平均瘤质量)/对照组平均瘤质量×100%。
1.2.7 荷 H22小鼠各器官的测定 将小鼠解剖称取肝脏、脾
脏和胸腺质量，计算小鼠的肝脏指数、脾脏指数、胸腺指数
（mg/g），其计算公式为：肝脏（脾脏、胸腺）指数（mg/g）=肝脏
（脾脏、胸腺）质量(mg)/体质量（g）。
1.3 统计学方法 数据采用 SPSS 17.0 软件进行统计学分
析，计量资料以 xˉ ±s表示，多组间比较采用单因素方差分析，
组间多重比较行 LSD-t法，P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 一般情况观察 各组小鼠造模均成功。在接
种 H22肿瘤细胞悬液后的前 3 d，各组小鼠一般状况
无明显差异，均进食良好，反应敏捷，毛色亮泽。自
接种第 4天开始，小鼠开始出现腋下膨隆，出现小瘤
块，自主活动减少，食欲下降，毛色开始暗淡，对外界
刺激反应迟钝等。模型对照组最先出现肿瘤鼓起且
生长最快，以上反应最为明显，剂量 1、2 组小鼠次
之，剂量 5组和环磷酰胺组最慢。每组进食和进水
都在相对减少，环磷酰胺组、薏苡茎醇提取物剂量组
与模型对照组比较，进食和进水量减少较缓。
2.2 薏苡茎醇提取物对荷 H22小鼠肉瘤的影响 薏
苡茎醇提取物剂量组和环磷酰胺组的瘤质量均低于
模型对照组( P < 0.05)，环磷酰胺组的抑瘤率最高，
薏苡茎醇提取物剂量组随薏苡茎醇提取物剂量的降
低，抑瘤率逐渐升高，呈剂量依赖性，但均大于
20.0%，半数抑制浓度（IC50）为 3.92 g/L。见表 1。
2.3 薏苡茎醇提取物对荷 H22小鼠各器官的影
响 除剂量 1组脾脏指数与模型对照组差异无统计
学意义外，剂量 1组的肝脏指数和胸腺指数以及其
余各组的肝脏指数、脾脏指数、胸腺指数均低于模型
对照组（均 P＜0.05）；薏苡茎醇提取物剂量组的肝
脏指数低于环磷酰胺组，脾脏指数、胸腺指数与环磷
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酰胺组差异无统计学意义，见表 2。
3 讨论
薏苡仁有抗肿瘤作用，临床上常用于治疗胃癌、
子宫颈癌、绒毛膜上皮癌等癌症以及多发性疣，而目
前对于薏苡茎的成分探索逐渐增多，其中，薏苡茎可
能含有多糖、黄铜、有机酸、鞘质、三萜、甾体等化学
成分[10]。环磷酰胺是一种抗癌谱广、疗效较好的抗
癌药物，同时也是一种良好免疫抑制剂，已广泛应用
于移植性动物肿瘤实验和临床。本研究采用 H22肝
癌细胞制备荷 H22小鼠肿瘤模型，将不同剂量的薏
苡茎醇提取物组与模型对照组和环磷酰胺组进行比
较，探索薏苡茎醇提取物对荷 H22小鼠体内抗肿瘤
作用。结果显示，模型对照组最先出现腋下肿瘤鼓
起且生长最快，自主活动减少、食欲下降、毛色开始
暗淡等反应，剂量 1组、剂量 2组小鼠次之，剂量 5
组和环磷酰胺组最慢，提示薏苡茎醇提取物可以相
对改善荷 H22小鼠的生活质量。薏苡茎醇提取物剂
量组、环磷酰胺组的瘤质量均明显低于模型对照组，
提示薏苡茎醇提取物对荷 H22小鼠体内肉瘤具有一
定的抑制作用，且薏苡茎醇提取物剂量越低，其抑瘤
率越高，呈剂量依赖性，这可能与薏苡茎醇提取物的
毒副作用有关。另外，本研究结果显示，环磷酰胺组
和薏苡茎醇提取物剂量组的肝脏指数、脾脏指数和
胸腺指数均低于模型对照组（剂量 1组脾脏指数除
外）；薏苡茎醇提取物剂量组的肝脏指数低于环磷酰
胺组，脾脏指数、胸腺指数与环磷酰胺组差异无统计
学意义，提示薏苡茎醇提取物在发挥抑制肿瘤作用
的同时对肝脏也有保护作用，且其对肝脏的保护作
用优于环磷酰胺，而对脾脏和胸腺的作用与环磷酰
胺无明显差异。
综上所述，薏苡茎醇提取物具有抗肿瘤作用，但
薏苡茎醇提取物抗肿瘤的主要成分尚未明确，故仍
有待进一步从有效部位中提取分离出有效成分，并
探究有效成分的抗肿瘤机制，为开发利用我国薏苡
资源，大幅度提高其附加值，也为临床上治疗肿瘤、
研究肿瘤新疗法等提供一定的理论依据。
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783. [朱晓莹,林瑶,黄锁义,等.薏苡茎叶提取物的体外抗肿瘤活
Tab. 2 The effect of H22 bearing on liver, spleen, thymus,
and their indexes
表 2 对荷 H22小鼠肝脏、脾脏、胸腺及其指数的影响
＊P < 0.05；a与模型对照组比较，b与环磷酰胺组比较，P＜0.05
组别
模型对照组
环磷酰胺组
剂量 1组
剂量 2组
剂量 3组
剂量 4组
剂量 5组
F
脾脏质量
（g）
0.18±0.04
0.10±0.03a
0.15±0.04
0.13±0.02
0.12±0.03
0.12±0.03a
0.14±0.03
2.726＊
脾脏指数
（mg/g）
6.55±1.30
3.91±1.14a
5.67±1.25
4.97±0.80a
4.62±1.19a
4.60±1.02a
5.06±1.07a
2.754＊
胸腺质量
（g）
0.11±0.02
0.07±0.02a
0.09±0.02
0.09±0.01
0.09±0.02
0.09±0.02
0.08±0.01
1.789
胸腺指数
（mg/g）
4.05±0.80
2.64±0.47a
3.27±0.81a
3.40±0.39a
3.22±0.67a
3.46±0.71a
3.08±0.37a
1.991
组别
模型对照组
环磷酰胺组
剂量 1组
剂量 2组
剂量 3组
剂量 4组
剂量 5组
F
体质量（g）
27.39±1.80
26.52±1.73
26.67±2.94
25.61±1.70
26.75±1.79
25.67±1.73
27.31±1.83
1.583
肝脏质量（g）
1.52±0.16
1.33±0.12a
1.21±0.19 ab
1.16±0.13 ab
1.22±0.15 a
1.14±0.08 ab
1.27±0.12 a
11.387＊
肝脏指数（mg/g）
55.61±4.89
50.17±4.04a
45.26±3.40ab
45.03±2.67ab
45.55±3.68ab
44.46±4.19ab
46.68±3.42ab
14.199＊
（n=12，xˉ ±s）
组别
模型对照组
环磷酰胺组
剂量 1组
剂量 2组
剂量 3组
剂量 4组
剂量 5组
F
瘤质量（mg）
0.60±0.21
0.24±0.11a
0.47±0.18a
0.37±0.13a
0.34±0.10a
0.30±0.11a
0.28±0.09a
5.700＊
抑瘤率（%）
＿
60.00
21.67
38.33
43.33
50.00
53.33
Tab. 1 Comparison of tumor mass and tumor
inhibition rate between seven groups
表 1 各组荷 H22小鼠瘤质量及抑瘤率比较 （n=12，xˉ ±s）
＊P < 0.05；a与模型对照组比较，P < 0.05
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生长期膳食缺锌小鼠肾细胞凋亡及机制研究
田娟，郭芳，李晓明
摘要:目的 观察膳食缺锌条件下生长期小鼠肾细胞凋亡情况、氧化应激情况及凋亡相关因子 Bcl-2和 Bax的
表达变化，探讨锌缺乏诱发肾细胞凋亡的机制。方法 将刚断乳雄性小白鼠 30只随机分为缺锌组和足锌组，每组
15只。缺锌组喂饲缺锌饲料(0.85 mg/kg)，足锌组喂饲足锌饲料（30 mg/kg）。应用 TUNEL法观察小鼠肾细胞凋亡情
况，计算凋亡指数；分别应用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法测定肾超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛(MDA)含量；
应用蛋白印迹技术检测肾组织中 Bcl-2、Bax蛋白表达变化。结果 与足锌组比较，缺锌组小鼠肾可见 TUNEL阳性
细胞增多，细胞凋亡指数明显增加；抗氧化酶 SOD活性下降，MDA增加，氧化应激反应增强；凋亡相关因子 Bcl-2蛋
白表达量明显下降，Bax蛋白表达量明显上调，Bcl-2/Bax比值下降。结论 生长期膳食缺锌导致肾细胞抗氧化酶活
性降低，氧化应激反应增强及细胞凋亡相关因子 Bcl-2和 Bax蛋白表达改变，最终导致肾细胞发生凋亡。
关键词:锌；细胞凋亡；肾；氧化性应激；bcl-2相关 X蛋白质；缺锌
中图分类号：R737.1 文献标志码：A DOI：10.11958/j.issn.0253-9896.2015.11.016
Study on the mechanism of apoptosis of mouse kidney cells in dietary zinc deficiency during the
growth period
TIAN Juan, GUO Fang，LI Xiaoming
Department of Histology and Embryology, Liaoning Medical College, Jinzhou 121001, China
Abstract: Objective To observe the cell apoptosis, oxidative stress reaction and expressions of Bcl-2 and Bax in kid⁃
ney of dietary zinc deficiency mice during growth period, and discuss the mechanism of renal cell apoptosis induced by zinc
deficiency.Methods Thirty weaning male mice were randomly divided into zinc-deficient group and zinc-adequate group,
and 15 mice for each group. Zinc-deficient group was fed with zinc deficiency diet (0.85 mg/kg), while zinc-adequate group
was fed with enough zinc diet (30 mg/kg). The TUNEL method was applied to observe the cell apoptosis, and the apoptotic in⁃
dex was measured. The content of SOD and MDA were detected to observe the oxidative stress reaction in kidney. The ex⁃
pression levels of Bcl- 2 and Bax protein were detected by Western blot assay. Results Compared with zinc- adequate
group, the cell apoptosis and oxidative stress reaction were increased in zinc-deficient group. The expression of Bcl-2 de⁃
creased, and the expression of Bax increased. The ratio of Bcl-2 and Bax declined in kidney of zinc deficiency mice. Conclu⁃
sion Diet zinc deficiency in growth period may result in the decreased antioxidase, the increased oxidative stress reaction,
and the changed Bcl-2 and Bax expression, which promote the occurrence of cell apoptosis in kidney.
Key words：zinc; apoptosis; kidney; oxidative stress; bcl-2-associated X protein; zinc deficiency
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（2015-03-09收稿 2015-07-13修回）
（本文编辑 陈丽洁）
基金项目：辽宁省科学技术计划项目（2013022067）；辽宁省教育厅科学技术研究项目（L2012307）；辽宁省大学生创新创业训练计划项目
（201410160037）；国家级大学生创新创业训练计划项目（201410160037）；辽宁省高等学校优秀人才项目（LJQ2013092）
作者单位：辽宁医学院组织学与胚胎学教研室（邮编121001）
作者简介：田娟（1976），女，博士，硕士研究生导师，主要从事肾脏发育生物学研究
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