全 文 ：动物医学进展，２０１５，３６（４）：６７－７２
Ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｉｎ　Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
藏药绿萝花对高血糖小鼠模型的治疗试验
王　赛，刘　群＊，韩金潭，康莲莲，杨　荣
（西南民族大学生命科学与技术学院，四川成都６１００４１）
　　摘　要：研究藏药绿萝花对高血糖动物模型的治疗作用，为临床合理用药和进一步开发利用提供科学依
据。采用饲喂高糖高脂饲料和注射链脲佐菌素（ＳＴＺ）建立ＩＣＲ小鼠高血糖动物模型，将实验动物分成对照
组、模型组、二甲双胍（２５０ｍｇ／ｋｇ）组及绿萝花提取物组（剂量分别为５０、２５、１２．５ｇ／ｋｇ），分别在造模试验的
第１４天、第２１天、第２８天，以及治疗试验的第１４天、第２１天、第２８天，以空腹血清血糖含量、血清胰岛素
含量为检测指标，研究造模因素和不同剂量绿萝花对血糖的影响。连续饲喂高糖高脂饲料，结合ＳＴＺ注射，
造模小鼠表现为体重下降、血糖升高、胰岛素含量下降；表明３个剂量绿萝花组均具有降血糖的作用，
１２．５ｇ／ｋｇ剂量组连续服用绿萝花１４ｄ后降血糖作用明显，５０ｇ／ｋｇ剂量组连续口服绿萝花７ｄ～１４ｄ，显著
提高成模小鼠血清胰岛素含量。连续饲喂高糖高脂饲料（配方：蔗糖∶猪油∶奶粉∶鸡蛋∶猪胆酸盐∶普通
饲料＝３０∶２０∶４∶２∶０．０５∶６３）１４ｄ～２８ｄ，结合ＳＴＺ注射的造模方法成功获得了Ⅱ型糖尿病动物模型；
绿萝花通过降低成模小鼠血糖含量、升高成模小鼠血清胰岛素含量而对Ⅱ型糖尿病动物模型具有治疗作用。
　　关键词：绿萝花；ＩＣＲ小鼠；高血糖症；治疗作用
中图分类号：Ｓ８５３．７４；Ｓ８５２．３３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００７－５０３８（２０１５）０４－００６７－０６
　　藏药绿萝花，别名石柑子、马蹄金、黄金葛，为天 南星科喜林芋属植物绿萝花（Ｓｃｉｎｄａｐｓｕｓａｕｒｅｕｓ
　收稿日期：２０１４－０７－３１
　基金项目：国家“十二五”科技支撑计划项目（２０１１ＢＡＤ３４Ｂ０２－４）；中央高校基本科研业务费科研建设平台项目（１１ＮＰＴ０３）
　作者简介：王　赛（１９８９－），女，黑龙江哈尔滨人，硕士研究生，主要从事中药药理学研究。＊
櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙櫙
通讯作者
Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｐｒｕｎｅｌｌａ　ｖｕｌｇａｒｉｓ　ｏｎ　Ｃａｌｃｉｕｍ　Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　ａｎｄ　Ｒｅｎａｌ
Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｉｎ　Ｍｉｃｅ　ｗｉｔｈ　Ｃａｌｃｉｕｍ　Ｏｘａｌａｔｅ　Ｓｔｏｎｅｓ
ＬＩ　Ｊｉｎｇ，ＨＵ　Ｇｕｏ－ｑｕａｎ，ＧＵＩ　Ｊｉｎｇ－ｑｉａｎｇ，ＨＥ　Ｓｈａｏ－ｊｕｎ，ＬＩＵ　Ｄｅ－ｙｉ，ＣＨＥＮ　Ｈｕｉ－ｌｉａｎｇ，ＪＩＮ　Ｅｒ－ｈｕｉ
（Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ａｎｉｍａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ａｎｈｕｉ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｆｅｎｇｙａｎｇ，Ａｎｈｕｉ，２３３１００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ　ｅｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｐｒｕｎｅｌｌａ　ｖｕｌｇａｒｉｓ　ｏｎ　ｃａｌｃｉｕｍ　ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　ａｎｄ　ｒｅｎａｌ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｉｎ
ｍｉｃｅ　ｗｉｔｈ　ｃａｌｃｉｕｍ　ｏｘａｌａｔｅ　ｓｔｏｎｅｓ，ｔｈｅ　ｍｉｃｅ　ｗｉｔｈ　ｃａｌｃｉｕｍ　ｏｘａｌａｔｅ　ｓｔｏｎｅ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　１％ｅｔｈｙｌｅｎｅ　ｇｌｙ－
ｃｏｌ　ａｎｄ　１％ａｍｍｏｎｉｕｍ　ｃｈｌｏｒｉｄｅ，ｍｅａｎｗｈｉｌｅ　ｕｓｉｎｇ　Ｐｒｕｎｅｌｌａ　ｖｕｌｇａｒｉｓ　ａｓ　ｉｎｔｅｒｖｅｎｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒｓ．Ａｆｔｅｒ　２８ｄａｙｓ，ｔｈｅ　ｃａｌｃｉ－
ｕｍ　ａｎｄ　ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ｉｎ　ｓｅｒｕｍ．Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｃａｌｃｉｕｍ　ｉｎ　ｌｉｖｅｒ，ｒｉｇｈｔ　ｋｉｄｎｅｙ　ａｎｄ　ｂｒａｉｎ　ｔｉｓ－
ｓｕｅｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ．Ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌ　ｓｅｃｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｌｅｆｔ　ｋｉｄｎｅｙ　ｗｅｒｅ　ｍａｄｅ　ｗｉｔｈ　ＨＥ　ｓｔａｉｎｉｎｇ．Ｔｈｅ　ｃａｌｃｉｕｍ　ａｎｄ　ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ
ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｉｎ　ｋｉｄｎｅｙ　ｔｉｓｓｕｅｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．Ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌ　ｓｅｃｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｋｉｄｎｅｙ　ｗｅｒｅ　ｓｔａｉｎｅｄ　ｗｉｔｈ　ＨＥ．Ｔｈａｔ　ｃａｌｃｉｕｍ　ｌｅｖ－
ｅｌ　ｉｎ　ｒｅｎａｌ　ｔｉｓｓｕｅ　ｏｆ　ｏｘａｌａｔｅ　ｃａｌｃｉｕｍ　ｓｔｏｎｅ　ｇｒｏｕｐ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｏｆ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５），ｃａｌｃｉ－
ｕｍ　ｌｅｖｅｌｓ　ｉｎ　ｒｅｎａｌ　ｔｉｓｓｕｅ　ｏｆ　Ｐｒｕｎｅｌｌａ　ｖｕｌｇａｒｉｓ　ｏｘａｌａｔｅ　ｃａｌｃｉｕｍ　ｓｔｏｎｅ　ｇｒｏｕｐ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｌｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｏｆ　ｏｘ－
ａｌａｔｅ　ｃａｌｃｉｕｍ　ｓｔｏｎｅ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５），ａｎｄ　ｗａｓ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｗｉｔｈ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ＞０．０５）．Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ
ｏｆ　ｃａｌｃｉｕｍ　ｉｎ　ｌｉｖｅｒ　ａｎｄ　ｂｒａｉｎ　ａｍｏｎｇ　ｇｒｏｕｐｓ　ｗｅｒｅ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＞０．０５）．Ｔｈｅ　ｃａｌｃｉｕｍ　ｏｘａｌａｔｅ　ｓｔｏｎｅｓ　ｉｎ
ｒｅｎａｌ　ｔｕｂｕｌａｒ　ｗｅｒｅ　ｖｉｓｉｂｌｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｏｘａｌａｔｅ　ｃａｌｃｉｕｍ　ｓｔｏｎｅ　ｇｒｏｕｐ，ｃｒｙｓｔａｌ　ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃａｌｃｉｕｍ　ｏｘａｌａｔｅ　ｓｔｏｎｅｓ　ｉｎ　Ｐｒｕｎｅｌ－
ｌａ　ｖｕｌｇａｒｉｓ　ｇｒｏｕｐ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｒｅｄｕｃｅｄ．Ｔｈｅ　Ｐｒｕｎｅｌｌａｖｕｌｇａｒｉｓｃｏｕｌｄ　ｒｅｄｕｃｅ　ｔｈｅ　ｃａｌｃｉｕｍ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　ｒｅｎａｌ　ｔｉｓｓｕｅｓ
ｓｌｏｗ　ｔｈｅ　ｅｘｐａｎｓｉｏｎ　ｏｆ　ｒｅｎａｌ　ｔｕｂｕｌａｒ，ｐｒｏｔｅｃｔ　ｒｅｎａｌ　ｔｕｂｕｌａｒ　ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ　ｃｅｌ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｉｎ　ｍｉｃｅ　ｗｉｔｈ　ｃａｌｃｉｕｍ　ｏｘａｌａｔｅ
ｓｔｏｎｅｓ，ａｎｄ　ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ａｓ　ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ　ｄｒｕｇ　ｉｎ　ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ　ｏｘａｌａｔｅ　ｃａｌｃｉｕｍ　ｓｔｏｎｅ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｐｒｕｎｅｌｌａ　ｖｕｌｇａｒｉｓ；ｃａｌｃｉｕｍ　ｏｘａｌａｔｅ　ｓｔｏｎｅ；ｋｉｄｎｅｙ；ｍｏｕｓｅ
DOI:10.16437/j.cnki.1007-5038.2015.04.016
Ｌｉｎｄｅｎ　ｅｘ　Ａｎｄｒｅ）Ｅｎｇｌ的干燥花蕾，产于西藏寒冷
地带及喜马拉雅山脉区域［１］。绿萝花是西藏地区特
有的珍贵草本植物，是一种具有民族特色的习用药
材，当地人采摘花蕾晾干泡水饮用，对糖尿病、冠心
病、高血压及各种血管炎等疾病具有良好的预防和
治疗作用［２－３］。目前有关西藏绿萝花的研究报道较
少，仅限于其化学成分如挥发油、黄酮、还原糖的提
取分离及其抗氧化、降血糖等药理作用研究［４－９］。为
了探讨藏药绿萝花的降血糖作用，本研究在中医药
理论指导下，结合当地民间服用习惯及总化学成分
产生整体效应的观点，采用最传统的水萃取法制备
绿萝花干膏制剂作为研究材料，以Ⅱ型糖尿病小鼠
动物模型为研究对照，以空腹血糖值、胰岛素含量为
检测指标，研究不同剂量绿萝花干膏制剂对高血糖
ＩＣＲ小鼠的降血糖作用，现将研究结果报告如下。
１　材料与方法
１．１　材料
１．１．１　实验动物及饲料　８周龄ＩＣＲ雄性小鼠，体
重２６ｇ～３０ｇ（批号：００１６２９９），高糖高脂饲料
（蔗糖∶猪油∶奶粉∶鸡蛋∶猪胆酸盐∶普通饲料
＝３０∶２０∶４∶２∶０．０５∶６３），购自成都达硕生物科
技有限公司。
１．１．２　受试药物　藏药绿萝花干燥花蕾，四川宇妥
藏药药业有限责任公司产品，由四川省兽药监察所
鉴定（鉴定人唐棣，研究员），室温密封干燥保存。
绿萝花干膏口服液的制备：藏药绿萝花干膏的
制备参照钟晓明和张素萍等［１０－１１］水萃取工艺制备中
药绿萝花干膏：浸泡０．５ｈ、２０倍加水量、煎煮４次、
煎煮时间１ｈ；收集滤液，所得干膏率为２４．５％。将
干膏换算成生药含量并配制成２、１、０．５ｇ／ｍＬ浓度
的口服液，４℃冰箱保存备用。
１．１．３　主要试剂及仪器　盐酸二甲双胍片，哈尔滨
同一堂药业有限公司产品（批号：２０１３０１０４３１）；胰岛
素检测试剂盒，北京雅安达生物技术有限公司产品
（批号：２０１３１１９６Ｔ）；葡萄糖测试盒，长春汇力生物
技术有限公司产品（批号：２０１３０４１）；链佐霉素
（ＳＴＺ），Ｓｉｇｍａ公司产品（批号：０４０Ｍ１３５７）；Ｍｏｄｅｌ
６８０酶标仪，美国伯乐公司产品；ＤＵ８００分光光度
计，贝克曼库尔特公司产品；Ｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅ　５４１７超速
离心机、移液枪，Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ公司产品；血糖仪（批
号：０５０８８５２００１）、血糖试纸（批号：２３４６４６２３），罗康
公司产品。
１．２　方法
１．２．１　Ⅱ型高血糖模型小鼠的建立　８周龄ＩＣＲ
雄性小鼠，２２０只，适应性喂养７ｄ。按体重随机分
出４８只作为正常对照组，其余为造模组小鼠。从正
常对照组小鼠和造模组小鼠中各随机抽取１０只，禁
食１２ｈ后尾静脉采血，血糖仪测血糖，分别作为正
常对照组和造模组小鼠的零基准血糖值。正常对照
组小鼠饲喂普通饲料，正常饮水；造模组小鼠饲喂高
糖高脂饲料，正常饮水。在饲喂高糖高脂饲料的第
７天、第１４天、第２８天随机抽取正常组和造模组小
鼠各１０只，禁食１２ｈ后，尾静脉采血，血糖仪测血
糖值。第２８天，造模组和正常对照组小鼠各随机抽
取１０只，禁食１２ｈ，眼眶取血，分离血清，用胰岛素
测试盒测定血清胰岛素含量，判断高糖高脂饲料饲
喂的小鼠产生胰岛素抵抗现象。然后试验组小鼠左
下腹腔注射ＳＴＺ（４０ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇ），连续注射
５ｄ，正常对照组注射枸橼酸钠缓冲溶液，连续注射
５ｄ。于最后１次注射后７２ｈ，尾静脉采血，血糖仪
测血糖，血糖值＞１１．１ｍｍｏｌ／Ｌ［１２－１７］的小鼠为高血
糖模型成模小鼠。
１．２．２　动物分组及处理　成模小鼠随机分为模型
组，绿萝花５０、２５、１２．５ｇ／ｋｇ剂量组，二甲双胍
（２５０ｍｇ／ｋｇ）组；正常小鼠随机分为空白对照组和
正常绿萝花组，每组２４只。各组处理如下：空白对
照组：常 规 饲 养，正 常 饮 水，灌 胃 生 理 盐 水
０．５ｍＬ／ｄ，连续１４ｄ；绿萝花对照组：常规饲养，正
常饮 水，灌 胃 ２５ｇ／ｋｇ 剂 量 的 绿 萝 花 口 服 液
０．５ｍＬ／ｄ，连续１４ｄ；模型对照组、绿萝花５０、２５、
１２．５ｇ／ｋｇ剂量组、二甲双胍２５０ｍｇ／ｋｇ组，饲喂高
糖高脂饲料，正常饮水，分别灌胃生理盐水、５０ｇ／ｋｇ
剂量的绿萝花口服液、２５ｇ／ｋｇ剂量的绿萝花口服
液、１２．５ｇ／ｋｇ剂量的绿萝花口服液、二甲双胍片溶
液２５０ｍｇ／ｋｇ，０．５ｍＬ／ｄ／只，连续１４ｄ。
１．２．３　临床观察及检测指标
１．２．３．１　临床观察　观察采食量、饮水量、被毛情
况。小鼠不限食，每周称体重。
１．２．３．２　造模小鼠血糖检测　在饲喂高糖高脂饲
料前和饲喂高糖高脂饲料的第７、１４、２１、２８天，随机
抽取正常组和造模组各１０只，禁食１２ｈ，尾静脉采
血测血糖含量以了解正常组和高糖高脂饲料造模组
血糖的动态变化情况。判断造模是否成功：连续注
射ＳＴＺ　５次后，禁食１２ｈ，血糖仪测尾静脉血血糖
含量。
１．２．３．３　灌胃小鼠血糖测定　分别在灌胃试验（治
疗试验）的第７、１４、２８天，每组随机取６只小鼠，禁
食１２ｈ，眼眶取血，分离血清，按照血糖试剂盒操作
步骤测血糖含量。计算公式：Ｃ样＝（Ａ 样／Ａ 标）
×Ｃ标（注：Ｃ样：样品浓度；Ａ样：样品管吸光度值；
８６ 动物医学进展　２０１５年　第３６卷　第４期（总第２６２期）
Ａ标：标准液吸光度值；Ｃ标：标准液浓度）。
１．２．３．４　灌胃小鼠血清胰岛素测定　分别在灌胃
试验（治疗试验）的第７、１４天，每组随机取１０只小
鼠，禁食１２ｈ，眼眶采血制备血清，按照胰岛素试剂
盒测血清胰岛素含量。
１．２．４　数据处理　统计方法采用ＳＰＰＳ１８．０进行
统计学分析，数据资料以平均数和标准差（珚ｘ±ＳＤ）
表示。
２　结果
２．１　造模小鼠的临床观察及体重
饲喂高糖高脂饲料期间，小鼠被毛逆乱，体重减
轻，出现多尿、多饮、多食的“三多”症状。空白对照
组小鼠被毛光滑洁白。造模的小鼠０、７、１４、２８ｄ的
体重变化情况见表１。
　　表１表明，０ｄ两组之间的体重值无显著性差异
（Ｐ＞０．０５）。７、１４、２８ｄ造模组的体重都极显著低
于空白对照组的体重（Ｐ＜０．０１）。试验结果表明，
造模小鼠在注射ＳＴＺ　７ｄ后体重明显下降，并呈降
低趋势，但都基本维持在一个恒定的水平上，且都低
于空白对照组，说明造模因素具有降低小鼠体重的
作用。
２．２　造模小鼠血糖检测
造模小鼠血糖含量的变化情况见表２。
　　表２结果表明，２１ｄ空白对照组的血糖值显著
性低于造模组的血糖值（Ｐ＜０．０５），其他时间点的
血糖值与造模组的血糖值无显著性差异（Ｐ＞
０．０５）。研究结果表明，连续饲喂高糖高脂饲料
２１ｄ，能使小鼠血糖含量升高并明显高于正常对照
组的血糖含量，且基本保持在一个恒定的水平。
表１　小鼠体重组间动态变化值
Ｔａｂｌｅ　１　Ｔｈｅ　ｃｈａｎｇｅ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ　ｗｅｉｇｈｔ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　ｍｉｃｅ
组别
Ｇｒｏｕｐｓ
时间／ｄ　Ｔｉｍｅ
０　 ７　 １４　 ２８
空白对照组Ｂｌａｎｋ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　 ４８．８３±４．３７ａ ５０．４３±４．４７ａ ４９．２４±４．４５ａ ４９．８３±４．５５ａ
造模组 Ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ　 ４９．３３±４．８４ａ ４６．１７±４．７１ｂ　 ４３．１４±５．１５ｂ　 ４０．０５±５．１９ｂ
注：同列右肩有相同小写字母的表示无显著差异，Ｐ＞０．０５；同列右肩无相同小写字母，表示差异显著，Ｐ＜０．０５。
Ｎｏｔｅ：Ｔｈｅ　ｄａｔａ　ｗｉｔｈ　ｓａｍｅ　ｌｅｔｔｅｒｓ　ｉｎ　ｓａｍｅ　ｃｏｌｕｍｎ　ｒｅｐｒｅｓｅｎｔ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ，Ｐ＞０．０５；ａｎｄ　ｗｉｔｈ　ｓａｍｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｌｅｔｔｅｒｓ　ｒｅｐｒｅｓｅｎｔ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ，Ｐ＜０．０５．
表２　小鼠血糖值组间动态变化值
Ｔａｂｌｅ　２　Ｔｈｅ　ｃｈａｎｇｅ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ　ｂｌｏｏｄ　ｓｕｇａｒ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　ｍｉｃｅ
组别 Ｇｒｏｕｐｓ
时间／ｄ　Ｔｉｍｅ
０　 ７　 １４　 ２１　 ２８
空白对照组Ｂｌａｎｋ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　 ６．７５±１．７０ａ ６．９５±０．９５ａ ７．４９±１．１４ａ ７．８９±１．５１Ａ　 ６．２９±０．９１ａ
造模组 Ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ ６．８０±１．８８ａ ８．０１±１．４５ａ ７．６２±０．６３ａ １０．０７±１．０６Ａ　 ７．９４±１．８２ａ
注：同列右肩有相同小写字母的表示无显著差异，Ｐ＞０．０５；同列右肩有相同大写字母的表示差异显著，Ｐ＜０．０５。
Ｎｏｔｅ：Ｔｈｅ　ｄａｔａ　ｗｉｔｈ　ｓａｍｅ　ｓｍａｌ　ｌｅｔｔｅｒｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｃｏｌｕｍｎ　ｒｅｐｒｅｓｅｎｔ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ，Ｐ＞０．０５，ａｎｄ　ｗｉｔｈ　ｓａｍｅ　ｃａｐｉｔａｌ　ｌｅｔｔｅｒｓ　ｒｅ－
ｐｒｅｓｅｎｔ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ，Ｐ＜０．０５．
２．３　绿萝花降血糖测定
绿萝花灌胃试验，各组动物血糖含量见表３。
　　表３表明模型组小鼠血清血糖值含量在灌胃试
验第７天显著高于空白对照组的血清血糖值（Ｐ＜
０．０５），在试验的１４ｄ和２８ｄ达到极显著差异（Ｐ＜
０．０１）。第７天模型组、５０、２５、１２．５ｇ／ｋｇ的绿萝花
组、二甲双胍片溶液２５０ｍｇ／ｋｇ的血糖值极显著高
于空白对照组和正常绿萝花组的血糖值（Ｐ＜０．０１），
且它们之间的血糖值无显著差异（Ｐ＞０．０５）。１４ｄ
１２．５ｇ／ｋｇ的绿萝花组的血糖值显著低于模型组的
血糖值（Ｐ＜０．０５）。尽管３个绿萝花组血糖含量与
模型组无统计学意义，但血糖平均值仍低于模型组
血糖平均值。研究结果表明，造模因素具有显著升
高小鼠血清血糖含量的作用，３个剂量绿萝花组均有
降血糖的作用，尤其是１２．５ｇ／ｋｇ的绿萝花组连续
服用绿萝花１４ｄ后，降血糖作用明显。连续口服二
甲双胍片２５０ｍｇ／ｋｇ　２８ｄ后具有较好的降血糖作
用。
２．４　血清胰岛素检测
各组实验动物血清胰岛素含量统计结果见表４。
　　表４表明，治疗试验第７天，模型组小鼠血清胰
岛素含量低于空白对照组，虽然无统计学意义，但试
验第１４天极显著低于空白对照组。试验第７天，高
剂量绿萝花组小鼠血清的胰岛素含量明显高于低剂
量绿萝花组（０．０１＜Ｐ＜０．０５），极显著高于模型组的
血清胰岛素含量（Ｐ＜０．０１）。第１４天，三个剂量绿
萝花组小鼠血清胰岛素含量均高于模型组，尤其是
高剂量绿萝花组极显著高于模型组小鼠血清胰岛素
９６王　赛等：藏药绿萝花对高血糖小鼠模型的治疗试验
的含量（Ｐ＜０．０１）。研究结果表明，造模因素能引起
小鼠血清胰岛素含量下降，连续口服高剂量绿萝花７
ｄ～１４ｄ，可以显著提高造模小鼠血清胰岛素含量的
作用。
表３　服用绿萝花口服液后小鼠血糖值组间动态变化值
Ｔａｂｌｅ　３　Ｔｈｅ　ｃｈａｎｇｅ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ　ｂｌｏｏｄ　ｓｕｇａｒ　ｉｎ　ｍｉｃｅ　ａｆｔｅｒ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓｃｉｎｄａｐｓｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　ｏｒａｌ　ｌｉｑｕｉｄ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｇｒｏｕｐｓ
组别
Ｇｒｏｕｐｓ
时间／ｄ　Ｔｉｍｅ
７　 １４　 ２８
空白对照组Ｂｌａｎｋ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ ９．１７±０．５８ａ ７．９７±２．１７ａ ７．５１±０．７３ａＡ
正常绿萝花组 Ｎｏｒｍａｌ　Ｓ．ａｕｒｅｕｓ　ｇｒｏｕｐ ９．６６±１．３５ａ ８．７７±１．０３ａ ７．７７±１．２１ａｂ
模型组 Ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ ２７．２８±１．７２ｂ　 ２９．２４±３．４３ｂＡ　 ２４．５８±４．２９ｃ
５０ｇ／ｋｇ绿萝花组５０ｇ／ｋｇ　Ｓ．ａｕｒｅｕｓ　ｇｒｏｕｐ　 ２３．８３±７．１５ｂ　 ２１．５２±８．１４ｂｃ　 ２３．８６±６．９４ｃ
２５ｇ／ｋｇ绿萝花组２５ｇ／ｋｇ　Ｓ．ａｕｒｅｕｓ　ｇｒｏｕｐ　 ２１．４６±５．３０ｂ　 ２４．７４±３．３９ｂｃ　 ２１．６８±４．１２ｃ
１２．５ｇ／ｋｇ绿萝花组１２．５ｇ／ｋｇ　Ｓ．ａｕｒｅｕｓ　ｇｒｏｕｐ　 ２３．６６±６．９２ｂ　 ２０．６３±６．９５Ａｃ　 ２１．９２±６８９ｃ
２５０ｍｇ／ｋｇ二甲双胍２５０ｍｇ／ｋｇ　ｍｅｌｂｉｎｅ　ｇｒｏｕｐ　 ２３．３６±４．８８ｂ　 ２５．１４±２．７５ｂｃ　 １６．２４±５．６０ｂｃＡ
注：同列右肩有相同小写字母的表示无显著差异，Ｐ＞０．０５；同列右肩无相同小写字母有相同大写字母的表示差异显著，Ｐ＜０．０５；同列右
肩无相同大写字母表示差异极显著，Ｐ＜０．０１。
Ｎｏｔｅ：Ｔｈｅ　ｄａｔａ　ｗｉｔｈ　ｓａｍｅ　ｓｍａｌ　ｌｅｔｔｅｒｓ　ｉｎ　ｓａｍｅ　ｃｏｌｕｍｎ　ｒｅｐｒｅｓｅｎｔ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ，Ｐ＞０．０５，ａｎｄ　ｗｉｔｈ　ｓａｍｅ　ｃａｐｉｔａｌ　ｌｅｔｔｅｒｓ　ｒｅｐｒｅｓｅｎｔ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ，Ｐ＜０．０５，ａｎｄ　ｗｉｔｈｏｕｔ　ｓａｍｅ　ｃａｐｉｔａｌ　ｌｅｔｔｅｒ　ｒｅｐｒｅｓｅｎｔ　ｅｘｔｒｅｍｅｌｙ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ，Ｐ＜０．０１．
表４　小鼠口服绿萝花口服液后血清胰岛素的组间变化值
Ｔａｂｌｅ　４　Ｔｈｅ　ｃｈａｎｇｅ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ　ｉｎｓｕｌｉｎ　ｉｎ　ｍｉｃｅ　ａｆｔｅｒ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓｃｉｎｄａｐｓｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　ｏｒａｌ　ｌｉｑｕｉｄ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｇｒｏｕｐｓ
组别
Ｇｒｏｕｐｓ
时间／ｄａｙ　Ｔｉｍｅ
７　 １４
空白对照组Ｂｌａｎｋ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ １４４．６３±３１．７３ａｂ　 １７６．１８±２４．３９ａＡ
正常绿萝花组 Ｎｏｒｍａｌ　Ｓ．ａｕｒｅｕｓ　ｇｒｏｕｐ １５８．２２±１６．６７ａｂ　 １７６．７６±２２．３５ａＢ
模型组 Ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ １２８．９０±１４．１２ａｂ　 ９９．４５±１０．２０ｂｅＣ
５０ｇ／ｋｇ绿萝花组５０ｇ／ｋｇ　Ｓ．ａｕｒｅｕｓ　ｇｒｏｕｐ １６７．６４±１６．４５ａＡ　 １６２．８８±２１．９０ａｄ
２５ｇ／ｋｇ绿萝花组２５ｇ／ｋｇ　Ｓ．ａｕｒｅｕｓ　ｇｒｏｕｐ １５５．９９±４５．５０ａｂ　 １４３．６６±１９．７９ａｂＣ
１２．５ｇ／ｋｇ绿萝花组１２．５ｇ／ｋｇ　Ｓ．ａｕｒｅｕｓ　ｇｒｏｕｐ １２０．９４±１５．６１Ａｂ　 １３４．２３±３９．３３ＡＢｂｄ
２５０ｍｇ／ｋｇ二甲双胍２５０ｍｇ／ｋｇ　ｍｅｌｂｉｎｅ　ｇｒｏｕｐ １３１．８１±９．６ａｂ　 ９０．６５±２１．０７ｅ
注：同列右肩有相同小写字母的表示无显著差异，Ｐ＞０．０５；同列右肩无相同小写字母有相同大写字母的表示差异显著，Ｐ＜０．０５；同列右
肩无相同大写字母表示差异极显著，Ｐ＜０．０１。
Ｎｏｔｅ：Ｔｈｅ　ｄａｔａ　ｗｉｔｈ　ｓａｍｅ　ｓｍａｌ　ｌｅｔｔｅｒｓ　ｉｎ　ｓａｍｅ　ｃｏｌｕｍｎ　ｒｅｐｒｅｓｅｎｔ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ，Ｐ＞０．０５，ａｎｄ　ｗｉｔｈ　ｓａｍｅ　ｃａｐｉｔａｌ　ｌｅｔｔｅｒｓ　ｒｅｐｒｅｓｅｎｔ
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ，Ｐ＜０．０５，ａｎｄ　ｗｉｔｈｏｕｔ　ｓａｍｅ　ｃａｐｉｔａｌ　ｌｅｔｔｅｒ　ｒｅｐｒｅｓｅｎｔ　ｅｘｔｒｅｍｅｌｙ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ，Ｐ＜０．０１．
３　讨论
３．１　关于Ⅱ型高血糖小鼠模型的建立
Ⅱ型糖尿病是一个复杂的群体，其发病总的来
说可以归纳为胰岛素抵抗和胰岛素分泌障碍，临床
和流行病学研究表明，通常胰岛素抵抗是启动Ⅱ型
糖尿病发生的初始原因，而胰岛素分泌障碍则引起
血糖升高［１８］。因此，建立试验性Ⅱ型糖尿病动物模
型，要从建立实验动物的胰岛素抵抗和高血糖症状
两个方面入手。目前相关研究文献报道［１９－２３］，建立
Ⅱ型糖尿病模型的方法是以高糖高脂饲料结合化学
药物诱导，其中高糖高脂饲料的作用是引起胰岛素
抵抗，化学药物起到破坏胰岛Ｂ细胞，使胰岛素分泌
减少，引起血糖升高的作用。应用化学药物最广泛
的是ＳＴＺ，ＳＴＺ分子结构有一个高活性的葡萄糖侧
链，使胰岛Ｂ细胞对其进行错误性识别，并进入细
胞内，对胰岛Ｂ细胞产生毒性作用，破坏Ｂ细胞从
而诱导糖尿病的发生［２４］。Ⅱ型糖尿病属于中医“消
渴”的范畴，其病机是阴虚燥热，阴虚为本、燥热为
标，糖尿病药监管理部门把糖尿病分为阴虚热盛、气
阴两虚、阴阳两虚、血瘀气滞四型［２５－２６］。现代医学用
高糖高脂饲料结合ＳＴＺ建立Ⅱ型糖尿病动物模型，
就是从病因上模拟中医多食肥甘而致糖尿病的病
因，建立符合中医“证”的糖尿病模型［２７］。目前，国内
外学者基本倾向于糖尿病动物空腹或非空腹的成模
血糖标准为１１．１１ｍｍｏｌ／Ｌ～１６．１７ｍｍｏｌ／Ｌ［２８］。
本研究采用中西医结合的试验性方法建立Ⅱ型
糖尿病动物模型，即饲喂高脂饲料后空腹胰岛素值
偏高且注射ＳＴＺ后，空腹血糖大于１１．１ｍｍｏｌ／Ｌ的
ＩＣＲ小鼠为糖尿病模型成模小鼠。试验结果表明高
糖高脂饲料组的血糖值较对照组的血糖值升高，造
模试验第２８天，模型组的胰岛素值高于正常对照组
的胰岛素值，表明存在胰岛素抵抗现象。每只高糖
高脂饲料组小鼠禁食 １２ｈ 左下腹腔注射 ＳＴＺ
４０ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇ，连续注射５ｄ，血糖值大于
１１．１ｍｍｏｌ／Ｌ的小鼠为模型成功小鼠。研究结果表
明：高糖高脂饲料结合ＳＴＺ注射的造模方法成功获
０７ 动物医学进展　２０１５年　第３６卷　第４期（总第２６２期）
得了Ⅱ型糖尿病动物模型。
３．２　关于绿萝花的降血糖作用
当今治疗糖尿病的方法有多种，包括手术治
疗［２９］和药物治疗，药物治疗又分为中药治疗和西药
治疗，本文就中药绿萝花的降血糖作用展开论述。
藏药绿萝花是一种具有民族特色的医用药材，
当地人采摘花蕾晾干泡水饮用，对糖尿病、冠心病、
高血压及各种血管炎等疾病具有良好的预防和治疗
作用［３０］。本研究在中医药理论指导下，结合当地民
间服用习惯及总化学成分产生整体效应的观点，采
用最传统的水煎法（浸泡０．５ｈ、２０倍加水量、煎煮
４次、煎煮时间 １ｈ，收集滤液，所得干膏率为
２４．５％）制备干膏制剂，将干膏换算成生药含量并配
制成２００％、１００％、５０％浓度的口服液以探讨不同剂
量绿萝花的降血糖作用。将成模小鼠分为模型对照
组、５０、２５、１２．５ｇ／ｋｇ的绿萝花组、二甲双胍片溶液
２５０ｍｇ／ｋｇ组，以空腹血糖值、空腹胰岛素值为检测
指标，造模试验结果表明：造模小鼠在饲喂高糖高脂
饲料并注射ＳＴＺ后体重明显下降并呈降低趋势，虽
然都基本维持在一个恒定的水平上，但都低于空白
组，说明造模因素具有降低小鼠体重的作用；连续饲
喂高糖高脂饲料能使ＩＣＲ小鼠的空腹血糖含量升高
并在一个较大的范围内波动、小鼠血清胰岛素含量
下降，胰岛素分泌不足是Ⅱ型糖尿病的一个典型特
征，胰岛素分泌不足又分为相对不足和绝对不足，绝
对不足是胰岛素总量的分泌水平降低，而胰岛素相
对不足包括外周胰岛素抵抗和分泌总胰岛素中有功
能的成熟胰岛素量下降［３１］。绿萝花治疗试验结果表
明，３个剂量绿萝花组均有降血糖的作用，尤其是低
剂量组连续服用绿萝花１４ｄ后降血糖作用明显；连
续口服高剂量绿萝花７ｄ～１４ｄ，可以显著提高造模
小鼠血清胰岛素含量的作用。
连续饲喂高糖高脂饲料（配方：蔗糖∶猪油∶奶
粉∶鸡蛋∶猪胆酸盐∶普通饲料＝３０∶２０∶４∶２∶
０．０５∶６３）１４ｄ～２８ｄ，结合ＳＴＺ注射的造模方法成
功获得了Ⅱ型糖尿病动物模型，表现为体重下降、血
糖升高、胰岛素含量下降。口服绿萝花后能使模型
小鼠血糖下降、胰岛素含量升高，表明绿萝花具有降
低空腹血糖指标的作用。
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Ｔｈｅｒａｐｅａｔｉｃ　Ｔｅｓｔ　ｏｆ　Ｈｙｐｅｒｇｌｙｃｅｍｉａ　ｉｎ
Ｍｏｕｓｅ　Ｍｏｄｅｌ　ｗｉｔｈ　Ｓｃｉｎｄａｐｓｕｓ　ａｕｒｅｕｓ
ＷＡＮＧ　Ｓａｉ，ＬＩＵ　Ｑｕｎ，ＨＡＮ　Ｊｉｎ－ｔａｎ，ＫＡＮＧ　Ｌａｎ－ｌａｎ，ＹＡＮＧ　Ｙｏｎｇ
（Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｆｏｒ　Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，Ｃｈｅｎｇｄｕ，Ｓｉｃｈｕａｎ，６１００４１，Ｃｈｉｎａ）
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ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔ　ｏｆ　ｍｏｄｅｌ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ＩＣＲ　ｍｏｕｓｅ　ｂｏｄｙ　ｗｅｉｇｈｔ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ，
ｂｌｏｏｄ　ｇｌｕｃｏｓｅ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ，ｉｎｓｕｌｉｎ　ｌｅｖｅｌｓ　ｄｒｏｐｅｄ　ａｎｄ　ｉｎｓｕｌｉｎ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｉｎｄｅｘ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｆｅｅｄｉｎｇ　ｈｉｇｈ
ｇｌｕｃｏｓｅ　ａｎｄ　ｈｉｇｈ　ｆａｔ　ｆｅｅｄ　ｃｏｍｂｉｎｅｄ　ｗｉｔｈ　ｉｎｊｅｃｔｉｎｇ　ＳＴＺ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔ　ｏｆ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ
ｂｌｏｏｄ　ｓｕｇａｒ　ｌｅｖｅｌ　ｗａｓ　ｒｅｇｕｌａｔｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｔｈｒｅｅ　ｄｏｓｅｓ．Ｌｏｗ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ　ｈａｄ　ｏｂｖｉｏｕｓ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｈｙｐｅｒｇｌｙｃｅｍｉａ　ａｆ－
ｔｅｒ　ｏｒａｌ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓ．ａｕｒｅｕｓ　ｆｏｒ　ｆｏｒｔｅｅｎ　ｄａｙｓ．Ｈｉｇｈ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ　ｈａｄ　ｏｂｖｉｏｕｓ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｅｎｈａｎｃｉｎｇ　ｉｎｓｕ－
ｌｉｎ　ｌｅｖｅｌ　ａｆｔｅｒ　ｏｒａｌ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓ．ａｕｒｅｕｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　７ｓｔ　ｄａｙ　ｔｏ　ｔｈｅ　１４ｓｔ　ｄａｙ．Ｔｈｅ　ｔｈｒｅｅ　ｄｏｓｅｓ　ｈａｄ　ｎｏ　ｏｂ－
ｖｉｏｕｓ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｉｎｓｕｌｉｎ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｉｎｄｅｘ．Ｔｈｅ　ｈｙｐｅｒｇｌｙｃｅｍｉａ　ｍｏｕｓｅ　ｍｏｄｅｌ　ｗａｓ　ｍａｄｅ　ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｙ　ｂｙ　ｆｅｅｄｉｎｇ
ｈｉｇｈ　ｇｌｕｃｏｓｅ　ａｎｄ　ｈｉｇｈ　ｆａｔ　ｆｅｅｄ　ｆｏｒ　１４ｔｏ　２８ｄａｙｓ（ｆｏｒｍｕｌａ：ｓｕｃｒｏｓｅ∶ｌａｒｄ∶ｍｉｌｋ　ｐｏｗｄｅｒ∶ｅｇｇ∶ｐｉｇ　ｃｈｏｌａｔｅ∶
ｓｔａｎｄａｒｄ　ｄｉｅｔ＝３０∶２０∶４∶２∶０．０５∶６３）ａｎｄ　ｃｏｍｂｉｎｅｄ　ｗｉｔｈ　ｉｎｊｅｃｔｉｎｇ　ＳＴＺ；Ｔｈｅ　ｈｙｐｅｒｇｌｙｃｅｍｉａ　ｍｏｕｓｅ
ｍｏｄｅｌ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｃｕｒｅｄ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ　ｂｌｏｏｄ　ｓｕｇａｒ　ｌｅｖｅｌ，ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ　ｓｅｒｕｍ　ｉｎｓｕｌｉｎ　ａｎｄ　ｒｅｄｕｃｉｎｇ　ｉｎｓｕｌｉｎ　ｒｅ－
ｓｉｓｔａｎｃｅ　ｉｎｄｅｘ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｔｉｂｅｔａｎ　ｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ｓｃｉｎｄａｐｓｕｓ　ａｕｒｅｕｓ；ＩＣＲ　ｍｏｕｓｅ；ｈｙｐｅｒｇｌｙｃｅｍｉａ；ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｅｆｆｅｃｔ
２７ 动物医学进展　２０１５年　第３６卷　第４期（总第２６２期）