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薏苡多糖的提取及其单糖组分的分析



全 文 :薏苡多糖的提取及其单糖组分的分析
刘春兰 , 周宜君 , 巴 特
(中央民族大学 生命与环境科学学院 ,北京 100081)
摘 要: 从薏苡根中提取水溶性多糖 , P.C分析其单糖组成为阿拉伯糖 、鼠李糖 、甘露糖 、半乳糖和葡萄糖.
总糖含量为 14.1%, 蛋白质含量为 5.55%.将粗多糖进行乙醇分级得到 A1 、A2 、A3 三个级分多糖 , P.C 分析其
单糖组成均为Ara、Rha、Xyl 、Man 、Gal 、Glc.红外检测具有多糖类物质的一般特征.
关键词: 薏苡;多糖;P.C 分析;I.r.分析
中图分类号:Q53  文献标识码:A  文章编号:1005-8036(2005)01-0049-04
收稿日期:2004-10-11
基金项目:国家民委重点课题 , 民委发[ 2001] 16 号.
作者简介:刘春兰(1962-),女(汉族),吉林省公主岭市人 ,中央民族大学生命与环境科学学院副教授 ,研究方向:天
然产物开发与利用.
1 前 言
  薏苡(Coix lachrymaljobi L .)为禾本科薏苡属草本植物 ,其干燥成熟种仁称为薏苡仁 ,据载具有“温气
消渴”作用 ,为中医学临床上治疗“消渴”(糖尿病)常用药之一[ 1] .近年来 ,国内外学者对薏苡的化学成分
和药理活性进行了研究[ 2] .Takahashi .M 等对薏苡仁水溶性提取物的实验研究中 , 发现薏苡仁多糖
(Coixan)有显著降血糖作用.徐梓辉等进行了薏苡仁多糖的分离提取及降血糖作用的研究 ,结果显示
Coixan有降低正常小鼠血糖作用[ 3] .然而目前对薏苡非食用部分中多糖的研究报道很少.本文就薏苡根
中多糖的提取 、理化性质及单糖组成进行了分析研究 ,为拓宽薏苡资源的利用提供一条新途径.
2 材料与方法
2.1 材料 、试剂及仪器
2.1.1 材料 薏苡根:产地贵州 ,剪碎脱油备用.
2.1.2 试剂 α-淀粉酶:生物试剂(北京京双施微生物培养及制品厂).标准单糖:E.Merck产品.乙醇:
化学纯95%(北京化工厂).其他常用化学试剂均为分析纯.
2.1.3 仪器 紫外光谱仪:美国Nicolet公司.751-紫外可见分光光度仪(上海分析仪器厂).红外光谱
仪:日立 260-10型.
2.2 方法
2.2.1 粗糖提取(见粗糖提取流程)
2.2.2 乙醇分级[ 4]  1%粗糖上清液 ,搅拌下滴加浓度为 90%的乙醇 ,放置过滤 、离心 ,沉淀部分进行常
规干燥 ,上清部分继续分级.
2005年 2月
第 14卷 第 1期
中央民族大学学报(自然科学版)
Journal of the CUN(Natural Sciences Edition)
Feb.2005
Vol.14 No.1
    粗糖提取流程:
薏苡根(脱油脂后的残渣)
煮提三次过滤
残  渣 滤  液
     浓缩 、加 4倍 95%乙醇离心缩合
上清液 沉  淀  常规脱水干燥
薏苡根粗多糖
2.2.3 蛋白质含量的测定
紫外光谱法[ 5] ,半微量凯氏定氮[ 4] .
2.2.4 单糖组分测定
纸层析法[ 4] .
2.2.5 红外检测
取薏苡根多糖 2.0mg ,KBr压片 ,用红外光谱仪在 4000 ~ 650cm-1区间内进行红外扫描.
3 结果与讨论
3.1 薏苡根粗多糖
用水提取获得的薏苡根粗多糖为褐色粉末 ,易溶于热水 ,水溶液 PH值近中性 ,纸层析分析可知各
种单糖组成为Glc 、Gal 、Man 、Ara、Xyl 、Rha.
粗多糖经唾液淀粉酶水解 ,纸层析分析 ,不含 Glc ,与 I2_KI 试剂呈阴性反应 ,说明是一种不含淀粉的
粗多糖.
薏苡根粗多糖经凯氏定氮法测得蛋白质含量为 5.55%,用紫外光谱法测定薏苡根粗多糖在蛋白质
吸收峰处(波长 280nm)有吸收.根据定性和定量分析 ,表明薏苡根多糖含有蛋白质.
3.2 总糖含量的测定
3.2.1 测定条件的选择
利用苯酚-H2SO4 法测定总糖含量时 ,需选择适当的波长并进行稳定性试验.波长选择结果如图 1.
图 1 吸收谱图
Fig.1 Absorbance spectrum
50 中央民族大学学报(自然科学版) 第 14卷 
由图 1可知 ,最大吸收波长为 495nm.稳定性试验结果如表 1.由表 1可知反应时间应选取20min.
表 1 稳定性试验
Table 1 The test of stability
时间(min) 5 10 15 20 25 30
吸光度(A) 1.13 1.14 1.19 1.20 1.18 1.18
3.2.2 总糖含量的测定
按3.2.1条件 ,以苯酚-H2SO4 测得薏苡根粗多糖中总糖含量为 14.1%.
3.3 薏苡粗多糖的分级
因薏苡粗多糖是一个分子大小及极性都不均一的混合杂多糖 ,需进一步纯化.采用分级沉淀法 ,即
在混合多糖的浓水溶液中逐步加入乙醇 ,收集不同醇度下析出的沉淀.薏苡粗多糖经中性乙醇分级得三
个级份:A1 、A2 、A3 .按 3.2.2方法进行糖含量测定 ,经纸层析法测定各级份中单糖成分结果见表 2.
表 2 A1 、A2 、A3 单糖组分及总糖含量
Table 2 Components and contents in A1 、A2 、A3
分级的乙醇浓度(%) 级份 Glc Gal Man Ara Xyl Rha 总糖含量(%)
50 A 1 + + + + + + 12.6
60 A 2 + + + + + + 7.9
80 A 3 + + + + + + 9.9
注:“ +”表示存在
从表 2中可知 ,A1 、A2 、A3 均由Glc 、Gal 、Man 、Ara、Xyl 、Rha六种单糖组成的中性杂多糖 ,其中A 1含
糖量最高 ,为 12.6%.
3.4 薏苡多糖的红外分析
红外光谱可判断分子中官能团的存在及其所处状态 ,图 2为薏苡多糖的红外光谱.可以看出在4000
-650cm-1区间具有多糖类物质的一般特征 ,表现在 3398.85cm-1(强 ,宽)谱带对应于缔合羟基的伸缩振
动 ,2817.54cm-1 ,2849.80cm-1有弱峰 ,为 C-H吸收峰 , 1416.18 cm-1为 C=H 的面内弯曲振动 , 1246.78
cm
-1为CO伸缩振动 ,1044.21 cm-1处的吸收峰 ,表明含吡喃型糖甙键构型 ,885.0 cm-1有吸收峰表明有β
-糖苷键 ,在 1641.72 cm-1出现一典型酰胺吸收 ,表明糖中有蛋白质[ 4] .
图 2 薏苡根多糖红外图谱
Fig.2 I.r.spectrum of the polysaccharide
51 第 1期 刘春兰等:薏苡多糖的提取及其单糖组分的分析
综上所述 ,薏苡根是一种可提取多糖的天然资源.所提多糖是一种不同于淀粉的多糖 ,其单糖组成
复杂 ,具有较高的营养价值 、经济价值及保健作用.通过薏苡多糖的提取及其单糖组分的分析 ,我们进一
步认识到薏苡的多方面价值 ,同时也为充分利用薏苡这种资源提供了试验依据.
参考文献:
[ 1 ]  江苏新医院.中药大词典[ M] .北京:人民卫生出版社 , 1997.
[ 2 ]  阴健.中药现代研究于临床应用[ M] .北京:中医古籍出版社 , 1995.
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[ 4 ]  张惟杰.复合多糖生化研究技术[ M] .第三版.杭州:浙江大学出版社 , 1994.
[ 5 ]  黄如彬 ,等.生物化学实验教程[ M] .北京:世界图书出版公司 , 1990 , 28.
Extraction and Analysis of Polysaccharide of Coix Lachryrnajobi L .
LIU Chun-lan , ZHOU Yi-jun , BA Te
(College of Life and Environmental Science , Central University for Nationalities , Beijing 100081, China)
Abstract:The water soluble crude polysaccharide in the root of Coix lachrymaljobi L ., isolated and
identified by P.C.It contained Ara、Rha、Xyl 、Man 、Gal、Glc.The crude polysaccharide was fractionated
with eth repeatedly and the fractions A1 、A2 、A 3 were obtained.P.C showed that A1 、A2 、A3 contained
Ara 、Rha 、Xyl 、Man 、Gal 、Glc.I.R showed that A1 、A 2 、A3 possessed characters of poly-saccharide.
Key words:Coix lachrymajobi L.;Polysaccharide;P.C ;I.r
[责任编辑:白 玲]
(上接第 38页)
参考文献:
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[ 2 ]  BEHROUZ A , FOROUZAN.数据通信与网络[ M] .北京:机械工业出版社 , 2002.
[ 3 ]  李小平.多媒体网络通信[ M] .北京:北京理工大学出版社 , 2001.
[ 4 ]  杨德贵.网络与宽带 IP技术[ M] .北京:人民邮电出版社 , 2002.
Residential Access Network
ZHAO Hong-shuai
(School of Mathematics and Computer Science , Central University for Nationalities , Beijing 100081 , China)
Abstract:There are some kinds of ways to accomplish resident access network , but there is no verdict
and uniform international criterion.The main methods of realization are introduced in this paper.
Key words:Dial_up;ISDN;ADSL;Cable Modem;FTTH
[责任编辑:杨 玉]
52 中央民族大学学报(自然科学版) 第 14卷