全 文 ：廖建良，谢晓萍，曾令达，等． 土沉香育苗技术研究［J］． 江苏农业科学，2013，41(9) :219 － 220．
土沉香育苗技术研究
廖建良1，谢晓萍1，曾令达1，林芳花1，叶海宇2
(1．惠州学院生命科学系 /生物技术研究所，广东惠州 516007;2．惠州龙发山农业发展有限公司，广东惠州 516007)
摘要:为探索土沉香高效、经济的快速繁殖方法，对土沉香进行组织培养。研究发现，青霉素对土沉香组织培养中
的污染状况有一定的抑制作用;扦插试验表明，土沉香插穗在以泥炭土、河沙(体积比 1 ∶ 1)作为基质，以 1 000 mg /L
ABT 1 号进行处理后生长较好。
关键词:土沉香;荔枝;混交林;组织培养;扦插
中图分类号:S567． 1 + 90． 43 文献标志码:A 文章编号:1002 － 1302(2013)09 － 0219 － 02
收稿日期:2013 － 02 － 20
基金项目:惠州学院生化与分子生物学重点学科项目［编号:惠院科
发(2009)41 号］;惠州科技计划(编号:20110220、20110220) ;惠州
学院质量工程(编号:kc2010003、rcpy2010001) ;广东省大学生创新
性试验项目(编号:2012． 52)。
作者简介:廖建良(1965—) ，男，广东紫金人，硕士，教授，研究方向为
药用植物学。E － mail:chxnljl@ 163． com。
土沉香(Aquilaria sinensis) ，别名白木香，属于瑞香科
(Thymelaeaceae)植物［1］。土沉香以其含树脂的心材入药，药
材名为沉香，为国产中药沉香的正品来源，也是中国生产中药
沉香的唯一植物资源，属于国家二级重点保护野生植物［2］。
沉香是临床常用的理气药，具行气止痛、温中止嗳、纳气平喘
功效，用于治疗胸腹胀痛、胃寒嗳吐、虚喘等症［3］。
近年来，由于土沉香树自然繁殖率低、生存环境的破坏、
虫害及人为掠夺式砍伐等原因，使土沉香树资源遭到严重破
坏，现仅有零星散生的残存植株。1987 年土沉香树被列为国
家珍稀濒危三级保护植物，1999 年又被国务院批准为国家二
级重点保护野生植物［4 － 7］。
本试验研究土沉香育苗技术，初步探索土沉香的快速繁
殖方法。促进土沉香产业发展，引导山区人民种植土沉香这
一珍贵的乡土树种，对调整农村产业结构、发展特色林业、带
动山区农民致富和拉动山区经济的发展、保护森林资源、改善
生态环境都有着重要的意义［4］。
1 材料与方法
1． 1 主要仪器
卷尺，树枝剪、花盆，烧杯，量筒，组培瓶，乙醇灯，长镊子，
剪刀，解剖刀，细胞过滤器，FA1104A 电子天平(上海精天电
子仪器有限公司) ，HWS12 型电热恒温水浴锅(上海一恒科学
仪器有限公司) ，LDZX －40KB 立式压力蒸汽灭菌器(上海申
安医疗器械厂) ，HD － 650 － U 超净工作台(苏州安泰空气技
术有限公司)。
1． 2 主要试剂
75%乙醇，0． 1%氯化汞，无菌水，6 － BA，NAA，大量元
素，微量元素，铁盐，维生素，头孢氨苄，MS 培养基，中国林业
科学研究院 ABT 研究开发中心研制的生根粉 1 号(ABT 1
号)。
1． 3 试验方法
1． 3． 1 组织培养方法 取材、消毒和接种。于晴天的下午取
生长旺盛的土沉香幼嫩枝条，用自来水冲洗约 30 min，在超净
工作台上按以下程序进行表面消毒处理:75%乙醇浸泡 30 s，
接着用 0． 1% 氯化汞液浸泡 7 min，最后用无菌水冲洗
5 ～ 6 次，用无菌吸水纸吸干后，切去与药液直接接触的伤口
部分，将枝条切成 1． 5 ～ 2． 5 cm长的枝段(带 1 ～ 2 个叶芽)备
用。分别接种于诱导分化的普通培养基和青霉素培养基中。
试验设计。普通培养基为 MS + 6 － BA 0． 8 mg /L + NAA
1． 0 mg /L，青霉素培养基为 MS + 6 － BA 0． 8 mg /L + NAA
1． 0 mg /L，附加 50 mg /L青霉素。
培养条件。接种后置于培养室，培养温度控制在(25 ±
2)℃，光照时间 10 h /d，光照强度 2 000 ～ 3 000 lx。
1． 3． 2 扦插繁殖方法 选择清晨温度较低时采集土沉香枝
条，将采下的枝条放在清水中冲洗，然后制成长 10 ～ 12 cm、
保留顶部 3 张叶片(留叶方式试验除外)、每片叶 2 /5 面积的
插穗;插穗上切口为平口，以减少水分散失，下端斜切且尽量
靠近叶节处［5 － 6］。
试验设计。不同基质处理对插穗生根的影响:本试验于
2012 年 3 月在惠州学院试验基地开展。选取土沉香半木质
化插穗中段，用 ABT 1 号 1 000 mg /L处理插穗，浸泡 4 h后进
行扦插。试验设 3 种处理:(1)河沙;(2)泥炭土;(3)泥炭土、
河沙，体积比为 1 ∶ 1。采用完全随机区组设计，每处理 10 株
插穗。
生长调节剂对插穗生根的影响:选取土沉香半木质化插
穗中段，以泥炭土、河沙(体积比 1 ∶ 1)为基质。选用 ABT 1
号为植物生长调节剂，浓度为 1 000 mg /L，插穗基部浸泡 4 h
后扦插，以清水为对照(CK)。试验采用随机区组设计，每处
理 20 株插穗。
2 结果与分析
2． 1 土沉香组织培养
土沉香组织培养中发现，在普通培养基配方中，接种的外
植体在 10 d内全部污染，未发现愈伤组织生长。但添加青霉
素培养基中的外植体在培养过程中，发现外植体在 16 d 左右
长出愈伤组织。
—912—江苏农业科学 2013 年第 41 卷第 9 期
DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2013.09.086
由组织培养结果(表 1)看出，普通 MS 培养基无法成功
诱导出土沉香愈伤组织，可能与土沉香外植体本身带有内生
菌有关。青霉素对于土沉香组织培养中的污染现象有一定的
抑制作用。
表 1 土沉香组织培养生长情况
时间
(d)
MS培养基 添加青霉素 MS培养基
生长情况 污染率(%) 诱导率(%) 生长情况 污染率(%) 诱导率(%)
2 外植体正常 0 0 外植体正常 0 0
4 外植体正常 0 0 外植体正常 0 0
6 部分外植体开始污染 76． 6 0 外植体正常 0 0
8 污染范围扩大 96． 6 0 外植体正常 0 0
10 培养基全部污染 100 0 部分外植体基部开始略显膨大 0 0
12 部分外植体基部开始略显膨大 0 0
14 部分外植体边缘较蓬松 0 0
16 部分长出愈伤组织 0 16． 6
18 部分长出愈伤组织 0 50
2． 2 土沉香扦插繁殖技术
2． 2． 1 不同基质处理对插穗生根的影响 扦插在河沙中的
土沉香插穗，插后 10 d 发现部分插穗萎蔫死亡，其余插穗正
常生长，直到 50 d后有 40%插穗生根。扦插在泥炭土中的土
沉香插穗，插后 25 d部分插穗基部发生腐烂，其余插穗正常
生长，直到 50 d后有 50%插穗生根。扦插在泥炭土、河沙(体
积比 1 ∶ 1)混合基质中的土沉香插穗，基本上正常生长，直到
50 d后共有 70%插穗长出根，第 65 天部分插穗长出叶子。
由不同基质处理扦插土沉香可看出，3 种基质中，土沉香
在泥炭土、河沙(体积比 1 ∶ 1)混合基质中生长最好，存活率
明显较高，且最长根长、插穗生根率比生长在河沙中的土沉香
插穗分别提高了 85． 7%、75%，比生长在泥炭土中的土沉香
插穗分别提高了 3． 33 倍、40%(表 2)。由此可知，土沉香插
穗较适合在泥炭土、河沙(体积比 1 ∶ 1)混合基质中生长，可
能与泥炭土、河沙(体积比 1 ∶ 1)混合基质较好的保水能力与
透气能力有关。
表 2 不同基质处理对插穗生根的影响
基质 插穗生长情况
存活率
(%)
平均生根数
(条 /穗)
最长根长
(cm)
插穗生根率
(%)
河沙 部分插穗萎蔫死亡 40 0． 3 0． 7 40
泥炭土 部分插穗基部腐烂 50 0． 7 0． 3 50
泥炭土、河沙(体积比 1 ∶ 1) 插穗基本正常生长 70 2． 1 1． 3 70
2． 2． 2 生长调节剂对插穗生根的影响 经清水处理过的土
沉香插穗扦插于泥炭土、河沙(体积比 1 ∶ 1)混合基质中，
20 d 后发现部分插穗萎蔫死亡，65 d 后有 20%插穗长出根。
经 1 000 mg /L ABT 1 号 处理过的土沉香插穗扦插于泥炭土、
河沙(体积比 1 ∶ 1)混合基质中，插穗基本正常生长，50 d 后
插穗长出根。
通过清水与 ABT 1 号 处理沉香进行扦插结果可看出，经
ABT 1 号处理的土沉香插穗，最长根长为 1． 1 cm，生根率为
90%，均比清水处理的插穗高(表 3)。经 ABT 1 号处理的土
沉香插穗比清水处理的生根好，说明 ABT 1 号能促进插穗早
生根，提高插穗成活率及生根率。
表 3 生长调节剂对插穗生根的影响
生长调节剂 插穗生长情况
存活率
(%)
平均生根数
(条 /穗)
最长根长
(cm)
插穗生根率
(%)
清水(CK) 部分插穗萎蔫死亡 20 0． 2 0． 3 20
1 000 mg /L ABT 1 号 插穗基本正常生长 90 1． 9 1． 1 90
3 讨论与小结
通过对土沉香快速繁殖研究，发现青霉素对于土沉香组织
培养中的污染现象有一定的抑制作用，但无法真正让土沉香长
出的愈伤组织正常生长发育为植株。这可能与土沉香本身带
有的内生菌有关。植物内生细菌是一种潜在的病原菌，它对于
无病症寄主和感病寄主存在一定威胁。当寄主遇到恶劣的环
境或外界微生物干扰时，在无病症的健康植物组织中存在的内
生休眠病原菌能够重新活动，引起病害［6 －7］。在土沉香扦插试
验中发现，土沉香插穗在以泥炭土、河沙(体积比 1 ∶ 1)作为基
质，以 1 000 mg /L ABT 1号 进行处理后生长较好。
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—022— 江苏农业科学 2013 年第 41 卷第 9 期