全 文 ：— 34 — 现代中药研究与实践2011年第25卷第1期Chin Med J Res Prac,2011 Jan.,Vol.25 No.1
苍术、买麻藤抗高尿酸活性部位筛选
袁红宇 1，孟 玲 1，欧 宁 1，王永庆 1，徐 猛 2
（1. 南京医科大学第一附属医院，江苏 南京 210029 ；2. 南京医科大学，江苏 南京，210029）
摘要：目的 筛选苍术、买麻藤中降低尿酸的活性部位。方法 分别提取分离苍术、买麻藤的不同化
学部位，连续给药一周，测定高尿酸模型小鼠体内尿酸水平及黄嘌呤氧化酶活性。结果 苍术各部位均能
显著降低模型小鼠的血尿酸水平，其中总提取液（Ⅲ）效果最佳；买麻藤部位（Ⅳ）可显著抑制黄嘌呤氧
化酶的活性，降低模型小鼠的血尿酸水平。结论 苍术总提取液是降尿酸的活性部位，挥发油和水提液在
其中共同发挥作用；买麻藤醇提液经过大孔树脂吸附、预洗脱后，60％乙醇洗脱部位是抑制黄嘌呤氧化酶
活性、降低尿酸水平的活性部位。
关键词 ：苍术 ；买麻藤 ；尿酸 ；黄嘌呤氧化酶 ；活性部位
中图分类号 ：R285.5 文献标识码 ：A 文章编号 ：1673-6427(2011)01-0034-04
Screening on Active Sites of Atractylodis Rhizoma and Gnetum Caulis for Anti-
hyperuricaemia
YUAN Hong-yu1， MENG Ling1，OU Ning1，WANG Yong-qing1，XU Meng2
（1. The First Affiliated Hospital to Nanjing Medical University, Nanjing 210029, China; 2. Nanjing Medical
University, Nanjing 210029, China）
Abstract: Objective To screen the effective sites of Atractylodis Rhizoma and Gnetum Caulis to lower
the level of uric acid in blood. Methods The different sites of Atractylodis Rhizoma and Gnetum Caulis were
prepared and given to mice of hyperuricemia model for a week, then the contents of uric acid and activity of
xanthine oxidase were determined. Results Three parts of Atractylodis Rhizoma could lower concentration of
uric acid in blood of model mice, the effect of part Ⅲ was the best. The part Ⅳ of Gnetum Caulis could suppress
the activity of xanthine oxidase significantly and lower the level of uric acid in blood. Conclusion The total
extract was the active site of Atractylodis Rhizoma, which reduced the level of uric acid with volatile oil and water
extract together. The part Ⅳ of Gnetum Caulis was the effective site to inhibit the activity of xanthine oxidase and
lower the contents of uric acid, prepared by macroporous resin adsorption, pre-cleared and 60% ethanol elution.
Key words：Atractylodis Rhizoma; Gnetum Caulis; uric acid; xanthine oxidase; active sites
收稿日期：2010-09-20
作者简介：袁红宇（1973-）， 硕士，副主任中药师，从事中药制剂研究开
发工作。
高尿酸血症是指人体细胞外液中尿酸盐呈超饱和
（≥417 μmol/L）的一种状态，是痛风发病的生化基础，
约有 5~12% 的高尿酸血症患者最终发展成为痛风。
中药对于痛风的治疗、病情的控制有着良好的效果，
且不良反应较少，既可以缓解病人在炎症发作期的疼
痛，又可以从整体上调节机体的内在平衡进而治愈痛
风 [1]。为进一步探索苍术和买麻藤抗高尿酸的物质基
础以及二者间是否存在协同作用， 按照其成分特点，
采用适合的方法提取分离各自不同化学部位，进而以
高尿酸小鼠为实验模型，对苍术及买麻藤不同部位进
行药理筛选，初步确定苍术、买麻藤抗高尿酸的活性
部位，为其新药的研究开发奠定基础。
1 材料与仪器
1.1 实验动物
ICR 雄性小鼠，清洁级，28~32 g，（购自南通大
学动物中心，许可证号 ：SCXK( 苏 )2008-0004）。
1.2 实验材料
苍 术 、 买 麻 藤 饮 片 （ 购 于 安 徽 省 亳 州 药 材
公司）；HPD-100大孔吸附树脂（沧州宝恩化工
有限公司）；别嘌醇（上海信谊万象药业，批号:
080502）；苯溴马隆（德国赫曼大药厂，批号：
0802279）；氧嗪酸钾（山东中科泰斗化学有限公
司，批号:090202）；次黄嘌呤（Adobe公司）；黄嘌
呤氧化酶(XOD)测试盒（南京建成生物工程研究所，
批号:20090421）。
DOI:10.13728/j.1673-6427.2011.01.016
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1.3 实验仪器
调温电热器（通州市申通电热器厂）；旋转蒸发
仪（上海申顺生物科技有限公司）；SHZ-D（Ⅲ）循环
水式真空泵（巩义市英峪予华仪器厂）；101-2 型电热
鼓风干燥箱（上海沪南实验仪器总厂）；Anke TGL-16
冷冻离心机（上海安亭仪器制造厂）；岛津 UV-2401
紫外分光光度计 ；OLYMPUS AU5400 全自动生物分
析仪 ；Sartorius BP 211D 电子天平。
2 药液的制备
2.1 苍术不同提取物药液的制备
取剪碎的苍术160 g，置挥发油提取器中，加入8
倍量蒸馏水，回流提取6 h，收集苍术挥发油（Ⅰ）；
将药渣滤过、滤液适当浓缩得苍术水提液（Ⅱ）。同
法提取，将挥发油加至适当浓缩的水提液中混匀，得
苍术总提取液（Ⅲ）。将以上3种不同部位的苍术提
取液分别用适量吐温-80增溶，蒸馏水定容至200 mL，
得每mL含0.8 g苍术生药材部位的提取液，备用。
2.2 买麻藤不同提取部位药液的制备
2.2.1 买麻藤不同部位的提取分离 取剪碎的买麻藤
500 g 置圆底烧瓶中，加入 60% 乙醇 3 000 mL，浸泡
30 min，回流提取 3 次，每次 1.5 h，合并醇提液，减
压浓缩至约 3 000 mL，蒸馏水稀释至 6 000 mL，作为
上大孔吸附柱母液。将母液平均分成 3 份，1 份留样
备用 ( Ⅰ )。另 2 份母液分别用 A、B 两根 HPD-100
型 大 孔 吸 附 树 脂 柱 吸 附， 水 洗 至 基 本 无 色。A 柱
用 60% 乙醇 2 000 mL 直接洗脱，收集洗脱液 2 000
mL( Ⅲ ) ；B 柱用 20% 乙醇 6 000 mL 预洗脱至无色，
得预洗脱液 6 000 mL( Ⅱ )，再用 60% 乙醇 2 000 mL
洗脱，收集洗脱液 2 000 mL( Ⅳ )。
2.2.2 买麻藤 4 种分离部位固含物含量的测定 [2] 为了
折算不同提取部位的药液浓度，先对上述 4 个部位提
取液进行固含物含量测定。 取 4 个蒸发皿，烘干至恒
重，称重 ；分别加入（Ⅰ）、（Ⅱ）、（Ⅲ）、（Ⅳ）洗脱
液各 50 mL，水浴蒸干，105°C 烘 3 h，在干燥器中冷
却 30 min 后迅速称重。4 份样品的固含物含量测定结
果， 分别为 10.201、0.908、1.688、1.536 mg/mL。
2.2.3 买麻藤不同部位药液的配制 将上述买麻藤
（Ⅰ）、（Ⅱ）、（Ⅲ）、（Ⅳ）部位提取液分别回收乙醇、
按比例减压浓缩配制成浓度为 60、20、20、20 mg/mL
的药液，备用。
2.3 阳性对照组药液的配制
别嘌醇溶液 ：取别嘌醇 3 片（0.1g/ 片）混悬于
200 mL0.7% 的 CMC-Na 溶液中，浓度 1.5 mg/mL，给
药量 30 mg/kg。
苯溴马隆溶液 ：取苯溴马隆 3 片（50 mg/ 片）
混悬于 400 mL0.7% 的 CMC-Na 溶液中，浓度 0.375
mg/mL，给药量 7.5 mg/kg。
3 实验方法和结果
3.1 实验方法
取健康雄性ICR小鼠110只，随机分为11组，每组
10只。各组别分别为A：生理盐水组；B：模型组；
C：别嘌醇组；D：苯溴马隆组；E：苍术（Ⅰ）部
位；F：苍术（Ⅱ）部位；G：苍术（Ⅲ）部位；H：
买麻藤（Ⅰ）部位；I：买麻藤（Ⅱ）部位；J：买麻
藤（Ⅲ）部位；K：买麻藤（Ⅳ）部位。
生理盐水组、模型组按 0.2 mL/10 g 灌服生理盐
水 7 d，每 d1 次。阳性对照组前 4 d 给药同生理盐水组，
后3 d按0.2 mL/10 g灌服阳性药，每d 1次。实验组按0.2
mL/10 g 灌服相应的药液 7 d，每 d 1 次。各组于第 6
d 晚禁食，次日灌服药液后 1 h，除生理盐水组外，
分别皮下注射氧嗪酸钾 50 mg/kg，腹腔注射次黄嘌呤
500 mg/kg，建立高尿酸血症小鼠模型 [3]。造模 3 h 后，
小鼠摘眼球取血，每鼠取血约 0.8 mL，3 500 r/min 离
心 10 min，吸取血清分别测定尿酸浓度和黄嘌呤氧化
酶的活性。
3.2 统计学方法
统计软件 : Stata，结果以均数 ± 标准差表示，以
t 检验进行各组间的统计，用单因素方差分析对实验
组进行总体比较，并使用 Scheffe 法对各实验组进行
两两比较。
3.3 实验结果
各组药液对高尿酸小鼠模型尿酸水平及 XOD 活
性的影响，测定结果见表 1、2。
表1 各药液组对高尿酸模型小鼠尿酸水平的影响（x±s）
Tab.1 Effect of each drug groups on uric acid level in model of higher uric
acid
组别
生理盐水
模型
别嘌醇
苯溴马隆
苍术（Ⅰ）
苍术（Ⅱ）
苍术（Ⅲ）
买麻藤（Ⅰ）
买麻藤（Ⅱ）
买麻藤（Ⅲ）
买麻藤（Ⅳ）
n
8
8
10
7
8
10
9
10
10
8
10
剂量(g/kg)
─
─
0.03
0.0075
16
16
16
1.2
0.4
0.4
0.4
血尿酸值(μmol/L)
30.1±16.3
169.76±44.61＃＃
7.3±4.7**
57.4±26.9**
102.6±59.5*
105.1±46.3*
56.5±32.8**
89.4±43.0**
204.5±58.9
139.0±28.8
86.9±46.2**
注 ：苍术各组剂量为相当于生药材重量 ；与空白组比较，＃＃ p<0.01 ；
与模型组比较，*p<0.05， **p<0.01
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从表 1、2 可以看出，模型组小鼠皮下注射氧嗪
酸钾、腹腔注射次黄嘌呤后，体内 XOD 活性显著升
高，可能是由于次黄嘌呤含量急剧增加且尿酸酶被抑
制时，机体内应激性增强，迅速将次黄嘌呤氧化成黄
嘌呤，进而生成尿酸，导致血尿酸水平增高。与空白
组相比，模型组 XOD 活性和血尿酸均有极显著差异
（p<0.01），说明造模成功。
表 1 结果表明，苍术总提取液能极显著的降低
模型小鼠尿酸水平（p<0.01），而苍术挥发油、水煎液
也有显著的降尿酸作用（p<0.05）。采用 Scheefe 法对
苍术的三个不同部位进行单因素方差分析，三者间差
异具有有统计学意义 ( p<0.01) ；两两比较结果表明，
苍术总提取液降低尿酸的效果最好，而苍术挥发油的
降尿酸作用与水提液大致相当，推测在苍术总提取液
中挥发油与水提液共同发挥作用。因此在应用苍术降
尿酸时，应将苍术总提取液作为有效部位。从表 2 可
以看出，苍术总提取液在抑制 XOD 活性方面无明显
效果，推测苍术是通过促进尿酸排泄来降低血尿酸水
平，与作者前期研究结果一致。
通过表 1、2 可以看出，买麻藤（Ⅰ）、（Ⅲ）、（Ⅳ）
部位均可降低模型小鼠的尿酸水平，其中（Ⅰ）、（Ⅳ）
部位可显著性的降低模型小鼠的尿酸水平 ( p<0.01)，
显著的抑制 XOD 的活性 ( p<0.05)。采用 scheefe 法对
买麻藤的 4 个不同部位的降尿酸水平进行单因素方差
分析，差异有统计学意义 ( p<0.01)，其中差异主要来
自（Ⅱ）部位与（Ⅰ）、（Ⅳ）部位 ( p<0.01)，说明Ⅱ
部位无降尿酸活性 ；从表 2 亦可以看出买麻藤（Ⅱ）
部位对 XOD 活性无抑制作用，因此可作为杂质除去。
从两两比较的结果来看，（Ⅰ）（Ⅳ）两组药液的降尿
酸效果接近，而（Ⅰ）部位给药剂量是（Ⅳ）部位的
3 倍，可见母液在大孔吸附树脂吸附后，用 60％乙醇
表2 各药液组对高尿酸模型小鼠XOD活性的影响（x±s）
Tab.2 Effect of each drug groups on activity of XOD in model of higher
uric acid
组别
生理盐水组
模型
别嘌醇
苯溴马隆
苍术（Ⅲ）
买麻藤（Ⅰ）
买麻藤（Ⅱ）
买麻藤（Ⅲ）
买麻藤（Ⅳ）
n
9
8
10
7
9
10
10
8
10
剂量(g/kg)
─
─
0.03
0.0075
16
1.2
0.4
0.4
0.4
XOD的活性(U/L)
13.8±1.1
19.2±2.3＃＃
16.0±2.6**
18.3±2.8
18.2±1.6
16.8±2.3*
17.8±2.0
17.0±1.8
16.6±1.3*
注 ：苍术给药量为相当于生药材的质量 ；与空白组比较，＃＃ p<0.01 ；
与模型组比较，* p<0.05，** p<0.01。
洗脱可得到纯度较高的降尿酸活性部位 ；（Ⅲ）、（Ⅳ）
两组药液的给药剂量相同，但（Ⅳ）药液的降尿酸效
果显著优于（Ⅲ）药液组（p<0.01），说明在用 60％
乙醇洗脱前，用 20％的乙醇进行预洗脱，可去除杂质
部位，使有效部位的纯度得到进一步的提高。综上结
果，可优选部位（Ⅳ）作为买麻藤降尿酸的活性部位。
4 讨论
对比苍术挥发油与水溶性成分的药理作用可以发
现 ：在利尿方面，挥发油成分作用较强 ；而在抑制炎
症方面，挥发油及水溶性成分的作用相当 [4]。结合本
实验的实验结果，选择苍术总提取液作为抗高尿酸活
性部位，既可以显著降低血尿酸水平，又能有效的抑
制痛风发作期的炎症反应。
买麻藤为买麻藤科植物买麻藤或小叶买麻藤的
干燥藤茎，主要含有茋类、生物碱、挥发油、黄酮等
类化合物 [5]。在体外实验中发现，买麻藤茋类提取物
对黄嘌呤氧化酶具有较强的抑制作用 [6]。从本实验的
结果来看，通过大孔吸附树脂纯化后的买麻藤部位
（Ⅳ）在体内降低尿酸水平及抑制 XOD 活性显著提
高。另外，买麻藤中茋类化合物还是一种高活性的
LTC4 受体拮抗剂，抗炎机制与其抑制 IL-6 mRNA 表
达 [7]，并能抑制 TNF-α 诱导的 HSC IL-8 生成，影响
IL-8 mRNA 表达有关 [8]。提示买麻藤活性部位具有缓
解炎症反应、降低尿酸水平的双重药理效应，对于痛
风病的治疗既可以缓解痛风患者在炎症急性发作期的
疼痛，又可从根本上降低尿酸水平，防止病情复发。
经多次预实验均未发现苍术提取液对黄嘌呤氧化
酶有抑制作用，故文中未对苍术挥发油及水提液部位
进行黄嘌呤氧化酶的抑制作用作进一步实验。另外，
前期的研究提示，苍术与买麻藤降低尿酸的机制不
同，二者间可能有协同作用。本次实验中还对苍术与
买麻藤总提取液进行了简单配伍，研究其配伍后对模
型小鼠尿酸和黄嘌呤氧化酶的抑制作用，结果发现配
伍组仍能显著的降低模型小鼠体内的黄嘌呤氧化酶的
活性，但降尿酸作用反不如使用苍术或买麻藤单一活
性部位。因此，苍术、买麻藤之间降尿酸作用是否存
在协同作用还不能简单得出结论，需进一步的实验探
讨。
参考文献
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1.4 观察指标
1.4.1 一般体征 观察大鼠右后肢内踝胫跗关节的
外观、肢体的活动情况等。
1.4.2 K+ 浓度的测定 于造模后的第 4 d，断头处死
动物，取右侧踝关节及其周围组织，称重、匀浆、离
心取上清液，用 SYNCHRON EL-ISE 分析仪 ( 美国
Beckman 公司 ) 测定组织的 K+ 浓度 。
1.4.3 组织病理学检查 取右侧踝关节及其周围组
织，作光镜检测。用常规方法将标本固定、脱钙、石
腊包埋、切片、HE 染色。
2 结果
2.1 一般体征 痛风模型组大鼠，在被注射尿酸盐
溶液后第 2 d ，内踝的胫跗关节均出现了不同程度的
踝关节肿胀、行走迟缓、足爪卷曲、肢体不愿着力负重 ,
个别动物出现后肢过度俯屈，甚至跛行。造模后第 3
d，各种体征更为明显。
2.2 K+ 浓度 痛风模型组踝关节及其周围组织的 K+
浓度明显高于正常组（P<0.05）。结果见表 1。
2.3 组织病理学改变 正常组 ：踝关节及其周围组
织结构正常清晰，无任何组织病理学改变。见图 2。
痛风模型组 ：局部解剖时发现有尿酸盐结晶沉
着于踝关节腔内。光镜下可见明显的关节炎病理改
变，胫骨跗骨周围有明显的异物肉芽肿形成，表现为
异物肉芽肿组织中出现较多的异物多核巨细胞 , 新生
小血管形成及较多的成纤维细胞 ；局部软骨组织被破
坏。见图 3。
3 讨论
痛风的急性发作，是尿酸钠盐在关节及关节周
围组织，以结晶形式沉积引起的急性炎症反应。尿酸
钠盐可使白细胞趋化、坏死，从而释放出 5-HT、缓
激肽等多种致炎因子，使炎症局部组织充血、水肿，
K+、H+、浓度升高，引起关节及关节周围组织红、肿、
热、痛。有文献报道：实验性痛风外周疼痛介质 5-HT
和 K+， 在由局部注射尿酸盐而造成的大鼠急性痛风
模型过程中均明显升高，且二者的动态变化高度相关
[3]。本实验结果显示大鼠踝关节及其周围组织的 K+
离子浓度变化，与文献报道的基本一致。
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表1 踝关节及其周围组织的K+浓度（x±s）
Tab.1 Distribution of K+ concentration in ankle joint and its surrounding
tissues
n K+（cB/mmol•L-1）
正常组 10 0.93±0.07
痛风模型组 10 1.14±0.06
注 ：与正常组比较，* P<0.05。
图2 正常组 X100（HE）
Fig.2 HE photo in the normal rat
图 3 痛风模型组X100（HE）
Fig.3 HE photo in the gout model (X100)
（上接第 36 页）
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