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Field efficacy of emulsifiable suspensions of Beauveria bassiana conidia for control of Myzus persicae population on cabbage

球孢白僵菌分生孢子乳悬剂对甘蓝上桃蚜的田间控制效果



全 文 :球孢白僵菌分生孢子乳悬剂对甘蓝上桃蚜
的田间控制效果*
应盛华1  冯明光1* *  许寿涛1  马再波2
( 1 浙江大学微生物研究所,杭州 310029; 2云南星耀生物技术有限公司,昆明 650051)
摘要  利用液酵法生产球孢白僵菌 ( Beauver ia bassiana) SG8702 菌株的分生孢子粉, 配制成含孢量为
1010个!ml- 1的孢子乳悬剂 I, 在此基础上按 1%( W/ V)的比例添加 10% 吡虫啉可湿性粉剂而得孢子乳悬
剂∀ . 于 2001 年 7 月对两种孢子乳悬剂在云南昆明进行了自然条件下甘蓝上桃蚜 ( Myz us p er sicae)的田
间小区( 5. 5m # 4. 8m)药效试验,各 3 个浓度(含孢量分别为 107、106 及 105个!ml- 1常规喷雾处理,重复设
清水喷雾对照, 重复 3 次,随机区组排列. 在喷菌后连续 28 d 的田间蚜虫密度定期抽样调查中, 乳悬剂∀
的 1000倍稀释液喷雾有效抑制了蚜虫数量增长,喷后第 7~ 28 天防效始终在 90%以上.乳悬剂 I 的相同
稀释液喷雾对桃蚜的控制略逊于乳悬剂 ∀ ,但喷后第 7 天的相对防效也达到 85% , 此后维持防效 70%以
上达两周, 第 24 天和 28 天才分别降至 64. 4%和 52. 6% .用含孢量 106 和 105 个!ml- 1的菌液喷雾,乳悬剂
I 仍表现出明显的控蚜效果,而添加微量吡虫啉的乳悬剂 II 的控蚜效果总是优于同一浓度下的乳悬剂 I .
昆明地区夏季温和而多小雨的气候有利于孢子乳悬剂发挥作用.
关键词  球孢白僵菌  孢子乳悬剂  桃蚜  田间试验  防治效果
文章编号  1001- 9332( 2003) 04- 0545- 04 中图分类号  Q939. 9  文献标识码  A
Field efficacy of emulsifiable suspensions of Beauveria bassiana conidia for control of Myzus persicae popula
tion on cabbage. YING Shenghua, FENG Mingguang, XU Shoutao and MA Zaibo ( 1 I nstitute of M icrobiolo
gy , Zhej iang University , Hangzhou 310029, China; 2 Yunnan Xingyao Biotechnology Co. , L td. , K unming
650051, China) . Chin . J . A pp l. Ecol . , 2003, 14( 4) : 545~ 548.
The conidial powder of Beauver ia bassiana SG8702 produced using a diphasic fermentation technolog y was for
mulated into emulsifiable suspention I ( ESI, > 1010 conidia!ml- 1) and ESII, which resulted from adding 1%
( W/ V ) of imidacloprid 10% WP to t he ES I. Thr ee dilut ions ( 107 , 106 , and 105 conidia!ml- 1 of each w ere
sprayed onto cabbage plants for control of the green peach aphid Myzus p er sicae populat ion in field plots in Kun
ming , Yunnan dur ing July 2001. Each dilution and a w ater spray as control were r eplicated three times. During
a 28 d per iod of sampling at 3 or 4 d intervals, spray of the ES II at 107 conidia!ml- 1 controlled the increase of
the aphid population by > 90% consistently from day 7 after spray. T he efficacy for the ES I at the same con
centration r eached 85% on day 7 after spr ay , ex ceeded 70% in the following two weeks, but declined to 64. 4%
on day 24 and 52. 6% on day 28. A t t he lower concentr at ions sprayed, both suspensions significantly suppressed
the increase of M . persicae population, but the ESI I resulted in higher efficacy t han the ESI. Local summer
weather with mild temperature and frequent r ainy days w as favorable to the use o f the formulations for aphid
control.
Key words  Beauver ia bassiana, Emulsifiable conidia suspensions, Myzus p er sicae, F ield trial, Aphid control.
* ∃ 长江学者奖励计划%、国家自然科学基金( 39870513) 及云南省省
院省校科技合作资助项目( 2000YZ03) .
* * 通讯联系人.
2001- 10- 26收稿, 2002- 03- 26接受.
1  引   言
球孢白僵菌( Beauver ia bassiana)是一种在国内
外已被广泛深入研究的重要杀虫真菌, 近几年来已
有多种剂型产品在欧美国家登记注册[ 9, 11] ,用于多
种农林害虫尤其是刺吸式口器害虫的微生物防治.
该菌的杀蚜特性最早由冯明光等发现[ 8]并进行了
一系列研究报道[ 5~ 8, 10, 13] ,从自然感病的麦二叉蚜
( Schiz aphis graminum )上分离获得的菌株对蚜科
Diuraphis、 Metopolophium、 Myz us、 Phorodon、
Rhopalosiphum、Schiz aphis、Sitobion ( Macrosiphi
um )等 7个属的 8种蚜虫在生物测定中表现很强的
毒力,孢子悬浮液表面处理的致死浓度 LC50一般在
10
5 个!ml- 1量级水平[ 7, 10, 14] ,因而作为蚜虫的微生
物控制因子具有很好的开发应用前景.近年来, 我们
在高纯度孢子粉的生产制备工艺、孢子贮存生
理[ 11]、孢子乳悬剂的重要助剂筛选[ 19]以及与孢子
相容的化学杀虫剂筛选[ 18]等方面的研究取得了较
大进展, 为球孢白僵菌孢子乳悬剂的研制奠定了必
要基础. 本文首次报道以球孢白僵菌杀蚜菌株
应 用 生 态 学 报  2003 年 4 月  第 14 卷  第 4 期                              
CHINESE JOURNAL OF APPLIED ECOLOGY, Apr . 2003, 14( 4)&545~ 548
SG8702[ 8]为基础开发的孢子乳悬剂中试产品在云
南昆明对甘蓝上桃蚜( Myz us p ersicae )种群的控制
作用进行田间小区试验的研究结果,以评价其应用
潜力.
2  材料与方法
21  孢子乳悬剂配制
采用液固两相法[ 9]对球孢白僵菌 SG8702 菌株[ 8]在云
南星耀生物技术有限公司进行分生孢子粉的中试生产. 以所
获孢子粉为有效活性成份和由生物学相容的惰性液载体、乳
化剂、稳定剂及紫外保护剂等助剂组成的配方优化乳液(浙
江大学微生物研究所研制) , 按1/ 10 的比例( W/ V)配制成孢
子乳悬剂,使含孢量达到 1010个!ml- 1 .配制时按配方比例称
量孢子粉和各种助剂, 先将惰性液(一种石化产品 )加热到
30~ 35∋ , 然后将上述助剂加入少量惰性液中,充分搅拌混
匀,再加入全部惰性液, 混匀后即成乳液.最后将称量好的孢
子粉分批次加入乳液中,充分搅拌均匀即成球孢白僵菌孢子
乳悬剂 I[ 12] .同时, 在配制好的孢子乳悬剂 I 中按1%的比例
( W/ V)加入与该菌孢子相容的 10%吡虫啉可湿性粉剂[ 18] ,
搅拌混匀即得孢子乳悬剂∀ .
22  田间药效试验
221 浓度处理  将孢子乳悬剂(和孢子乳∀均用清水分
别稀释至 1000 倍( 107 个!ml- 1 )、10000 倍( 106 个!ml- 1 )和
100000 倍( 105 个!ml- 1 ) 3 个浓度处理, 并以清水作为对照,
每处理重复 3 次.最低浓度处理相当于该菌对有些蚜虫的致
死浓度[ 10] . 用 DPS 软件[ 17]按双向分组完全随机区组设计安
排 2 种乳悬剂各浓度处理及其重复的小区试验.
222 小区试验  在云南昆明市郊官渡区选取肥力和长势
均匀的 4~ 5 叶期甘蓝(莲花白)菜地 0. 1hm2 , 划分为 21 个
大小相同的小区( 5. 5m # 4. 8m) ,各小区之间设立 4 行隔离
带.田间所有小区完全随机区组排列并给予标示. 两种孢子
乳悬剂的 3 个浓度及清水对照处理按标示小区在田间桃蚜
成虫较多时 ,用普通背负式喷雾器逐一从清水对照、低浓度
至高浓度对甘蓝植株进行喷雾, 喷雾量控制在 22~ 50kg!
hm- 2以内 .喷雾前当日随机取 5 个小区、每小区随机抽查 10
株甘蓝, 计数活蚜数作为种群基数. 于喷雾后第 7、10、14、
17、21、24 和 28 天,各处理每小区同样随机抽查 10 株甘蓝,
观察记录各小区每植株活蚜数.由于真菌杀虫剂的作用效果
可能受气候因子影响较大,试验期间每天记录天气情况.
23  数据处理
  两种孢子乳悬剂不同浓度处理与对照相比的控蚜效果,
根据喷雾前后各小区的活蚜数进行统计并按以下公式计算
活蚜减退率 D ( % )和相对防治效果 E( % ) .
  D= PT
0
- PT
1
/ PT
0
# 100
  E = (1- PCK 0# PT 1
PCK
1
# PT
0
) # 100
式中, PT
0
和 PT
1
分别表示处理小区喷菌前后的活蚜数, P CK
0
和 PCK
1
分别表示对照小区喷雾前后的活蚜数. 所有数据处
理及分析用 DPS 数据处理系统软件进行[ 17] .
3  结果与分析
31  试验期间天气状况
  表 1给出田间试验观察期间昆明地区气象资
料.从喷菌至观察结束的 28 d期间,温度变化范围
为 15. 0~ 27. 3 ∋ , 最低日均温 18. 1 ∋ , 最高日均温
22. 4 ∋ ,平均日均温 20. 8 ∋ .从降雨情况看, 共有 18
个降雨日,其中日降雨不超过 10 mm 的小雨日 10
d, 10~ 25 mm 中雨日 4 d, 25~ 50 mm 大雨日 4 d,
总降雨量为 217. 7 mm,日最大降雨量为 33 mm,日
均降雨量为 7. 5 mm .
表 1  田间试验期间的温度的降雨状况(云南昆明, 2001)
Table 1 Local records of temperature and precipitation during field ex
periment ( Kunming, Yunnan, 2001)
日期
Date
温度 T emperature( ∋ )
最低
Min.
最高
Max.
平均
Mean
降雨量
Precipi
tat ion
(mm)
日期
Date
温度 Temperature( ∋ )
最低
M in.
最高
Max .
平均
Mean
降雨量
Precipi
tat ion
( mm)
6. 29 19. 1 25. 6 21. 3 12. 0 7. 14 16. 7 26. 1 20. 4 21. 5
6. 3 15. 0 23 20. 1 25. 4 7. 15 18. 4 27. 3 21. 2 0. 1
7. 1 18. 2 24. 1 19. 1 0. 3 7. 16 18. 2 25. 8 21. 2 0. 0
7. 2 16. 0 27. 2 21. 6 0. 0 7. 17 17. 5 25. 8 21. 4 13. 0
7. 3 16. 6 24. 4 19. 8 23. 5 7. 18 17. 5 26. 7 21. 0 3. 0
7. 4 17. 0 24. 3 19. 6 33. 0 7. 19 16. 9 26. 2 20. 6 1. 4
7. 5 18. 0 21. 5 19. 3 10. 0 7. 20 18. 0 23. 8 20. 1 5. 9
7. 6 17. 8 25. 1 20. 4 0. 1 7. 21 18. 5 24. 2 20. 4 0. 0
7. 7 17. 5 27. 2 22. 3 0. 0 7. 22 18. 2 26. 2 21. 3 0. 0
7. 8 16. 6 23. 8 19. 9 2. 2 7. 23 18. 2 26. 0 21. 1 2. 2
7. 9 17. 2 19. 5 18. 1 27. 5 7. 24 18. 3 26. 3 21. 6 0. 0
7. 10 17. 6 25. 2 20. 6 5. 0 7. 25 18. 9 26. 9 21. 0 6. 0
7. 11 17. 7 26. 0 21. 5 0. 0 7. 26 20. 0 26. 5 21. 4 25. 5
7. 12 17. 9 26. 3 21. 6 0. 0 7. 27 18. 3 26. 4 22. 4 0. 0
7. 13 18. 3 27. 3 22. 3 0. 1 平均Mean  20. 8 7. 5
32  田间控蚜效果
  在两种孢子乳悬剂的不同浓度喷雾处理和清水
对照喷雾处理后, 各处理的活蚜数量随时间变化的
观察值见图 1所示. 所有浓度处理的活蚜数在同一
时间明显低于对照, 说明两种孢子乳悬剂在试验浓
度范围内均对甘蓝上桃蚜种群增长具有控制作用,
浓度越高,控制作用越显著. 在相同浓度下,喷孢子
乳悬剂 (的每株活蚜数明显高于喷孢子乳悬剂 ∀的
小区,二者间的差异呈现随菌液浓度升高而增大的
趋势. 也就是说, 按 1/ 100比例加入 10%吡虫啉可
湿剂的孢子乳悬剂控制田间桃蚜的效果明显优于纯
孢子乳悬剂,且浓度越高,差异越明显.
  表 2给出 2种孢子乳悬剂各浓度处理下在喷菌
后不同时间的蚜虫减退率和相对防效. 孢子乳悬剂
∀的 1000倍液喷雾能很好地抑制蚜虫的数量增长,
1)农业部农药检定生测室编. 1993. 农药田间药效试验标准(一) . 北
京:中国标准出版社.
546 应  用  生  态  学  报                   14卷
图 1  球孢白僵菌孢子乳悬剂 ES I 和 ES∀在不同浓度下喷雾后对田间甘蓝上桃蚜种群动态的影响
Fig. 1 Ef fect of spraying different concentration of B. bassiana conidia emulasifiable suspensions ( ES I an d ESII) on the f luctuations of M . persicae
populat ion on cabbage in the f ield.
表 2  球孢白僵菌孢子乳悬剂 I和 II对甘蓝地桃蚜种群的田间药效试验结果(喷菌当日蚜虫种群基数为 57. 4头/株,云南昆明, 200107)
Table 2 Efficacy of B. bassiana conidia emulsifiable suspensions ( ES) I and II for control of M. persicae population on cabbage in a fieldplot ex
periment in Kunming, Yunnan, during July 2001. Population density estimated on the spray day ( June 29) was 57. 4 aphids per plant
喷药后天数
Days aft er
spraying ( d)
防效指标
Indices
for efficacy
清水对照
Water spray
( CK)
孢子乳悬剂 I的喷雾浓度
Concent ration of ESI
sprayed( conidia!ml1)
105 106 107
孢子乳悬剂∀的喷雾浓度
Concent rat ion of ES∀
sprayed( conidia!ml1)
105 106 107
7 活蚜数/株 No. aphids/ plant, ) SD 73. 7) 10. 9 45. 1) 13. 1 30. 9 ) 12. 2 11. 1) 7. 3 33. 0) 1. 2 12. 1 ) 3. 6 0. 6 ) 0. 2
蚜虫减退率 Reduction of aphids ( %) 28. 3 21. 4 46. 1 80. 7 42. 5 79. 0 99. 0
相对控蚜效果 Relative control( % ) - 38. 7 58. 0 85. 0 55. 2 83. 6 99. 2
10 活蚜数/株 No. aphids/ plant, ) SD 81. 7) 21. 6 62. 9 ) 6. 1 37. 4 ) 12. 6 20. 6) 9. 4 27. 8) 3. 3 16. 5 ) 1. 2 1. 6 ) 2. 7
蚜虫减退率 Reduction of aphids ( %) 42. 3 9. 5 34. 8 64. 1 51. 6 71. 3 97. 2
相对控蚜效果 Relative control ( % ) - 23. 0 54. 2 74. 8 66. 0 79. 8 98. 0
14 活蚜数/株 No. aphids/ plant, ) SD 134. 0 ) 23. 1 81. 4 ) 9. 8 43. 5 ) 4. 6 25. 7) 1. 8 42. 4) 6. 0 22. 2 ) 6. 4 3. 3 ) 2. 0
蚜虫减退率 Reduction of aphids ( %) 133. 4 41. 9 24. 3 55. 3 26. 2 61. 3 94. 3
相对控蚜效果 Relative control ) % ) - 39. 2 67. 6 80. 9 68. 4 83. 4 97. 5
17 活蚜数/株 No. aphids/ plant, ) SD 192. 9 ) 37. 5 133. 2 ) 14. 8 82. 1 ) 16. 6 42. 8) 15. 9 59. 3) 4. 7 37. 8 ) 7. 2 3. 8 ) 1. 2蚜虫减退率 Reduction of aphids ( %) 236. 1 132. 0 43. 0 25. 5 3. 3 34. 1 93. 3
相对控蚜效果 Relative control( % ) - 31. 0 57. 4 77. 8 69. 3 80. 4 98. 0
21 活蚜数/株 No. aphids/ plant, ( SD 206. 7 ) 31. 7 153. 4 ) 12. 1 101. 0 ) 16. 9 62. 7) 12. 0 77. 3) 6. 2 64. 0) 13. 4 8. 3 ) 3. 1
蚜虫减退率 Reduction of aphids ( %) 260. 1 167. 0 75. 6 9. 3 34. 6 11. 5 85. 5
相对控蚜效果 Relative control ( % ) - 25. 8 51. 2 69. 7 62. 6 69. 0 96. 0
24 活蚜数/株 No. aphids/ plant, ) SD 213. 4 ) 34. 4 175. 6 ) 34. 5 150. 0 ) 38. 3 76. 1) 20. 1 101. 0) 17. 5 82. 9) 18. 8 16. 0 ) 11. 0
蚜虫减退率 Reduction of aphids(% ) 271. 7 206. 0 161. 0 32. 5 75. 9 44. 5 72. 1
相对控蚜效果 Relative control ( % ) - 17. 7 29. 8 64. 4 52. 7 61. 1 92. 5
28 活蚜数/株 No. aphids/ plant, ) SD 238. 1 ) 46. 6 204. 9 ) 29. 8 174. 0 ) 28. 0 113. 0) 11. 5 133. 3) 12. 5 108. 7 ) 13. 0 22. 7 ) 16. 0
蚜虫减退率 Reduction of aphids ( %) 314. 8 257. 0 204. 0 96. 8 132. 0 89. 4 60. 4
相对控蚜效果 Relative control ( % ) - 13. 9 26. 8 52. 6 44. 0 54. 4 90. 5
在喷后第 7天的防效达 99% , 第 28天的防效仍保
持在 90% 以上, 此时残存活蚜密度仅 22. 7 头!
株- 1,比当日对照的238. 1头!株- 1低 10倍以上. 孢
子乳悬剂 I 的 1000倍液喷雾对桃蚜的控制作用低
于孢子乳悬剂 ∀. 喷菌后第 7 天的相对防效达到
85% ,在此后的 2周内一直维持防效 70%以上, 至
第 24天降为 64. 4%, 第 28天降至 52. 6%.显然, 添
加微量吡虫啉能显著提高球孢白僵菌制剂对蚜虫的
控制效果. 在 1万倍和 10 万倍的喷雾浓度下, 孢子
乳悬剂 (的控蚜效果也逊于孢子乳悬剂 ∀,如前者
在喷后第 7~ 21天的防效两种浓度下分别为 51%
~ 68%和 23% ~ 39%,后者同期的防效分别为 69%
~ 84%和 55%~ 69% . 但无论如何, 孢子乳悬剂 (
即使稀释 10万倍喷雾,对田间桃蚜种群的增长也表
现出明显的抑制作用(表 2) .
4  讨   论
  球孢白僵菌分生孢子萌发和侵染桃蚜的适宜温
5474 期           应盛华等:球孢白僵菌分生孢子乳悬剂对甘蓝上桃蚜的田间控制效果         
度在 20 ∋ 左右[ 15] .在本次田间试验中,气温始终既
适合蚜虫的繁衍,也适宜白僵菌侵染,加之孢子乳悬
剂喷后多阴雨天气(表 1) , 有利于蚜虫感染发病, 因
而获得了较为理想的控蚜效果(表 2) . 尤其令人鼓
舞的是,本试验在完全自然的条件下进行,实证了用
SG8702孢子乳悬剂控制蚜害的可能性. 云南多数地
区只有雨季和旱季之分, 昆明地区的雨季一般在 5
~ 9 月, 是多种作物的生长季节和蚜虫等刺吸式口
器害虫的盛发季节,也正是最适合应用孢子乳悬剂
控制这些害虫的季节.
  孢子乳悬剂 II 的田间控蚜效果优于孢子乳悬
剂 I,说明加入微量的化学杀虫剂[ 18]可以大幅增强
孢子制剂的诱病杀蚜效果.在本试验中,纯孢子乳悬
剂中仅加入 1%(W/ V )的 10%吡虫啉可湿性粉剂,
在稀释 1000倍的高浓度喷液中,吡虫啉的实际含量
恰好为 1. 0mmol!L - 1,而同一剂型吡虫啉的田间常
规使用浓度为 3000倍.也就是说, 在孢子乳悬剂 II
的1000稀释液中吡虫啉实际用量仅相当于其常规
用量的 3%或低 33. 3倍,远低于该药剂对蚜虫的次
亚致死剂量(常规用药浓度的 10倍稀释液) . 添加如
此微量的化学杀虫剂却能大幅提升孢子乳悬剂的杀
蚜效果,其原因是微量的化学杀虫剂(尽管无致死作
用)削弱了蚜虫对孢子侵染的抵抗力,使菌液雾状喷
出后更容易诱发蚜虫种群的流行病.这有待于进一
步研究证实.
  丝孢类杀虫真菌制剂的杀虫效果受环境因子尤
其是湿度的影响,选择适合的助剂和应用配套技术
对菌剂的保护增效至关重要. 高侵染力菌株佐以适
当助剂可保证分生孢子在萌发前的稳定[ 4] , 分生孢
子油剂超低容量喷雾的治蝗效果达 90%以上防治
效果并优于水悬液[ 2, 3] , 因为水不易使孢子粘附于
昆虫体表[ 16] ,而油作为介质的孢子悬浮液能提高孢
子的粘附率[ 1, 12] .我们研制的球孢白僵菌孢子乳悬
剂选择了以惰性矿物油作为孢子制剂的主载体, 辅
之以生物学相容的乳化剂、防紫外损伤保护剂和稳
定剂[ 19] ,在本次田间试验表现出良好的控蚜效果,
有效控蚜期达 3~ 4周(图 1、表 2) .该制剂的生态适
应性、推广应用潜力及其对农产品安全性的贡献, 有
待于长期定点多次使用孢子乳悬剂和化学杀虫剂的
系统性平行对比田间试验的完成才能全面评价.
致谢  云南星耀生物技术有限公司李秀军、罗树荣对本项研
究给予热情支持,王保安、李继伟和吴必贤参加部分田间 调
查工作,在此表示诚挚谢意
参考文献
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作者简介  应盛华, 男, 1973 年生, 硕士, 助研, 主要从事杀
虫微生物及其制剂研究, 已发表论文 6 篇. Email: yingsh @
zju. edu. cn
548 应  用  生  态  学  报                   14卷