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数比较用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。
3 实验结果
3.1 皮瓣成活率测定 术后第7d,与空白对照组比较,桃红
四物汤组皮瓣的平均成活率明显增多(P<0.05)。见表1。
表1 2组皮瓣平均存活率(-x ±s)
组别 n 平均成活率/%
空白对照组 10 50.23±7.82
桃红四物汤组 10 66.74±6.73*
与空白对照组比较,*P<0.05
3.2 组织学观察 所有皮瓣坏死区的组织学形态相似,均表
现为急性炎症、中性粒细胞和单核细胞浸润。桃红四物汤组
皮下成纤维细胞增生明显,肉芽组织增生显著,皮下组织水肿
不明显,血管扩张;空白对照组皮下成纤维细胞,肉芽组织,毛
细血管增生均明显低于桃红四物汤组。
3.3 微血管密度检测 桃红四物汤组经CD34抗体染色阳性
微血管数中段明显多于空 白 对 照 组,差 异 有 统 计 学 意
义(P<0.05)。见表2。
表2 2组皮瓣单位面积平均毛细血管计数(-x ±s,个/mm2)
组别 n 皮瓣近段 皮瓣中段 皮瓣远段
空白对照组 10 19.71±0.66 9.29±1.13 —
桃红四物汤组 10 20.55±1.12 18.23±2.89* —
与空白对照组比较,*P<0.05;—:表示皮瓣坏死
4 讨论
近年来随着细胞生物学和分子生物学的不断发展,对皮
瓣存活的发生机制的研究不断深入,其重在改善自身血液循
环状态,促进缺血皮瓣血管的新生。因此,在促进皮瓣存活的
治疗过程中,如何让缺血皮瓣微循环重建,成为目前治疗缺血
皮瓣存活的重要方面。
近代中医研究皮瓣,多认为血虚夹瘀。血瘀是本病主要
的病因,治疗上应以养血以扶正,活血以化瘀祛邪。桃红四物
汤养血活血化瘀止痛,养血不滞血,化瘀不伤正,补中有行,破
中有收,方中熟地、白芍乃血中血药,当归、川芎是血中气药,
阴阳动静相配,故能补血,又能和血,加入活血祛瘀的桃仁、红
花为主药,突出了活血化瘀的作用。
本实验的结果显示:桃红四物汤能增加超长随意皮瓣的
成活面积,增加皮瓣毛细血管密度,可能诱导新生血管的生
成,从而促进缺血皮瓣的成活率及生存质量,提示其促进缺血
皮瓣成活的作用机制可能是诱导新生血管的生成,促进缺血
皮瓣的成活。
参考文献:
[1]肖海涛,李永林,王立夫,等 .EGF对大鼠背部随意皮瓣存活的影
响[J].江苏医药,2006,32(4):349~351.
(收稿日期:2011-09-13)
*基金项目:广西自然科学基金项目(NO:2010GXNSFA0131357)
作者简介:钟正贤(1952~),男,研究员,研究方向:心血管药物研究开发。
多叶越南槐和山豆根的药理作用比较*
钟正贤,张 颖,卢文杰,牙启康
(广西中医药研究院,广西 南宁 530022)
摘 要:目的:对多叶越南槐和山豆根的药理作用进行比
较。方法:采用小鼠耳廓肿胀法,0.6%醋酸所致扭体法,毛细
玻璃管凝血时间法,CCL4 所致急性肝损伤法,免疫器官法和
小鼠负重游泳等实验,观察多叶越南槐和山豆根、抗炎、镇痛、
抗凝血、抗肝损伤、抗疲劳等药理作用。结果:多叶越南槐和
山豆根均能减轻小鼠耳廓肿胀,减少小鼠扭体次数;延长凝血
时间;降低肝损伤小鼠转氨酶活性;增加免疫器官重量和延长
小鼠游泳时间。结论:多叶越南槐和山豆根具有一定的抗炎、
镇痛、抗凝、降酶、免疫增强和抗疲劳作用,相比较,2种药物药
理作用强度差异不大。
关键词:多叶越南槐;山豆根;药理作用;小鼠
中图分类号:285.5 文献标识码:A
文章编号:1007-2349(2012)01-0058-03
多叶越南槐(Sophora tonkinensis Gagnep.var.polyphyla
S.)为豆科槐属植物,与山豆根(越南槐)Sophora tonkinensis
是同科同属同种的根,是越南槐的一个变种。生长于石山区,
分布于广西、广东、云南、贵州和江西等省[1],在广西主要分布
于红水河流域,如都安、马山、忻城、武鸣等地[2]。其性寒,味
苦,具有清热解毒、消肿利咽之功效,常用于火毒蕴结,咽喉肿
痛,齿龈肿痛等疾患的治疗。市场上山豆根日益面临枯竭的
现状,因其与山豆根性状和药效相似,广西民间把多叶越南槐
当作山豆根药材来使用,《广西中药材标准》1990版也将多叶
越南槐作为山豆根药材的植物来源之一收载。为探索多叶越
南槐药材能否作为山豆根的代用品,为资源利用和临床应用
提供科学依据。且多叶越南槐药理基础研究又未见报道,因
此,笔者对多叶越南槐和山豆根进行了药理作用对比研究,现
85 云 南 中 医 中 药 杂 志 2012年第33卷第1期
DOI:10.16254/j.cnki.53-1120/r.2012.01.036
将研究结果报道如下。
1 实验材料
1.1 药物及试剂 多叶越南槐醇提物(4.25g生药/g膏);山
豆根醇提物(4.14g生药/g膏),由广西中医药研究院中药化
学研究所提供。实验时用蒸馏水研磨配制成药液备用。阿司
匹林肠溶片为武汉远大制药集团股份有限公司产品,批号:
081101。联苯双酯,为浙江万邦药业有限公司产品,批号:
100717。人参蜂王浆,为北京市东风保健营养品有限公司,批
号:201011806。乳酸,为南京建成生物研究所产品,批号:
20101229。尿素氮,为长春汇力生物技术有限公司产品,批
号:201010。血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)试
剂盒,均为长春汇力生物技术有限公司产品,批号为2010021
和2010048。
1.2 动物 昆明种小鼠,体重18~22g,部分12~14g,雌雄
各半。由广西医科大学实验动物中心提供,清洁级,许可证
号:SCXK桂2003—0003。小鼠分性别饲养于空调实验室内,
室温:(22±2)℃,相对湿度:(60±2)%,喂颗粒标准饲料,自
由饮水和摄食。
1.3 仪器 722型光栅分光光度计,上海分析仪器三厂产品。
FA1004-型万分之一电子天平,上海精密科学仪器有限公司
产品。
1.4 统计学方法 采用PEMS 3.1统计软件分析数据。所
得实验数据以均数±标准差(-x ±s)表示,采用t检验作组间
比较。
2 实验方法与结果
2.1 对巴豆油所致小鼠耳廓肿胀的抑制作用[3] 取小鼠60
只,雌雄各半,随机分为空白对照组,山豆根高、低剂量(3.6、
1.8g/kg)组,多叶越南槐高、低剂量(3.6、1.8g/kg)组和阳
性药阿斯匹林(0.2g/kg)组,每组10只。用药各组均灌胃给
药,空白对照组给予等量的蒸馏水,每天1次,连续7d。于末
次给药30min后,用微量注射器取0.05mL 2%巴豆油溶液
涂于小鼠右耳,待4h后处死小鼠。立即用口径为8mm的打
孔器,沿着小鼠左右耳廓相同部位打孔取材,然后在电子天平
上分别称重,以两耳片重量(mg)的差值作为肿胀程度指标,
并求出百分抑制率(%)。结果见表1。
表1 多叶越南槐和山豆根对巴豆油引起小鼠耳廓肿胀的影响(-x ±s,n=10)
组别 剂量/g·kg-1 肿胀度/mg 抑制率/%
空白对照组 — 25.91±4.33 —
阿司匹林 0.2 18.73±4.45** 27.7
多叶越南槐
3.6 20.82±3.56* 19.6
1.8 21.36±4.03* 17.5
山豆根
3.6 21.25±4.04* 17.9
1.8 20.71±6.15* 20.06
与空白对照组比较,*P<0.05,**P<0.01(下同)
结果表明,与空白对照组比较,多叶越南槐和山豆根高、
低剂量组及阿司匹林组均明显降低小鼠耳廓肿胀度,提示多
叶越南槐和山豆根均具有明显的抗炎作用。相比较,多叶越
南槐抗炎作用比山豆根稍强,但差异无显著性意义。
2.2 对醋酸所致小鼠扭体次数的影响[3] 分组及给药同
2.1。于末次给药后1h,每只小鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液
0.2mL/只,立即观察并记录20min内各小鼠的扭体次数。
比较给药组与对照组之间的差异,评价受试药物的镇痛作用。
结果见表2。
表2 多叶越南槐和山豆根对醋酸所致小鼠扭体反应的影响(-x ±s,n=10)
组别 剂量/g·kg-1 扭体次数
空白对照组 — 18.0±12.0
阿司匹林 0.2 3.3±2.5**
越南槐
3.6 5.3±4.8**
1.8 8.1±5.4*
山豆根
3.6 6.6±4.7*
1.8 7.9±5.6*
结果表明,与空白对照组比较,多叶越南槐和山豆根高、
低剂量组及阿司匹林组均明显减少小鼠扭体次数,提示多叶
越南槐和山豆根均具有明显的镇痛作用,且2者作用强度
相当。
2.3 对小鼠凝血时间的影响[3] 分组及给药同2.1。末次给
药1h后,用内径为1mm的玻璃毛细管插入小鼠眦球后静脉
丛取血,至毛细玻璃管血柱达5cm为止,每隔30s折断毛细
玻璃管一小段,同时用肉眼观察血柱是否移动,仔细检查有无
凝血丝出现,计算从毛细管采血到凝血丝出现的时间,进行组
间比较。结果见表3。
表3 多叶越南槐和山豆根对小鼠凝血时间的影响(-x ±s,n=10)
组别 剂量/g·kg-1 凝血时间/s
空白对照组 — 4.23±1.55
阿斯匹林 0.2 6.17±1.37**
多叶越南槐
3.6 5.91±0.29**
1.8 5.28±0.71
山豆根
3.6 5.53±0.88*
1.8 5.39±0.63*
结果表明,与空白对照组比较,多叶越南槐高剂量组及山
豆根高、低剂量组均明显延长小鼠凝血时间。提示多叶越南
槐和山豆根均具有一定的抗凝血作用,且2者作用相当。
2.4 对四氯化碳(CCL4)所致肝损伤模型的影响[4] 取小鼠
70只,随机分为空白对照组,模型组,联苯双酯(0.2g/kg)组,
山豆根高、低剂量(3.6、1.8g/kg)组,多叶越南槐高、低剂量
(3.6、1.8g/kg)组,每组10只。给药各组灌胃给药,空白对照
组给予同体积蒸馏水。动物每天灌胃给药1次,连续用药
7d。末次给药1h后除正常对照组外,各组小鼠腹腔注射1%
四氯化碳(CCL4)花生油溶液10mL/kg(体重)。16h后从小
鼠眼眶静脉丛取血,分离血清。然后取血清按临床试剂盒方
法,测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性。结
果见表4。
952012年第33卷第1期 云 南 中 医 中 药 杂 志
表4 多叶越南槐和山豆根对CCL4引起急性肝损伤小鼠
血清转氨酶活性的影响(-x ±s,n=10)
组别 剂量/g·kg-1 ALT/mmol·L-1 AST/mmol·L-1
空白对照组 — 1.90±0.64 3.70±0.44
模型组 — 13.67±6.41# 7.14±1.31#
联苯双酯 0.2 2.04±1.40*** 4.90±0.81***
多叶越南槐
3.6 11.59±2.11* 4.95±0.81**
1.8 12.56±3.23* 5.02±0.99*
山豆根
3.6 10.24±3.87* 4.61±1.49**
1.8 10.85±2.58* 5.55±0.94*
与空白对照组比较,#P<0.001;与模型组比较,*P<0.05,
**P<0.01,***P<0.001
结果表明,多叶越南槐和山豆根高、低剂量组对CCL4 引
起急性肝损伤小鼠血清 ALT、AST活性升高有明显抑制作
用。提示多叶越南槐和山豆根均具有一定的保肝降酶作用,
且作用强度相当。
2.5 对幼年小鼠免疫器官重量的影响[5] 取12~14g幼年
小鼠60只,雌雄各半。随机分为空白对照组,阳性药人参蜂
王浆(10mL/kg)组,多叶越南槐高、低剂量(3.6、1.8g/kg)
组,山豆根高、低剂量(3.6、1.8g/kg)组,每组10只。用药各
组分别每日灌胃给药1次,连续10d。于末次给药后24h,拉
颈椎处死,称体重,摘出胸腺及脾脏称重,以胸腺或脾脏重
量(mg)与体重(g)之比作为胸腺或脾脏指数。结果见表5。
表5 多叶越南槐对小鼠免疫器官重量影响(-x ±s,n=10)
组别
剂量
/g·kg-1
胸腺指数
/mg·g-1体重
脾脏指数
/mg·g-1体重
空白对照组 — 3.20±0.57 4.39±0.45
人参蜂王浆 10mL 3.76±0.53* 5.18±0.82*
多叶越南槐
3.6 3.69±0.43* 5.39±0.67*
1.8 3.07±0.45 5.60±1.38*
山豆根
3.6 3.99±0.92* 5.40±1.12*
1.8 3.67±0.45 5.07±1.13
与空白对照组比较,*P<0.05
结果表明,与空白对照组比较,阳性药人参蜂王浆,多叶
越南槐和山豆根高、低剂量组均能增加小鼠胸腺指数和脾脏
指数,提示多叶越南槐和山豆根具有一定细胞免疫增强作用。
且2者作用相当。
2.6 对小鼠抗疲劳能力的影响[5] 取小鼠60只,雌雄各半,
随机分为空白对照组,山豆根高、低剂量(3.6、1.8g/kg)组,
多叶越南槐高、低剂量(3.6、1.8g/kg)组和阳性药人参蜂王
浆(10mL/kg)组,每组10只。分别每日灌胃给药1次,连续
10d。末次给药后1h,给小鼠负重(约体重的10%保险丝),
放入水温30℃左右的水槽中游泳,并记录小鼠开始游泳至体
力耗尽沉入水面下8s不能浮出水面为止的时间,为体力耗竭
时间。并在耗竭游泳实验后的各组小鼠立即从水中取出,让
小鼠休息30min后,摘除眼球取血,按临床试剂盒方法测定
血液中乳酸(BLA)和尿素氮(BUN)的含量。结果见表6。
表6 多叶越南槐和山豆根对小鼠抗疲劳能力的影响(-x ±s,n=10)
组别
剂量
/g·kg-1
游泳耗竭时间
/min
BLA
/mmol·L-1
BUN
/mmol·L-1
空白对照组 — 2.01±0.82 6.49±0.67 10.03±1.33
人参蜂王浆 10mL 3.22±1.06* 5.02±1.17* 7.36±1.03**
多叶越南槐
3.6 3.44±1.44* 5.38±0.77* 7.90±0.95*
1.8 2.76±0.75* 5.77±0.59 8.11±0.64
山豆根
3.6 3.45±1.44* 5.65±0.84* 7.58±1.23*
1.8 2.74±0.69* 6.07±0.31 8.28±0.92
与空白对照组比较,*P<0.05,**P<0.01
结果表明,与空白对照组比较,多叶越南槐和山豆根高、
低剂量组和阳性药人参蜂王浆组均能延长小鼠游泳时间,高
剂量组明显降低血中乳酸及尿素氮含量。提示多叶越南槐和
山豆根具有一定的抗疲劳作用。相比较,两者抗疲劳作用强
度差异不大。
3 小结与讨论
目前对越南槐的研究和利用主要集中在山豆根上,其它
种类少有报道。加大对其它越南槐种类的研究,寻找新的药
源或发现新的有效成分,将会使越南槐的利用和开发前景更
加广阔。根据越南槐的临床功用及药理作用研究报道,笔者
对多叶越南槐和山豆根设计了抗凝、抗炎、镇痛、抗肝损、抗疲
劳等药理实验比较。结果表明,多叶越南槐和山豆根均能减
轻小鼠耳廓肿胀;减少小鼠扭体次数;降低肝损伤小鼠血清转
氨酶活性;延长凝血时间;并延长小鼠游泳时间,具有一定的
抗凝、抗炎、镇痛、降转氨酶和抗疲劳等药理作用。相比较,多
叶越南槐和山豆根的药理作用强度差异不大。推测这些药理
作用可能与该植物共同所含的黄酮类、酚类、生物碱等化学物
质有关,本研究结果为扩大多叶越南槐的科学应用提供了实
验依据,对于其他方面的药理作用仍待进一步研究。
参考文献:
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(收稿日期:2011-08-08)
06 云 南 中 医 中 药 杂 志 2012年第33卷第1期