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冀北山区野生红柴胡组织培养与快速繁殖研究



全 文 :河北林业科技第 4期 2016年 8月
红柴胡(B.scorzonerifolium Willd.)是为伞形科
柴胡属多年生草本植物,为我国的传统中药,以根
入药,主治感冒、发热、寒热等症状[1]。药理实验表
明,柴胡皂苷具有镇静、镇痛、镇咳、抗炎、保肝、抗
肿瘤等多种功效[2]。红柴胡主要分布在坝上高原,海
拔 1200m以上,光照充足,品质上佳,是冀北山区野
生珍稀药用植物[3]。由于过度采挖,野生资源逐渐枯
竭,在冀北山区仅零星分布,数量稀少。本文所建立
的红柴胡组织培养和快速繁殖技术,对其资源保护
及合理开发利用具有一定的指导意义。
1 材料
试验材料为野生红柴胡带腑芽茎段,采自河北
省坝上地区。
2 方法
以 MS为基本培养基。(1)诱导培养基:MS+6-
BA 1.5mg/L+IBA 0.5mg/L。(2)增殖培养基:MS+6-
BA 1.0mg/L+IBA 0.5mg/L。(3)生根培养基:1/2MS+
IBA 0.5mg/L。以上培养基中均加入 3%的蔗糖和
0.8%琼脂,pH5.8,培养温度为(24±2)℃,光照时间
12h/d,光照强 40μmol/m2·s左右。
2.1 芽的诱导
将腋芽茎用流水冲洗,在超净台里用 75%酒精
浸泡 30s,无菌水漂洗 2次,每次 1~2min;再用升汞
水溶液消毒 8~10min,无菌水漂洗 3 次,每次 1~
2min。切成 0.5cm的带芽茎段,接种到培养基(1)中
进行芽诱导。5d后芽体开始萌动,经过 20d芽可长
出新叶。
2.2 增殖培养
将诱导培养获得的无菌芽转接至丛生芽增殖
培养基(2)中培养,进行继代增殖。经过短暂的停滞
冀北山区野生红柴胡组织培养与快速繁殖研究
李冬杰
(河北科技大学生物科学与工程学院,河北 石家庄 050018)
摘要:以冀北山区野生药用植物红柴胡的腋芽为外植体,以 MS+6-BA 1.5mg/L+IBA 0.5mg/L为诱导培养基,以 MS+6-
BA 1mg/L+ IBA 0.5mg/L为增殖培养基,以 1/2MS+IBA 0.5mg/L为生根培养基,采用渐进法炼苗,注重适时移栽,成活率达到
90%以上,且苗齐苗壮。
关键词:红柴胡;腋芽;组织培养
中图分类号:S567.79 文献标识码:A 文章编号:1002-3356(2016)04-0034-02
Study on Tissue Culture and Rapid Propagation of B.scorzonerifolium Willd. in Mountainous Area
of Northern Hebei Province
LI Dong-jie
(Department of Biological Science and Engineering, Hebei University of Science and Technology,Shijiazhuang,Hebei 050018)
Abstract:To establish the tissue culture and rapid propagation system of the wild medicinal plant B.scorzonerifolium Willd.in
the mountain area of northern Hebei, the axillary buds were used as the explants, and the suitable medium for induction,
propagation and rooting was selected. The results showed that the seedlings survival rate was more than 90%, and the seedlings
were vigorous through asymptotic method training and transplanting in suitable time when the inducing, proliferation and rooting
culture medium was MS+6-BA 1mg/L+ IBA 0.5mg/L,MS+6-BA 1mg/L+ IBA 0.5mg/L and 1/2MS+IBA0.5 mg/L respectively.
Key words:B.scorzonerifolium Willd;Tuber with buds;Tissue culture
收稿日期:2016-06-22
资助:河北省科技支撑计划(14237503D)
作者简介:李冬杰(1966-),硕士,教授,主要从事生物技术方面的教学与科研工作。E-mail:ldj618@I63.com。
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DOI:10.16449/j.cnki.issn1002-3356.2016.04.010
河北林业科技第 4期 2016年 8月
期,3d后即能观察到新芽开始继续生长,茎段基部伴
有少量愈伤组织生成,10d后开始从腋芽处分化出丛
生芽,30d后丛生芽长到 3~4cm,增殖系数可达 3~5。
2.3 生根培养
将生长健壮的单苗接种到生根培养基中诱导
生根,7d后可见叶片明显增大,开始有根形成,15d
不定根长达 2~3cm。20d每苗生根数 5~6条,生根率
91%。
2.4 炼苗与移栽
待根长到 2~3cm时,将其从培养室中移到温度
较低、自然光照的室内 4~5d后,开瓶练苗 2~3d再
移栽。栽植前将培养土灭菌,苗栽后浇透水。初期
加盖塑料薄膜保湿保温,湿度保持在 80%,温度控
制在(18±2)℃,每日自然光照10h。7d后揭去薄膜,
移栽 14d后统计,成活率 90%以上。成苗后移栽至
苗圃。
3 讨论
目前,有关柴胡的组织培养研究尽管已有报
道,但仍有不少问题需深入研究[4]。本文对以下几个
方面进行了改进,首先在外植体的选择上,尽管柴
胡的外植体选择较广泛,包括叶片、叶柄、茎段、腋
芽都可以进行快繁[5],但选用分化能力最强的外植
体对组培的成功很关键。本实验直接采用带芽茎
段,其芽的诱导启动快、芽增殖效果也好。另外,在
外植体的选择问题上,还注重了采用同一基因型的
植株作为外植体。
在柴胡快繁的激素配比方面,多数采用的是细
胞分裂素 6-BA、KT,与生长素 NAA、2,4-D和 IAA
的配比[6-7]。本实验采用了 6-BA与 IBA的组合,结
果显示其对芽的诱导、芽增殖效果均佳。
在柴胡适时移栽研究方面,有报道成活率在
95%以上,移栽 2~3周后,可长出叶片[7]。本实验采
用了渐进法,即闭瓶炼苗逐渐到开瓶炼苗,此时恰
好根长到 2~3cm时,苗高 2~3cm时,移栽时机最
适,成活率能达到 90%以上,且苗齐苗壮,整体提高
了组培的效率。
参 考 文 献
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