全 文 ：收稿日期：2015-01-13
作者简介：韩天娇（1990-），女，黑龙江佳木斯人，硕士研究生，从事天然产物的分离纯化与药理活性研究
E-mail: 532510575@qq.com
*通讯作者：陈燕忠（1965-），男，研究员，研究方向：缓控释制剂 E-mail: Doctor.c@163.com
独子藤各部位提取物体外抗癌活性研究
韩天娇1，陈燕忠2*，王定勇2，张 彦2
（1. 广东药学院中药学院，广东 广州 510006；2. 广东药学院药科学院，广东 广州 510006）
摘 要：目的 探讨独子藤根、茎、叶、果实提取物的抗癌效果。方法 采用MTT法，检测独子藤不同部位甲醇提取物对
EC109食管癌细胞、Hela宫颈癌细胞、HT-29大肠癌细胞的抑制率。结果 独子藤根、茎、叶提取物对3种癌细胞有显著抑
制作用，对HT-29大肠癌细胞的抑制作用尤为突出；独子藤根、茎、叶部位提取物抗癌活性呈现一定的量效关系；果实部
位提取物对癌细胞株无明显抑制作用。 结论 独子藤根、茎、叶提取物对癌细胞抑制作用显著，有必要对其活性成分进行
筛选分离。
关键词：独子藤；提取物；抗癌活性
中图分类号：R285 　 　　　文献标识码：A 　 　　　文章编号：1672-979X（2015）02-0099-03
Research on Anti-tumor Activities in vitro of Extracts from Different Parts of Celastrus
Monospermus Roxb.
HAN Tian-jiao1, CHEN Yan-zhong2, WANG Ding-yong2, ZHANG Yan2
(1. School of Traditional Chinese Medicine, Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510006, China; 2.
School of Pharmacy, Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510006, China)
Abstract: Objective To study the anti-tumor activities of extracts from the roots, stems, leaves and fruits of Celastrus
monospermus Roxb.. Methods Cancer cell EC109, Hela and HT-29 were all treated with extracts from different parts
of Celastrus monospermus Roxb.. The inhibition rates of the extracts were detected through MTT method. Results
Extracts from roots, stems and leaves showed signifi cant inhibitory effects, especially on HT-29. Moreover, the effects
showed dose-dependency. However, the anti-tumor activity of extract from fruits was not remarkable. Conclusion The
extracts from roots, stems and leaves of Celastrus monospermus Roxb. have signifi cant inhibitory effects on cancer
cells. Further separation and extraction is a must to fi nd new compounds.
Key Words: Celastrus monospermus Roxb.; extract; anti-tumor activity
独子藤（Celastrus monospermus Roxb.）是卫矛
科南蛇藤属常绿藤本植物，又称单子南蛇藤、红藤、
大样红藤（广东）[1]。现代药理研究表明，卫矛科植
物大多具有抗肿瘤、抗菌、免疫抑制、杀虫及细胞毒
活性，是寻找天然活性产物的重要来源[2]。研究发现
独子藤中主要含生物碱和三萜类成分，其中木栓烷型
研究[J]．临床肺科杂志，2009，14（4）：455-457．
[10] Qiu X，Li H，Tang H，et al．Hydrogen inhalation ameliorates
lipopolysaccharide-induced acute lung injury in mice [J]．Int
Immunopharmacol，2011，11：2130-2137．
[11] Li B，Dong C，Wang G，et al．Pulmonary epithelial CCR3
promotes LPS-induced lung infl ammation by mediating release of
IL-8 [J]．J Cell Physiol，2011，226：2398-2405．
[12] Herdar E，Brown Z．p38 MAPK signaling cascades in infl ammatory
disease[J]．Mol Med Today，1999，5(10)：439-447．
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三萜类化合物具有显著的抗癌活性[3]。为进一步从独
子藤中获取更多生物活性物质，挖掘其抗癌活性成
分，我们采用甲醇为溶剂对采自广东阳春的独子藤进
行提取浓缩，并进行药理活性测试[4]，以冀为后续分
离和筛选活性化合物提供实验基础和理论依据，为更
有效更合理地开发独子藤资源奠定基础。
1 材料
1.1 仪器
S W - C J - 1 F超净工作台（苏州净化设备公
司）；M O D E L 3 1 1二氧化碳培养箱（美国
Thermo Forma）；XDS-1B倒置相差显微镜（日本
Olympus）；TGL-166A离心机（上海安亭）；Model
680酶标仪（美国Bio-Rad）；超声波清洗器（中国
华南超声波设备厂）；HH·W21·Cu 600恒温水浴锅
（上海医疗器械七厂）；KS260c平板震荡仪（德国
IKA）。
1.2 试剂
1640培养基（美国Gibco）；澳洲胎牛血清
（美国Gibco）；胰酶（美国Gibco）；顺铂（美国
Sigma）；水为超纯水。
1.3 药材
独子藤于2008年9月采自广东阳春地区，经广
东药学院中药学院李书渊教授鉴定为独子藤（C.
monospermus Roxb.），标本存放于广东药学院药科
学院天然药物化学教研室。
1.4 细胞
EC109食管癌细胞（中科院肿瘤研究所）；Hela
宫颈癌细胞（上海中科院细胞库）；HT-29大肠癌细
胞（上海中科院细胞库）。
2 方法
2.1 提取方法
称取独子藤根、茎、叶、果实各50 g，分部加入
400 mL甲醇，150 Hz下超声提取1 h，常压浓缩提取
液，分别得干燥浸膏2.8，3.6，3.2，2.7 g。
2.2 抗癌活性测试
采用MTT 法检测细胞存活率或抑制率[4]。
2.2.1 药物配制 分别称取独子藤根、茎、叶、果实部
分干燥浸膏80 mg，加1.0 mL DMSO，超声至无明显
沉淀物。再分别用含10 %胎牛血清的1640培养液倍比
稀释为1.25，2.5，5，10，20，40，80 μg/mL。精密
称取3 mg顺铂，用灭菌生理盐水溶解，配制为3 mg/mL
母液，再分别用含10 %胎牛血清的1640培养液稀释至
3.0，1.5 μg/mL。
2.2.2 抗癌活性检测 取对数生长期的细胞种板，用
含10 %胎牛血清的1640培养液配制细胞悬液，将
EC109、HT-29细胞以3×104/mL密度，Hela细胞以
2×104/mL密度接种于96孔培养板，37 ℃，5 % CO2
条件下贴壁培养24 h。取细胞铺满单层96孔培养板，
吸弃原培养液，空白对照组换入含10 %胎牛血清的
1640培养基200 μL，溶剂对照组换入含10 % DMSO
1640培养基200 μL，药物组分别换入1.25，2.5，5，
10，20，40，80 μg/mL药物溶液200 μL，阳性对照组
加顺铂溶液200 μL（EC109、Hela细胞给药浓度1.5 μg/mL，
HT-29给药浓度3.0 μg/mL），于37 ℃、5 % CO2培养箱
内孵育48 h。吸弃孔内上清，每孔加入1640培养液新
鲜配制的MTT溶液（0.5 mg/mL）100 μL，继续孵育4
h。终止培养，吸弃孔内培养上清，每孔加入150 μL
DMSO，37 ℃振荡10 min，测定570 nm波长吸光度
（A570）值。实验组抑制率=（1-实验组A570/空白对照
组A570）×100 %。阳性对照组抑制率（%）=（1-阳
性对照组A570/空白组A570）×100 %。
2.3 统计分析
采用SPSS 13.0统计软件，对实验数据进行方差
分析，各组数值以均值±标准差表示。
3 结果
不同浓度根、茎、叶、果提取物对肿瘤细胞
EC109、Hela、HT-29的抑制率分别见表1~表3。
由表1可见，根部位对EC109食管癌细胞抑制效
果极显著，较低浓度已经达到顺铂的抑制效果，药物
浓度为80 μg/mL时，其抑制效果显著强于顺铂（1.5
μg/mL）；茎部位最大浓度时抑制率与阳性药物相
当；叶部位对EC109食管癌细胞抑制效果不显著；低
浓度下叶部位抑制效果优于茎部位；果实部位不显示
抑制作用。
由表2可见，根、茎、叶部位均显示对Hela细胞
较显著的抑制效果。80 μg/mL根、茎提取物对Hela细
胞抑制效果与顺铂（1.5 μg/mL）相当；叶部位有一
定的抑制效果，果实部位同样无明显抑制作用。
由表3可见，根、茎、叶部位对HT-29大肠癌细胞
均显示极显著抑制效果， 10 μg/mL时抑制效果已与
100 食品与药品 Food and Drug 2015年第 17卷第2期
表1 不同浓度根、茎、叶、果提取物对EC109细胞抑制率
提取
部位
溶剂对照组
抑制率/%
不同浓度提取物抑制率/% 阳性药物
抑制率/%1.25
/μg·mL-1
2.5
/μg·mL-1
5
/μg·mL-1
10
/μg·mL-1
20
/μg·mL-1
40
/μg·mL-1
80
/μg·mL-1
根 9.0±1.8 8.3±0.8** 11.4±0.5** 12.8±0.6** 26.3±1.7** 53.6±1.2 82.5±0.6** 82.5±0.1** 48.4±1.0
茎 4.8±1.2 0±1.0** 0.8±0.7** 4.9±1.6** 5.4±0.6** 14.1±1.4** 15.7±1.6** 45.4±1.0 48.4±1.2
叶 7.2±0.8 10.4±0.9** 10.4±2.2** 14.0±1.4** 16.8±0.3** 20.7±0.9** 28.0±1.0** 31.8±0.2** 46.7±0.8
果 5.1±0.3 2.9±1.4** 6.5±1.8** 9.8±2.1** 8.3±1.9** 6.3±1.3** 8.8±0.8** 5.7±0.5** 45.0±0.6
*P≤0.05 vs 阳性药物；**P≤0.01 vs 阳性药物
表2 不同浓度根、茎、叶、果提取物对Hela细胞抑制率
表3 不同浓度根、茎、叶、果提取物对HT-29细胞抑制率
提取部位 溶剂对照组抑制率/%
不同浓度提取物抑制率/% 阳性药物
抑制率/%1.25
/μg·mL-1
2.5
/μg·mL-1
5
/μg·mL-1
10
/μg·mL-1
20
/μg·mL-1
40
/μg·mL-1
80
/μg·mL-1
根 3.9±1.2 1.9±1.5** 4.4±2.2** 3.7±0.6** 11.6±2.1** 53.9±1.1** 85.6±0.8 88.6±0.2 85.2±0.9
茎 7.3±1.8 8.2±1.2** 8.7±2.1** 5.1±1.8** 5.0±1.2** 13.3±2.3** 56.2±0.4** 90.4±0.6 86.3±0.8
叶 6.7±2.2 11.7±1.9** 10.6±2.1** 11.1±1.2** 12.8±1.9** 22.0±2.7** 34.4±2.4** 63.2±2.5** 80.0±0.5
果 5.5±1.3 7.4±3.1** 9.0±1.2** 11.3±0.9** 16.6±0.9** 17.2±2.8** 16.8±1.1** 15.1±0.5** 78.2±0.5
提取部
位
溶剂对照
组抑制率/%
不同浓度提取物抑制率/% 阳性药物
抑制率/%1.25
/μg·mL-1
2.5
/μg·mL-1
5
/μg·mL-1
10
/μg·mL-1
20
/μg·mL-1
40
/μg·mL-1
80
/μg·mL-1
根 0±1.5 3.0±1.1** 13.1±1.6** 15.0±2.2** 33.3±1.5 52.8±2.7 66.2±1.1** 83.4±0.6** 36.6±0.8
茎 0.5±2.4 3.4±3.8** 15.8±1.3** 20.0±1.3** 25.1±1.7 31.2±1.7 55.2±0.3** 79.1±1.5** 36.6±0.4
叶 3.0±2.3 11.4±1.6** 29.5±3.1** 30.7±2.5** 31.0±2.8 33.7±2.9 41.6±1.2 62.8±0.9** 34.9±1.8
果 6.6±0.9 3.4±1.4** 15.7±2.5** 16.7±3.4 17.3±2.4 20.6±2.68* 20.8±0.3 20.6±1.5 36.7±1.0
*P≤0.05 vs 阳性药物；**P≤0.01 vs 阳性药物
**P≤0.01 vs 阳性药物
阳性药物（3 μg/mL）相当，根、茎、叶部位浓度为
80 μg/mL时抑制作用远高于阳性药物；果实部位抑制
效果不明显。
4 结论
MTT 细胞存活率检测法测定结果表明，独子藤
根、茎、叶部分甲醇提取物对EC109食管癌细胞、
Hela宫颈癌细胞、HT-29大肠癌细胞均有显著抑制作
用，且对癌细胞株的抑制率随醇提取物的浓度增高而
增大，呈现量效关系；独子藤果实部位对癌细胞株无
显著抑制作用。因此，本课题研究结果表明，独子藤
根、茎、叶部分提取物中很可能含有抑制癌细胞生长
的活性物质，有必要进一步对其抗癌活性成分进行分
离鉴定。
参考文献
[1] 陈铭祥. 独子藤中木栓烷型三萜类化学成分的研究[D]. 广州:
广东药学院, 2010.
[2] Sun C R, Hu H J, Xu R S, et al. A new friedelane type triterpene
from Euonymus hederaceus[J]. Molecules, 2009, 14(7): 2650-2655.
[3] 陈铭祥, 李国成, 魏佳纯, 等. 独子藤化学成分研究[J]. 中成药,
2011, 33(4): 651-655.
[4] 刘树红, 吕喆, 李霞, 等. 槲芪散及其君药槲寄生提取物对人肝
癌细胞生长和端粒酶活性的影响[J]. 中药药理与临床, 2007,
23(3): 62-65.
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