全 文 ：豹皮樟总黄酮对胶原性关节炎大鼠腹腔巨噬细胞
产生细胞因子及其免疫功能的影响
周　倩 ,李　俊 ,王婷玉 ,王小华
(安徽医科大学药学院 ,安徽 合肥　230032)
收稿日期:2009-12-03,修回日期:2010-01-11
基金项目:安徽省科技攻关计划资助项目(No06013134B);安徽省
高等学校省级自然科学研究重点项目(No2006kj095A);
安徽省高等学校青年教师科研项目(No2005jq1095)
作者简介:周　倩(1982-),女 ,硕士生 ,研究方向:临床药理学 , Tel:
0551-5143371, E-mail:Zhouqian2832@163.com;
李　俊(1960-),男 ,博士 ,教授 ,博士生导师 ,研究方向:
抗炎免疫药理学 、临床药理学 , 通讯作者 , Tel/Fax:0551-
5161001, E-mail:lijun@ahmu.edu.cn
中国图书分类号:R-332;R284.1;R392.12;R 684.302.2;
R684.305.31
文献标识码:A 文章编号:1001-1978(2010)03-0353-06
摘要:目的 　研究豹皮樟总黄酮 (totalflavonoidsofLitsea
coreanaLeve, TFLC)对胶原性关节炎大鼠(colagen-induced
arthritis, CIA)腹腔巨噬细胞(peritonealmacrophage, PMΥ)产
生细胞因子及其免疫功能的影响。方法　Ⅱ型胶原蛋白
(collagenⅡ , CII)和氟氏完全佐剂(CFA)诱导大鼠胶原性关
节炎(CIA)模型 , 采用体重 、足爪肿胀及病理组织学变化等
指标评价 TFLC对 CIA大鼠的治疗作用;无菌取 PMΥ, 体外
用药(TFLC0.05、 0.5、 5 mg· L-1), 采用小鼠胸腺细胞增殖
法检测 CIA大鼠 PMΥ分泌白细胞介素 1(interleukin-1, IL-
1)的水平 , 小鼠脾淋巴细胞增殖法检测 CIA大鼠脾细胞分
泌白细胞介素 2(interleukin-2, IL-2)的水平 , 放射免疫测定
法和反转录 RT-PCR法分别检测 CIA大鼠 PMΥ中肿瘤坏死
因子 α(tumornecrosisfactor-α, TNF-α)的分泌和表达 , 中性
红法测定 CIA大鼠 PMΥ的吞噬功能。结果　TFLC(50、
100、200 mg· kg-1)能抑制关节肿胀 , 增加 CIA大鼠体重 , 改
善膝关节病理损伤。 TFLC(0.05、 0.5、 5 mg· L-1)可降低
CIA大鼠 PMΥ过强的吞噬功能 , 下调脾细胞 IL-2的分泌水
平和腹腔巨噬细胞 IL-1的分泌水平 ,同时抑制 PMΥTNF-α
的分泌水平以及 TNF-αmRNA的表达。结论　TFLC对 CIA
大鼠关节炎具有明显抑制作用 ,其抗炎和免疫抑制作用与其
降低 CIA大鼠 PMΥ过强的吞噬功能 , 抑制细胞因子的分泌
和表达有关。
关键词:豹皮樟;黄酮;关节炎;巨噬细胞;免疫;吞噬功能
　　豹皮樟(ListseacoreanaLeve),又称老鹰茶 、“白
茶 ”,属樟科 、木姜子属 ,其味芳香 ,性甘凉 ,是我国
南方各民族民间长期饮用的一种植物代用茶 [ 1] 。
豹皮樟总黄酮是从豹皮樟中分离出的有效成分 ,药
理学实验表明黄酮类具有抗氧化作用 [ 2] 。本实验
室前期研究证明 ,豹皮樟总黄酮对大鼠佐剂性关节
炎(AA)具有明显的治疗作用 [ 3] ,本文在此基础上 ,
以胶原性关节炎(colagen-inducedarthritis, CIA)为
模型 ,研究豹皮樟总黄酮的治疗作用 ,并以腹腔巨噬
细胞(PMΥ)为靶细胞 ,研究豹皮樟总黄酮体外用药
对 PMΥ产生细胞因子及其免疫功能的影响 ,并对
其机制进行探讨。
1　材料
1.1　动物　C57BL/6J小鼠 20只 , ♀♂各半 , 18.0 ～
24.7 g;Wistar大鼠 , ♂,体重(120±20)g,安徽医科
大学实验动物中心提供(清洁级)。均自由饮水 、进
食 ,饲养室温(22±2)℃。
1.2　主要药物及试剂　豹皮樟总黄酮 (totalfla-
vonoidsofLitseacoreanaLeve, TFLC),由安徽医科大
学药学院天然药物化学室研制 ,总黄酮含量 >75%。
来氟米特(leflunomide, Lef),美国欣凯公司上海代
表处提供 ,实验时以 0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-
Na)配制成所需浓度 。 RPMI1640粉 , 刀豆蛋 A
(concanavalinA, ConA)、脂多糖(lipopolysaccharide,
LPS)、中性红 、MTT(3, 4 , 5-dimethylthiazo-2-yl-2, 5-
diphenyltetrazoliumbromide)粉 ,美国 Sigma公司产
品。 Ⅱ型胶原蛋白(CⅡ):参照文献[ 4]采用胃蛋白
酶消化法从鸡胸骨剑突上提取 CⅡ。 D-Hanks液
(按常规配置),细胞裂解液:V(乙酸):V(无水乙
醇)=1 ∶1。完全氟氏佐剂 (CFA), Sigma公司产
品 ,批号 9007812。肿瘤坏死因子 α(tumornecrosis
factor-α, TNF-α)放射免疫分析试剂盒由解放军总医
院科技开发中心放免所生产 。逆转录试剂盒为 Pro-
mega公司产品 。
1.3　仪器与设备　足趾容积测量仪 YLS-TA,山东
省医学科学院设备站产品 。电热恒温水浴锅 GSY-
8,北京市医疗设备厂意成公司产品 。酶标仪 MK3,
荷兰雷勃公司产品。水套式 CO2 培养箱 Shalab
2323,广州南方生化医学仪器有限公司产品。多功
能显微镜 ,日本 OLYMPUS产品 。洁净工作台 SW-
CJ-IF,江苏苏净集团苏州安泰空气技术有限公司产
品。冷冻离心机 TGL-18R,珠海黑马医学仪器有限
公司产品 。PCR扩增仪为 Eppendorf公司产品。
·353·中国药理学通报　ChinesePharmacologicalBuletin　2010 Mar;26(3):353 ～ 8
2　方法
2.1　大鼠胶原性关节炎模型的建立 [ 5] 　将一定量
的 CⅡ溶于 0.1 mol· L-1的冰乙酸中 ,浓度为 2g·
L-1 ,置于 4℃搅拌过夜 。再与 CFA(1g· L-1)等体
积混合 、充分乳化 ,制成含 CⅡ浓度为 1 g· L-1的乳
剂 。取混悬乳剂 1 ml于大鼠背部皮内多点 (6 ～ 7
个点)注射致炎 , d7同上方法注射同等剂量乳剂作
为激发注射 ,正常对照组大鼠注射等量生理盐水 。
以首次注射记为 d0。
2.2　实验分组与给药方案　体内实验:取 Wistar大
鼠 ,于 d0先随机分为正常组和模型组 ,再于造模后
d14从模型组中挑选关节评分 >2的 CⅡ大鼠 ,随
机分组为模型组 、TFLC用药组 (50、100、 200 mg·
kg-1)及阳性对照组(Lef, 2 mg· kg-1)共 6组 ,每组
10只 , d14开始灌胃给药 , d14 ～ d28每日 1次 ,正
常组和模型组给予等体积的 0.5%的 CMC-Na,其它
各组按体重给予相应剂量的药物 ,于 d35处死大鼠
检测各项指标。体外实验:分为 5组即正常组 、CIA
模型组 、模型给药 TFLC3个浓度组(0.05、0.5、5mg
· L-1)。
2.3　体重及足爪容积测定[ 6] 　于致炎 d7、14、17、
21、24、28、32、35测量体重 ,并于同日用足爪仪测量
大鼠左后足爪容积 ,求出肿胀度(■ml=致炎后足
爪容积 -致炎前足爪容积的平均值)。
2.4　病理形态学　于造模后 d35,股动脉放血处死
动物。取各组大鼠膝关节置于 4%多聚甲醛中固
定 ,足爪组织脱钙 ,脱水 ,常规石蜡包埋切片 , HE染
色 ,在光学显微镜下观察病理组织学变化并摄片 。
按照 Hom等 [ 7]的标准给每个大鼠进行评分 , 0分:
未见有任何改变;1分:有轻度炎症增生;2分:有低
度炎症增生;3分:有中度滑膜炎 ,轻度软骨及骨改
变;4分:有明显滑膜炎 ,纤维增生 ,软骨及骨破坏;5
分:严重滑膜炎 ,软骨破坏 。
2.5　大鼠 PMΥ的制备 [ 8] 　将各组大鼠股动脉取
血处死后 ,浸入 0.1%新洁尔灭溶液中浸泡消毒 5
min,腹腔注射冷的 D-Hanks液 15 ml,用手轻揉腹
部 ,用无菌注射器吸出腹腔洗液 ,于 4℃离心(500×
g)10 min,弃上清 , D-Hanks液洗两次 ,用含 10%小
牛血清的 RPMI1640培养液重悬细胞 ,进行细胞计
数 ,调细胞浓度为 1×109·L-1 ,加入 24孔板中 ,每
孔 1ml,置 5%CO2 , 37℃培养箱内贴壁 2h后 ,吸弃
上清 ,再用 PBS轻洗 2次以去除非贴壁细胞 ,即得
所需浓度贴壁的 PMΥ。
2.6　大鼠 PMΥ吞噬中性红试验 [ 9] 　制备大鼠
PMΥ,置 96孔培养板 ,每孔加入 0.075%中性红 100
μl, 5% CO2 、37℃培养 1 h后 ,弃中性红 ,并用预温
的 PBS清洗未吸收的中性红 3次 ,吸水纸吸干 ,每
孔加入细胞裂解液(0.1 mol· L-1)200 μl,室温静
置 2 ～ 3h待细胞溶解后 ,用蒸馏水调零 ,酶标仪(λ
=570nm)测定各孔的吸光度 A值 。
2.7　白细胞介素-1(IL-1)的检测　按常规制备大
鼠 PMΥ,采用 1 mg· L-1 LPS诱导大鼠 PMΥ产生
IL-1,并用小鼠胸腺细胞增殖法[ 10]检测其活性 ,结
果以 3个复孔 A的均值表示。
2.8　脾细胞 IL-2的诱生与测定 [ 11] 　参照文献按
常规制备脾细胞悬液 ,采用 3 mg·L-1 ConA诱导大
鼠淋巴细胞产生 IL-2,并用小鼠脾淋巴细胞增殖法
检测其活性 ,结果以 3个复孔 A的均值表示。
2.9　肿瘤坏死因子 α(TNF-α)的检测　反转录
RT-PCR法检测 TNF-αmRNA的表达。采用 TRIzol
法提取 PMΥ总 RNA,紫外分光光度计测定总 RNA
的纯度 (A260 /A280 >1.8), 并进行 RNA定量 。用
AMV逆转录酶(Promega公司产品)逆转录得到 cD-
NA。PCR引物委托上海生工生物工程技术服务有
限公司合成。 TNF-α正义链:5′-CGTCGTAGCCAA
ACCACCAAG-3′;反义链:5′-CACAGAGCAATG
ACTCCAAAG-3′,扩增片段长度 426bp。 β-actin正
义链:5′-GATATCGCTGCGCTCGTCGTC-3′;反
义链:5′-GTCCCGGCCAGCCAGGTCCAG-3′,扩
增片段长度 543 bp。 PCR循环:94℃变性 40s, 54℃
复性 40s, 72℃延伸 1 min, 30个循环 。PCR产物在
琼脂糖凝胶上进行电泳 ,通过光密度扫描 ,取 TNF-
α/β-actinA比值。采用放免法检测 PMΥ细胞上清
中 TNF-α的量 ,按放免试剂盒说明书进行。
2.10　统计学处理　结果以 x±s表示 ,使用 SPSS
10.0统计软件中单因素方差分析程序检验各组间
差异的显著性 。
3　结果
3.1　TFLC对 CIA大鼠体重及足爪肿胀的影响　
由 Fig1、2可见 , CⅡ免疫后 ,模型组大鼠体重增长
较正常组大鼠明显缓慢 ,关节炎约于造模后 14 d出
现 , TFLC(50、100、200 mg· kg-1)灌胃给药可明显
减轻 CIA大鼠足爪肿胀 ,并增加 CIA大鼠体重。
3.2　TFLC对 CIA大鼠膝关节组织病理分析及评
分　由膝关节组织病理切片(Fig3)可见:正常组大
鼠滑膜组织细胞排列规则 ,关节软骨表面光滑 , CIA
模型组非致炎侧膝关节滑膜组织有明显的炎细胞
(以单核细胞为主)浸润增生 ,滑膜上皮细胞增生变
形 、纤维化 ,关节软骨破坏。 TFLC(50、100、200 mg
· kg-1 )ig给药可使CIA大鼠非致炎侧膝关节滑膜
·354· 中国药理学通报　ChinesePharmacologicalBuletin　2010 Mar;26(3)
Fig1　EffectofTFLConbodyweightofCIArats( x±s, n=10)
　　■■P<0.01vsnormal;＊P<0.05, ＊＊P<0.01vscontrol
Fig2　EfectsofTFLConinflammatoryreactionin
CIArats( x±s, n=10)
　　■■P<0.01vsnormal;＊P<0.05, ＊＊P<0.01vscontrol
增生减轻 ,炎细胞浸润减少 ,血供减少 ,血管翳形成
减少。各组病理评分结果比较见 Tab1,经 t检验差
异有显著性 。
Tab1　Histopathologicalscoresofthekneejointof
CIArats( x±s, n=10)
Group Dose/mg·kg-1 Histopathologicalscore
Normal - 0　　　
CIA - 4.1±0.7■■
TFLC 50 3.5±0.7
100 3.3±0.9＊
200 1.6±0.6＊＊
Lef 2 1.8±0.8＊＊
　　■■P<0.01vsnormal;＊P<0.05, ＊＊P<0.01vscontrol
3.3　TFLC对 CIA大鼠 PMΥ吞噬功能的影响　
由 Tab2可见 ,炎症状态下 , CIA大鼠 PMΥ的吞噬
功能明显增强 ,体外 TFLC(0.05、0.5、5 mg· L-1)
对 CIA大鼠腹腔巨噬细胞过高的吞噬功能有明显
的抑制作用 。
Fig3　EffectofTFLConkneejointhistopathologyin
CIArats(HE×200)
　　A:Normalkneejointhistopathologyofrats;B:Histopathologicalfind-
ingsfromthekneejointinCIArats;C:Histopathologicalfindingsfromthe
kneejointinCIAratstreatedwithTFLC(50 mg· kg-1 , ig);D:His-
topathologicalfindingsfromthekneejointinCIAratstreatedwithTFLC
(100mg· kg-1 , ig);E:Histopathologicalfindingsfromthekneejointin
CIAratstreatedwithTFLC(200mg· kg-1 , ig);F:Histopathologicalfind-
ingsfromthekneejointinCIAratstreatedwithLef(2mg· kg-1 , ig)
Tab2　EfectofTFLConphagocytosisinperitoneal
macrophageofCIArats( x±s, n=3)
Group Dose/mg· L-1 A570
Normal - 0.437±0.034
CIA - 0.832±0.069■■
TFLC 0.05 0.680±0.076＊＊
0.5 0.665±0.052＊＊
5 0.597±0.039＊＊
A771726 27 0.550±0.062＊＊
　　■■P<0.01vsnormal;＊＊P<0.01vscontrol
3.4　TFLC对 CIA大鼠产生 IL-1、IL-2的影响　
实验数据表明 , CIA大鼠 PMΥ产生 IL-1和脾淋巴
细胞产生 IL-2均高 , TFLC(0.05、0.5、5mg· L-1)可
降低 CIA大鼠过高的 IL-1、IL-2水平 ,结果见 Tab3。
3.5　TFLC对 CIA大鼠 PMΥ产生 TNF-α的影响
　实验数据表明 , CIA大鼠 PMΥ产生 TNF-α高 ,
TFLC(0.05、0.5、5 mg· L-1)可降低 CIA大鼠过高
的 TNF-α水平和 TNF-αmRNA的表达 ,结果见 Tab
4, Fig4。
·355·中国药理学通报　ChinesePharmacologicalBuletin　2010 Mar;26(3)
Fig4　EffectofTFLConexpressionofTNF-αmRNAin
peritonealmacrophageofCIArats( x±s, n=3)
　　■■P<0.01vsnormal;＊＊P<0.01vscontrol
Tab3　EfectofTFLConIL-1formationinperitonealmacrophage
andIL-2formationinsplenocyteofCIArats( x±s, n=3)
Group Dose/mg· L-1 IL-1 /A570 IL-2/A570
Normal - 0.324±0.058 0.282±0.062
CIA - 0.606±0.037■■ 0.561±0.076■■
TFLC 0.05 0.566±0.065 0.527±0.014
0.5 0.496±0.011＊ 0.456±0.109
5 0.486±0.029＊＊ 0.391±0.070＊
A771726 27 0.497±0.097＊＊ 0.468±0.052
　　■■P<0.01vsnormal;＊＊P<0.05, ＊P<0.01vscontrol
Tab4　EfectofTFLConTNF-αformationinperitoneal
macrophageofCIArats( x±s, n=3)
Group Dose/mg· L-1 TNF-α/ng· L-1
Normal - 13.69±2.26
CIA - 23.53±4.35■■
TFLC 0.05 21.46±4.49
0.5 16.79±3.04＊
5 16.29±3.01＊
A771726 27 15.93±3.47＊
　　■■P<0.01vsnormal;＊P<0.05vscontrol
4　讨论
　　免疫系统起着保护机体免受病原微生物感染的
作用 ,然而免疫系统遭受破坏常常导致感染 、癌症和
一些自身免疫性疾病 ,类风湿性关节炎(RA)就是一
种由免疫系统介导并累及周围关节的慢性多系统性
炎症性疾病。 RA患病率很高且具有滑膜增生 、免
疫细胞浸润 、软骨破坏 、骨质侵蚀的典型特征 [ 12] 。
本院前期已证明 TFLC对大鼠佐剂性关节炎有明显
的治疗作用 ,为进一步探讨 TFLC抗炎免疫机制 ,本
实验中我们采用Ⅱ型胶原免疫大鼠 ,成功地诱导了
多发性关节炎 ,取 TFLC(50、100、200 mg· kg-1)灌
胃给药 ,结果由 Fig1, Fig2可见体内给药可明显减
轻 CIA大鼠足爪肿胀 ,增加体重 ,由 Fig3病理摄片
可见滑膜增生减轻 ,炎细胞浸润减少 ,与前期研究中
使用 TFLC对 AA的作用一致 ,表明 TFLC对 CIA具
有明显的治疗作用 。
　　巨噬细胞作为调节炎症疾病的靶细胞受到国内
外学者的关注 ,在免疫系统受到自身抗体或特殊抗
原刺激时 ,活化的巨噬细胞成为炎症介质的主要来
源 ,由巨噬细胞分泌的炎性介质在 RA的滑膜炎症 、
骨质损伤中起了重要作用 [ 13, 14] 。在感染早期 ,巨噬
细胞可通过吞噬作用清除病原体和死亡细胞 ,发挥
非特异性免疫防御作用 ,但与此同时活化的巨噬细
胞又分泌大量的促炎性细胞因子 ,本实验体外研究
结果清楚的显示 (Tab2),体外给药(TFLC0.05、
0.5、5mg· L-1)后 , CIA大鼠过高的 PMΥ吞噬功能
明显降低 ,由此推测 TFLC对 CIA的治疗作用与其
调节 PMΥ异常的免疫功能有关。
　　尽管引起 RA的原因仍未清楚 ,但已确定细胞
因子网络在 RA的免疫应答及破坏中起到重要作
用[ 15] ,其中 TNF-α、IL-1的异常表达和失调是 RA的
典型特征之一 ,在关节软骨的分解代谢中起到重要
的促进作用[ 16] 。 IL-1、TNF-α上调软骨细胞产生基
质金属蛋白酶 、诱导酶 、自由基等细胞因子并伴随软
骨基质的破坏 ,并且通过抑制软骨特殊基因表达 Ⅱ
型胶原 、Ⅸ型胶原 、聚集蛋白聚糖 、连接蛋白等来抑
制软骨基质的合成 [ 17] 。一些研究显示 TNF-α可能
在促进炎症的发展中起着主要作用 ,反之 IL-1可能
在软骨和骨的损伤中起主要作用 , IL-1能刺激滑膜
成纤维样细胞 、血管内皮细胞的高度增殖 ,构成 RA
特征性的血管翳[ 18] 。同时 TNF-α与 IL-1又起着协
同作用 , TNF-α能诱导 IL-1的产生 , IL-1能提高
TNF-α的活性 [ 19, 20] 。抑制 TNF-α的产生可以有效
的降低 RA炎症反应 ,然而 TNF-α的作用是直接作
用还是间接依赖其他细胞因子产生作用仍未知 ,但
是在不同的关节炎动物模型中已研究出抑制 IL-1
的产生可以在一定程度上降低炎症症状 ,减小骨质
损伤 [ 21, 22] 。本实验体外研究结果显示 , TFLC体外
给药后可明显降低 CIA大鼠腹腔巨噬细胞 IL-1、
TNF-α的分泌及 TNF-αmRNA的表达 , 推测 TFLC
抑制 CIA大鼠产生细胞因子可能是其治疗 RA的机
制之一。
·356· 中国药理学通报　ChinesePharmacologicalBuletin　2010 Mar;26(3)
　　IL-2由体内重要的免疫活性细胞淋巴细胞产
生 ,是最强的 T细胞生长因子 ,同时还促进 B细胞
的生长和分化 ,促进抗体的生成 [ 23] ,检测其产生水
平对评价细胞免疫功能具有重要意义 。本实验中 ,
我们无菌取 CIA大鼠脾细胞体外培养 ,结果显示 ,
TFLC体外用药可明显降低 CIA大鼠脾淋巴细胞 IL-
2的产生 。
　　综上所述 ,作为豹皮樟的抗炎有效部位 , TFLC
能有效减轻 CIA大鼠的炎症症状 、调节异常免疫反
应 ,对关节炎症有明显的治疗作用 ,其抗炎机制可能
与调节免疫功能 、减少细胞因子的生成及抑制 CIA
大鼠巨噬细胞过强的吞噬功能有关 ,然而对其作用
的分子机制还知之甚少 ,这些细胞因子通过怎样的
信号通路发挥作用 ,它们之间又如何相互联系 ,相互
影响 ,相互作用还有待进一步研究。
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-63.
·357·中国药理学通报　ChinesePharmacologicalBuletin　2010 Mar;26(3)
EffectoftotalflavonidsofLitseacoreanaLeveoncytokinesproductionand
immunityofperitonealmacrophagefromcolagen-inducedarthritis
ZHOUQian, LIJun, WANGTing-yu, WANGXiao-hua
(CollegeofPharmacy, AnhuiMedicalUniversity, Hefei　230032, China)
Abstract:Aim　Toinvestigatetheefectoftotalfla-
vonidsofLitseacoreanaLeve(TFLC)oncytokinespro-
ductionandimmunityofperitonealmacrophage(PMΥ)
fromcolagen-inducedarthritis(CIA).Methods　CIA
wasinducedwithColagenIIandFeundscompletead-
juvant.TheefectofTFLConCIAwasevaluatedby
bodyweight, hindpawswelingandhistopathological
changes.Interleukin-1(IL-1)inPMΥofCIAratswas
measuredbymousethymocyteproliferationmethod.In-
terleukin-2(IL-2)insplenocytesofCIAratswasdeter-
minedbymousespleenlymphocyteproliferationreac-
tion.Tumornecrosisfactor-α(TNF-α)inthesuperna-
tantofPMΥ wasmeasuredbyradioimmunoassay
(RIA).AndthemRNAexpressionofTNF-αwasde-
tectedbyRT-PCR.PhagocytosisofPMΥwasmeasured
byneutralredmethod.Results　TFLC(50, 100 , 200
mg· kg-1 )singnificantlyinhibitedthepawsweling
andincreasedbodyweightofCIArats.Thepathological
damageofkneejointwasreversedbyTFLC.TFLC
(0.05 , 0.5, 5 mg· L-1)markedlyreducedIL-1 and
IL-2 inCIArats.Meanwhile, TFLCsingnificantlyre-
ducedTNF-αlevelandinhibitedtheexpressionof
TNF-αmRNA inPMΥ.Conclusion　 TFLC has
markedtherapeuticefectonCIArats, whichisrelated
toreducingthephagocytosisandinhibitingthesecre-
tionandexpressionofcytokines.
Keywords:LitseacoreanaLeve;flavonoid;arthritis;
macrophage;immunity;phagocytosis
人参皂苷 Rg1对大鼠肠缺血 /再灌注损伤的影响
李　茜 1 ,张彦敏2 ,关　玥 1 ,马会杰 1 ,高　璐1 ,张　翼 1
(1.河北医科大学基础医学院生理学教研室 , 河北 石家庄　050017;2.石家庄第二医院神经内科 ,河北 石家庄　050000)
中国图书分类号:R-332;R284.1;R322.45;R619.902.2
文献标识码:A 文章编号:1001-1978(2010)03-0358-04
摘要:目的　观察人参皂苷 Rg1(ginsenosideRg1)对大鼠肠
缺血 /再灌注后肠组织损伤的影响 , 并探讨其机制。方法　
制备 SD大鼠肠缺血 /再灌注损伤模型。实验分为 3组(n=
10):假手术组 、缺血 /再灌注组(对照组)、人参皂苷 Rg1干
预组(治疗组)。 比较各组大鼠肠黏膜肿瘤坏死因子 α
(TNF-α)水平 、白细胞介素 6(IL-6)水平 、丙二醛(MDA)含
量 、超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化;用 Chiu氏评分法观
察肠黏膜的损伤情况。 结果　与假手术组相比 , 对照组
TNF-α、IL-6水平明显升高 , MDA含量明显增高 , SOD活性明
显降低 , 小肠损伤评分明显升高;与对照组相比 , 治疗组
TNF-α、IL-6水平明显降低 , MDA含量明显降低 , SOD活性明
显升高 , 小肠损伤评分明显降低。结论　人参皂苷 Rg1对大
鼠肠缺血 /再灌注后的肠道有保护作用 , 该保护作用可能与
收稿日期:2009-12-25,修回日期:2010-01-29
基金项目:河北省科技厅计划资助项目(No07276437)
作者简介:李　茜(1977-),女 ,硕士 ,讲师 , E-mail:liqian963@ 163.
com;
张　翼(1955-),男 , 教授 ,博士生导师 , 研究方向:心血
管及低氧生理学 , 通讯作者, Tel:0311-86265663, E-mail:
ZhYhenry@hotmail.com
减少 TNF-α、IL-6、MDA含量 ,提高 SOD活性有关。
关键词:人参皂苷 Rg1;小肠;缺血 /再灌注;肿瘤坏死因子α;
白细胞介素 6;丙二醛;超氧化物歧化酶
　　肠缺血 /再灌注损伤(ischemiareperfusioninju-
ry, I/R)是常见的组织器官损伤之一 ,在严重感染 、
创伤 、休克 、心肺功能不全等疾患的病理演变过程中
起重要作用。近来认为肠缺血 /再灌注损伤不仅会
引起局部组织损害 ,黏膜屏障功能受损 ,导致肠内细
菌和毒素移位到体循环 ,引起网状内皮系统发生一
系列反应 ,进而导致大量相关介质和细胞因子的释
放 ,诱发全身炎性反应综合征(SIRS)和多器官功能
不全综合征(MODS),因此小肠被称为 “创伤后多脏
器功能衰竭的起源 ”[ 1] 。因而肠缺血 /再灌注损伤
越来越受到重视 ,其发生发展机制及防治措施的研
究也成为重点课题之一 。
　　三七总皂苷是我国传统珍贵药材 “三七 ”的主
要有效成分 ,广泛应用于心 、脑血管疾病的治疗 ,其
中人参皂苷 Rg1(ginsenosideRg1, Rg1)是三七总皂
苷中含量最高的成分 [ 2] 。实验表明[ 3 ～ 5] ,三七总皂
·358· 中国药理学通报　ChinesePharmacologicalBulletin　2010 Mar;26(3):358～ 61