全 文 ：收稿日期: 2008 - 03 - 19
作者简介:周现军 ( 1969 - ), 男,河南安阳人, 讲师,学士,研究方向:中
医药教学新方法及中药的现代应用。
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满山红及其制剂中满山红油的含量测定
周现军
(河南省安阳市中医药学校,河南 安阳 455000)
摘 要: 目的:测定满山红及其制剂中有效成分满山红油的含量, 以探索满山红及其制剂的质量标准。方法: 用
HPLC法测定不同产地的满山红及消咳喘胶囊中满山红油的含量。结果: 不同产地的满山红中挥发油含量差别较大,满
山红油是消咳喘胶囊中的主要活性成分之一。结论:此方法稳定可靠, 重现性好, 适用于满山红及其制剂中挥发油的测
定提取, 为满山红及其制剂的质量评价提供了一定的科学依据。
关键词: 满山红 ;挥发油 ; HPLC法;活性成分
中图分类号: R284. 1 文献标识码: A 文章编号: 1000 -1719( 2008) 08 - 1224 - 02
Determ ination ofO leum Rhododendr iDaurici-Content
in Folium Rhododendr iDaur ici and its Preparations
ZHOU X ian - jun
(H enan Chinese Med ical Schoo l o f Anyang, Anyang 455000, H enan, China )
Abstrac t: Ob jective: T o de te rm ine the active ingredient -O leum Rhododendri Dau rici - contrent in Fo lium Rhododend ri
Daurici and its p repa ra tions so as to explore the qua lity standa rds of Fo lium Rhododendri Dauric i and its prepara tions. M ethods :
D e term ine the O leum Rhododendri Dauriciconten t in X iaokechuan capsules and Fo lium Rhododend riDaurici from diffe rent habi-
tats by HPLC m ethods. Results : The vo la tile o il - conten ts in Folium RhododendriDaurici from diffe rent habita ts d iffe rw ide ly and
O leum Rhododendri Daurici is one o f the m ain active ing redients o f X iaokechuan capsu le s. Con clus ion: The m e thod adopted is
stable and dependable w ith em phasis oriented, being availab le for the de te rm ina tion and abstraction o f the vo latile o il in Fo lium
Rhododendri Daurici and its preparations and providing som e scientific references fo r the quality eva lua tion on Fo lium Rhododen-
dri Daurici and its preparations.
K ey words: folium rhododendri dauric ;i vo la tile o i;l H PLC m ethod; ac tive ingredient
满山红为杜鹃花科植物兴安杜鹃 Rhoclo -
dendron dauricum L. 的干燥叶, 其味苦性寒, 主入肺
经,具有镇咳、祛痰、消炎等作用,临床常用于治疗慢性
气管炎与支气管炎等疾病, 消咳喘胶囊是以满山红为
主要原料的胶囊制剂,具有清热、消炎、化痰、止咳等功
效。用于治疗口腔炎、扁桃体炎以及痰多咳喘等疾病。
满山红油是满山红的主要活性成分之一, 在药材
中的含量较高, 其镇咳祛痰作用明显。据报道, 160mg
满山红油与 60mg可待因作用相当, 其作用部位在脑
干,能抑制呼吸中枢, 另外,还具有抗菌消炎等作用,有
效地检测满山红药材及其制剂中挥发油的含量, 对于
保证临床疗效具有积极意义。本实验采用 HPLC法,
对满山红药材及其制剂中的挥发油进行测定, 结果表
明,该方法操作简便、准确,重现性良好。
1 仪器与材料
高效液相色谱仪 Agilen t 1100 Se ries; 甲醇为色谱
纯;水为蒸馏水; 其它试剂均为分析纯; 满山红药材分
别出自黑龙江等 5个产地, 经河南省安阳市中医药学
校中药鉴定室主任师东琴鉴定,符合药典规定;满山红
油对照品为河南省药品生物制品鉴定所提供 (批号:
1365 -0809);消渴喘胶囊为自制。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 色谱柱 Shimadzu VP -ODS ( 150mm
@ 4. 6mm, 5Lm ), 柱温: 45e ,流动相:氯仿 - 70%乙醚
( 25B75),体积流量: 1. 0mL /m in,检测波长: 300nm, 理
论板数按满山红油计算应不低于 5000。
2. 2 对照品溶液的制备 精密称取满山红油对照品
0. 3500g,置 150mL量筒中,加 70%甲醇 50mL, 超声处
理 2h,过滤,蒸干, 残渣加 70%甲醇溶解,转移至 10mL
量瓶,稀释至刻度,摇匀,即得。
2. 3 满山红药材供试品溶液的制备 将满山红药材
研细,精密称取 0. 5000g, 置 200mL锥形瓶中, 加 70%
甲醇 50mL, 超声处理 2h,过滤,蒸干,残渣加 70%甲醇
适量溶解,并转移至 10mL量筒中, 稀释至刻度, 摇匀,
即得。
2. 4 消咳喘胶囊供试品溶液的配制 取不同批号的
#1224# 辽宁中医杂志 2008年第 36卷第 8期
DOI：10.13192/j.ljtcm.2008.08.108.zhouxj.058
消咳喘胶囊 30 个, 将药粉混合摇匀, 精密称取
0. 4500g,置 150mL锥形瓶中,加 70%甲醇 20mL,超声
处理 2h, 过滤, 蒸干, 残渣加 70%甲醇溶解,并转移至
10mL量筒中,稀释至刻度,摇匀,即得。
2. 5 线形关系考察 精密称取满山红油对照品适
量,置于烧杯中, 加 70%甲醇适量制成 0. 2500mg /mL
的溶液,精密吸取上述溶液 2、4、6、8、10mL置于 50mL
量筒中,加 70%甲醇稀释至刻度,摇匀, 分别精密吸取
1、2、3、4、5、6LL进样,测定其峰面积,以满山红油量为
横坐标,以峰面积值为纵坐标, 绘制标准曲线, 计算得
回归方程为 Y = - 15608. 12 + 30566254. 23X, r =
0. 9998,满山红油在 0. 1563~ 0. 5286Lg之间与峰面积
具有良好线性关系。
2. 6 方法学考察 ( 1)精密度试验:精密吸取满山红
油对照品溶液 10LL, 重复进样 5次, 测定满山红油峰
面积积分值,得 RSD为 0. 186% ( n = 5)。
( 2)重现性试验:取满山红药材样品, 平行取样 5
份,制备供试品溶液, 测定, 结果满山红油峰面积的
RSD为 2. 35% ( n = 5)。
( 3)稳定性试验: 取满山红药材供试品溶液
20LL, 每隔 2h测定 1次, 其结果表明, 样品在 10h内
稳定, 样品中的满山红油的峰面积 RSD为 1. 90% ( n
= 7)。
( 4)回收率试验: 精密称取 5份质量分数为 25mg /
g的满山红样品 0. 2500g,分别精密加入满山红油对照
品 0. 0050g,按供试品溶液的制备方法操作测定, 结果
平均回收率为 97. 5% , RSD为 2. 30% ( n = 5)。
2. 7 样品的测定 分别取黑龙江、山东、山西等不同
产地的满山红药材, 制备供试品溶液, 按上述色谱条
件,每个样品测定 5次, 取平均值, 按标准曲线法计算
各样品中满山红油的质量分数,结果见表 1。
表 1 不同产地满山红药材满山红油的质量分数 ( n = 5)
产 地 满山红油的质量分数 ( mg /g) RSD (% )
黑龙江 30. 8 1. 56
山东 22. 5 2. 87
山西 21. 6 0. 98
云南 18. 7 1. 20
四川 16. 6 0. 85
取 5个不同批号的消咳喘胶囊样品,制备供试品
溶液, 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液注入色
谱仪, 测定峰面积,按外标法计算,结果见表 2。
表 2 消咳喘胶囊中满山红油的质量分数 ( n = 5)
批 号 满山红油的质量分数 ( mg /g) RSD (% )
07115 12. 8 1. 26
07106 13. 9 0. 98
06185 15. 2 0. 86
06196 12. 2 2. 36
06125 13. 0 1. 56
3 讨 论
( 1)试验中曾以甲醇 -水 ( 50: 50)、甲醇 -氯仿
( 40: 60)、甲醇 - 0. 5%磷酸 ( 35: 65)、乙醇 - 0. 2%醋
酸 ( 70: 30)为流动相进行试验,结果满山红油的分离
较差, 经多次试验, 以氯仿 - 70%乙醚 ( 25: 75)为流动
相,满山红油的分离效果较好。
( 2)对满山红油对照品溶液进行紫外扫描 ( 200~
400nm ) ,在 260nm、300nm、330nm等处均有吸收,多次
实验证实,在 300nm处样品干扰少, 且分离效果较好,
故选择 300nm作为检测波长。
( 3)本实验建立了 HPLC法测定满山红药材及其
制剂中活性成分满山红油质量分数的方法, 通过对 5
个不同产地满山红药材样品的测定, 结果表明,黑龙江
所产药材的满山红油的质量分数最高,四川最低,建议
该药材应以黑龙江为主产地。
( 4)中药复方制剂中, 所含成分复杂, 有效成分分
离、测定较困难, 采用 HPLC法进行分析时, 由于毛细
管柱易冲洗再生,效率高, 分离效果较佳, 经过测定,消
咳喘胶囊中满山红油的平均质量分数为 13. 4mg /g, 考
虑到生产中的损耗问题,建议该制剂中的满山红油的
含量不应低于 13. 0mg /g。
( 5)样品用甲醇溶解, 分别用回流提取、索氏提
取、超声提取进行处理, 结果表明, 样品用甲醇超声处
理效果较好,方法简便,满山红油提取完全。
( 6)本实验曾用不同厂家、不同型号的色谱柱进
行实验, 如: A lltech alltima C18、Shimadzu VP - ODS
( 150mm @ 4. 0mm, 5Lm )、Ag ilent Zorbax SBC18、Shodex
Ohpak SB ( 300mm @ 7. 8mm )等, 结果表明, Sh imadzu
VP -ODS( 150mm @ 4. 0mm, 5Lm )对满山红油的分离
效果最好。
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5中国中医急症 6杂志 2009年征订启事
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#1225# 辽宁中医杂志 2008年第 36卷第 8期