全 文 ：2015 年 第 17 卷 第 5 期 (总第 139 期)
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当归属伞形科植物，目前世界上约有90余种，据
《神农本草经》[1]和现代临床研究[2]，有润肠通便、调
经止痛、活血补血等功效，其主要药物活性成份紫花
前胡素倍受临床前药物开发与研究的关注[3]。本文考
察研究使用HPLC法，测定不同产地当归中紫花前胡素
含量。
1 实验材料与方法
1.1 实验材料
仪器与试剂：电子分析天平（AUW-120D）、中
草药粉碎机（FZ102）、超声清洗仪（H66025）、紫
外分光光度计（2100型）、Anastar色谱工作站、
LabAlliance系列高效液相色谱仪、紫外检测器、空气
泵等。水：实验室自制的去离子水；色谱纯：甲醇、
乙腈；分析纯：氢氧化钠（NaOH）、磷酸（H3PO4）、
磷酸二氢钠（NaH2PO4）、乙醚、十二烷基磺酸钠。试
药：中国当归（四川产）、韩国当归（吉林产）、杭白
芷（浙江产）、日本当归（延边产）、丽江当归（云南
产）、紫花前胡（湖南产）。所有药材采购与安国药材
市场，采购后均经3位以上专家鉴定，均属正品。所有
药材自然干燥后备用。
1.2 方法
采用HPLC法进行测定：色谱条件如下：流动相为
H3PO4-NaH2PO4 Buffer（10倍稀释）：乙腈（1:1），
检测波长为270nm、带宽为4nm，参比波长为320nm、
带宽为80nm，柱温为30℃，流速为1.0ml/min，色谱
柱为TIANHE C18（250mm×4.6mm，5μm），进样量为
10μm。
1.2.1 试样制备 对照品溶液：电子分析天平精确称
取8.75mg紫花前胡素对照品，甲醇溶解至50ml，采用
超声清洗仪处理15min后经微孔滤膜（0.5μm），滤
液即为0.175mg/ml紫花前胡素对照品溶液。供试品
溶液：电子分析天平精确称取中国当归（四川产）、
韩国当归（吉林产）、杭白芷（浙江产）、日本当归
（延边产）、丽江当归（云南产）、紫花前胡植物
不同产地的当归中紫花前胡素HPLC法含量测定
胡方
(上海中医药大学附属曙光医院中药室，上海 200060)
【摘要】目的：研究HPLC法测定当归中紫花前胡素的方法，明确不同产地当归中紫花前胡素的含量。方法：称取不同产地的当归
制备供试品溶液和对照品溶液。设定HPLC法色谱柱为TIANHE C18（250mm×4.6mm，5μm）、流动相为H3PO4-NaH2PO4缓冲液：乙腈
（1:1）、流速为1ml/min、检测波长为270nm，然后进行测定方法的精密度考察、稳定性考察、线性相关考察、加样回收率考察
及重复性考察等5项考察，然后进行含量测定并获取了不同产地的当归中紫花前胡素含量。结果：HPLC法测定的以上5项考察结果
均良好；六种不同产地当归中紫花前胡素含量[/RSD（%）]由低到高依次排序。结论：HPLC法测定不同产地当归中紫花前胡素含
量简便、快捷、准确、有效。
【关键词】 当归；紫花前胡素；HPLC法；含量测定
【中图分类号】 R284.1 【文献标识码】 A 【文章编号】1009-0959(2015)05-0533-02
Determination of Decursin from Different Habitats
of Angelica by HPLC
Hu Fang
(Department of TCM,Affiliated Shuguang Hospital of Shanghai TCM University,Shanghai 200060, China)
【ABSTRACT】Objective: To study decursin from angelica determined by HPLC,got decursin content in different habitats
of angelica.Methods:The different origin of angelica preparation of the test solution and the reference solution. Set the
HPLC method the chromatographic column was TIANHE C18 (250mm×4.6mm,5 m),the mobile phase was H3PO4-NaH2PO4 buffer
solution: acetonitrile (1:1),the flow rate was 1ml/min,the detection wavelength was 270nm,and then precision,stability of the
determination method of linear correlation study,investigation,recovery and reproducibility of 5 study of Angelica sinensis
were determined,and then obtained in different habitats of imperatorin.Results:The HPLC method for the determination of the
above 5 results were good; six kinds of different origin of imperatorin in Angelica sinensis [/RSD (%)] from low to high order.
Conclusion:The HPLC method for the determination of in Radix Angelicae sinensis from different regions of imperatorin is
simple,fast,accurate,and effective.
【KEY WORDS】 Angelica;Decursin;HPLC method;Determination of content
药物分析
2015 Volume 17 No. 5(Serial No.139)
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根（湖南产）及紫花前胡花粗粉10g，分别用150ml
乙醚回流提取5h，过滤后回收乙醚，甲醇溶解残渣
至50ml，采用超声清洗仪处理15min后经微孔滤膜
（0.5μm），滤液即为供试品溶液。
1.2.2 方法学考察方法 ①精密度考察：在设定色谱条
件下连续进样87.5μg/ml对照品溶液5次，分别记录紫
花前胡素峰面积。②稳定性考察：在20℃下，将每份供
试品溶液在设定色谱条件下分别在0h、4h、8h、12h时
测定。③线性相关考察：精确量取5ml对照品溶液，甲
醇分别稀释至175mg/ml、87.5mg/ml、43.75mg/ml、
21.88mg/ml、10.94mg/ml、5.47mg/ml、2.74mg/ml、
1.37mg/ml、0.685mg/ml、0.343mg/ml，在设定色谱
条件下按上述顺序进样并记录色谱图。④加样回收率考
察：精确称取2g/份紫花前胡粗粉共12份，紫花前胡素
含量为10.5mg/g，4份为一组，分别加入3ml、4.5ml、
6ml、7.5ml 10.31μg/ml对照品溶液，按照供试品溶
液制备方法制备溶液，在设定色谱条件下测定峰面积。
⑤重复性考察：精确称取10mg/份紫花前胡粗粉共8
份，按照供试品溶液制备方法制备溶液，在设定色谱条
件下测定紫花前胡素含量。
1.2.3 样品测定 按照供试品溶液制备方法将中国当
归（四川产）、韩国当归（吉林产）、杭白芷（浙江
产）、日本当归（延边产）、丽江当归（云南产）、
紫花前胡植物根（湖南产）制备溶液，每种样品5
份，在设定色谱条件下进行紫花前胡素测定，记录每
次测定峰面积并行外标法计算紫花前胡素含量。
2 结果
2.1 HPLC法方法学考察结果
精密度考察试验得到的峰面积平均值为287.9，
RSD=1.11%，说明本研究中HPLC法精密度良好；稳定性
考察试验得到的RSD=1.10%，说明本研究中HPLC法12h
内测定紫花前胡素是相对稳定的；线性相关考察试验中
根据记录的色谱图进行沪指标准曲线，横坐标为mg/ml
（对照品溶液浓度X），纵坐标为A（色谱峰面积），
回归直线方程为A=3434X-511，r=0.9998（n=10），
说明HPLC法中紫花前胡素浓度在0.343～175mg/ml间
线性关系好；加样回收率考察试验中利用所得的峰
面积计算出加样回收率，平均加样回收率为99.4%，
RSD=1.22%，说明本研究中HPLC法加样回收率良好；重
复性考察试验中根据紫花前胡素测定结果算的紫花前
胡素平均含量为10.4mg/g，RSD=1.08%，说明本研究
中HPLC法可重复性良好。
2.2 样品测定结果比较
六种不同产地当归中均含有紫花前胡素，而其
HPLC法测定含量[/RSD（%）]由低到高依次为日本
当归（延边产）、中国当归（四川产）、丽江当归
（云南产）、杭白芷（浙江产）、紫花前胡植物根
（湖南产）、韩国当归（吉林产），其含量分别为
（0.47）μg/g（0.50）、（0.63）μg/g（0.41）、
（9.30）μg/g（0.32）、（67.35）μg/g（0.61）、
（545.33）μg/g（0.41）、（33.22×103）μg/g
（0.42）。
3 讨论
紫花前胡素具有治疗糖尿病、高血压、白血病、降
低肾毒素等，已广泛应用于临床实践中[4]；研究发现紫
花前胡素亦具有抑制幽门螺旋杆菌之功效[5]，还可抑制
TPA（肿瘤促进剂）磷脂磷酰化作用[6,7]。紫花前胡素
测定方法的快捷、有效是临床前药物研究的助器。刘向
前等[8]人研究证明，HPLC测定紫花前胡素含量准确、
快捷、简便。本研究在实验设计过程中，参考国内外文
献，从样品选择、色谱条件设定、供试品溶液配制等方
面进行了预实验，并经过多种方法学考察验证，证实是
适应于当归紫花前胡素含量测定的、结果均良好；本研
究测定结果还与相关研究报道相符[9,10]。
综上所述，HPLC法测定当归中紫花前胡素含量简
便、快捷、准确、有效，不同产地当归中分别含有紫花
前胡素不同。
参考文献
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