全 文 ：［收稿日期］ 20120107(004)
［基金项目］ 重庆科技重大专项计划(CSTC，2010AC5171)
［通讯作者］ * 易为丹，硕士，讲师，从事中医中药的教学和临
床研究，Tel:15923843598，E-mail:479256923 @
qq． com
HPLC测定三峡库区紫花大叶柴胡中柴胡皂苷 a含量
易为丹* ，方应权
( 重庆三峡中药研究所，重庆 404020)
［摘要］ 目的:建立紫花大叶柴胡柴胡皂苷 a 的含量测定方法。方法:色谱条件 Phenomenex luna C18色谱柱(4. 6 mm ×
250 mm，5 μm) ，以甲醇-水(74∶ 26)为流动相，流速 0. 9 mL·min －1，柱温 35 ℃，检测波长 200 nm。结果:柴胡皂苷 a 进样量在
0. 11 ～ 4. 4 μg 与峰面积线性关系良好(r = 0. 999 9)。柴胡皂苷 a平均回收率为 97. 42%，RSD 1. 42%。结论:紫花大叶柴胡
中柴胡皂苷 a的 HPLC梯度洗脱法灵敏、准确，专属性强，重复性好。
［关键词］ 紫花大叶柴胡;HPLC;柴胡皂苷 a
［中图分类号］ R284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2013)02-0071-03
Determination of saikosaponin a of Bupleurum longiradiatum var． porphyranthum
from the Three Gorges Reservoir Area by HPLC
YI Wei-dan* ，FANG Ying-quan
(Chongqing Three Gorges Institute of Chinese Meteria Medica，Chongqing 404020，China)
［Abstract］ Objective:To establish a method for the determination saikosaponin a from Bupleurum
longiradiatum var． porphyranthum． Method:HPLC conditions:Phenomenex luna C18 column (4. 6 mm × 250
mm，5 μm)with methanol-water (74∶ 26)as mobile phase;flow rate was 0. 9 mL·min －1;column temperature
was set at 35 ℃，and the detection wavelength was at 200 nm． Result:Saikosaponin a was linear in the range of
0. 11-4. 4 μg (r = 0. 999 9) . The average recovery was 97. 42% with RSD of 1. 42% ． Conclusion:HPLC
gradient elution method for determination of saikosaponin a from B． longiradiatum var． porphyranthum is sensitive，
accurate，specific，and reproducible．
［Key words］ Bupleurum longiradiatum var． porphyranthum;HPLC;saikosaponin a
紫花大叶柴胡为伞形科柴胡属多年生草本植
物，为区域民间用药，地方使用较为广泛，疗效较为
显著，具有发表祛风、清肝利胆、清心火、通经之功
效，主治感冒、虚劳骨蒸、月经不调、肝气不舒、黄疸
等症［1-2］。目前已知该药材根部主要含有柴胡皂苷
a，c，d，此外根中尚含有挥发油、植物甾醇和有机酸
等，茎叶、地上部分经分析尚含有黄酮类化合物，如
槲皮素、芸香苷、水仙苷、异鼠李素等成分［3-4］。紫
花大叶柴胡作为地方草药，目前尚缺乏系统研究，也
无地方标准可供参考。鉴于此，本实验主要通过检
测紫花大叶柴胡地上部分柴胡皂苷 a 含量，建立紫
花大叶柴胡质量标准的研究方法，为紫花大叶柴胡
的进一步利用和开发提供依据。
1 材料
1. 1 药材［1］ 2011 年 8 月中旬采集于重庆巫溪海
拔约 1 500 m的红池坝山取其带根全草，经过付绍
智教授鉴定为伞形科柴胡属紫花大叶柴胡
Bupleurum longiradiatum var． porphyranthum。
1. 2 仪器 Agilent 1100 型系列高效液相色谱仪
(美国安捷伦科技有限公司) ，8453 型紫外-可见分
光光度计(美国安捷伦科技有限公司) ，SB 3200 型
超声波提取器(上海能信超声有限公司) ，Millipore
simplicity-185 型超纯水器(美国密里博公司) ，BP
211 D型电子分析天平(德国赛多利斯公司)。
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第 19 卷第 2 期
2013 年 1 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 2
Jan．，2013
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2013.02.036
2 紫花大叶柴胡中柴胡皂苷 a测定方法［5-6］
色谱条件 Phenomenex luna C18(4. 6 mm × 250
mm，5 μm) ，以甲醇-水(74∶ 26)为流动相，流速 0. 9
mL·min －1，柱温 35 ℃，检测波长 200 nm，进样量 20
μL，检测时间 30 min。结果见图 1。
1. 柴胡皂苷
图 1 紫花大叶柴胡液相色谱
2. 2 对照品溶液制备 精密称取柴胡皂苷 a 对照
品适量，加甲醇制成每 1 mL 甲醇含柴胡皂 a
0. 22 mg的溶液，即得。
2. 3 供试液制备 取柴胡粉末约 1. 5 g，(平行 3
份) ，精密称定，加入甲醇-氨水(95 ∶ 5)100 mL，密
塞，称定，索氏提取 4 h，滤过，回收溶液至干，残渣加
甲醇使溶解，定容至 10 mL，即得。
2. 4 标准曲线绘制 分别取柴胡皂苷 a 对照品储
备液分别进样 0. 5，1，2，4，8，12，16，20 μL，按上述
色谱条件测定，一峰面积为纵坐标，浓度为横坐标作
标准曲线，得回归方程如下，柴胡皂苷 a Y = 784 476
X + 16 064(r = 0. 999 7) ，说明柴胡皂苷 a 进样量在
0. 11 ～ 4. 4 μg与峰面积线性关系良好。
2. 5 精密度试验 取柴胡皂苷 a对照品溶液，进行
测定，重复进样 6 次，记录其峰面积。结果柴胡皂苷
a的 RSD 0. 71%，说明仪器精密度良好。
2. 6 重复性试验 取同一批号的柴胡药材样品 6
份，依法进行测定，记录其含量，其平均含量 0. 139 8
mg·g －1。结果柴胡皂苷 a的 RSD 0. 68%，说明仪器
重复性良好。
2. 7 稳定性试验 取同一份柴胡药材供试品溶液
每 3 h进样 1 次，进样 5 次，记录其峰面积。结果柴
胡皂苷 a的 RSD 0. 36%，说明供试品溶液在室温下
放置 12 h稳定。
2. 8 加样回收率试验［7-8］ 精密称取已知含量的柴
胡药材样品 9 份，精密称定，分别按其含量的 80%，
100%，120%加入柴胡皂苷 a对照品适量，按 2. 1 色
谱条件和 2. 3 项下制备供试液方法进行测定，记录
其峰面积。柴胡皂苷 a 平均回收率为 99. 8%，RSD
0. 96% ＜3. 00%。
表 1 柴胡皂苷 a加样回收率试验
质量分数
/%
称样量
/ g
样品中
含量 /mg
加入柴量
/mg
测出量
/mg
回收率
/%
均值
/%
RSD
/%
80 0. 755 4 0. 108 9 0. 087 2 0. 195 1 98. 85 99. 8 0. 96
0. 755 3 0. 108 8 0. 089 0 0. 196 0 97. 98
0. 756 9 0. 109 1 0. 088 3 0. 198 0 100. 60
100 0. 753 6 0. 108 7 0. 109 0 0. 216 0 98. 44
0. 758 4 0. 109 0 0. 106 8 0. 215 0 98. 50
0. 749 5 0. 103 1 0. 103 0 0. 205 2 100. 21
120 0. 753 5 0. 108 6 0. 140 3 0. 249 3 100. 30
0. 757 0 0. 109 0 0. 141 5 0. 251 0 100. 35
0. 755 6 0. 108 9 0. 141 3 0. 248 0 98. 45
2. 9 样品测定 取 3 批紫花大叶柴胡地上部分药
材样品，按供试品制备方法和前述色谱条件测定，结
果柴胡皂苷 a 含量分别为 0. 1424，0． 1459，0． 1444
mg·g －1。
3 讨论
定量检测(HPLC)中，柴胡皂苷 a 峰形较好，含
量较高;据文献报道紫花大叶柴胡中含有一定量的
柴胡皂苷 d，另外紫花大叶柴胡地上部分柴胡皂苷 a
含量远小于根部，和其他文献报道也有所差异。柴
胡属植物绝大多数药用部位为根部，故采收季节为
春、秋二季，此时柴胡皂苷 a 等成分富集于根部，故
含量相对较高。本实验所用紫花大叶柴胡，因考虑
到当地民间习用带根全草入药，选择夏季植物生长
旺盛时采集，此时由于地上部分生长旺盛，植物体内
组分分布产生一定变化，同时产地提取工艺的不同，
也可能对含量造成一定影响。
［参考文献］
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第 19 卷第 2 期
2013 年 1 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 2
Jan．，2013
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［8］ 王健，王博，滕利荣，等． 高效液相色谱测定克郁舒神
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［责任编辑 顾雪竹］
［收稿日期］ 20120801(004)
［基金项目］ 重庆市科委重点项目(CSTC2010AC5095)
［第一作者］ 贺钢民，在读硕士，E-mail:hegangmin1985@ sina． com
［通讯作者］ * 彭腾，副教授，从事中药及中药复方活性成分的筛选及物质基础研究，Tel:13880376673，E-mail:pengteng1973@ sina． com
风芍六君子汤水煎液化学成分研究
贺钢民1，彭腾1* ，李柏群2，邓赟1，杨菁1，袁海梅1，黎豫川1
( 1. 成都中医药大学药学院教育部中药材标准化重点实验室、中药资源系统研究与开发利用
省部共建国家重点实验室培育基地，成都 611137; 2. 重庆三峡中心医院药剂科，重庆 万州 404000)
［摘要］ 目的:揭示风芍六君子汤水煎液活性成分的化学物质基础，进行综合开发利用，对其进行系统的化学成分研究。
方法:按照传统煎煮方法提取，反复运用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20 柱色谱、D101 大孔吸附树脂、ODS-C18进行分离，并通过
波谱分析进行结构鉴定。结果:分离并鉴定了 13 个化合物，分别为 β-谷甾醇(β-sitoster，1)、棕榈酸(palmitic acid，2)、
isomultiflorenol(3)、正三十醇(triacontanol，4)、补骨脂素(psoralen，5)、白术内酯Ⅲ(atractylenolidⅢ，6)、对羟基苯甲醛(P-
hydroxybenzaldehyde，7)、没食子酸(gallic acid，8)、苯甲酸(benzoic acid，9)、蜜桔黄素(nobiletin，10)、甜橙素(sinensetin，11)、桔
皮晶(tangeritin，12)、芍药新苷(lactiflorin，13)。结论:13 个化合物均首次从该方中分离得到，没食子酸可能是该复方主要活性
成分之一。
［关键词］ 风芍六君子汤;水煎液;化学成分;没食子酸
［中图分类号］ R284． 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2013)02-0073-04
［网络出版地址］ http:/ /www． cnki． net /kcms /detail /11． 3495． R． 20121107． 1337． 004． html
［网络出版时间］ 2012-11-7 13:37
Study on Chemical Constituents in Water Decoction of Fengshao Liujunzi
HE Gang-min1，PENG Teng1* ，LI Bo-qun2，DENG Yun1，YANG Jing1，YUAN Hai-mei1，LI Yu-chuan1
(1. Pharmacy College，Chengdu University of Traditional Chinese Medicine，Ministry of Education
Key Laboratory of Standardization of Chinese Herbal Medicine，State Key Laboratory Breeding Base
of Systematic Research，Development and Utilization of Chinese Medicine Resources，Chengdu 611137，China;
2. Pharmacy Department of Sanxia Central Hospital in Wangzhou，Wanzhou 404000，China)
［Abstract］ Objective:To reveal the chemical material foundation of active components in water decoction
of Fengshao Liujunzi． Moreover，in order to develop and utilize them comprehensively，this paper studies the
chemical constituents systematically． Method:According to extraction of the traditional decocting method，the
components were isolated by silica gel column，Sephadex LH-20，macroporous adsorption resin D101，ODS-C18
repeatedly，and compounds structures were identified by spectral analysis． Result:Thirteen compounds were
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中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 2
Jan．，2013