全 文 ：见加深认识 , 为此开展萤光眼底血管摄影是很有意义的 。
上述肾功能试验 、 脑电阻图和脉搏波速度与眼科检查的总异常率分别为 90 % 、 71 %
与 71 % 。 若将此三类改变作相关比较 , 在 21 例中 , 同时具有三类改变者为 9 例 , 同时具
有两类改变者为 10 例 , 只有一类改变者仅 2 例 , 说明有一定的平行关系 , 提示二硫化碳
同时对这些方面有损害 ; 因此 , 在慢性二硫化碳中毒早期诊断指标 中是否应同时具备指
示这三类损害的指标 , 亦值得进 一步探讨 。
照山白治疗慢性气管炎的有效成分
制剂工艺方法和含量测定的研究
有效成分的提取分离
临床验证 , 照山白水煎剂治疗慢性气管炎疗效高 , 有效率达 肠% , 临床近期控制率
为 86 % , 显效以上为 89 % 。 但在烙床试用过程中发现有不同程度的毒副作用 , 部分病例
出现胃肠道反应及头晕头痛 , 少数病例出现颈疼 、 出冷汗 、 黄视 、 脉迟缓无力 、 血压下
降 。 因此探素了除丢毒性物质 、 保留有效成分的方法 。 通过提取分离 , 得到一种药理试
验证 明具有强烈毒性的物质 , 经分析鉴定证明为侵木毒素 , 含量为原生药的 0 . 05 % ; 去
除侵木毒素后的制剂 (总黄酮和 酚性 化 合物部分 ) , 经药理实验证 明毒性显著降低 , 临
床验证 , 未再发现中毒反应 , 副作用也很轻微 , 井且保持了原来的疗效 , 说 明照山白中
主要有毒物质是浸木毒素 , 有效部分为总黄酮和酚性化合物部分 。
根据黄酮和其它酚性化合物的酚经基与侵禾毒素醇经基性质的不同 , 利用聚酚胺柱
层离 , 先将毒性部分除去 , 然后分离黄酮和其它酚性化合物部分 。 有效成分提取分离操
作简示如下 :
照山白叶
l
乙醇回流提取三“
}乙醇提取液
l
减压浓缩放置分层
}树脂状物 }水溶液
次两一土涤一水一洗一沸一
酒精结晶 水洗液杏 !
}三祛类化合物 {
聚酞胺柱 , 顺序洗脱 `接下页 ,
一 4 0 一 (总 10 51 )
_
_
_ _ i
聚酞脸柱 , 顺 “ 洗脱 `接上 “ ’ 一
}
洗至无侵
木毒素
9 5 %乙醇
l
洗脱液减压蒸二 “`
水溶液今浓缩
氯仿提取
总黄酮
酚性化合物部分
(琪咳 、 祛痰 )
中和蒸于
{
无水醇提
( 一 )
水溶液
{
减压蒸二 氯仿溶液
{
浓缩
土黄色粉末
(中性部分 )
(一 )
授木毒素部分
分离所得总黄酮和酚性化合物部分有较好的琪咳祛痰作用 , 又重点进行了分离 。 分
离过程如下 :
总黄酮酚性化合物部分
}
甲醉 : ` 仿 ` , : , “ ,反复处理两 ,
溶热薛甲
!淀
l沉
}
溶液
l 城压燕干 .
}热水溶解
浓缩放置
!沉淀
{
乙酸乙 , 溶解液l
!溶
l甲醇热溶放冷
}
.
(4) 溶液
}浓缩放置
}
!结 晶 I
茸若亭
} }硼酸络合
}
分另。酸化提取蒸干
}
(1) (2) 侣 )
聚酸胺附吸
醇结晶
皿
}聚酞胺吸附
l甲4晶
结
胺附
!金林桃贰
!聚酞
吸
2 5% 甲醇洗脱
甲醇 : 乙
酸乙醋
( 1` 9 9 )洗脱
!懈皮素
W
黄茂武
l 甲醇 : 乙酸乙酉旨
( 2
: 9 8 )
洗脱
V
山茶酚
经初步实验 , 照 山白提取分离得 7种结晶成分 , 共中 6 种已进行鉴定 。 为蓑若亭 、
金林桃贰 、 黄茂贰 、 斜皮素 、 山蔡酚及浸木毒素 。 三菇类化合物的药理作用未确定 , 因
此尚未进行分离 。 所得成分经药理实验及临床验证 , 证 明蓑著亭 、 金耕桃试均有一定的
(总 1 0 5 2 ) 一 4 1 一
止咳 、 祛痰作用 , 食著亭井有一定的平喘作用 。 黄茂贰经药理实验证明也有一定的祛痰作
用 。 三菇部分药理实验初步证明有一定的祛痰作用 , 有待进一步重复实验后再行研究 。
制剂工艺方法的研究
基于以上实验研究结果 , 设计了酒精提取 , 聚酞胺柱分离法 ( I 法 ) ,所得的总黄酮
和酚性化合物 , 经北京军区一五一五部队医院临床验证治疗慢性气管炎病人 132 例 , 有
效率为 98 % , 显效以上为 8 % , 近控率为 56 % 。 在临床观察中仅少数 病例有轻微的胃
肠道不适 , 未发现任何毒性反应 。 但用 I 法提取 , 需耍大量酒精 , 成本较高 , 每一疗程
需 3 元 。 为了进一步降低成本 , 减低病人负担 , 设计了用水提取 , 聚酞胺柱分离法 ( 亚
法 ) 。 经实验室初步探索和药理研究 , 证 明 I 、 l 两法所得总黄酮和酚性化合物 , 得量近
似 ( 3 %左右 ) , 药理作用相似 。 通过小型试生产及临床验证 , l 法所得的总黄酮和酚性
化合物的疗效不低于 I 法所得者 。 北 京 军 区 一 五一 五部队试用于治疗慢性气管炎病人
14 4 例 , 有效率为 98 % , 显效以 上 为 7 9 % , 近控率为 56 % 。 酒精提取改为水提取 , 节
省了大量酒精 , 省去了比较复杂的大型减压浓缩设备 , 缩短了操作流程 , 成本 由每一疗
程 3 . 。元降至 1 . 3 元 , 为制剂的推广提供了初步方法 。
I
、
I 两法生产流程简示如下 :
照山白叶 照山白叶
{
乙醇回 ” 提取 水煮沸提取
} 液柱胺取提毒酞水聚乙醇提取液
}
减压浓缩
}树脂状物 水液
热水洗提
\ {
{
水 、 乙醇顺序洗脱
} }水 乙醇
聚酞胺柱
l
水 、 乙醇顺序洗脱
i侵木毒素 总黄酮
酚性化合物
1 }水 乙醇杏 杏浓缩蒸干浸木毒素 总黄酮
酚性化合物
I 法 l 法
I
、
l 两法提取总黄酮 、 酚性化合物及有效成分收率的比较
二 卜法 …了丫丁杀一
i:;;:鳖
化合物收`…:3 ;):…::1)洲 3 3、9):
一 4 2 一 (总 10 53 )
水提取 、 聚酞胺柱层离法 ( l 法 ) 的具体操作
照山白叶 5 0 斤 , 加水 70 升 (以浸没原叶为度 ) , 加热煮沸提取 4 次 , 每次煮沸 1 小
时 。 第一 、 二次提取液合井 , 加入聚酞胺柱 (注 1 ) 。 用水洗脱 , 至洗脱液不含有侵木毒
素 (注 2 ) , 约用水 30 升 。 然后用 95 % 乙醇洗脱 , 收集 乙醇洗脱液约 80 升 , 减压蒸馏 ,
回收乙醇 。 浓缩物干燥后即得总黄酮和酚性化合物 70 。 克 ( 2 . 7 % ) 。 第三 、 四次提取液
留作下一次提取套用 。
聚酞胺柱的再生 。 以 5 % 氢氧化钠溶液洗脱 , 除去揉夙 若聚酞胺柱的颜色较深 ,
则多洗几次或用 10 ~ 20 %氢氧化钠溶液浸饱过夜 。 用水洗至中性 , 留作下次应用 。 用过
的聚酸胺柱由于吸收一些不易洗脱完全的杂质 , 颜色变深 , 每次用后 , 吸附力稍有减退 ,
根据实验室呢察 , 每批聚酞胺至少可以反复应用 30 次左右 。
【注】1 . 聚酞胺 2 5 斤。 原料 :聚酞胺二 2 : 1
2
. 取洗股液 10 滴 , 滴在滤纸上 , 干后 , 喷以三氛化锑饱和氯仿溶液 , 10o5 C烘千 , 应无浅
红色斑点 出现 。
照山白叶的粗提物 中蓑若亭和金丝桃贰的含量测定
照山白叶粗提物中的主耍成分是金林桃试 (脚p e ir n) 和茸若亭 ( S c o OP le 杭功 。 为了
控制照山白粗提物中有效成分的质量 , 便于临床用药 , 探索了在粗提物中金林桃代和茸
若亭的含量测定方法 。
将 照山白叶的粗提物精密称取一定量溶于 甲醇中 , 按下法点在薄层上 。
金蒜桃试的含量侧定 : 在楔形纤 维 素薄层上 , 点样 50 ~ 10 。微克 , 用 60 % 醋酸展
开 , 在萤光灯下观察 , 金林桃贰呈棕色萤光 , 排值约 0 . 9 。 将金拣桃试的部分吸集在小
层离柱内 , 用 2五硬醋酸 一 Z M醋酸钠 ( 3 : 1) 2 毫升 , 加水 6 毫升的混合液洗脱到刻度试管
中 , 使洗脱液为 4 . 0 毫升 , 然后加 3 % 二氯化氧结溶液 1 . 0 毫升 , 在 。 . 5 ~ 1 小时内
用 72 型分光光度计在 4 40 毫微米比色 。
茸若亭的含量测定 : 在硅胶 G 薄层上 , 点样 50 ~ 10 。 微克 , 用氯仿 : 甲醇 ( 9 : 1 )
展开 , 在萤光灯下观察 , 蓑若亭的 R f 值约 0 . 8 , 呈蓝色萤光 , 与共它杂质能很好分开 。
将蓑若亭的部分 吸 集在 小 层 离柱内 , 用乙醇洗脱至 2 50 毫升 , 在 3 40 毫微米波长处测
定 。
[注 ] 1 . 经上述薄层分离后 , 金林桃贰中尚混有黄茂贰 , 一拜按金拣桃贰测出 。
2
. 在薄层上茸若亭走在金林桃贰之前 , 未能完全分开 ,但茸若亭与二氯化氧结不产生颜色 。
(摘 自北京军 区一五一 五部队医院 、 中国医学科学院
药物研究所 : 《 照白山研究资料》 )
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