全 文 ：新中医 2(X ]7 年 5月 第 39卷第 5期
O JU R L A NO F N EWC I H N ES EM EI DC I NM Ea y 2 0 07 V o l
.
3 9 N o
.
5 1 5 0
实验研究报告
[文章编号 ] 02 5 6一 7 41 5( 7 2 0 0) 5 0一 1 0 05一 02
野黄桂叶油抗菌活性的实验研究
王岳峰 , 曲方圆 , 朱利平
西南交通大学药学院 , 四川 峨眉山 61 4 2 02
I摘要』目的 : 观察川产野黄桂叶油的杭菌活性 。 方法 : 应 用药物浓度稀释培养对照观察法确定最小杭菌浓
度 。 结果 : 歼黄桂叶油有类似中药丁香油的抗菌作用 , 对大肠杆菌和金黄色荀萄球菌的杭菌浓度均为 0 . 63 % 。
结论 : 野黄桂叶油时大肠杆菌和金黄色菊萄球菌有抗菌作用 , 且有类似中药丁香油的作用 , 其效果是含有多种
杭菌化学成分综合作用的结果 。
[关健词 ]野黄桂叶油 ; 掉属 ; 大肠杆菌 ; 中药药理
【中圈分类号」R2 8 5 . 5 【文献标识码 IA
野黄桂 (e i n n
amo
u m j
e n se n ia n u m H an d
.
M az z )为常绿乔木 ,
生长于海拔 50 一 1 6以)米的山坡常绿阔叶林或竹林中 , 分布于四
川 、 湖北、 湖南 、 贵州 、 江西 、 云南等。 味辛、 甘 , 性温 。 归肝
经 、 胃经 。 具有行气活血 、 散寒止痛之功。 主治院腹疼痛 , 风寒
湿痹 , 跌打损伤川 。 野黄桂在我国众多省份有分布 , 资源丰富 。
其枝叶和果含有芳香油 , 可作工业原料。 目前 , 对野黄桂叶油的
研究较少 。 笔者在研究了野黄桂油化学成分的基础上 , 对野黄桂
叶油进行抗菌活性研究 , 结果报道如下 。
, 材料
1
.
1 样品 采集四川峨眉山海拔 1 20 一 1 50 米高度生长的
样品鲜叶 , 经西南交通大学药学院植物学专家宋良科教授鉴定
为樟科樟属植物野黄桂 ( C i n n a m o m u m j e n s e n ian u m H a n d . M az z )
提取的挥发油 。
1
.
2 对照品 本实验室提取的丁香油 。
1
.
3 菌种 大肠杆菌 、 金黄色葡萄球菌均由本院微生物实验
室提供。
1
.
4 培养基 肉汤蛋白脉液体培养基 : 牛肉浸膏 39 , 蛋白
脉 10 9 , N a C I 15 9 , 水 1 o o m L , p H 7 . 0 一 7 . 2 ; 肉汤蛋白陈固
体培养基 : 牛肉浸膏 39 , 蛋白脉 10 9 , NaC I 、 琼脂各 15 9 , 水
l X() o m L
,
P H 7
.
0 一 7
.
2
。
2 方法
2
.
1 菌种培养 分别在 2 个已灭菌的琼脂培养基的平板上 ,
滴加 lmIJ 大肠杆菌和金黄色葡萄球菌液 , 并将平板放人电热
恒温培养箱中 , 于 犯℃下培养 2h4 。 将琼脂平板固体培养基上
生长的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别转种于 4 支盛有刚配制
灭菌过的肉汤蛋白陈液体培养基的试管中 , 于 32℃的培养箱
中培养 24 h 。
2
.
2 菌液浓度的测定 用血球计数板计数法 , 血球计数板有
2 个室 , 每个室含有 9 个大方格 。 当盖上盖玻片后 , 每个大方
格的容积为 1 . 0 x 10 一 呜m L。 取出菌液试管 , 将大肠杆菌和金黄
色葡萄球菌菌液稀释适当倍数后分别用毛细管移人 2 个室 , 盖
上盖玻片 , 对 2 个室的各 5 个大方格内的细菌进行计数 , 所得
结果即为 1 . 0 x l0 一 ’ m L 中的细菌数目 。 将此数据乘以 1 0 X() ,
再乘以菌液稀释倍数就得到每 m L 菌液中细菌的实际数 目。 测
得菌液浓度为 9 x l护 个活菌数 / m L 。
2
.
3 侍检品浓度的稀释 取 20 支洗净消毒后的试管分 2
组 , 每组 10 支并编号 。 精密吸取 0 . s m L 丁香油待检品 , 分别
滴加到 2 组试管的第 l 支试管内 , 再加人 2 滴吐温 一 so , 混匀
后加人肉汤蛋白陈培养液 3 . Zm L , 其余各试管分别加人培养液
Zm L
, 其中 10 号试管内加人 2 . l m L 。 然后在 2 组试管中 , 从
第 1 号试管内吸取 2 . Om L 到第 2 号试管内 , 依次重复进行递
增稀释至第 8 号试管 , 再从第 8 号试管内吸取 2 . o ml 混合液弃
去 , 第 9 、 10 号试管不加待检品 。 从第 l 一 8 号试管 , 丁香油
浓度依次为 2 0 . 0 0% 、 一0 . X() % 、 5 . 0() % 、 2 . 50% 、 一 25% 、
0
.
63 %
、
0
.
32 %
、
0
.
16 %
。 同理 , 再取 20 支洗净消毒后的试
管进行野黄桂叶油待检品的稀释 。
2
.
4 抗菌试脸 将浓度为 9 x lo “ 个活菌数 / m L 的大肠杆菌
菌液向装有 丁香油 待检 品 的一组 试管的第 l 一 9 号加人
【收稿日期 ]20 06 一 09 一 2 1
[作者简介 ]王岳峰 ( 19 57 一 ) , 男 , 副教授 , 主要从事植物资源研究开发工作 。
DOI : 10. 13457 /j . cnki . jncm. 2007. 05. 068
106
新中医 20 7年 5月 第 39 卷第 5期
O JN UR AL O FN EW H NE C I SE ME I DCN IE Ma0 0y 27 O VI
,
3 9 N o
.
5
0
.
lm L
, 第 10 号不加菌液作为阴性对照管 , 其中第 9 号为阳
性对照管 。 再将浓度为 g x l护个活菌数 / m L 的金黄色葡萄球
菌菌液按照上述方法加入装有丁香油待检品的另一组试管中。
同法 , 将大肠杆菌和金黄色葡萄球菌菌液分别加人装有野黄桂
叶油待检品的各组试管中。 将所有试管均加人 2 滴吐温 一 80 ,
摇匀后分别放人电热恒温箱中 , 于 32 ℃下培养 2h4 。
2
.
5 抗菌结果观察 从培养后的各试管中分别吸取 1. om L
混合液 , 转接到已灭菌过的固体培养基的培养皿上 。 各培养皿
均放人电热恒温培养箱中 , 于 32 ℃下培养后观察结果 。 细菌
不生长的最高药物浓度稀释度为该药最低抑菌浓度 。
3 结果
不同浓度的丁香油与野黄桂叶油抗菌效果对照 见表 l 。
衰 , 不同浓度的丁香油与野黄桂叶油抗菌效果对照表
抗菌液 菌种 试管号与细菌生长状况
野黄桂叶油抗菌作用较丁香油弱。 由于酚类化合物具有最
高的抑菌系数 , 单枯醇的抗菌活性次于酚类化合物`2 ’ 。 丁香油
的主要化学成分为丁香酚 , 含量为 70 % 一 85 % ; 野黄桂叶油
中主要含芳樟醇和按油素 , 丁香酚含量偏低 , 故野黄桂叶油抗
菌效果比丁香油弱 。 但芳樟醇和按油素属于枯类化合物 。 芳樟
醉常用于医药 , 可用于合成抗癌— 西松内醋类化合物的中间体 , 还具有抗菌和抗病毒的效果 , 如芳樟醇等菇烯类化合物 ,
对大肠杆菌 、 变形杆菌 、 肠炎膜杆菌 、 葡萄球菌 、 酿酒醉母
菌 、 白色念球菌 、 黑曲雄菌等有很好的抗菌活性 , 此外还具有
镇静 、 杀虫等作用川 。 按油素具有抗菌消炎 、 解热镇痛的活
性 , 大量用于医药行业 。 按油素与其他药品配合可用于感冒 、
各种感染 、 肠炎 、 肺结核及多种皮肤病治疗 , 在口腔医学中可
用作口腔清洁剂的防败血和除臭组分 , 还可用于治疗呼吸道疾
病 、 治疗食欲亢进和用于减肥 ’ 4 j 。 野黄桂叶油主含这 2 种成
分 , 加之还含有最高抗菌系数的酚类化合物丁香酚 , 笔者认为
其抗菌效果是这些化学成分的综合作用结果 。
丁香油
野黄桂叶油
大肠杆菌
金黄色蔺萄球菌
大肠杆菌
金黄色蔺萄球菌
有.无无无无
注 : “ 有” 表示有细 菌生长 , “ 无 ” 表示无 细菌生长 。
第 10 号试管因未接菌种 , 没有细菌生长 ; 第 9 号试管接入
了菌种 , 但未加抗菌液 , 有细 菌生长 , 符合阴性和阳性对照
品的结果 。
4 讨论
丁香油 、 野黄桂叶油对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抗
菌作用 。 丁香油对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌效果相
同 , 最低抗菌浓度均为 0 . 16% ; 野黄桂叶油对大肠杆菌和金黄
色葡萄球菌的抗菌效果也相同 , 最低抗菌浓度均为 0 . 63 % 。
[参考文献 l
【1 《中华本草》 编委会 . 中华本草 IM ] . 上海 : 上海科学技术
出版社 , 1999 : 99 .
12] 滑燕 , 邓燕如 , 汪汉卿 . 各种挥发油的药理活性及在医
学方 面的应用 ! J] . 天然产物研究与开发 . 2 0 3 , 巧
(5 )
:
46 8
.
【3] 林耀红 , 谈峰 , 萧树德 . 合成芳樟醇的研究进展【J] . 广
州化学 , 19 9 , 3 : 4 5 .
【4] 李建华 , 周敏君 , 郎书源 . 按叶挥发油对几种寄生虫驱
杀作用的研究【J] . 贵州 医学院学报 , 2以X) , 25 (4) :
36 2 一 3 64
.
(编辑: 马力 )
无药疗法特色医疗专修班常年招生
门诊实习形象教学 颁发按摩师职业责格证书
东方无药疗法科研所 、 东方无药疗法技术培训部谢绍英父女集多年临床经验创立的集整脊 、 点穴 、 推拿 、 拨筋 、 针灸 (艾灸 、 火
针 ) 、 刺血 、 拔堆 、 刮疹 、 脚疗 、 腹穴秘法指针 、 电气法等于一体的无药疗法 12 大特色 医疗技术。 世界热门 , 被誉为 “ 绿色医学 ” 的无
药疗法 。 无 药疗法 12 大特色医疗临床诊疗专修班常年招生 。 函授费 6 0 元 。 面授每月 26 日开班 , 短修班学费 18 0 元 ; 长修雄 (跟
师学 )精通为止 , 学费实习费 21 0 元 。 学员结业经考试合格 , 由劳动部门颁发按摩师职业资格证书。 此证 出国有效 , 凭证可开 业 、
求职 , 同时颁发职业技能培训合格证和结业证 书。 可单项 面授 : 电气通经治病法 印O 元 ; 腹穴秘法指针 4 0 元 《函授 20 元 ) ; 函授 : 教
材之 四刺血毫针堆法一绝 30 元 ; 之 五灵龟八法快速开穴治病法 10 元 ; 之 六整脊医术 40 元 。 为了使学员在短期内能真正学习医术 ,
面授从临床入手 , 师带徒手把手地教学 , 让 学员快速掌握各种疗法的操作技巧和方法 。 有门诊部供学员实习 。 备有简介 , 欢迎索取 。
(此广告长期有效 , 如有不 实 , 负法律责任 ) 。 地址 : 四川省南充市西 门坝街 95 号附 5 号 , 娜幼 : 63 7仪 )K , 联系人 : 谢雪芬 , 电话 :
08 17 一 2 2 4 7 5 4
,
5 I l 8 10()
,
3 6 9 2 0 8 9
, 网址 : w
.
d加 y l.f c o m , 电子伯箱 : d f加v】f@ s o h u . 。 o m