全 文 ：2． 0 mg /L，最佳生根培养基 1 /2MS + IAA 0． 3 mg /L
+ IBA 0． 5 mg /L，避免了经过愈伤组织脱分化诱导
出不定芽过程所引起的不良变异，可保持材料的遗
传稳定性，大大缩短了培养周期，降低了成本，推广
应用性强。
参 考 文 献
［1］王文翠，但忠，木万福，等．罗勒的适应性研究及开发价
值［J］．香料香精化妆品，2012，2(1) :21-24．
［2］吴征镒，李锡文．中国植物志［M］．第 66 卷．北京: 科学
技术出版社，1997:267．
［3］江苏新医学院． 中药大辞典［M］． 上海: 上海人民出版
社，1977:1354．
［4］韩晓光，袁平芳．柠檬罗勒丛生芽诱导和植株再生的研
究［J］．江苏农业科学，2009，6:90-91．
［5］邓明华，文锦芬，赵凯，等．罗勒离体培养植株再生体系
的建立［J］．云南农业大学学报，2008，23(5) :658-662．
［6］张福平，魏玲玲． IAA 等对紫罗勒种子发芽及幼苗的影
响［J］．种子，2007，26(10) :94-97．
［7］杨文钮． 植物化控［M］． 成都: 四川科学技术出版社，
1997．
［8］王金祥，李玲，潘瑞炽． 高等植物中赤霉素的生物合成
及其调控［J］．植物生理学通讯，2002，38(1) :1-8．
鄂西北地区竹叶柴胡种子萌发特性研究
杜士明1，2，孙荣进2，张文明3* ，杜 婷2，叶 方2，王 刚2
(1．湖北中医药大学中药资源和中药复方教育部重点实验室，湖北 武汉 430065;2．湖北医药学院附属十堰
市太和医院，湖北 十堰 442000;3．湖北神农本草中药饮片有限公司，湖北 房县 442000)
摘要 目的:探讨鄂西北地区竹叶柴胡种子休眠的原因以及提高其发芽率的方法。方法:徒手切片法观察竹
叶柴胡种子特征，采用 40 ℃温水浸种和 1% KMnO4 浸种的方法来提高种子发芽率，同时考察了温度和培养介质对
种子发芽率的影响。结果:40 ℃温水浸种能使竹叶柴胡种子的发芽率提高到 64． 8%;发芽介质对竹叶柴胡种子无
显著性的影响，但是 30 ℃及以上的萌发温度使种子发芽率显著降低。结论:种子中含有发芽抑制物质和胚后熟是
影响竹叶柴胡种子发芽率的重要原因。
关键词 竹叶柴胡;种子;发芽率
中图分类号:Ｒ282． 6 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2013)05-0705-03
收稿日期:2012-12-17
基金项目:科技部 2010 年度科技型中小企业技术创新基金(10C26214204534)
作者简介:杜士明(1964-) ，男，在读博士研究生，主任药师，研究方向: 中药资源及其品质评价;Tel:0719-8801163，E-mail:dsmch@ sina．
com。
* 通讯作者:张文明，Tel:13477986222。
竹叶柴胡 Bupleurum marginatum Wall． ex DC．
为伞形科柴胡属植物，药用部位为干燥根及全草。
生于海拔 700 ～ 2 500 m的山坡草地或林下，主要分
布于湖北、陕西、四川、云南、贵州、湖南等地。性苦、
寒，具有散风退热、疏肝解郁等功效，临床常用于感
冒发热、胸胁胀痛、疟疾、脱肛、子宫下垂、月经不调
等。本课题组前期研究考察了鄂西北地区的柴胡资
源及分布主要为竹叶柴胡〔1〕。竹叶柴胡作为鄂西
北地区商品柴胡的主要品种，被四川、贵州、云南、湖
南等地方中药材标准所收载，是常用中药柴胡的三
大来源之一。因此研究竹叶竹叶柴胡种子休眠特
性，对竹叶柴胡资源的保护、可持续利用以及 GAP
基地的建设具有重要意义。
1 材料与仪器
1． 1 材料 竹叶柴胡种子为湖北神农本草中药饮
片有限公司 2011 年 9 月中旬于种植基地采集，经湖
北中医药大学陈科力教授鉴定为伞形科植物竹叶柴
胡 Bupleurum marginatum Wall． ex DC．的种子( 室内
常温阴干后牛皮纸袋常温保存) ; 北柴胡种子购买
于山西运城，经陈科力教授鉴定为伞形科植物北柴
胡 Bupleurum chinense DC． 的种子; 白菜种子( 济南
睿袤农业科技开发有限公司) ;普通滤纸，高锰酸钾
(AＲ) ，培养皿(10 cm ×1． 5 cm)。
1． 2 仪器 天平( 上海精密仪器FA-2004) ，光照培
养箱( 上海博迅实业公司SPX250I-G) ，CFY-Ⅱ风选
净度仪( 浙江托普有限公司)。
2 试验方法与结果
·507·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 5 期 2013 年 5 月
DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2013.05.007
2． 1 种子形态特征观测 本实验研究用种子使用
前先用净度风选仪除去空壳种子。借助放大镜观察
柴胡种子形态，徒手切片观察种子横切面;游标卡尺
测定柴胡种子的大小; 用万分之一的电子天平测定
种子千粒重(n = 3)。种子形态特征: 种子长椭圆
形，部分微弯曲，长 2． 5 ～ 3． 5 mm，宽 1． 0 ～ 1． 5 mm，
棕褐色，棱狭翼状，5 条，每棱槽中油管 3 个，合生面
4 ～ 6 个，棱线内偶有油管 1 个，总油管数 15 ～ 24
个。种子千粒重为 1． 232 g。
2． 2 萌发抑制物质实验
2． 2． 1 方法〔2〕:准确称取手工剥取的竹叶柴胡种
皮 2． 0 g，加 80%甲醇研磨，4 ℃密封浸提 48 h，其间
振荡 5 次，每次 1 min，过滤，35 ℃减压浓缩至无醇
味，纯净水定容至 40 mL，分别稀释为原提取液的
10%、20%、30%、100%，以纯净水为对照。分别用
纯净水和上述不同浓度浸提液浸泡白菜种子 2 h
后，置铺有滤纸的培养皿中，水分适量，光照培养箱
25 ℃全光照培养，每个处理平行 4 组，每组 100 粒，
统计发芽率和萌发势。结果见表 1。
发芽率(%)=正常发芽种子数
参试种子总数
× 100%
萌发势(%)=发芽后内正常发芽种子数
参试种子总数
× 100%
表 1 竹叶柴胡种皮不同浓度浸提液对白菜种子发芽率和萌发势的影响(x－ ± s，%)
发芽指标
浸提液的浓度
0% 10% 20% 30% 100%
萌发势 82． 0 ± 4． 2 53． 3 ± 5． 8 63． 0 ± 10． 3 64． 0 ± 6． 9 58． 0 ± 12． 2
发芽率 84． 7 ± 2． 0 60． 0 ± 8． 7 64． 0 ± 8． 0 66． 7 ± 6． 4 60． 0 ± 14． 0
2． 2． 2 结果: 不同浓度竹叶柴胡种皮浸提液处理
的白菜种子发芽率、萌发势与对照差异显著，且随浓
度升高抑制作用明显增强，表明竹叶柴胡种皮中存
在抑制种子萌发的物质。
2． 3 萌发实验
2． 3． 1 温度和不同培养床材料对竹叶柴胡种子发
芽率的影响:将40 ℃温水浸种 12 h 后的竹叶柴胡
种子置入光照培养箱，恒温培养，温度分别为 15、
20、25、30 ℃，分别用蛭石、湿沙、滤纸、海绵等 4 种
培养床( 蛭石和沙子的直径为0． 05 ～ 0． 8 mm，海绵
厚0． 5 cm)。每培养床材料设平行 4 组，每组 50 粒
种子。以胚根长出 1 mm为发芽标准。结果见表 2。
表 2 不同发芽介质和温度对竹叶柴胡种子发芽率的影响(x－ ± s)
温度 / ℃
不同培养床的发芽率 /%
湿沙 蛭石 海绵 滤纸
15 67． 3 ± 6． 1 64． 3 ± 4． 67 46． 7 ± 12． 2 68． 0 ± 6． 9
20 66． 7 ± 5． 1 68． 0 ± 11． 6 68． 0 ± 6． 0 70． 0 ± 4． 0
25 54． 7 ± 7． 1 46． 7 ± 4． 0a 58． 7 ± 2． 3 61． 3 ± 8． 3
30 31． 7 ± 10． 1a 22． 7 ± 4． 0a 21． 3 ± 12． 2a 28． 7 ± 9． 2a
注:“a”表示有显著性差异(P ＜ 0． 05)
表 3 不同处理对 2 种柴胡种子发芽率和萌发势的影响(x－ ± s)
不同处理
20 ℃的发芽率和发芽势 /%
北柴胡发芽率 北柴胡萌发势 竹叶柴胡发芽率 竹叶柴胡萌发势
空白 58． 5 ± 5． 7 14． 3 ± 9． 67 48． 5 ± 8． 7 7． 5 ± 6． 9
40 ℃温水浸种 73． 5 ± 2． 1a 18． 0 ± 11． 6 64． 8 ± 6． 8a 9． 5 ± 14． 3
1%KMnO4 浸种 64． 5 ± 7． 3 16． 7 ± 9． 0 53． 5 ± 6． 1 11． 3 ± 9． 3
注:“a”表示有显著性差异(P ＜ 0． 05)
表 2 表明，在培养床材料以滤纸最优，采用
SPSS 11． 0 单因素方差分析，在温度相同时，不同培
养床的发芽率无显著性差异(P ＞ 0． 05) ; 在相同培
养床不同温度的最小显著差异法(LSD) 比较的结果
表明，15、20、25 ℃三者间无显著性差异(P ＞0． 05) ，
但三者与 30 ℃存在显著性差异(P ＜0． 05)。
2． 3． 2 不同处理对发芽率的影响:参考文献〔3，4〕将
2 种柴胡种子分别采用 40 ℃温水浸种( 种子∶水 = 1
∶ 2)、1%KMnO4 浸种( 种子∶ 1% KMnO4 = 1∶ 2)12 h，
用水漂洗至无色，备用。将处理的种子分别放入铺
有滤纸的培养皿，置 20 ℃光照培养箱全光照培养
30 d，平行 4 组，每组 100 粒。以胚根长出 1 mm 为
发芽标准，观察 35 d，计算发芽率和萌发势。数据采
用 SPSS 11． 0 进行统计分析。结果见表 3。
·607· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 5 期 2013 年 5 月
由表 3 可知，40 ℃温水浸种能够显著提高竹叶
柴胡和北柴胡种子的发芽率，发芽率可达64． 8%和
73． 5%，对发芽势无显著性影响(P ＞ 0． 05)。
3 讨论
3． 1 竹叶柴胡种子休眠特性的探讨 竹叶柴胡种
子的研究目前处于野生转家种阶段，本研究表明竹
叶柴胡的发芽率能够达到 64． 8%，种子中含有发芽
抑制物质和胚后熟是影响种子发芽率的重要原因。
实验前虽然将采集的竹叶柴胡种子用净度风选仪清
选空壳，但是种子中仍然有 10% ～ 20%的未成熟种
子，这与北柴胡和三岛柴胡的研究结果是一致
的〔5，6〕。发芽抑制物质和胚后熟是影响竹叶柴胡种
植的关键技术，需要进一步深入研究。
3． 2 不同处理对种子发芽率的影响 本实验参考
文献采用了多种方法提高竹叶柴胡种子的发芽率，
以 40 ℃温水浸种效果较好，且便于实际生产应用。
1%KMnO4 浸种也能提升竹叶柴胡和北柴胡的发芽
率，但是在发芽试验后期发现 KMnO4 的强氧化性虽
然克服了种子发芽的机械阻力，同时也损伤了种子
的胚，出现了部分畸形苗和死苗。所以 KMnO4 浸种
处理还有待于探讨。温度对竹叶柴胡的萌发具有显
著地影响，30 ℃及以上的温度使种子发芽率显著降
低，发芽介质对竹叶柴胡的种子无显著性的影响。
3． 3 培养条件的选择 本实验以人工光照培养箱
模拟自然环境，结果是否与大田播种一致还需要进
一步深入研究。培养条件中，水分是影响种子发芽
率的一个非常重要的条件，水分的量应该控制为滤
纸湿润有光泽，但是培养血倾斜成 80° ～ 90°又不能
有水流出为宜，过干和过湿都会影响种子发芽率。
参 考 文 献
［1］杜士明，叶方，杨光义，等．鄂西北地区柴胡资源调查研
究［J］．中药材，2012，35(6) :866-869．
［2］王小平，王九龄． 白皮松种子内含物的提取、分离及生
物测定［J］．种子，1998，17(5) :19-22．
［3］郝建平，徐笑飞，杨东方，等．北柴胡快速繁殖及种子萌
发条件研究［J］．中草药，2008，39(5) :752-756．
［4］胡继鹰，张正磷，何德刚． 柴胡种子处理对发芽及生长
的影响［J］．中药材，2004，27(8) :553-557．
［5］陈莹，蔡霞，胡正海，等．北柴胡胚和胚乳的发育及对其
种子萌发的影响［J］．植物研究，2008，28(1) :14-16．
［6］魏建和，李昆同，程惠珍，等．种子成熟度及种皮对北柴
胡和三岛柴胡种子萌发的影响［J］． 中国中药杂志，
2003，28(7) :614-617．
·动物药研究·
美洲大蠊提取物含药血清体外抗肝纤维化的实验研究
李春艳，陈衍杰，李树楠，刘光明，赖 泳*
(大理学院药学与化学学院药理教研室，云南 大理671000)
收稿日期:2012-10-08
基金项目:云南省重点产业创新工程项目(2008IF012)
作者简介:李春艳(1983-) ，女，硕士，助教，主要从事中医药药效学研究;Tel:0872-2257412，E-mail:lcyyanyan@ 126． com。
* 通讯作者:赖泳，Tel:0872-2257412，E-mail:laiyong8879@ yahoo． com． cn。
摘要 目的:研究美洲大蠊提取物含药血清对大鼠肝星状细胞的影响。方法:通过制备美洲大蠊提取物含药
血清，MTT法观察美洲大蠊提取物含药血清对肝星状细胞的作用，酶联免疫吸附剂测定法(Elisa) 检测培养上清中
TGF-β1、Ⅰ型胶原的含量。结果:24、48、72 h美洲大蠊提取物Ⅰ( 水提物)、Ⅱ( 乙醇提取物) 含药血清(15%) 对肝
星状细胞均有抑制作用(P! 0． 05) ;美洲大蠊提取物Ⅰ、Ⅱ含药血清在 24 、48 h能减少Ⅰ型胶原的生成，但无统计
学差异(P 0． 05) ;24 h美洲大蠊提取物Ⅰ含药血清 15%、9%、5． 4%均能减少 TGF-β1 的生成(P ! 0． 05) ，48 h
时，只有 15%含药血清能减少 TGF-β1 的生成(P ! 0． 05) ，美洲大蠊提取物Ⅱ含药血清在 24、48 h 时未显著减少
TGF-β1 的生成(P 0． 05)。结论:美洲大蠊提取物含药血清具有一定的体外抗肝纤维化作用，其机制可能为抑制
肝星状细胞的增殖及减少 TGF-β1 的生成。
关键词 美洲大蠊;肝纤维化;肝星状细胞;转化生长因子-β1;Ⅰ型胶原
中图分类号:Ｒ285． 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2013)05-0707-05
·707·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 5 期 2013 年 5 月