全 文 :doi:10.3969/j.issn.1673-1409.2011.07.112
[收稿日期]2011-07-06
[作者简介]陈 惠,男,助理研究员,主要从事植物保护研究。
不同溶剂的芫荽提取物对菜蚜生物活性的影响
陈 惠,徐 莉,葛 红,顾国华 (江苏沿江地区农业科学研究所,江苏 如皋22654)
[摘要]为了解芫荽 (Coriadrum sativumL.)活性物质的杀虫毒力及作用方式,以芫荽整株为试验材料,
采用不同溶剂提取其活性物质后,在室内分别对菜蚜 (Lipaphis erysimi)进行触杀、胃毒、驱避毒力测
定。结果表明:芫荽的丙酮提取物具有较高的触杀和胃毒作用,其毒力回归方程分别为y=2.348x-
4.248、y=1.810x-3.647,LC50 分别为64.470mg/ml、103.496mg/ml;浓度为200mg/ml的氯仿、乙酸
乙酯提取物则对菜蚜的驱避作用等级较高,为V级。
[关键词]芫荽 (Coriadrum sativumL.);提取物;生物活性;菜蚜 (Lipaphis erysimi)
[中图分类号]Q949.763.3 [文献标识码]A [文章编号]1673-1409 (2011)07-0234-03
芫荽 (Coriadrum sativumL.)又名胡荽,俗称香菜。芫荽属伞形科植物,英文名Coriander,为
一年生香辛叶类蔬菜,由于具有调味和多种保健功效而在世界范围内倍受青睐[1]。除了食用功能之外,
芫荽提取物还对鱼油具有抗氧化作用[2],对沙门氏菌、大肠杆菌等具有抗菌作用[3]等。徐汉虹等[4]研究
表明:芫荽对蚜虫具有活性作用,但其活性成分的粗提方法及作用方式的系统研究还未见报道。本研究
探索芫荽杀虫活性成分的提取方法,明确它的主要作用方式,为将芫荽进一步开发成新型植物源农药提
供科学依据。
1 材料与方法
1.1 材料
(1)芫荽原粉 芫荽来自江苏沿江地区农业科学研究所试验田,用清水洗净后,自然阴干,粉碎、
过筛 (20目)得芫荽原粉,待用。
(2)供试昆虫 蚜虫捕自江苏沿江地区农科所附近农户种植的青菜田,选择健康、大小均匀的蚜
虫,以鲜嫩青菜叶饲养。室内温度 (25±1)℃,相对湿度60%~75%,光周期12D∶12L。
(3)试剂 乙醇、氯仿、丙酮、乙酸乙酯均为分析纯 (AR),吐温-80。
1.2 方法
1.2.1 活性成分的提取与药剂配制
称取200g植物原粉,倒入1000ml的烧瓶中,分别加入不同的溶剂500ml,浸泡24h,超声30min,
抽滤,共浸提3次,合并滤液后减压浓缩至油状为止 (A:芫荽的乙醇提取物;B:芫荽的氯仿提取物;
C:芫荽的丙酮提取物;D:芫荽的乙酸乙酯提取物)。分别加入1g吐温-80,用水稀释后定容到50ml
作为药剂,稀释为0、25、50、100、200mg/ml的溶液,备用。
1.2.2 活性作用方式的研究
(1)触杀活性测试 采用点滴法。在每头虫体的腹背处点滴0.1μl各处理溶液
[5],然后将试虫转入
垫有保湿滤纸的培养皿中,喂饲新鲜青菜叶片,每处理30头,重复3次,对照为1%吐温-80的水溶
液,将培养皿放置于养虫室。72h后分别记录各处理蚜虫的死亡数,以软毛笔尖触及虫体无反应为死亡
标准。计算毒力回归线、半致死浓度 (LC50)、LC50 的95%置信限等。
(2)胃毒活性测试 采用载毒叶片法,参照xenou-Kokoletsi[6]的方法,先将药液倒进抽气瓶中,
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长江大学学报 (自然科学版) 2011年7月 第8卷 第7期
Journal of Yangtze University(Nat Sci Edit) Jul.2011,Vol.8No.7
再将带叶柄的完整青菜叶片浸入抽气瓶的药液中,然后抽气,直到叶片表面无气泡冒出时,松开抽气瓶
的放气活塞放气,使叶片将药液吸入。把叶片从药液中取出,放在自来水中漂洗2min,将叶片表面的
药液洗去。用吸水纸吸干叶片上的水,放入9cm培养皿中,每皿放叶片3张,用湿棉球包裹叶柄保湿。
用软毛笔将大小一致的无翅成蚜接入培养皿的叶片上,每皿接虫30头,重复3次。将培养皿养虫室中
饲养。72h后检查死亡率,以软毛笔尖触及虫体无反应为死亡标准。计算指标及方法同上。
(3)驱避活性测试 选取新鲜干净青菜叶片,剪成大小一致的叶碟 (直径2cm),以中间主叶脉为
界用毛笔将叶碟一侧均匀涂上植物提取物[7-8],对照为1%吐温-80的水溶液,静置阴干;在培养皿底部
放3张保湿滤纸,加水,然后将叶碟置于滤纸上。将大小一致的试虫接于叶脉中部,每处理重复3次,
每重复30头试虫,置于养虫室内。分别于处理后72h调查处理和对照活虫数。按下式计算驱避率。
驱避率= [(对照边试虫数-处理边试虫数)/对照边试虫数]×100%。
根据驱避率的不同,将驱避效果分为6个等级 (0~V),分级标准为:0级,无驱避作用;I级,
0.1%~20%驱避率;Ⅱ级,20.1%~40%驱避率;Ⅲ级,40.1%~60%驱避率;Ⅳ级,60.1%~80%
驱避率;V级,80.1%~100%驱避率[9]。
1.2.3 数据处理方法
参照贾春生[10]的方法,试验结果采用SPSS 17.0软件计算毒力回归方程、半致死浓度(LC50)、LC50
的95%置信限等。
2 结果与分析
2.1 不同溶剂的芫荽提取物对蚜虫的触杀活性的影响
室内72h的触杀活性测定结果表明,不同溶剂的芫荽提取物对蚜虫均有触杀作用,其结果见表1。
由表1可知,B的触杀活性LC50 最高,为124.207mg/ml,A、D 的LC50 相近,C 的LC50 最低,为
64.470mg/ml,其95%的置信区间为 [49.406,83.340],即芫荽的丙酮提取物触杀活性最高。
表1 不同溶剂的芫荽提取物对蚜虫触杀活性分析结果 (72h)
提取物 毒力回归方程 LC50/ (mg/ml) 95%置信区间 回归直线斜率 (SE)
A y=1.838x-3.436 74.058 [53.729,103.961] 0.383
B y=1.950x-4.083 124.207 [92.198,196.506] 0.405
C y=2.348x-4.248 64.470 [49.406,83.340] 0.414
D y=1.979x-3.742 77.823 [57.953,107.263] 0.390
2.2 不同溶剂的芫荽提取物对蚜虫的胃毒活性的影响
蚜虫是刺吸式、吸汁类的害虫,所以采用xenou-Kokoletsi的方法对其进行胃毒活性测定,结果见
表2。由表2可知,芫荽的不同溶剂提取物对蚜虫均有胃毒活性作用,其中,B的触杀活性LC50 最高,
为195.242mg/ml,其次分别为 A、D,C的LC50 最低,为103.496mg/ml,95%的置信区间为 [76.004,
159.265],毒力回归方程为y=1.810x-3.647。
表2 不同溶剂的芫荽提取物对蚜虫胃毒活性分析结果 (72h)
提取物 毒力回归方程 LC50(mg/ml) 95%置信区间 回归直线斜率 (SE)
A y=1.987x-4.218 132.741 [98.407,213.808] 0.441
B y=1.568x-3.592 195.242 [127.872,529.756] 0.408
C y=1.810x-3.647 103.496 [76.004,159.265] 0.386
D y=1.719x-3.656 134.065 [95.713,240.660] 0.393
2.3 不同溶剂芫荽提取物对蚜虫的驱避活性的影响
根据 Malik等的分级方法,对4种提取物不同浓度的驱避率进行分级,结果见表3。由表3可知,
这4种提取物对蚜虫均有驱避活性,当药剂浓度达200mg/ml时,B、D 的驱避活性等级最高,
为V级。
·532·第8卷 第7期 陈 惠等:不同溶剂的芫荽提取物对菜蚜生物活性的影响
表3 芫荽不同溶剂的提取物对蚜虫驱避活性测定结果 (72h)
浓度
/ (mg/ml)
A
驱避率 等级
B
驱避率 等级
C
驱避率 等级
D
驱避率 等级
0 11.62 Ⅰ -23.39 0 2.29 Ⅰ 17.12 Ⅰ
25 19.85 Ⅰ 26.04 Ⅱ 29.72 Ⅱ 23.12 Ⅱ
50 32.99 Ⅱ 49.75 Ⅲ 41.81 Ⅲ 41.81 Ⅲ
100 52.38 Ⅲ 66.85 Ⅳ 54.29 Ⅲ 58.90 Ⅲ
200 64.86 Ⅳ 87.25 V 76.39 Ⅳ 84.26 V
3 讨论
由上述试验结果可知,4种提取物对菜蚜均有触杀、胃毒、驱避活性作用,其中丙酮提取的芫荽活
性物质对菜蚜的触杀、胃毒作用最大;氯仿、乙酸乙脂的提取物则对菜蚜的驱避活性相对较高,这是由
于溶剂的化学性质不同,导致提取物中活性物质的质量不一样,故而毒力测定的结果有差异,这一结果
与杨玉英等[11]的研究是一致的。本研究中没有对芫荽提取物活性组分进行分离、提纯、鉴定,尚需今
后进一步研究。
全球生物农药市场销量已达到农药总量的20%,而目前我国生物农药年产量仅占农药总量的1%左
右[12]。本研究为芫荽的进一步开发利用和仿生合成新型植物源农药奠定了一定基础。
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·632· 长江大学学报 (自然科学版) 2011年7月
Journal of Yangtze University(Nat Sci Edit)
Vol.8No.7 Jul.2011
MAIN ABSTRACTS
234 Study on the Biological Activity against Cabbage Aphid(Lipaphis erysimi)of Different
Extracts from Coriander
CHEN Hui,XU Li,GE Hong,GU Guo-hua
Agricultural Institute of Riparian Region of Jiangsu,
Rugao,Jiangsu226541,( )China
Abstract:In order to grasp the toxicity and the mode of action of the active substances
in coriander,the whole plant was used as experiment material,with different solvent
extraction,and the contact,stomach poison and repelent toxicity test to cabbage a-
phid were carried out.The results showed that:coriander acetone extract had higher
contact toxicity and stomach toxicity,and the regression equations of toxicity were y=
2.348x-4.248 and y = 1.810x -3.647,and LC50 was 64.470mg/ml and
103.496mg/ml respectively.200mg/ml chloroform and ethyl acetate extracts had higher
grade which was Level V repelent effect against cabbage aphids.
Key words:coriande(Coriadrum sativumL.);extracts;biological activity;cabbage
aphid(Lipaphis erysimi)
237 Effects of Ilumination,Temperature and NaCl Stress on Seed Germination and Seedling
Growth of Trifoliate Orange
WANG Gui-yuan,LI Yan
College of Horticulture and Gardening,Yangtze University,
Jingzhou,Hubei 434025,( )China
Abstract:The effect of different environmental conditions on seed germination and
seedling growth status were studied with trifoliate orange seeds which were used by
randomized trial design.Al 12treatments were set respectively as folows:(1)Light
treatment:ful light,light∶dark=12h∶12hand ful dark.(2)Temperature treat-
ment:light∶dark=12h∶12hcondition and set 15,25,35℃3constant temperature
and 25℃/15℃ (light/dark)a variable temperature.(3)NaCl stress treatment:light∶
dark=12h∶12hand 25℃condition,under the conditions of 0.1,0.3,0.5,0.7,
0.9mol/L with 0.0mol/L NaCl concentration(plus distiled water)as control.The
results showed that the treatment of light∶dark=12h∶12h,normal temperature 25℃
and zero concentration of NaCl was best for germination and seedling growth of trifoli-
ate orange.
Key words:trifoliate orange;seed;germination rate;germination energy;seedling;
light;temperature;NaCl
241 On the Landscaping and Scenic Art of Tower of Buddhist Incense,the Summer Palace
XIONG Yun-hua,WANG Zhong-bao,
WANG Xiong
Hubei Lvdadi Garden Engineering Company Limited,Qianjiang,
Hubei 433100,( )China
Abstract:Classical Chinese garden always implies the use of visual relationship between
the constraints to control the composition.This performance was more subtle and more
··