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阴香茎及叶挥发油化学成分的气相色谱-质谱联用分析比较



全 文 :收稿日期:2007-01-29; 修订日期:2007-04-20
基金项目:广东省肇庆市科技创新项目(2006G21);
     肇庆学院科研资助项目(No. 0522)
作者简介:刘艳清(1973-),女(汉族),江西萍乡人 ,现任肇庆学院轻工化
学系讲师 ,博士学位 ,主要从事天然产物化学、色谱分析工作.
阴香茎及叶挥发油化学成分
的气相色谱 -质谱联用分析比较
刘艳清 , 汪洪武 , 鲁湘鄂
(肇庆学院 , 广东 肇庆 526061)
摘要:目的 分析比较阴香茎及叶两个部位挥发油的化学成分。方法 采用水蒸气蒸馏法提取 , 运用毛细管气相色谱 -
质谱联用法结合计算机检索对其化学成分进行分析和鉴定 , 用气相色谱面积归一法测定各组分的相对百分含量。结果
经毛细管色谱从阴香茎及叶挥发油中分别鉴定出了 41和 42种化合物 , 已鉴定挥发油成分占总挥发油含量分别为 95.
12%及 97. 15%。两个部位中挥发油化学组成各有异同。结论 报道了阴香茎和叶挥发油的化学成分 , 为其综合开发利
用提供了一定的依据。
关键词:阴香; 挥发油; 气相色谱 -质谱联用
中图分类号:R284. 1  文献标识码:A  文章编号:1008-0805(2007)10-2383-02
Analysis and Compar ison of the VolatileO il from the Stem s and L eaves ofC innamomum
burmanii (N ees) B.l by GC -M S
L IU Y an-qing, WANG H ong-wu, LU X iang-e
(Department of L ight Industry&Chem istry, ZhaoqingUniversity, Zhaoqing 526061, Ch ina)
Abstract:Object ive To ana ly se and com pare the chem ica l constituen ts o f the vo la tile o il from the stem s and leaves o fCinnam o-
m um burman ii B.l . Methods The vo la tile o ilw as ex trac ted by steam d istillation, ana ly zed by cap illa ry GC -MS and elucida ted
based on the standa rd m ass spectral data. The rela tive con tent o f each com position was calculated by area norm aliza tion m e thod.
R esu lts 41 and 42 kinds of vo latile com ponen ts we re from the stem s and leave s, respective ly. The iden tified re la tive con tents o f
e ssentia l o ilsw ere 96. 78% and 99. 72%, respec tively. Conc lu sion The chem ical constituents of the vo latile oil o fCinnam omum
burman ii B .l w ere reported fo r the first tim e. The resu lts have provided scientific proof fo r the furthe rdeve lopm en ts o f the medic i-
nal m ateria.
Key words:Cinnamom um burm anii B.l; Vo latile oil; Gas chrom atography -m ass spectrom etry
  阴香 Cinnamomum burmanii (Nees) B.l , 别名粘连树 、梓樟 、
香桂树 , 主要分布于福建 、广东 、广西 、云南及东南亚等地 ,在海南
分布比较广 [ 1] 。研究发现阴香叶具有防蛀 [ 2] 、抑菌 [ 3]等生理活
性。颜振光利用 GC对阴香叶油的化学成分进行了初步分析 [ 4] ,
中大有机教研室 [ 5]仅对阴香叶油中的单萜及含氧单萜成分进行
了鉴定 , 以上文献未对阴香挥发油化学成分进行系统全面地分
析 , 尚未见关于其茎油化学成分的报道。实验采用水蒸气蒸馏法
提取阴香茎及叶中的挥发油 ,采用气相色谱 -质谱联用方法分析
鉴定了其挥发油化学成分 ,并用气相色谱面积归一化法测定了各
成分的相对含量 , 为进一步开发利用该植物资源提供依据。
1 器材
实验材料于 2006-07采自广东省肇庆地区 , 经鉴定为阴香。
自然阴干后剪碎。 QP2010型气相色谱 -质谱联用仪 (日本岛津
公司)。所以试剂均为广州化学试剂厂生产的分析纯试剂。
2 方法
2. 1 挥发油的提取 按《中国药典》2005版提取植物精油的方
法 [ 6] , 分别称取阴香茎及叶 103. 5和 106. 2 g, 加水 1 000 m l,于挥
发油提取器中提取 4 h,分别得油 0. 05和 0. 08 m l,用少量乙醚将
挥发油反复溶出 , 并用无水硫酸钠干燥 , 经 GC -M S检测。
2. 2 挥发油成分的分离与鉴定 色谱条件:RTX - 5石英毛细管
柱(30 m ×0. 25 mm ×0. 25μm), 载气为高纯氦气;柱流量 1 m l
m in- 1 ,气化室温度:280 ℃, 升温程序为从 50 ℃开始 , 保温 2
m in;以 10 ℃ m in- 1升温到 140 ℃, 保温 1 m in, 继续以 4 ℃
m in- 1升温到 220 ℃,保温 1 m in;分流比 20∶1, 进样量:0. 5 m l。
质谱条件:质谱的电离方式为 EI,灯丝电流 0. 6 mA;电子能量 70
eV, 倍增器电压 1. 0 kV ,离子源 200 ℃,扫描范围:40 ~ 350 AMU,
扫描周期 0. 5 s,溶剂延迟 2 m in。按以上条件对阴香茎及叶挥发
油化学成分进行分析。经美国 NIST02. L质谱数据库检索 ,分析
确定各化学组分 , 按峰面积归一法测得各成分相对质量百分
含量。
3 结果与讨论
按上述条件对阴香各部位挥发油进行分析 ,所得到阴香茎及
叶挥发油的总离子流图见图 1。从阴香茎挥发油中鉴定了 41个
化合物 , 占总挥发油的 96. 78%, 其中含有 8类化合物。单萜类 8
个化合物 ,占总含量的 15. 02%;单萜氧化物类 7个化合物 ,占总
含量的 33. 49%;倍半萜类 7个化合为 ,占总含量的 10. 69%;倍
半萜氧化物类 12个化合物 ,占总含量的 24. 36%;酯类 3个化合
物 , 占总含量的 4. 29%;芳烃类 2个化合物 , 占总含量的 5. 61%;
醛类 1个 , 占总含量的 0. 82%;烷烃个化合物 , 占总含量的
0. 84%。含量最高的是龙脑 ,占 20. 32%;其次是 α-水芹烯 , 占
4. 70%;居第 3位的是对甲基异丙基苯 ,占 4. 52%。结果见表 1。
图 1 阴香茎(a)和阴香叶(b)挥发油的总离子流图
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LISH IZH EN MEDIC INE AND MATERIA MED ICA RESEARCH 2007 VOL. 18 NO. 10 时珍国医国药 2007年第 18卷第 10期
表 1 阴香茎及叶的挥发油成分及相对含量
序号 保留时间
t /m in
化合物 分子式 茎相对含量(% ) 符合度(% )

相对含量(% ) 符合度(% )
1 6. 717 α- thu jene(α-侧柏烯) C10H16 - - 0. 40 95
2 6. 875 α- p inene(α-蒎烯) C10H16 2. 51 97 3. 76 97
3 7. 175 C am ph ene(莰烯) C10H16 0. 90 97 0. 58 97
4 7. 625 β - phellandrene(β -水芹烯) C10H16 - - 4. 26 95
5 7. 700 β - p inene(β -蒎烯) C10H16 1. 03 97 2. 04 96
6 7. 867 β -myrcene(β -月桂烯) C10H16 1. 45 96 1. 67 96
7 8. 183 α- phellandrene(α-水芹烯) C10H16 4. 70 96 2. 36 94
8 8. 408 4 - carene(4 -蒈烯) C10H16 - - 0. 58 96
9 8. 550
1 -m ethyl - 4 - isop ropy lbenzene(对甲基异丙基苯) C10H14 4. 52 96 2. 35 96
10 8. 625 lim onen e(柠檬烯) C10H16 2. 67 94 2. 42 95
11 8. 708 eu calyptol(桉油素) C10H 18O 3. 44 97 20. 71 97
12 8. 908 ocim ene(罗勒烯) C10H16 0. 68 98 0. 68 97
13 9. 167 γ- terp in ene(γ-松油烯) C10H16 - - 0. 99 96
14 9. 325 β - linalool(β -沉香醇) C10H 18O 0. 85 94 - -
15 9. 692 2 - carene(2 -蒈烯) C10H16 1. 08 94 - -
16 9. 842 lim onol(柠檬醇) C10H 18O 0. 81 87 0. 38 96
17 11. 042 ben zen epropanal(苯丙醛) C9H 10O - - 0. 38 87
18 11. 150 borneol(龙脑) C10H 18O 20. 32 96 5. 16 96
19 11. 283 terp inen - 4 - o l(松油烯 - 4 -醇) C10H 18O 3. 27 93 - -
20 11. 350 2 -m ethylbenzofuran(2 -甲基苯并呋喃) C9H 8O - - 1. 41 85
21 11. 392
1 -m ethyl- 4 -(. a lpha. - hyd roxyisop ropyl)
ben zen e(1 -甲基 - 4 -(α-羟基异丙基)苯 C10H 14O 1. 09 84 - -
22 11. 508 α- terp ieo l(α-松油醇) C10H 18O 4. 02 96 7. 73 96
23 11. 608 decanal(癸醛) C10H 20O 0. 82 86 0. 79 96
24 11. 758
4(10) - thu jen - 3 - o l(4(10) -侧柏烯 - 3
-醇) C10H 16O 0. 78 89 - -
25 12. 650 phenethy l acetate(乙酸苯乙酯) C10H12O2 - - 0. 46 98
26 12. 883 C i tral(柠檬醛) C10H 16O - - 0. 33 97
27 13. 058 cinnam a ldehyde(肉桂醛) C9H 8O - - 0. 41 96
28 13. 233 bornyl acetate(乙酸龙脑酯) C12H20O2 2. 73 97 1. 71 97
30 15. 100 nerol acetate(香橙醇乙酸酯) C12H20O2 - - 0. 48 94
31 15. 525 elem ene(榄香烯) C15H24 0. 81 92 0. 29 93
32 16. 083 erem oph ilene(雅槛蓝油烯) C15H24 1. 45 87 - -
33 16. 325 caryophyllene(丁香烯) C15H24 2. 93 94 5. 53 97
34 16. 708 cinnam y l acetate(乙酸肉桂酯) C11H12O2 0. 87 92 2. 12 97
35 16. 800 arom adend rene(香橙烯) C15H24 0. 86 89 - -
36 17. 175 α- caryophyllene(α-丁香烯) C15H24 0. 92 92 0. 75 96
37 17. 900 β - cubebene(β -荜澄茄苦素) C15H24 - - 2. 71 92
38 18. 050 α- guaiene(α-愈创木烯) C15H24 0. 97 82 - -
39 18. 283 germ acrene(大根香叶烯) C15H24 2. 75 92 7. 34 92
40 19. 650 elem ol(榄香醇) C15H 26O 1. 31 94 2. 58 95
41 19. 808 nerolido l(橙花叔醇) C15H 26O 1. 33 94 1. 69 96
42 20. 633 spathu lenol(匙叶桉油烯醇) C15H 24O 4. 02 94 1. 67 95
43 20. 825 caryophyllene ox ide(石竹烯氧化物) C15H 24O 1. 37 91 1. 12 94
44 21. 100 guaiol(愈创木醇) C15H 26O 3. 76 95 3. 78 95
45 21. 942
2, 2, 7, 7 - tetram ethyltricyclo[ 6. 2. 1. 0(1,
6)] undec - 4 - en - 3 - one(2, 2, 7, 7 -四甲基三环 [ 6. 2. 1. 0(1, 6)]十一碳 - 4 -烯 - 3
-酮)
C15H 22O 2. 14 86 - -
46 22. 183 γ- eudesmo l(γ-桉叶油醇) C15H 26O 0. 76 87 0. 59 94
47 22. 875 β - eudesm ol(β -桉叶油醇) C15H 26O 2. 53 94 0. 88 89
48 22. 942 agarosp irol(沉香螺醇) C15H 26O - - 1. 20 88
49 23. 250 β - guaiol(β -愈创木醇) C15H 26O 1. 35 93 1. 12 96
50 23. 658 hep tadecane(十七烷) C17H34 0. 84 87 0. 27 93
51 24. 350 isolongifolen - 5 - one(异长叶烯 -5 -酮) C15H 22O 1. 34 83 0. 64 85
52 24. 550 α- cyperone(α-香附酮) C15H 22O 2. 55 88 - -
53 25. 925
4, 8a - d im ethy l- 6 - isop ropenyl - 3, 5, 6, 7,
8, 8a - hexahydronaph th alene 2(1H) - one(4,
8a -二甲基 - 6 -异丙烯基 - 3, 5, 6, 7, 8, 8a
-六氢萘 -2(1H) -酮)
C15H 22O 1. 90 85 0. 83 82
  从阴香叶挥发性成分鉴定了 42个化合物 , 占挥发油总量的
99. 72%, 其中含 8类化合物。 单萜类 11个化合物 , 占总含量的
19. 74%;单萜氧化物类 5个化合物 ,占总含量的 34. 31%;倍半萜
类 5个化合为 , 占总含量的 16. 62%;倍半萜氧化物类 11个化合
物 , 占总含量的 16. 10%;酯类 4个化合物 ,占总含量的 4. 77%;
芳烃类 2个化合物 , 占总含量的 3. 76%;醛类 3个 , 占总含量的
1. 58%;烷烃类 1个化合物 , 占总含量的 0. 27%。含量最高的是
桉叶油素 ,占 20. 71%;其次是龙脑 ,占 5. 16%;居第 3位的是 α-
松油醇 ,占 7. 73% 。见表 1。
从阴香茎及叶挥发油中共鉴定出 53种化合物 , 其中两者共
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时珍国医国药 2007年第 18卷第 10期 LISH IZHEN MEDIC INE AND MATERIA M EDICA RESEARCH 2007 VOL. 18NO. 10 
有成分有 30种 ,主要成分及含量见表 2。
表 2 阴香挥发油的主要成分及含量
化合物 茎 (%) 叶(%)
龙脑 20. 32 5. 16
桉油素 3. 44 20. 71
α-松油醇 4. 02 7. 73
丁香烯 2. 93 5. 53
α-水芹烯 4. 70 2. 36
愈创木醇 3. 76 3. 78
α-蒎烯 2. 51 3. 76
参考文献:
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[ 3 ]  骆炎平 , 郑服丛 , 谢 江. 阴香叶提取物的抑菌活性初步研究
[ J] .现代农药 , 2005, 4(2):31.
[ 4 ]  颜振光.阴香树叶油的气相色谱分析与利用 [ J] .湛江师范学院学
报 , 1994, 1:120.
[ 5 ]  中山大学化学系有机化学教研室. 阴香叶油化学成分的研究 [ J] .
中山大学学报(自然科学版) , 1974, 2:36.
收稿日期:2007-02-06; 修订日期:2007-04-17
基金项目:宁夏自然科学基金重大项目(No. 2003ZD01);
国家科技支撑计划项目子课题(No. 2006BA I06A15 -11)
作者简介:严奉坤(1979-),男(汉族),湖北荆州人 ,现任宁夏工商职业技术学
院助教 ,硕士学位,主要从事生物技术及应用方面的教学与科研工作.
*通讯作者简介:许 兴 (1959-), 男(汉族),宁夏银川人 , 现任宁夏大学
教授 ,博士学位 ,主要从事植物逆境生理生态与分子生物学研究工作.
同一品种不同产地宁夏枸杞
DNA指纹图谱特征研究
严奉坤 1, 2 ,许 兴2, 3* , 杨亚亚 3 ,殷 敏2, 3
(1.宁夏工商职业技术学院 ,宁夏 银川 750001;
 2.宁夏农业生物技术重点实验室 ,宁夏 银川 750002; 3.宁夏大学生命科学学院 ,宁夏 银川 750021)
摘要:目的 探讨同一品种不同产地宁夏枸杞 DNA指纹图谱特征。方法 采用 RAPD技术对全国四大商品区的枸杞道地
品种宁夏枸杞的主栽品种宁杞 1号的叶片和宁夏商品区的制品枸杞子进行了 DNA指纹图谱特征研究。结果 四大商品
区的宁夏枸杞叶片 DNA指纹图谱一致 ,而制品枸杞子的 DNA指纹图谱与叶片的有较大差异。 结论 DNA指纹图谱用于
鉴定同种枸杞的叶片结果可靠。
关键词:宁夏枸杞; 多态性; DNA指纹图谱
中图分类号:R284. 1  文献标识码:A  文章编号:1008-0805(2007)10-2385-02
Studies on the DNA F ingerpr ints ofLyc ium barbarum L. from D ifferentA rea
YAN Feng-kun1, 2 , XU X ing2, 3* , YANG Y a-ya3 , Y IN M in2, 3
(1. N ingxia Professional Institute of Technology and Business, Y inchuan 750001, Ch ina;2. Key Lab of Agricu l-
tural B io - technological of N ingxia , N ingx ia Academy of Agricu ltural and Forestrial Sciences, Y inchuan
750002, China;3. L ife Science School ofN ingxia University , Y inchuan 750021, Ch ina)
Abstract:Objective To study the DNA fingerprints of Lycium barbarum L. obta ined from d iffe rent a reas. M ethods DNA fin-
ge rprin ts o f sam ples o f leaves and fruits o fLycium barbarum L. from four large comm ercial cen te rsw ere exam ined by RAPD. R e-
su lts A ll leaves o f Lycium barbarum L. show ed sim ilar finge rprin ts charac teristics, wh ile the fru its of Lycium barbarum L. gave
considerab le differen t re su lts. C onclusion DNA finge rprin t study is re liable fo r identify ing Lycium barbarum L. .
Key words:Lycium barbarum L. ; RAPD; DNA fingerp rin t
  用任意引物进行基因组指纹分析是检测 DNA多态性的一种
通用方法 , 这种方法是用随机选择的引物在一定反应条件下产生
DNA指纹 , 这样获得的指纹有的只包括几个主要的聚合酶链反
应(po lym era se cha in reaction,简称 PCR)产物 , 有的则包括 100多
个 , 这样的产物通常被称为随机扩增的多态性 DNA(Random Am-
p lified Polym o rphic DNA, 简称 RAPD)。 RAPD 由 W illiam s和
W elsh两个研究小组几乎同时于 1990年建立起来的一项 DNA分
子标记技术 [ 1, 2] , 其原理是:它以一个 10碱基的任意序列的寡核
苷酸片段为引物在未知序列的基因组 DNA上进行随机的 PCR
扩增 , 这种被 DNA聚合酶调节的扩增是一个复杂的 、动态的化学
反应系列;在这些反应中引物将同源序列从非同源的竞争位点识
别出来并确定以后的效率 ,模板 、扩增产物 、酶 、引物与 dNTPs浓
度之间的平衡随每个温度周期而变 ,不同种类的分子彼此相互作
用 , 其结果是合成了 PCR扩增产物;在基因组上 , 某一引物可能
会与单链 DNA的多个位点结合 ,但只有这些引物的位置是在彼
此可扩增的距离内(200 ~ 4 000 bp),一组不连续的分子量为 200
~ 4 000 bp的 DNA片段就会通过 PCR产生;如果双链 DNA分子
在一定长度内具有反向平行又与引物互补的片段 , 那么经过 40
个循环后就可以合成 240条新链 ,如此高产的 DNA片段经电泳
分离和溴化乙锭专一染色后可直接在紫外光下观察和照相 ,记录
下 RAPD指纹 [ 3] 。
前文已报道过 RAPD法对枸杞叶片基因组 DNA进行指纹图
谱分析 [ 4] 。本文在此基础上 , 对全国同品种不同产地宁夏枸杞
主栽品种宁杞 1号的 DNA指纹图谱特征进行了研究。
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