全 文 ：照山白的药物分析
中国人 民解放军第2 5 4医院 药局
照山白 ( R h o d o d e n d r o n m i e r a n t h u m 3 . 照 ilJ 白的毒性成分— 橙木毒素系一
T
u r o r
)又名照 白杜鹃 , 属杜鹃花科 ( E r i c a 一 中性物 , 易溶于水 、 醇 、 乙酸乙醋 、 醚 、 氯
c e a e) 植物 。 药用其叶 。 有镇咳 、 祛痰 、 平 仿 。 不被次醋酸铅沉淀 。
喘 、 消炎 、 降压作用 。 毒性较大 , 水煎液于 4 . 试验几种去毒方法 , 以氯型树脂提取
小白鼠口服 L D 。 。 = 8 5 . 5克 /公斤体重 ’ 。 法 、 酸沉淀法较为实用 , 但仍不够理想 。
我区 1 5 1 5部队应用照山白治疗慢性气管 5 . 产地不同的照山白的毒性不一 , 河北
炎 , 有效率 9 5 . 2% , 显效 89 . 5% 。 为了解照 省承德产 的 L D S。 (腹腔 ) 二 0 . 3 09 士 0 . 0 25
山白有效成分 , 降低毒性 , 提高疗效 , 改进 (克生药 /公斤体重 ) , 丰宁县产的 L J) 5 。 (腹
剂型 , 我们作 了化学成分预试验 , 有效成分 腔 ) 二 1 . 5 0 士 0 . 0 75 (克生药 /公斤体重 ) 。
分离 , 层析和药理等初步工作 、 其结果是 : 前者比后者毒性大 5 倍左右 。
1
. 照山白镇咳 、 祛痰有效部分为挥发油 现将实验步骤和结果报告如下 :
和水煎剂中能被次醋酸铅沉淀的物质 一 、 化学成分预试验 . 据北京药物研究
2
.挥发油经初步分析含有酚性物 、 醛酮 所 《植物化学成分系统预试法 》 , 北医 、 京
类 、 经基幽类等 。 水煎液有效部 分 中含 黄 字 9 09 部队合编 《 中草药制剂资料汇编 》 、 南
酮 、 多经酸 、 酚性物等。 它们在酸性下可被 京药学院 《 中 一草药薄层层析 》 分析 (表一 ) 。
醚萃取 , 硷性下成盐 , 不被有机溶媒提出 。
衰一 照 山 白 化 学 成 分 预 试 验
门 ,
树性中脂一.内醋吞豆精一葱配俄.黄附俄小强心试挥发一油
一
街醉蛋自叭…一一、皂袱一刻司一叫 l性还原物.裸质+酸性物十有机酸+生物碱+ō化学成分
反
二 、 有效和毒性部分的分离步骤 : 按图
1步骤 , 用次醋酸铅可分开有毒 与 有 效 部
分 。
北京药物研究所在满山红中曾提得校木
毒素 , 并发现照山白中含量更多 。 从照山白
浸液经醋酸铅沉淀后母液中可提 得 慢 木 毒
素 。 据此 , 我们分析提取液 I 中确含有橙木
毒素 , 在提取液 I 中也仍混有微量毒素 。
三 、 药理实脸
!
. 镇咳实验 : 在恒压下喷氨雾 , 用上下
法求半数有效制咳剂量 , 动物为小 白鼠 , 以
水作空白对照 , 其延长百分率在 30 % 以上为
有效 , 50 % 以上为显效 。 结果见表二 。
表二示 , 挥发油 、 自 色结晶 、 提取液和
醇 、 硷沉淀均有明显镇咳作用 。 4 0 毫克白
色结晶的镇咳作用与 7 5毫克可待 因 作 用 相
似 。 水煎液毒性大 , 镇咳作用难以表现 。 从
水煎液中分离出的提取液 I 已无毒性 , 显出
显著的镇咳作用 。 黄 色 沉 淀 的 收 得 率 为
0
.
3 9%
,
12 5毫克 /公斤体重的剂 量 相 当 一 J二
5 了8
,. 山白外 (粉碎成粗宋》
上冰蒸汽燕溜
挥发油 (浅漪色 ` 分翻衣, 有平喘作用 ) 水煎液
l ~ .1
,
C冷藏过夜
少
白色结晶
(锁咳祛谈均有效 )
挥发油
(锁咳祛痰均有效 )
浓缩成调羔 , 加乙脚
放置过夜
回收乙醉 , 加水稀释成 4
克生药 /毫升
水煎液 (毒性大镇咳祛痰不明显 )
}加 1。%次醋酸铅液
抗淀
悬浮于水中 , 通H声脱铅
过悠 , 水浴上浓缩
驱H : S , 调整浓度为4克生药 /毫升
红棕液体
水液…通 H Z S脱饥过滤水浴上浓缩驱H : S调整浓度为 4 克生药 /奄升
4
放 里
从色沉淀
(主要为黄铜体 ,
提取液 l
提取液 1
(毒性与水煎液相似 , 祛痰
平喘作用均不明显 , 降压作用明显 )
镇咳 , 祛痰均不明
显 , 像性低 )
{ (镇咳祛痰均显效无
} 平喘和降压作用
! 毒性比水煎液有显著
! 降低 ) 加 2 倍 t 乙工 ” , 放置过液
上消液
卜
醉沉淀
(主要为多径酸 , 镇咳钊痰均有效 ) 土回收乙醉 : 加 , “ %暇翱七钠液尹一 ` 、 一一一一 -一一一一一、 、碱沉淀 碱上洁液(主要为酸性物与多羚 (主要为酸性物 , 黄酮酸锁咳祛痰均有效 ) 类 、 祛痰有效 )图 1 有效和毒性部分的分离步骤
裹二 照山白各分离部分的锐咳作用
药 物 剂 贵(每公斤体重 ) 给药途径 }延长百分率 }结 果
6149盯帕8拍58幼挥 发 油
白色结 晶
黄色沉淀
水 煎 液
提取液 l
醉 沉 淀
碱 沉 淀
碱上 清液
可 子寺 因
2 2 5毫克
3 6 0毫克
2 5 0毫克
4 0 0毫克
12 5毫克
2 0克生药
60克生药
16 0克生药
1 6 0克生药
16 0克生药
75毫克
腹腔
口 服
腹腔
口服
腹腔
口服
腹腔
腹腔
腹腔
腹腔
n 服
显效
有效
显效
显 效
显效
显 效
显效
不 显若
显 效
3 2 0克生药 /公斤体贡 , 剂量 已较大 , 但与挥
发油比较 (挥 发油收得率为 0 . 1 5 % ) . 剂量又
小一些 。 因此 , 黄色沉淀有无镇咳作用尚待
观察 。
2
. 祛痰实验 : 用小白鼠气管内酚红排泄
法 , 每组 8 只 , 每批做空白对照 , 并做显著
性测验 , 结果见表三 : 其中挥发油 、 白色结
晶 、 提取液 ! 、 醇沉淀 、 硷沉淀和硷上清液
均有显著的祛痰作用 , 提取液 I 的酚红排 出
浓度比空白对照组还低 , 故未作 t测验 。水煎
液与黄色沉淀的结果与镇咳试验项下同。
3
. 平喘实验
(一 ) 离休气管实验 : 用组织胺使离体
豚鼠气管收缩 (在 37 ℃恒温下 ) , 用实验药
物观察豚 鼠气管舒张情况 , 以百分数表示抗
5 1夕
班三 照 山 白 各 分 离 部 分 的 祛 痰 作 用
药 物 剂 盆
( 每公斤体盆 )
给 药 途 径 阶红排出浓度
( 徽克 /奄升 》
空 白对照组阶红排
出浓度 ( 橄克/ 毫升 )
侧验 P值
挥 发 油
白色给晶
水 煎 液
提取浪 I
提取液 l
黄色沉淀
醉 沉 淀
孩 沉 淀
旅上清液
8 0 1奄克
3 0 6班克
4 00电克
4 0 0瑰克
0 6克生药
60克生药
100 克生药
15 0庵克
160克生药
160克生药
160克生药
1
。
9 1士0 。 5 1
2
。
5 5 士0 。 5 9
3
。
3 土0 。 5 4
1
。
5 士 0 。 63
0
。
4
1
.
4 6士 0 。 3 6
2
一
5 2士0 . 4 2
0
。
8 0 土 0 。 0 98
0
。
9 3土0 。 0 5 7
1
。
3 1土0 。 5 2
2
。
0 3士 0 。 3 9 1
0
。
3 土0 。 0 1
0
。
5 7 士 0 。 4 2
0
。
5 7 士0 。 4 2
O
。
5 7 士 0 。 4 2
< 0
。
0 5
< 0
。
0 1
< 0
。
0 1
二 0 。 10
0
。
5 7 士 0 。 4 2
0
。
28 士 0 。 9 1
O
。
28 士 0 。 19
0
。
28 土 0 。 9 1
0
。
2 2士 0 。 10
O
。
2 2土0 。 0 1
0
。
2 2士 0 。 0 1
< O
。
0 5
< 0
。
00 1
>O
。
05
< 0
。
0 1
< 0
。
0 2
< 0
。
0 0 1
腔服应口旗腹
组织胺作用 。 结果见表四 。
衰四 照山白各分离部分对耳限离体气甘实脸结果
荆 t 抗组织 胺作用 ( %》
气
OQ4 27 1
挥发油 ( 配成乳液 , 浓度 18 奄克 /在升 )
新 配 制
放工几天 后
放里几天 后
放 t 几天 后
1
.
8毫克
1
。
8毫 克
1
。
8毫克
5
.
4奄克
提取液 I 新配制
( 4 克生药 /奄升 )
放里几天后
O
。
2毫升
提取液 I 新配制
( 4 克生药 / 奄升 )
放 t 几天 后
O
。 2毫升
O
。
3毫升
0
。 4奄升
(二 ) 健康豚鼠平喘实验 : 在恒压下造
成气洛胶态之组织胺 , 观察豚鼠 6 分钟内发
生蜜息性抽摘数 。 (具体步骤见后字 2 36 部
队编印的 《平喘药的筛选方法》 ) 。
结果 , 挥发油组 (剂量 3 0 毫克 /公斤 ,
灌胃 ) 4 只豚鼠中 3 只发生窒息性抽搐 。 空
白对照组 3 只豚鼠全部发生室息性抽搞 。
上述两项实验结果表明 : 提取液 I 几乎
无平喘作用 , 挥发油与提取液 I 均有一定的
平喘作用 , 以挥发油为好 。 但挥发油的抗组
织胺作用有随时间延长而降低的趋向 , 提取
液 I 亦有此情况 。 挥发油的离体与整体实验
结果的差异可能与整体试验的样品放置时间
较长有关 。 这可能是该抗组织胺的物质是一
种不稳定或在水溶液中能失去作用的物质 。
因为实验次数尚少 , 尚需迸一步观察比
较 。
4
. 降压实验
取一健康狗 , 在硫喷妥呐麻醉下 , 记录
动脉血压为 90 一 1 0 毫米汞柱 , 然后腹腔注射
提 取 液 1 1 . 2 克生药 /公斤 。 观 察 1 小时 ,
血压不降。 再腹腔注射提取液 I (剂最与提
取液 I 相同 ) 。 注射后血压立即开始下降 ,
3 0分钟后血压降至42 毫米汞柱 , 并呈继续下
降趋势 。 此时给予新福林半支 , 血压升到50
一 5 毫米汞柱 。 再加一支肾上腺素 , 血压仍
停留在原处 , 维持了 2 个半小时以上 。 此实
验做得比较粗糙 , 还不能完全说明问题 , 但
可以初步说明提取液 I 有明显的降压作用 。
新福林可 以部分对抗 。 提取液 I 则无急性降
压作用 。
5
. 急性毒性观察
在做上述药理筛选中 , 发现照山白的某
些分离部分具有很大毒性 , 因此将其在 l 小
时内的死亡率列表五 , 以供参考 。
其中水煎液毒性很大 , 提取液 I 保留了
水煎液的毒性 , 提取液 互则明显地降低了毒
性 。 醇沉淀和碱沉淀毒性均较小 , 硷上清液
, 2 0
表五 照山白某些分离部分的急性容性观察
!
⑧
O
药 物 } 剂量 (克生 药 /公斤 ) }
腹腔给药死 亡数
水 煎 液 } : 。 { ; / 4
提取液 1 ! 5 } 3 / 3
提取液 1 1 6 0 1 0 / 7
提取液 1 1 10 0 1 0 / 9
醉 沉 淀 1 1 6 0 ! 0 / 1 3
碱 沉 淀 1 16 0 } 0 / 1 7
碱上清液 } ` 6 0 { ” / 1 5
毒性略大些 , 其原因根据薄层分析 , 在提取
液 I 中混入有少量授木毒素 , 而在进一步分
O
0 O
O 0原点
一 ①图 2 挥发油双向层 析图
离中都集中在硷上清液了 。
6
. 不 同产地的照山白半数致死量测定
l沾床上反映不同产地照山白的毒性不一
样 。 为此我们测定了丰宁 、 承德两地产的照
山白的半数致死量 。 方 法采用孙瑞元的修正
法 . , 结果 :
照山白 (承德产 ) L D 。 。 (腹腔 )
二 O。 30 9 士 0 . 02 5 (克生药 /公斤体重 )
照山白 (丰宁产 ) L D 。。 (腹腔 )
二 1 . 5 0 0 士 0 . 0 7 5 (克生药 /公斤体重 )
承德产比丰宁大 5 倍 。 此项结果与临床
观察相符 。
四 、 薄层层析
l
。 挥发油 : 用硅胶一C M C薄层 , 苯一无
水 乙醇 ( 8 : 2 ) 展开 。 以澳 甲酚绿 、铁佩化
铁 、 硅钨酸显色 。 结果除澳甲酚绿外余均显
色 , 表明挥发油内不含酸性物 , 含有酚 、 醛 、
酮和羚基街类化合物 。 又在 中性氧化铝薄层
上用 5 % 乙酸 乙醋石油醚展开 、 2 %香荚兰
浓盐酸显色可分 得 8 个斑点 , 其 R f 值各为
0
。
8 1
, 0
.
4 6
,
0
。
4 3
,
0
.
3 7
,
0
.
3 1
,
0
。
2 7
,
0
。
0 8
,
0 (原点 ) 。
在中性氧化铝薄层上双 向层析 , 先用 5%
乙酸乙醋石油醚展开 , 另一 向用苯展开 。 与
单向层析 比较 , 在 R f 值为 0 . 81 的斑点又分
出一个斑点 , 原点又分 出一个点 , 因此初步
分离得十个斑点 (图 2 ) 。 对每个斑点尚未
进一步鉴别 。
2
. 黄色沉淀 : 在硅胶薄层上与铁氛化铁
呈兰色 , 在纸层上以乙酸 乙酷 : 水展开 , 得
呈黄绿色莹光的斑点 , 喷三氯化铝试剂则莹
光显著加强 ; 用氨气熏之则黄色显著加深 ,
放置待氨挥发后可复原 。 所以黄色沉淀主要
为黄酮类化合物 。
3
. 提取液 I : 用氯仿热提 , 提取 液回收
氛仿 ,提取物用少量甲醇溶解 , 在硅胶一C M C
板上 用 已烷 : 乙酸乙醋 : 甲醇 ( 4 : 4 : 2 )展
开 , 10 %三氯化锑氯仿液显色 ,得图 3 。 在 R f
值为0 . 5处有一棕红色点 , 即为权木毒素 。
阵
一棕绿色`二〕 一一
甲一
: :
O
红棕色
薄 层 . 硅胶 一 CM C
展开荆 : 已 烷 、 乙酸乙 丽 、 甲醉
显色剂 : 1 0%三氛化锑舰仿 液
图 3 提取掖 l 的氮仿提取钧层 析图
4
. 提取液 l 、 醉沉淀 、 硷沉淀和硷上清
液 : 提取液 I 与明胶试液发生多 量 白 色 沉
乡2 1
淀 。 在硅胶薄层上与澳甲酚绿 、 铁氰化铁 、
磷铜酸等试剂均显反应 。 在纸层上有两个浅
黄色斑点 , 在浓氨气熏下 , 黄色加深 , 放置
待氮挥散后 , 可复原 , 喷三氯化铝试剂则黄色
萤光显著加强 。 因此提取液 I 中含酚性物和
裸质 、 黄酮类 、 幽醇类化合物 。
另取提取液 I 两份 , 一份用固体碳酸钠
硷化至 p H l l , 一份用稀盐酸酸化到 p H I一 2 ,
然后以醚萃取 , 得酸醚与硷醚两部分和醇沉
淀 、 硷沉淀 、 硷上清液同作薄层层析 ,得图 4 。
一一口一~ 一 l一 l es ~ 一口一一 ~ l ~ 一一一、 一
O90门IJU
o巴O八白z,白,J月,O哑
0 1
“ @ I @ 1 0 1 0
硷醚 酸醚 醇 沉 淀 硷上清液
薄 层 : 硅胶一 CM C
展开剂 : 苯 : 无水乙醉 ( 8 : 2 )
显色荆 : 澳甲阶绿 、 铁青化铁 、
图 4 硷醚 、 酸醚 、 醉沉淀 、 硷上清液 、
层析图
硷沉淀
三抓化锑
硷沉淀
从层析图推知有效部分中大都为含酚经
基的酸性物 , 硷性时成盐 , 不被醚溶出 , 酸性
下可被醚溶出 。 具体说 : 成分 1 为含酚经基
之中性留体类 , 极性很小 , 成分 2 为酚经类
物 , 中性 , 极性较小 , 在此部分有与三氯化
锑反应呈红棕色的成分即橙木毒素 (次醋酸
铝分离时混入的 ) 。 从薄层上看该毒素为中
性物 , 在水 、 醉 、 醚中均可溶解 。 成分 3 属
酚类 ; 成分 4 为酚类 、 黄酮类 , 成分 5为多
经酸类 。 醇沉淀部分主要为成分 5 , 硷沉淀
部分主要 为 成 分 2 、 5 , 硷上清液含成分
4 , 及少量毒素 。
五 、 几种去毒法之试验
因为次醋酸铅法分离毒素与有效部分不
实用 ,也难推广 ,故拟寻找一个操作简便 , 易
于推广之去毒法 , 为此作了下列几个试验 。
1
. 活性炭吸附法 : 照 山白中校木毒素含
量为 0 . 05 % 2 , 因此设想用活性炭吸附毒素 。
方法为 : 醇浸液回收乙醇后 , 加入活性炭 (按
液体量 1% ) , 煮沸30 分钟 ,放冷后过滤 。 再重
复处理一次 。 但经薄层检查仍有校木毒素 。
2
. 硷性下不溶于醚 , 而毒素为中性物 ,
酸 、 硷性下均可被醚提 出 , 所 以采用下列两
法提取毒素 :
( 1 ) 醇浸液回收乙醉后 , 浓 缩 至 适
量 , 加 10 %氢氧化钠液硷化 (P H 10 以上 ) , 用
乙醚提取 5 次 , 又用乙酸乙醋提取 4 次 。 毒
素被提 出一部分 , 但由于分配系数小 , 母液
仍含有毒素 。 试用于 2 只小 白鼠 ,毒性很大 。
( 2 ) 取风干叶 ,粉碎成粗末 , 用 10 %氢
氧化钠液湿润 ,再用氯仿热提共 15 次 ,氯仿提
取液经薄层检查仅为痕迹量 。 然后驱除叶中
之氯仿 ,中和后再用醇热提 ,提取液回收乙醇 ,
浓缩后得去毒提取液 , 作祛痰试验 (表六 ) 。
3
. 阴离子交换树脂交换法 : 根据有效成
分为酸性物 , 硷性下成阴离子而设想 。 方法
为 : 醇浸液回收乙醇 , 用 10 %氢氧化钠液硷
化后 ( p H 10以上 ) , 通过 O H型树脂 , 后又
通过氯型树脂 。 树脂用水洗净 。 O H 型树脂
用 0 . 1%盐酸液洗脱 , 中和洗脱液得 O H 型
树脂提取液 。 氯型树脂晾干 , 用 10 % 盐酸液
湿润 , 酸化 , 用醇洗脱 , 洗脱液中和后 , 回
收乙醇 , 浓缩得氯型树脂提取液 。 此两提取
液作祛痰试验 (表六 ) 。
4
. 酸沉淀法 : 醇浸液回收乙醇 , 加入盐
酸酸化 , 放置后过滤 , 得酸沉淀物 。 作祛痰
试验 (表六 ) 。
几种提取方法均能提得有效成分 , 毒性
有所降低 。 但某些有效成分本身也可能有一
, 2 2
定毒性 。 上述几种方法中以氯型 树 脂 提 取
法 , 酸沉淀法实用性较大 。 但仍不甚理想 ,
还需继续寻找新法 。
裹六 各 法 去 毒 液
照山白的临床疗效确实 、 值得进一步深
入研究 , 弄清其有效和毒性成分及其药理作
用 , 以指导临床提高疗效 ,改进制剂 、 降低毒
的 祛 痰 试 验
药 物 剂 量
( 克生药 /公斤体重 ) 给药途径
阶红 排出浓度
(徽克 /毫升 )
空 白组 酚红排 出
`浓度徽克 /奄升 )
t侧验
P 值 备 注
去毒提取液 腹腔 1。 9 0 士 0 。 2 4 0 。 3士 0 。 0 4 5 < 0。 0 0 1 荆 t 加倍则小白鼠死亡
2 / 2
O H型树脂提
取液
C l 型树脂提
取液
胶沉淀物
腹腔
腹腔
1
。
6 0 士 0 。 2 7 0。 3士 0 。 0 4 5 < 0。 0 5 有抑制呼吸
现象
0
。
8 3 士 0 。 0 9 0。 3士 0 。 0 4 5 . 0。 0 0 1
腹腔 1 . 7 4 士 0 。 1 7 0 。 3士 0。 04 5 < O。 0 01 】多数脚疾
n.n们匕」内七匕t-11
性 ,进一步推广 。我们的初步工作还很粗糙 ,
有的尚不能确切地说明问题 , 尚待继续深入 。
实验还有 1 5 1 5部队医院 、 1 0医院 、 107 医院人员参加 。
参 考 资 料
1
。 北京卫生局药品检验所 , 迎红杜鹃和照山白 的初步
研究 , 6 页 , 1 9 7 2年 4 月 。
2
。 北京中国医 学科学院药物研 究所 , 满山红叶有效成
分的研究 , 1 9 72年 6 月 。
3
。孙瑞元 , 药学学 报 , ( 2 ) : 6 5 , 19 6 3 。
注。 本文药理实脸中平喘部分为后字 2 36 部队所傲 , 本
对于临床试用确有疗效的单味中草药 , 如何使
之去芜存精 , 减低毒性 , 提高疗效 , 也是整理 、 发
展 、 提高我国医药学宝库的一条重要途径 , 近年来
国内许多药研工作者在这方面作了许多工作 , 有一
些并已人工合成 , 但大多数有效草药仍未获深入研
究 。 本文以寻求降低照山白毒性作用的 方 法 为 目
的 , 工作虽然 尚未完结 , 却是一个值得 欢 迎 的 工
作 。 — 编者
鸟 头 炮 制 的 研 究
天津市药材公司中药研究室 饮片加工厂
乌头 ,辛温有大毒 , 《本草纲目》 列为毒草
类 。 治诸风 , 半身不遂 , 除寒冷 , 暖脾胃诸
症 。 因有毒 , 性猛烈 , 须炮制后始能使用 。
乌头的炮制方法很多 , 有水浸 , 水煮 , 加石
灰或食盐泡 , 蒸汽蒸等 。 检验方法仅凭 口尝
无麻 、 辣 、 痛感为度 。 天津的传统方法是 :
用冷水浸 10 夭 , 再加甘草水煮 , 此法不利于
大量生产和保证药效 。 浸泡时间较长 , 易使
有效成分流失 。 后经药工建议 , 我们结合生
产 , 对乌头的炮制法作了初步实验 。
一 、 原料来源及炮制方法 : 实验所用 ’
乌头为天津市饮片厂供给 。
1
. 水浸后甘草水煮法 (老法 ) : 将乌头
放清水中 (水面超过药一寸 ) 室温浸泡 , 每
天换水一次 (换下水浓缩成 浸 膏 , 待 实 验
用 ) 连续 10 天 。 将泡就乌头加 10 %甘草水煮
4小时 , 切开 , 口尝无麻辣感取 出 室 温 干
燥 。
2
. 加压甘草水蒸 (新法一 ) : 取乌头里
白磁罐内 , 加 10 %甘草水 , 放加压旅内 , 以
1
.
5公斤 /平方厘米 ( 12 2 ℃ ) 热压 , 50 分钟或
1时 30 分 , 取出干燥 。
5 2 ,