全 文 ：(C-6), 117.72(C-5), 117.38(C-7), 115.21(C-8), 67.65(C-
4), 34.54(C-2), 31.17(C-3)。其数据与文献 [ 9]中谱学数据
基本一致 , 故确定为 4, 8-dihydroxy-1-tetralone, 即 regiolon。
化合物Ⅴ(C4H16O4):mp187 ～ 189 ℃,极易溶于水和甲
醇 , 呈酸性 , EI-MS得相对分子质量为 118, 推测分子式为 C4
H16O4 ,结合 1H-NMR(CDCl3):2.6、 11.3, 13C-NMR(CDCl3):
30.0、176.4, 说明应为一具有对称结构的酸 ,且为二元酸 , 与
丁二酸对照 ,混合熔点不下降 ,在 TLC中 Rf值一致 ,得出其
结构应为丁二酸即琥珀酸。
参考文献:
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明党参不同部位珊瑚菜内酯的含量比较研究
段志富 , 陈建伟＊ , 李 祥 , 朱华云 , 沈 立
(南京中医药大学 , 江苏 南京 210046)
收稿日期:2007-12-19
基金项目:江苏省科技厅基础研究计划(BK2003107)。
作者简介:段志富(1981-),男 ,研究生 ,助教 ,研究方向:中药材活性成分分离 ,电话:025-85811153, E-mail:duanzhifu1981@163.com。
＊通讯作者:陈建伟(1955-),男 ,医学博士 ,教授,研究方向:中药品质评价与中药生物技术 ,电话:025-85811695, E-mail:chenjw695@126.
com。
关键词:明党参;珊瑚菜内酯;积累规律;HPLC
中图分类号:R284.1 文献标识码:B 文章编号:1001-1528(2008)12-1851-03
明党参 ChangiumsmyrnioidesWolf为伞形科(Umbelif-
arae)多年生草本植物 , 去皮的根供药用。 始载于明 、清时
期 , 为现版《中国药典 》的名贵中药。分布于江苏 、安徽 、浙
江 、江西 、湖北等省 , 江苏为地道药材产区。外形和疗效似人
参 , 具润肺化痰 、养阴和胃 、平肝解毒之功效 , 是《中国药典 》
常用中药之一 , 为我国重点保护的珍稀濒危植物 [ 1] 。珊瑚菜
内酯(phellopterin)是明党参根中新发现的有效成分之一 , 具
有很强的药理活性 , 本课题组最新研究表明 , 珊瑚菜内酯不
仅抑制 Ca2+内流从而刺激门控电压和受体依赖的钙通道 ,
而且抑制内钙释放 , 是一种有开发前途的钙拮抗剂 [ 2] 。但有
关它在明党参中的积累情况尚未见报道。本试验考察了其
在叶和根不同部位中的含量 ,以期揭示其积累规律 , 为其资
源的合理开发与利用提供科学依据。
1 仪器与试药
1.1 仪器 LC-10AD高效液相色谱仪 , SPD-10A(SHIMAD-
ZU)紫外可见分光检测器 , LC-10AD(SHIMADZU)LIOUID
CHROMATOGRAPH, HW-2000 色谱工作站 (SHIMADZU);
HT-230A柱温箱(COLUMNHEATER);C-21色谱数据采集
单位;岛津 UV-2401紫外扫描仪;LIBRORAEL-40SM电子分
析天平 (SHIMADZU);ELECTRONICBABANCE(AY220,
SHIMADZUCORPORATION);台式离心机(TGL-16B, 上海安
亭科学仪器厂制造)。
1.2 药材 实验使用的明党参采自于江苏句容 , 经本校中
药鉴定学教研室陈建伟教授鉴定为伞形科植物明党参
ChangiumsmyrnioidesWolf。按部位不同将其分别分为叶 、
根头部 、根中部 、根尾部 、去根皮后根部和根皮六个部分 , 见
表 1。
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第 30卷 第 12期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
December2008
Vol.30 No.12
表 1 明党参样品制备
序号
No. 样品名 生长年限 (t/a)采集时间 采集地点 干燥
1
明党参叶
LeafofChangiumsmyrnioides 栽培 3年 2007-05 江苏句容 55℃低温 ,粉碎过 80目筛
2
明党参根头部
RootofChangiumsmyrnioides 栽培 3年 2007-05 江苏句容 55℃低温 ,粉碎过 80目筛
3
明党参根中部
RootmiddleofChangiumsmyrnioides 栽培 3年 2007-05 江苏句容 55℃低温 ,粉碎过 80目筛
4
明党参根尾部
RoottailofChangiumsmyrnioides 栽培 3年 2007-05 江苏句容 55℃低温 ,粉碎过 80目筛
5
明党参去栓皮根
RooteliminatedcorkofChangiumsmyrnioides 栽培 3年 2007-05 江苏句容 55℃低温 ,粉碎过 80目筛
6
明党参根皮 ＊
RootbarkfromChangiumsmyrnioides 栽培 3年 2007-05 江苏句容 55℃低温 ,粉碎过 80目筛
7
明党参全根
RootofChangiumsmyrnioides 栽培 3年 2007-05 江苏句容 55℃低温 ,粉碎过 80目筛
＊加工刮下的栓皮部
表 2 加样回收率试验结果
样品 样品中含量/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均值
/% 方差
标准方差
/%
1 0.092 3 0.081 9 0.173 8 99.487 5
2 0.091 1 0.081 9 0.173 3 100.307 7
3 0.091 3 0.081 9 0.173 1 99.930 1 99.96 0.82 0.82
4 0.089 9 0.081 9 0.172 7 101.117 0
5 0.091 7 0.081 9 0.172 8 98.963 3
1.3 试药 珊瑚菜内酯对照品(本实验室自制 ,块状结晶 ,
mp.98 ～ 99 ℃, UVETOHmax λ 220.5, 241.0, 248.5, 269.0,
313.0nm;EI-MSm/z:300 [ M] +(C17 H16 O5), 归一化纯度
99.7%);1 H-NMR(300 MHz, CDCl3)δ:1.69[ 6H, s, =C
(CH3)2] , 4.17 (3H, s, = C5-OCH3), 4.84(2H, d, J=
7.2Hz, O-CH2-C=), 5.60(1H, t, J=7.2Hz, O-C-CH=), 6.26
(1H, d, J=10Hz, C3-H), 6.98(1H, d, J=2.4Hz, C′2-H),
7.61 (1H, d, J=2.4Hz, C′3-H), 8.10(1H, d, J=10Hz, C4-
H)。综上分析并与文献 [ 3]对照 , 确定为珊瑚菜内酯(phel-
lopterin)。
甲醇 (色 谱 级 , 江 苏 汉邦 科 技有 限 公司 , 批 号
2005051802);水为双蒸水。
2 实验与结果
2.1 色谱条件 Lichrospher5-C18(250 mm×4.6 mm)色谱
柱(江苏汉邦科技有限公司), 柱温 30 ℃;以甲醇-水(66:
34)为流动相;检测波长为 268nm;流速为 1.0mL/min, 进样
体积 10μL。在上述条件下 , 珊瑚菜内酯峰与其它峰呈良好
分离。
2.2 对照品及供试品溶液的制备
2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取对照品珊瑚菜内酯
4.61 mg, 置于 50 mL量瓶中 , 用甲醇溶解并稀释至刻度摇匀
即得。
2.2.2 供试品溶液的制备 取上述样品 , 精密称定 , 加甲醇
50 mL于圆底烧瓶中 , 回流提取 60 min, 冷却 , 过滤 , 分次洗
涤容器 ,合并滤液 , 水浴蒸干 ,残渣加甲醇溶解 , 并定容至 25
mL, 摇匀 ,离心(16 000r/min)20 min, 取上清液 ,即得供试品
溶液 ,备用。
2.3 线性关系考察 分别精密吸取上述对照品溶液 1, 3,
3, 3, 6, 12 mL, 加甲醇分别定容至 100, 100, 50, 25, 25, 25 mL,
摇匀 ,分别取上述各浓度对照品溶液 10 μL进样各 2次 , 测
定 ,记录峰面积 , 以峰面积为纵坐标 , 珊瑚菜内酯的浓度为横
坐标绘制标准曲线 ,得回归方程为:Y=18 549X+3 733,相
关系数 R2 =0.999 8。结果表明 , 对照品在 0.922 ～ 44.256
μg/mL浓度范围内线性关系良好。
2.4 精密度实验 取同一对照品溶液连续进样 5次 , 记录
峰面积 ,结果 RSD为 0.94%, 表明本法精密度良好。
2.5 稳定性实验 取同一供试品溶液于 0、1、2、4、8、12 h测
定 ,记录峰面积 , 结果 RSD为 0.96%, 表明该样品溶在 12 h
内稳定。
2.6 重复性试验 精密称取明党参去栓皮根部位(过 80目
筛)3 g,共 5份 , 按 “供试样品溶液的制备”项下的方法进行
样品处理并测定 ,计算药材中珊瑚菜内酯的含量。结果药材
中珊瑚菜内酯的平均含量为 60.712 7 μg/g, RSD为 0.99%,
表明该方法重复性良好。
2.7 加样回收率试验 精密称取已知含量的明党参去栓皮
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根部位约 1.5 g,共 5份 , 每份加入适量的对照品 , 精密称定。
按 “供试样品溶液的制备”项下的方法进行样品处理并测
定 , 计算回收率。结果珊瑚菜内酯的平均回收率为 99.96%,
RSD为 0.82%, 表明本法加样回收率精密度良好。见表 2。
2.8 样品含量测定 照高效液相色谱法(《中华人民共和
国药典》 2005年版附录Ⅵ D)外标法测定 。
分别取供试品溶液 ,按上述色谱条件分别进样 10 μL各
2次 , 记录峰面积 ,计算含量 ,结果见表 3。
表 3 明党参叶和根不同部位含量测定结果(n=2)
编号 样品名称 样品重 /g 含量 /(μg/g)
1 2 平均值
1
明党参叶
LeafofChangiumsmyrnioides 3.0 127.7 129.34 128.52
2
明党参根头部
RootofChangiumsmyrnioides 0.6 509.7 555.33 532.52
3
明党参根中部
RootmiddleofChangiumsmyrnioides 1.5 146.46 147.19 146.82
4
明党参根尾部
RoottailofChangiumsmyrnioides 1.5 310.96 310.35 310.66
5
明党参去栓皮根
RooteliminatedcorkofChangiumsmyrnioides 3.0 60.77 60.94 60.85
6
明党参根皮＊
RootbarkfromChangiumsmyrnioides 0.2 1 352.43 1 355.39 1 353.91
7
明党参全根
RootofChangiumsmyrnioides 1.5 289.13 283.37 286.25
3 讨论
3.1 色谱条件的选择 取对照品及供试品溶液 , 分别进行
200 ～ 800nm的紫外扫描 , 进行分析比较确定 268 nm为检测
波长。经实验比较 , 确定甲醇-水(66:34)为流动相进行洗脱
分离效果较好 , 且对照品色谱峰保留时间适宜。
3.2 提取条件的选择 称取等量的同一批药材 , 分别采用
甲醇回流提取 1 h和超声 1 h(50 Hz)的方法制备样品液 , 含
量测定结果表明超声的方法(11.841 0 μg/g)比甲醇回流提
取方法(19.834 5 μg/g)提取效果差 , 因此实际操作时我们
选用甲醇回流提取方法。另外 , 本实验对不同的提取溶剂
(70%乙醇 、甲醇)和提取时间进行了考察 , 确定了以上的样
品液制备方法。
3.3 由表 3可见 , 珊瑚菜内酯在根和叶中均有累积 ,根部的
含量高低依次为根头部 、根尾部和根中部;根皮部与去栓皮
根部相差悬殊 ,达到 22.25倍。表明珊瑚菜内酯成分在根中
的积累主要在根皮部 , 传统明党参加工制成品中含量甚微 ,
提示明党参叶和加工弃去的明党参根皮具有再利用价值。
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红蓼不同提取部位花旗松素和总黄酮含量的测定
魏 艳 , 陈晓青＊ , 马志祥 , 蒋新宇
(中南大学化学化工学院 ,湖南 长沙 410083)
收稿日期:2007-10-15
作者简介:魏 艳(1981-),女 ,硕士。
＊通讯作者:陈晓青(1965-),女 ,博士 ,教授 ,从事天然产物分析研究 ,电话:0731-8830833, E-mail:xqchen@mail.csu.edu.cn。
关键词:红蓼;花旗松素;总黄酮;高效液相色谱
中图分类号:R284.1 文献标识码:B 文章编号:1001-1528(2008)12-1853-02
1853
2008年 12月
第 30卷 第 12期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
December2008
Vol.30 No.12