全 文 ：书2013 年
第 33 卷
5 月
第 5 期
河 南 中 医
HENAN TＲADITIONAL CHINESE MEDICINE
May 2013
Vol． 33 No． 5
收稿日期:2012 － 11 － 21
作者简介:徐霞( 1963 － ) ，女，山东临朐人，副主任药师。
白花丹参水提物对缺血再灌注损伤大鼠脑组织中
GSH、CAT和 SOD、MDA的影响
徐霞1，杨清2，隋在云2，张新站3
(1．山东省胸科医院，山东 济南 250013;2．山东省中医药研究院，山东 济南 250014;
3．新汶矿业集团莱芜中心医院，山东 莱芜 271103)
摘要:目的: 观察白花丹参水提物对缺血再灌注损伤大鼠脑组织中 SOD、GSH、CAT、MDA 水平的影响，探讨其对脑组织氧化损伤的作用机制。
方法: 采用线栓缺血再灌注损伤大鼠模型，观察白花丹参水提物对大鼠脑组织中 SOD、CAT 的活性和 GSH、MDA 的含量进行测定。结果: 与手
术对照组比较，白花丹参水提物高剂量组大鼠脑组织中 SOD( P ＜ 0． 001) 、CAT( P ＜ 0． 01) 活力、GSH( P ＜ 0． 01) 水平明显增加，MDA 含量明显
降低( P ＜ 0． 001) 。白花丹参水提物中剂量组大鼠脑组织中 SOD( P ＜ 0． 001) 、CAT( P ＜ 0． 001) 活力明显增加，MDA含量明显降低( P ＜ 0． 05) 。
白花丹参水提物低剂量组大鼠脑组织中 SOD( P ＜ 0． 01) 、CAT( P ＜ 0． 001) 活力明显增加。结论: 白花丹参水提物能抑制脂质过氧化，增强脑组
织的抗氧化能力，从而对缺血再灌注大鼠脑组织起到保护作用。
关键词:白花丹参; 超氧化物歧化酶; 还原型谷胱甘肽; 过氧化氢酶; 脂质过氧化物;大鼠
本文引用:徐霞，杨清，隋在云，等．白花丹参水提物对缺血再灌注损伤大鼠脑组织中 GSH、CAT 和 SOD、MDA 的影响［J］． 河南中医，2013，33
( 5) : 684 － 685．
中图分类号:Ｒ285． 5 文献标志码:A 文章编号:1003 － 5028(2013)05 － 0684 － 02
唇形科植物丹参(Salvia miltiorrhiza Bge)是临床上治疗
缺血性脑血管病的常用中药。白花丹参(salvia miltiorrhiza
bge． F． alba．)是丹参的变种，主要分布于泰山山脉及其周边
地区，为山东特有珍稀濒危药用植物。其味苦，微寒，归心、
肝经，有祛瘀止痛，活血通经，清心除烦的功能［1］。药典收载
的丹参为紫花丹参，多年来，人们将白花丹参雷同丹参使用，
广泛用于防治心脑血管病，但对白花丹参的基础研究较少，
本研究采用线栓法大鼠脑缺血再灌注损伤模型，观察白花丹
参水提物对大鼠脑组织中超氧化物歧化酶(superoxide dis-
mutase，SOD)、还原型谷胱甘肽(glutathione，GSH)、过氧化氢
酶(catalase，CAT)和脂质过氧化物(malondialdehyde，MDA)
水平的影响，为山东白花丹参防治心脑血管病的开发利用提
供理论依据。
1 材料
1． 1 实验动物 SPF 级 wistar 大鼠，雄性，体质量 250 g 左
右，由山东大学实验动物中心提供。合格证号:SCXK(鲁)
20090001。
1． 2 实验药物制备 白花丹参和紫花丹参均采集于山东莱
芜苗山白花丹参种植基地，将药材洗净晾干，用 FW － 177 型
中草药粉碎机粉碎，过 80 目筛，取适量粉末置于煎煮容器
内，加入 10 倍药材量的水，浸泡 24 h，武火煮沸，再以文火煎
煮 30 min，过滤;滤渣加 5 倍量纯化水继续煎煮，强火煮沸后
改文火再煎煮 20 min，过滤。合并两次滤液，浓缩，4 ℃保存，
用时蒸馏水稀释至所需浓度。
1． 3 试剂与仪器 SOD、MDA、GSH、CAT试剂盒均购自南京
建成生物工程研究所，批号分别为 20100531、20100526、
20100524、20100601;WFJ2100 型紫外可见光分光光度计，上
海合利仪器有限公司;GB303 型电子天平，梅特勒托利多仪
器(上海)有限公司;DDL － 5 型冷冻离心机，上海安亭科学
仪器设备厂;S658 型号电热恒温水温箱，温州永强医疗器械
厂;FW －177 型中草药粉碎机，天津市泰斯特仪器有限公司;
移液器;显微手术器械;Gangrou渔线，韧度适中;自制大鼠固
定板。
2 方法
2． 1 动物分组及给药 按照随机的原则，将实验动物分为
假手术组、手术造模组、紫花丹参组、白花丹参高、中、低剂量
组 6 组，每组 10 只。紫花丹参组给予生药量 10． 8 g·kg －1的
紫花丹参水提液，白花丹参高、中、低剂量组分别灌胃给予生
药量 10． 8 g·kg －1、5． 4 g·kg －1、2． 7 g·kg －1白花丹参水提
液，假手术组、手术造模组每天给予等容量的生理盐水。连
续灌胃10 d，末次灌胃后 1 h 制作脑缺血再灌注损伤模型。
脑缺血2 h拔栓线再灌注，手术造模 12 h后再给药 1 次。
2． 2 动物模型的制备［2］ 用 10%水合氯醛 3 mL·kg －1腹
腔给药麻醉大鼠，仰卧位将大鼠固定，颈部去毛备皮消毒。
切开皮肤，钝性分离颈总动脉，6 － 0 丝线结扎颈总动脉(假
手术组不结扎) ，继续向上方分离，找到颈总动脉分叉，在颈
外动脉和枕动脉下方穿线同时结扎这两根血管。并在颈内
动脉上套上一段 6 － 0 丝线，用血管钳提起，牵拉压闭颈内动
脉，以控制剪开动脉时的血液反流［1］。在离颈总动脉分叉约
·486·
DOI:10.16367/j.issn.1003-5028.2013.05.090
书第 33 卷 第 5 期 徐霞，等:白花丹参水提物对缺血再灌注损伤大鼠脑组织中 GSH、CAT和 SOD、MDA的影响 Vol． 33 No． 5
5 mm处的近心端剪一小口，用镊子夹取栓线沿切口插入约
23 ～ 25 mm，结扎预先套在颈内动脉上的丝线，消毒后缝合。
缺血 2 h后，拔栓线，再灌注 22 h。
2． 3 脑组织蛋白的提取［3］ 术后 24 h末次给药后 12 h，处
死动物，迅速取出脑组织称质量。加入预冷的 pH 7． 4 的
HEPES缓冲液(10 mmol·L －1 HEPES、137 mmol·L －1 NaCl、
4． 6 mmol·L －1 KCl、1． 1 mmol·L －1 KH2PO4、0． 6 mmol·L
－1
MgSO4、1． 1 mmol·L
－1 EDTA)中，体积是脑组织块的 9 倍，
在 0 ～ 4 ℃下制成脑组织匀浆，3 000 r·min －1，15 min，离心
取上清。加0． 1 g·mL －1溶液(0． 1 mg·L －1硫酸链霉素和
50 mmol·L －1 HEPES 缓冲液)于上清液中，使终浓度为
0． 01 mg·L －1，室温放置 10 min后，11 000 g离心 10 min，取
上清备用。
2． 4 脑组织中 SOD、MDA、GSH、CAT的测定 进行 SOD、
CAT活力及 GSH、MDA含量测定，测定方法详见南京建成生
物工程研究所提供的测定试剂盒说明书。
2． 5 统计学方法 用 SPSS 12． 0 软件，组间比较采用方差分
析，实验数据以(珋x ± s)表示。
3 结果
各组对大鼠脑组织中 SOD、GSH、CAT和 MDA水平的影
响见表 1。表 1 示，与假手术组比较，手术对照组大鼠脑组织
中 SOD、CAT活力、GSH水平明显降低，MDA含量明显增加。
与手术对照组比较白花丹参水提物高剂量组大鼠脑组织中
SOD(P ＜ 0． 001)、CAT(P ＜ 0． 01)活力、GSH(P ＜ 0． 01)水平
明显增加，MDA含量明显降低(P ＜ 0． 001)。白花丹参水提
物中剂量组大鼠脑组织中 SOD(P ＜ 0． 001)、CAT(P ＜
0． 001)活力明显增加，MDA含量明显降低(P ＜ 0． 05)。白花
丹参水提物低剂量组大鼠脑组织中 SOD(P ＜ 0． 01)、CAT
(P ＜ 0． 001)活力明显增加。紫花丹参水提物组大鼠脑组织
中 SOD(P ＜ 0． 001)、CAT(P ＜ 0． 001)活力、GSH(P ＜ 0． 05)
水平明显增加，MDA含量明显降低(P ＜ 0． 05)。
表 1 各组对大鼠脑组织中 SOD、GSH、CAT和MDA水平的影响(珋x ± s)
组别 n 剂量(生药 g·kg －1) SOD(U /mg prot)MDA(nmol /mg prot)GSH(μg /mg prot) CAT(U /mg prot)
假手术组 10 － 423． 60 ± 17． 36＊＊＊ 11． 73 ± 4． 20＊＊＊ 76． 02 ± 14． 81＊＊＊ 12． 18 ± 2． 47＊＊＊
手术对照组 10 － 254． 81 ± 16． 63 36． 91 ± 12． 94 49． 17 ± 6． 75 5． 17 ± 1． 04
紫花丹参水提物 10 10． 8 322． 56 ± 19． 65＊＊＊ 24． 85 ± 8． 19* 55． 70 ± 6． 92* 9． 24 ± 1． 01＊＊＊
白花丹参水提物低剂量组 10 2． 7 316． 13 ± 47． 67＊＊ 32． 17 ± 4． 98 51． 31 ± 5． 10 8． 13 ± 2． 14＊＊＊
白花丹参水提物中剂量组 10 5． 4 335． 21 ± 44． 15＊＊＊ 25． 96 ± 6． 32* 56． 55 ± 10． 50 8． 38 ± 1． 83＊＊＊
白花丹参水提物高剂量组 10 10． 8 348． 47 ± 56． 87＊＊＊ 21． 13 ± 7． 52＊＊ 63． 44 ± 13． 06＊＊ 10． 05 ± 2． 82＊＊＊
注:与手术对照组相比，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01，＊＊＊P ＜ 0． 001。
4 讨论
在正常情况下，氧自由基由于机体的代谢损伤而产生并
依生理需要及时消除。脑缺血再灌注损伤是一个复杂的损
伤级联反应。氧自由基损伤细胞膜结构，生成大量脂质过氧
化物，最终产物是丙二醛(MDA) ，MDA的量可以反映机体内
脂质过氧化的程度是缺血再灌注损伤的重要机制之一。为
保护机体免受过氧化损伤，细胞形成一套复杂的抗氧化酶防
御系统，这个系统主要包括 SOD、CAT、GSH 等，其中 SOD 把
超氧阴离子(O2 －)转换为过氧化氢(H2O2) ，CAT 再把 H2O2
转化为水，从而有毒性的 O2 －和 H2O2 均被转化为无害的水
分子;GSH使氧化型物质还原，解除其毒性［4］。研究发现脑
缺血再灌注损伤时，机体内发生着快速的级联损伤反应，其
中，氧自由基的大量产生与脑缺血再灌注损伤机制密切相
关［5］。脑缺血再灌注时缺血区自由基增多，脂质过氧化产物
MDA 生成增多，并且自由基防御系统功能受损，SOD、
GSH － Px等抗氧化酶活性下降［6］，诸多因素一起损伤脑实质
及脑血管内皮损伤，导致血脑屏障通透性增加［7］，这系列级
联反应进一步造成脑缺血再灌注损伤。
本研究发现，白花丹参水提物能显著增加大鼠脑组织中
SOD、CAT活力、GSH水平，明显减少大鼠脑组织中 MDA 含
量。该作用与紫花丹参水提物相似。并且脑组织中 MDA的
含量随白花丹参水提物剂量增加而减少，GSH含量却表现为
随剂量增加而增加。表明白花丹参水提物可能是因为增加
了脑组织的抗氧化能力，使 GSH 含量增加，而及时清除体内
自由基，减少脂质过氧化作用，从而对缺血再灌注脑组织起
到保护的作用。
参考文献:
［1］ 曹春泉，孙隆儒，娄红祥，等．白花丹参化学成分与药理作用研
究进展［J］．中药材，2006，29(6) :938 － 939．
［2］ 李克明，武继彪，隋在云，等．线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞
模型手术操作探讨［J］．河南中医学院学报，2007，22(3) :23 －
24．
［3］ 刁汇玲，高金祥，蒋淑君，等． 甲醛吸入对大鼠肾组织中 SOD、
GSCAT和 MDA 水平的影响［J］． 滨州医学院学报，2008，31
(6) :409 － 414．
［4］ Pellegrini G，Dellambra E，Golisano O，et al． p63 identifies kerati-
nocytestem cells［J］． Proc Natl Acad Sci U S A，2001，98(6) :3156
－ 3161．
［5］ Babuccu O，Peksoy I，Hosnuter M，et al． Evaluation by scintigra-
phy of hindlimb ischemia in a rat model［J］． J Ｒe － constr Micro-
surg，2004，20(5) :405 － 410．
［6］ Hallenbeck JM，Dutka AJ． Background reviewand currentconcepts
of reperfusion injury ［J］． Arch Neurol，1990，47(11) :1245 －
1254．
［7］ 吴岚，刘开祥，俸军林，等．原花青素对脑缺血再灌注损伤大鼠
血脑屏障通透性和自由基含量的影响［J］．中西医结合心脑血
管病杂志，2009，7(7) :801 － 803．
(编辑:魏群)
·586·