全 文 ：蓬子菜中香叶木苷对急性血瘀及血管内皮
功能影响的实验研究
董坤，寇韩旭，宁馨，孙超，马英丽*
(黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040)
摘 要:目的:研究蓬子菜活性成分香叶木苷对急性血瘀模型大鼠凝血功能及血管内皮功能的作用。方
法:采用皮下注射盐酸肾上腺素复合冰水浴制备大鼠急性血瘀模型，通过测定凝血四项研究香叶木苷对
血瘀大鼠凝血功能的影响，并通过测定血液中可溶性细胞间黏附因子 － 1(sICAM －1)、可溶性血管细胞
黏附因子 － 1(sVCAM －1)的含量，研究香叶木苷对血管内皮功能的影响。结果:与模型组比较，香叶木
苷能明显改善血瘀大鼠凝血功能，延长凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时
间(TT)，降低纤维蛋白原(FIB)及细胞黏附因子 sICAM －1、sVCAM － 1 的含量。结论:香叶木苷可改善
急性血瘀大鼠凝血功能，有效减少细胞黏附因子的释放，具有抗凝血功能，并能改善血管内皮功能。
关键词:蓬子菜;香叶木苷;急性血瘀;凝血功能;细胞黏附因子
中图分类号:Ｒ285． 5 文献标识码:A 文章编号:1002 － 2406(2015)06 － 0020 － 03
Experimental Ｒesearch on the Effect of Diosmin from Galium verum
L． on Function of Acute Blood Clotting and Vascular Endothelium
DONG Kun，KOU Han － xu，NING Xin，SUN Chao，MA Ying － li*
(Heilongjiang University of Chinese Medicine，Harbin 150040，China)
Abstract:Objective:To study the effect of diosmin which is an active component abstracted from Galium verum
L． on the function of blood clotting and vascular endothelium of rats’acute blood stasis models． Methods:Use
Eepinephrin injected subcutaeously and icewater bath to make rats’models of acute blood stasis syndrome．
Then make a study on how diosmin ameliorated the blood clotting function of rats’models by assaying the in-
dexes of blood clotting tetrachoric． In the meantime，we made an approach to the subject on how diosmin im-
proved the function of vascular endothelium by assaying sICAM －1 and sVCAM －1 in the blood． Ｒesults:Com-
pared with models，diosmin could improve the function of blood clotting obviously． It could extend prothrombin
time，activate partial thromboplastin time，thrombin time． Moreover，it could reduce the content of fibrinogen
and two kinds of cellular adhesion molecule． Concluson:Diosmin can improve the funtion of anticoagulation．
Diosmin can also improve the function of vascular endothelium．
Key words:Galium verum L;Diosmin;Acute blood clotting;Function of blood coagulation;Cellular adhesion
molecule
基金项目:国家自然科学基金项目(No． 201281274034);教育部博士点
博导类基金资助项目(No． 20112327110006)
作者简介:董坤(1987 －)，女，博士，主要研究方向:中药活性成分的机
理研究。
通讯作者:马英丽* (1954 －)，女，教授，博士研究生导师，主要研究方
向:中药活性成分的机理研究。
收稿日期:2015 － 04 － 21
修回日期:2015 － 05 － 10
蓬子菜(Galium verum L．)为茜草科(Ｒubiaceae)
拉拉藤属(Galium)药用植物。实验证明，蓬子菜中化
学成分主要为黄酮、蒽醌及环烯醚萜类，其中黄酮类成
分是其治疗周围血管病(静脉、动脉及淋巴系统疾病)
的有效部位，主要包括香叶木苷(Diosmin)、木犀草苷
(Luteoloside)、芸香苷(Ｒutin)等。据研究表明，蓬子菜
治疗静脉系统疾病的活性成分主要为香叶木苷(Dios-
min，3，5，7 －三羟基 4 －甲氧基黄酮 － 7 －芸香苷)，
具有改善微循环和抗炎的作用［1］。本实验以香叶木
苷药理作用和急性血瘀模型大鼠的病理表现为基础，
通过测定凝血四项指标，证明香叶木苷具有抗凝血和
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2015 年 11 月第 32 卷第 6 期
Vol. 32，No. 6，Nov． 2015
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改善纤溶系统功能的作用;同时，通过测定血液中相关
细胞黏附因子的含量，证明香叶木苷具有改善血管内
皮功能的作用，为蓬子菜治疗血瘀证的临床使用提供
药效学依据。
1 材料
1． 1 实验动物
Wistar雄性大鼠，体质量 200 ～ 300g，购于黑龙江
中医药大学实验动物中心(合格证号:SCXK2009 －
0002)。
1． 2 药品与试剂
香叶木苷(C28H32O15)，质量分数≥90%(HPLC);
阿司匹林泡腾片(阿斯利康制药有限公司，批号
H32026199);盐酸肾上腺素注射液(天津金耀氨基酸
有限公司，批号 H12020526);水合氯醛(天津市科密
欧化学试剂有限公司，批号 20130325);大鼠 sICAM －
1 ELISA试剂盒(上海森雄科技实业有限公司，批号
1406053);大鼠 sVCAM － 1 ELISA 试剂盒(上海森雄
科技实业有限公司，批号 1406091);凝血酶原时间测
定试剂盒(Siemens Lot545570);活化部分凝血活酶时
间测定试剂盒(Siemens Lot538084);凝血酶时间测定
试剂盒(Siemens Lot504472);纤维蛋白原测定试剂盒
(Siemens Lot546743)。
1． 3 仪器
全自动血液凝固仪(CA － 7000，SYSMEX);离心
机(KDC －160HＲ，安徽中科中佳科学仪器有限公司);
连续光谱扫描式酶标仪(SpectraMax Plus384，Molecular
Devices)。
2 方法
2． 1 分组与给药
Wistar大鼠，雄性，平均体质量 250g。随机分成 6
组，每组 10 只。大鼠给药剂量参考陈奇主编《药理试
验方法学》，按人的临床给药剂量进行换算。实验分
组如下:空白组与模型组:均灌胃与给药组等体积生理
盐水;香叶木苷低剂量组:45mg /(kg·d);香叶木苷中
剂量组:90mg /(kg·d);香叶木苷高剂量组:180mg /
(kg·d);阿司匹林组:25mg /(kg·d)。各组均采用灌
胃给药，按剂量连续给药 14 天。
2． 2 造模方法
各组大鼠连续灌胃 14 天，于第 13 天给药后，除空
白组外，各组大鼠采用皮下注射，每只大鼠每次注射盐
酸肾上腺素 0． 8mg /kg，共 2 次，间隔 4h。于第一次注
射后 2h时，将除空白组外其他组别的大鼠均置于 0 ～
2℃冰水中浸泡 5min，制造大鼠急性血瘀模型。造模
后，禁食不禁水。在禁食第 12h后，于手术前 30min 时
最后一次灌胃给药。
2． 3 取材方法
采用腹腔注射麻醉，麻醉剂为 10%水合氯醛。将
大鼠仰卧位固定，沿腹中线剑突以下切开皮肤 3cm，进
行下腔静脉采血，并于 4h内检测凝血功能指标。并将
部分血液分别取血清、血浆分装，贮存于 － 80℃冰箱，
以用于检测血液中细胞黏附因子的含量。
2． 4 检测方法
2． 4． 1 凝血功能检测
将处理后的样本及各种所需试剂放入血液凝固
仪，检测凝血四项。即 PT(凝血酶原时间)、APTT(活
化部分凝血活酶时间)、TT(凝血酶时间)、FIB(纤维蛋
白原)。
2． 4． 2 细胞黏附因子 sICAM －1、sVCAM －1 检测
采用 ELISA法，检测样本中 sICAM － 1(可溶性细
胞间黏附因子 － 1)、sVCAM － 1(可溶性血管细胞黏附
因子 － 1)含量，所有操作严格按说明书进行。
2． 5 统计学处理
数据均用平均值 ± 标准误(珋x ± s)表示，采用
SPSS19． 0 for Windows统计分析软件分析处理。
3 结果
3． 1 香叶木苷对急性血瘀模型大鼠凝血功能的影响
由表 1 可知，与空白组比较，模型组 PT、APTT、TT
时间缩短，FIB 值升高，具有统计学意义(P ＜ 0． 01)。
表明在造模过程中，血瘀大鼠的凝血功能明显发生异
常。PT:与模型组相比，香叶木苷各剂量组的 PT 时间
均有不同程度延长，其中低剂量组有统计学意义(P ＜
0． 01)，中剂量组也有统计学意义(P ＜ 0． 05)，而高剂
量组则无统计学意义。APTT:与模型组相比，香叶木
苷各剂量组 APTT时间均延长，其中低、高剂量组有统
计学意义(P ＜ 0． 05)，而中剂量组也有统计学意义
(P ＜ 0． 01)。TT:与模型组相比，香叶木苷各剂量组均
能延长 TT时间，其中低、中剂量组有统计学意义(P ＜
0． 01)，高剂量组无统计学意义。FIB:与模型组相比，
香叶木苷各剂量组 FIB 值降低，且均具有统计学意义
(P ＜ 0． 01)。
蓬子菜中香叶木苷对急性血瘀模型大鼠 PT 时间
的延长，表明香叶木苷能抑制外源性凝血途径;对
APTT时间的延长，表明香叶木苷有抑制内源性凝血
途径的作用;对 FIB值的降低，表明香叶木苷能有效降
低血浆纤维蛋白原含量，促进纤溶活性;对 TT 时间的
延长，表明香叶木苷能延长纤维蛋白原转变为纤维蛋
白的时间，减慢纤维蛋白形成速度，抑制血液凝固。
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表 1 香叶木苷对大鼠凝血功能的影响(珋x ± s)
组别 剂量(mg /kg) PT(s) APTT(s) FIB(g /L) TT(s)
空白组 － 10． 82 ± 0． 21＊＊ 23． 82 ± 0． 59＊＊ 2． 96 ± 0． 02＊＊ 46． 66 ± 1． 44＊＊
模型组 － 9． 62 ± 0． 35△△ 17． 34 ± 1． 66△△ 4． 79 ± 0． 07△△ 41． 35 ± 0． 13△△
低剂量组 45 11． 23 ± 0． 71＊＊ 20． 23 ± 0． 33* 3． 78 ± 0． 09＊＊ 45． 40 ± 0． 52＊＊
中剂量组 90 11． 75 ± 1． 35* 22． 45 ± 1． 80＊＊ 3． 84 ± 0． 42＊＊ 47． 50 ± 1． 65＊＊
高剂量组 180 9． 89 ± 0． 27 19． 31 ± 0． 83* 3． 62 ± 0． 22＊＊ 42． 00 ± 1． 55
阿司匹林组 25 12． 18 ± 0． 35＊＊ 19． 26 ± 1． 79 4． 11 ± 0． 16＊＊ 42． 16 ± 1． 25
注:与模型组比较，＊＊P ＜ 0． 01，* P ＜ 0． 05;与空白组比较，△△P ＜ 0． 01，△P ＜ 0． 05。
3． 2 香叶木苷对细胞黏附因子 sICAM －1、sVCAM －1
的影响
由表 2 可知，与空白组相比，模型组所释放的 sI-
CAM － 1 和 sVCAM － 1 含量增多，均具有统计学意义
(P ＜ 0． 05)，表明在急性血瘀造模过程中，血管内皮受
损，血液中黏附因子表达上调，导致内皮细胞黏附白细
胞能力增强，引起炎症发生，促进血液高凝状态，导致
血瘀发生。
sICAM －1:与模型组相比，香叶木苷各剂量组能
明显降低 sICAM － 1 的含量，其低剂量组较之模型组
有统计学意义(P ＜ 0． 05)，中、高剂量组仍有统计学意
义(P ＜ 0． 01)。
sVCAM －1:与模型组相比，香叶木苷各剂量组均
可有效降低 sVCAM －1 的含量，且各组均具有统计学
意义(P ＜ 0． 01)。
蓬子菜中香叶木苷能改善白细胞的流变性，抑制
白细胞与血管内皮黏附，从而抑制炎症的发生，改善血
瘀症状。
表 2 香叶木苷对大鼠 sICAM －1 和 sVCAM －1 的影响(珋x ± s)
组别
剂量
(mg /kg)
sICAM －1
(ng /ml)
sVCAM －1
(ng /ml)
空白组 － 13． 07 ± 3． 60* 49． 00 ± 34． 41*
模型组 － 17． 34 ± 4． 41△ 90． 37 ± 39． 32△
低剂量组 45 10． 23 ± 6． 28* 32． 84 ± 25． 29＊＊
中剂量组 90 9． 39 ± 5． 89＊＊ 35． 72 ± 30． 31＊＊
高剂量组 180 10． 25 ± 5． 24＊＊ 27． 07 ± 11． 48＊＊
阿司匹林组 25 11． 16 ± 6． 84* 26． 14 ± 6． 96＊＊
注:与模型组比较，＊＊P ＜ 0． 01，* P ＜ 0． 05;与空白组比较，△△P ＜
0． 01，△P ＜ 0． 05。
4 讨论
本实验所采用的血瘀造模方法，可导致健康动物
处于急性应激状态，从而造成血管内皮受损，而内皮细
胞的损伤正是血管病变的始因之一。相对的，血管内
皮功能失调可进一步促发血瘀证。
血瘀证可由多种因素引起，并不同程度造成血管
内皮损伤，引发血管内皮功能障碍，导致单核细胞、中性
粒细胞与内皮细胞黏附，继而释放黏附因子 ICAM － 1、
VCAM －1 等，介导血管内皮与白细胞黏附得更加紧密
和稳定，并逐渐改变内皮细胞骨架形态，引发并扩大血
管局部炎症［2］。血管内皮功能异常导致黏附分子
ICAM －1、VCAM － 1 等从内皮表面脱落，以可溶形式
sICAM －1、sVCAM －1 等存在于血液中，可作为血管内
皮损伤的早期标志物。
当血管内皮细胞损伤后，暴露内膜下蛋白基层，激
活血小板，而在活化的血小板膜上则暴露出 FIB 的结
合位点，黏附血浆中游离的纤维蛋白原，以它为连接桥
梁，导致血小板聚集［3］，促进凝血酶生成，加快凝血速
度，并激活内外源凝血系统。
实验结果显示，香叶木苷可改善血管内皮功能。
血管内皮损伤参与了血瘀证的发生与发展过程，是血
瘀证产生的重要基础。内皮细胞受损后，刺激血小板
释放凝血酶，导致大量的 ICAM －1、VCAM －1 释放，促
使内皮细胞黏附白细胞的能力增强，故血液中
sICAM －1 和 sVCAM － 1 的含量与内皮细胞受损程度
呈正相关［4］。香叶木苷能减少急性血瘀大鼠血管内
皮中的 ICAM －1、VCAM － 1 的释放，进而下调血液中
sICAM －1 和 sVCAM －1 的表达。
实验结果表明，香叶木苷能明显改善急性血瘀大
鼠的凝血功能。凝血四项已被广泛用于检查凝血机制
异常。PT反映外源性凝血因子含量，APTT 反映内源
性凝血因子含量，香叶木苷能延长 PT、APTT 时间，通
过抑制外源及内源凝血途径，抑制血瘀发展和血栓形
成。TT反映纤维蛋白原转变为纤维蛋白的时间，香叶
木苷能延长 TT时间，增强纤溶活力，降低凝血因子活
性。FIB即凝血因子 I，是一种主要的凝血蛋白质，香
叶木苷能降低 FIB含量，从而降低血液黏度，抑制血瘀
的进一步发展。
参考文献:
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业大学，2012．
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和血瘀证的关系［J］．首都军医大学学报，2008，29(3):267 － 269．
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