全 文 ：第 n卷 第 1 期 热 带 作 物 学 报
1 9 9 0年 3月 C HIE NSE O U J R NA LO F T RO C IA C O P L R PS
Vo l
.
1 1
Ma r
.
19 9 0
、 `一 - - _ _
畴 中粒种咖啡小抱子染色体加倍方法的研究
余凤英 凌绪柏 刘伟青 区靖祥
(华南热带作物学院 热带作物 系 )
摘 要
本文报道在中粒种咖啡 (C .C ae n p ho ra ) 花粉母细胞减数分裂时期 , 应用骤 变 低 温 和 秋
水仙素直接处理花器官 , 诱导形成二倍性花粉粒的方法 。 研究结果表明 : ( 1 ) 在花粉母细胞减
数分裂时期用骤变低温处理可获得大量二倍性花粉粒。 最佳处 理 时 期 为 终 变 期一一 中 期 I 和
后期 I , 最适处理温度为 8 一 10 O C , 对不同的无性系 , 处理效果有所不同 。 ( 2 ) 应 用 1 % 浓度
的秋水仙素滴液法直接处理花蕾可获得 7 . 23 一 9 . 20 % 二倍性花粉 。
关妞词 . 中粒种咖啡 , 低温处理 , 秋水仙素 , 二倍性花粉粒
月lJ 舀
卜 具有良好抗病虫性的二倍体中粒种咖啡 ( C o f f e a e a n e p h 。 r a , Z n = Z x = 2 2 ) 和具有良好抗寒 、 耐旱性和饮用品质的异源 四 倍 体 小 粒 种 咖 啡 ( C · a r a ib c a , Z n = 4 x = 4 4 ) “
是当前两个主要的咖啡栽培种 。 杂交育种时两者的主要性状优缺点可 以互补 。 因而 , 培育中
小粒种咖啡种间杂种 , 是提高小粒种咖啡抗病虫能力 , 改善中粒种抗寒耐旱性以及饮用品质
的重要途径 〔 1, 2〕 。 然而 , 由于两者之间染色体数量上的差异 ,形成咖啡种间的生育隔离 ,
故难 以获得天然杂交种 ; 而强迫异交则 由于杂交不育而难以成功 。
从本世纪 50 年代开始 , 巴西首次诱导成功中粒种咖啡四倍体 , 并用于与四倍体小粒种咖
啡杂交育种 , 经过与多个高产小粒种回交 , 其后代统称为 cI at u 〔 3 〕 。 而后 , 科特迪 瓦 、 肯
尼亚 、 印度等国都相继开展这方面的研究 〔 4 〕 。 科特迪瓦则育成了具有推广价值的 四 倍体
中小粒杂文种 A r a b u s t a 〔 “ 〕 。 上述研究大都是首先对二倍体中粒种咖啡种子或营养器 官进
行秋水仙素处理 , 使体细胞染色体加倍 , 形成二倍体的同源四倍体植株 , 待其生长发育至开
花 , 产生二倍性花粉后才用于杂交 。 通过营养器官诱导多倍体途径的缺点是往往 形 成 嵌 合
体 , 而且有较长的营养生长期 , 推迟了杂交授粉的时间 。
L a n a u d 〔 6 〕 在研究低温对咖啡减数分裂影 响的机制时 , 发现小泡子倍性 变 异 类 型丰
富 , 由此可发育成大小悬殊的具有生活力的花粉粒 。 这一处理在中小粒种咖啡杂交育种上是
否有应用价值 , L a n a u d并未说明 。
本文是探讨应用骤变低温及秋水仙素直接处理中粒种咖啡花器官 , 以期快速而有效地获
得大量中粒种咖啡二倍性花粉 ( n = Z x = 2 ) 的方法 , 为进行中小粒种咖啡种间杂交 , 在短
本文于 1 9 8 9年一0月 22 日收到 。
4 6热 带
期内获得大量可育的杂种打下基础 。
作 物 学 报 1 1卷
材料与方法 侧
一 、 材料
选用华南热带作物科学研究院兴隆试验站中粒种咖啡无性系兴隆 24、 兴 隆 24一 1 0和 兴
隆 26的 3 龄植株 , 采集花粉母细胞发育完全 , 但减数分裂尚 未 开 始 ( 花 蕾 长 4 一 7 m m ,
绿色 ) 的花枝 , 在室内插入盛有自来水的瓶中 , 注意保持花枝导管水柱的连续 , 以保证处理
后能正常开花 ) 。
二 、 试验方法与设计
采用低温及秋水仙素处理两种方法 。
( 一 ) 低温处理
1
. 探讨同一无性系花粉母细胞不同分裂时期的染色体加倍效果 。 将兴隆 26 的花枝按花
粉母细胞为分裂时期分为 6 组 , 即间期 、 粗线期 、 终变期一中期 I 、 后期 工 、 中期 五一后期
I 和小泡子四分体时期 , 置于 8 一 10 ℃低温下处理 2 天 ( 各分裂时期的花蕾形态标准通过染
色体检查确定 ) 。
2
. 探讨同一无性系试脸材料在同一分裂时期处理的最适宜 低 温 条 件。 将 同 一 无 性
系 ( 兴隆 26 ) 在后期 工分裂期的材料 , 分别置于 7 一 8 ℃ , 8 一 10 ℃和 1 一 12 ℃ 下 处 理 2
天 。
3
. 比饺不同无性系试验材料在同一分裂 时期和低温条件下的处理效果 。 将同一分裂 时
期 ( 终变期一中期 工 ) 的三个无性系材料置于 8 一 10 ℃ 条件下处理 2 天 。
以上每种方法处理 30 个小花束 ( 每个花束 8 一 10 朵小花 ) , 2 次重复 。
( 二 ) 秋水仙素处理
采用三种处理方法 。
1
. 秋水仙素一一滴液法 用脱脂棉花包扎花蕾 , 然后 滴加秋水仙素溶液并 保 持 湿 润
( 图 l 一 1 ) 。
2
. 秋水仙素一一节上插毛细管法 将盛有秋水仙素溶液的毛细管 ( 加热玻管拉制 ) 插
在节上通向花器的输导组织处 ( 图 l 一 2 ) 。
3
. 秋水仙素一花束柄上插毛细管法 方法同上 , 只是将毛细管插在 花 束 柄 上 ( 图 l
一 3 ) 。
以上处理共需 3 一 4 天 , 处理完毕后 , 将药液和棉花除去并用清水冲洗 .
试验采用正交设计 , 上述方法为三个因子 , 秋水仙素浓 度 为 0 . 0% ( 对 照 ) , 0 . 5% ,
0
.
7 5%和 1 . 0%四个水平 。 材料为兴隆 24 一 10 和兴隆 26 两个无性 系 , 共 24 个 组合 处 理 , 每
一组合处理数为 30 个花束 ( 每束留 5 朵小花 ) 。
各种方法处理完毕后 , 于小泡子四分体 、 小抱子第一次有丝分裂时期和花粉粒成熟时采
样观察 . 每个花束取 2 朵小花 , 每个花药测量 2 0 个花粉粒的直径 。 以 直径为 3 7 . 5一 50 。的
花粉粒 ( 即二倍性花粉粒 ) 数与观察总数的比例来衡量处理效果 。 将试验数据经反正弦代换
本
*
l 期 余凤英等 : 中粒种咖啡小抱子染色体加倍方法的研究
采用方差分析和 Q测验处理 , 分析比较 各处
理组合的差异显著性。
结果与分析
= I X
圈 1 狄水他斑处理方法
短夏蓦获益菇藕晶, 一企赢杯漏三薇 ,落, ` 法 ” 节上 , 毛 ” 管法 3 ’ “ ” , 上 , 毛细普鳌贺馨分需雪嚣霜黑鬃纂或 , , 。 , 、 图 2一 7 , , 不 , , 、 , , ,
杂交上无利用价值 。 此外 , 还有少数小于正常花粉粒的一般是败育的花粉 ( 不被醋酸洋红染
色 、 也不发芽 ) 。 因此 , 本试验是以鉴定小抱子第一次有丝 分裂时染色体倍性与其直径大小
相关性研究为基础 , 确定以二倍性花粉粒 ( 直径为 37
来衡量处理效果的 。
二 、 低温处理的效果
咬 ( 一 ) 花粉母细胞不同减数分裂时期的处理效果
.
5一 50 卜 ) 占花粉粒观察总数 的 比 例
4 8热 带 作 物 4一比 1 1卷
,
图 2 花粉拉大小和染色体倍性
l 期 余凤英等 : 中粒种咖啡小抱子染色体加涪方法的研究
衰 1不同染色体倍性小艳子的大小比较
小抱子 (第一次有丝 分裂时 )大小材 料 借 性 观察数 平均直径 (卜 )相对值 ( % )
兴隆24 嵌合 多借体
(人工诱导 )
n =X = 1 1
n =ZX 二 22
50
48
: 5. 。
{
, 。。 . 。
衰 2 不同倍性花粉较大小比较
观察 数 花 粉 粒 大 小
材 料 花 粉粒倍性
(粒 ) 平 均值 (闰
3 1 。 0
3 0
。
7
4 0
。
7
相对值 (% ) 介 值 (林 )
兴 隆 24 二倍休
兴隆24 嵌合 多倩体
(人工诱导 )
自然多倍 体 1
( 纯型 )
自然多佬 体 I
(纯型 )
兴隆 26 二倍 体
n = X = 1 1
n = X = 1 1
n = Z X = 2 2
10 0
9 9 一 0
1 3 1一 3
2 6 。 2 e 3 4
。
8
2 5
.
0一 3 3 。 4
38
。 5一 48 。 6
n 二 Z X = 22 1 3 0。 6 3 7。 5一 4 7。 3
n = Z X = 2 2 1 3 2
.
3 3 8 。 2一 50 。
八UnUtI、 JnUùO几1ùnn“, l曰1.1工1
n = X = 1 1 2 5
。
8 e 3 4
。
0
衰 8 粘连的不同倍性花粉拉大小比较
粘冰 举纽 { 0 0 } 。自 { 只。
花粉粒 类型 } O } 0 { n 1 0 } O
观 察 教 ! 2 0 { 1 0 } 1 0 】 2 0 { 10
倍 性 I n = Z x = 2 2 1 。 = x = 1 1 ( 公 = 3x 二 3 3 } n 二 x = 1 1 } 。 二 Z x 二 2 2
大 小 ( x , 卜 ) } 3 9 . 2 1 3 2一 } 6 3 一 6 { 2 8 一 7 { 4 0 . 8
介 值 ( u ) } ” 7 · 5一 5 0 · 0 ! 2 5 · 0一 3 5 · o } “ 2 , 5一 7 5 · o } “ 5 · 0一 35 · 0 1 3 7 · 5一 5 0 · 0
对不同减数分裂时期的花粉母细胞低温处理结果见表 4 。 统计分析结果表明 , 8一 10 ℃
低温对同一无性系兴隆 26 花粉母细胞不同减数分裂时期的处理效果差异 显 著。 终 变 期一中
期 工和后期 工的处理效果 , 显著优于中期 亚一后期 亚的处理效果 , 但与粗线期的处理效果差
异不显著 。 粗线期与中期 亚一后期 亚的处理效果差异也不显著 。 此外 , 在小抱子母细胞间期
和四分体形成后进行低温处理基本无效。
花粉母细胞不同减数分裂时期低温处理效果存在显著差异 , 与低温作用的时机有密切关
系 . 在间期进行处理 , 低温仅阻碍减数分裂的启动 ( 处理 2 天后仍处于间期 ) , 解除低温抑
制后减数分裂又正常进行 , 致使处理无效 。 四分体时期处理 , 因减数分裂已结束而小抱子有
丝分裂尚未开始 ,故亦无效果 。中期 l 一后期 五进行低温处理 , 因材料温度从室温 (2 5一 30 ℃ )
下降至处理温度 ( 8 一 10 ℃ ) 有一个过程 , 在这一降温过程中 , 有一些母细胞已完成减数分
裂而形成四分体 ( 该分裂过程时间很短 , 约为20 分钟 ) , 故处理效果较差 。 粗线期 , 终变期
一 中期 工 、 后期 工的材料 ,多数细胞正处于对低温敏感的减数分裂相 ,处理时低温抑制 了中期
I 或中期 1 纺锤丝形成 , 使染色体不能正常分离趋向两极 , 致使胞质分裂异常 , 形成较多的
均等的小抱子二分体和三分体 , 进而发育成为二倍性花粉粒 。 这是粗线期 、 终变期一中期 I
和后期 工的材料处理效果较好的原因 。
和 热 带 作 物 学 报 n 卷
. , . . . . . 口 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
衰 4 一 1 低沮 ( 8 一 1 OO C ) 处理兴班 25号减教分裂不同时期的效果
减 效 t 花粉粒 不 同 倍 性 的 花 粉 粒 数 多倍性花 二倍性花
分 裂 汪 观 察 粉牧数占 粉枚数占时 期 总 数 单倍性 二倍性 多 倍 性 观察总数 观察 总数
(皿 二 x 二 1 1 ) ( n 畏 Zx 二 2 2 ) ( 。 。 s x , 4 x 二 3 3 , 4 4 ) (% ) ( % )
粗 I 5 4 2 8 4 0 2 0 1 16 4 2 4 4 4 。 5 0 2友。 4 4
线 I 6 43 0 49 6 0 1 19 0 2 80 4 。 35 18 。 5 1
期 平 均 5仑2 9 4 4 9 0 1 1 7 7 2 6 2 4 。 4 3 1匀。 9 8
自臼 j 从月相
_ I 5台5 2 4 2 42 1 5 9 6 1 4 0 。 2 4 2 7 。 2 7
I 5分6 8 4 7 3 4 1 1 2 2 12 0 。 2 0 ! 9 。 1 2
, ` 曰夕 . 声, 刁 平均 5 8 6 0 4 4 8 8 1 3 5 9 1 3 0 。 2 2 2 3 一 2 0
中 I 12 12
1 2 3 5
后 I 6 3 6 4 5 14 1 1 2 2 4 1 1 0 。 1 7 10 。 0 4
期 I 5 4 0 0 4 1 5 8 7 0 。 ! 3 2 2 。 8 7
I 平均 5 8 8 2 4 6 5 0 0 0 。 1 5 2 0 。 9 8
中 1一 I 6 8 8丈 吕4 0 7 4 5 0 2 4 0 。 4 1 7 一 6 5
后 1 I 5 3 8 0 4 8 00 5 00 8 0 1 一 4 9 口。 2日
平均 B6 3 1 5 10 1 4 75 5 2 0 。仑5 8 。 4 7
月
注 : “ 花粉位总数 ” 不包 括砍育花粉粒数 。 下同。
衰 4 一 2
变异 来浑
减数分裂时期
方 差 分 析
一兰兰里)一 _ !一兰
一一立
裹
自由度 F 值 F o 。 0 5 F o 。 0 1
1 7 1 。 2 2
抖2 3 . 5 1
1 9 4
。
7 3
5 7
。
0 7 9 7 1
*
6
。
5 9 1 6
。
6 9
奋
5
。
8 8知7复差异
变
误总重
裹 4 一 8 同
“ 期
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终变期一中 I } 28 . 71后 期 1
{
2 7
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2 2
罄I竺后 f … :;:;:
时 期 的 均 教 比 较寸…二一…共生 -
D o
。 0 5 ( a “ 4 ) = 9 一 e s D o 。 0 1 ( a ” 4 ) 二 1 5 。 68
( 二 ) 不同温度处理的效果
同一无性系花粉母细胞同一分裂时期不同温度处理结果见表 5 。 统计分析结果表明 , 不
同温度处理兴隆26 花粉母细胞减数分裂后期 工 , 其效果差 异 极显 著 。 其中 7 一 8 ℃和 8 一
10 ℃处理的效果差异不显著 , 但均极显著优于 1 1一 12 ℃处理的效果 。 应该 指 出的 是 , 7一
8 ℃处理的材料 , 大量花蕾在小抱子发育阶段就已产生离层 , 不久即死亡脱落 , 不能获得成
熟的花粉粒用于授粉 , 而 8一 10 ℃处理者 , 大多可正常开花 ,从而获得较多的二倍性花粉粒 .
( 三 ) 不同无性系的低温处理效果
8 一 10 ℃低温处理花粉母细胞同一减数分裂时期 ( 终变期一中期 I ) 的不同无性系结果
见表 6 。 统计分析结果表明 , 兴隆 24 的处理效果 , 显著优于兴隆 24 一 10 和兴隆 26 的 效 果 。
后两者差异不显著 . 这可能是兴隆 24 的花粉母细胞减数分裂的同步程度更高或该品系 对 低
沙
1期 余风英等 :中粒种咖啡小泡子染色体加倍方法的研究 5 1
冬
温更为敏感的缘故 。
表 6一 1 不同沮度处理兴隆 26无性系减数分裂后期 I 的效果
花粉粒 { 不 同 倍 性 的 花 粉 粒 数
温 度 重 复 单倍性
(
n= x=一主 )
二倍性
(= n Zx= 2 2)
多 倍 性
(= n3 x
, 4 x = 3 3 , 44 )
多倍性花
粉粒数 占
观察总数
( % )
二倍性
花粒数 占
观察 总数
( % )
察观 数总
1 1一 1 Z O C I
平均
4 9 2 0
5 3 6 8
5 1 4 3
4 6 20
5 1 18
4 8 6 9
2 9 0
2 4 0
2 6 5
, 。 一 -一 { 。 . 2。 …
0
。 1 5 4
。
5
…一竺竺_
8一 1 0“ C
I
I
平均
6 36 4
5 40 0
6 88 2
5 1 4 1
4 1 6 8
4 6 5 0
1 2 12
12 3 5
12 2 4
0
。 1 7
0
。
1 3
0
。
1 5
1 9
。
0 4
2 2
。
8 7
2 0
。
9 6
0
。
3 2
0
。
2 0
0
。
2 6
2 4
。
7 9
2 2 一 5 2
2 3
。
6 6
OU,目5门.工上11
7一 8 O C
I
I
平均
5 6 0 0
6 0 1 8
5 8 0 9
42 9 3
4 6 5 1
4 4 72
12 8 9
13 5 5
1 3 2 2
衰 5 一 2 方 差 分 析 表
奋
` 二竺竺兰一 -阵~全竺二 ~ ~!一 兰立塑一一阵生一空一一卜二哩二一…一里2二些 {一竺二一` .扁竺二里一一` - }一一三 卜一竺士些~一卜. ~上生竺.一…-- 望.竺二- {一里少5 一卜-竺望兰一一一宜 复 1 1 、 } O 。 0蜘 , 一 _ . 1 } }二 _ _ } ) 3 } ) } 乙 “ 1。 } ! }一粤一二: ~粤一一一 I,一兰…一- 一一卜二丝止- 一…— 一 {一一一{— 一 {-一一忌 变 异 l ” 1 3 0 5 · 5 2 1 1 } l
衰 6 一 3 不 同 通 度 的 均 教 比 较
一二色一` 尘L 一 {一一兰- 一一生` 1— 圣卫坦兰一一…一一二竺兰— }一一 i竺 一 一一…一 )竺些一一 !8 一 ` 。:任 { 2 7 · 3 3 … ’ 3 ` , 2” {” 一 `“ 一七 { ` ” · 4 1 一 }
X 一 2 7 . 3 3
1
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9 3
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.
D o
。 o 。
(
a = 3 ) = 6
。 一5 D o
.
o l ( a = 3 ) = 1 1
.
0 4
衰 6 一 1 不同无性系在终变期一中期 I 低沮 ( 8一 1 0o C ) 处理的效果
花粉粒 不 同 倍 性 的 花 粉 粒 数
单倍性
(
n = x = 1 1 )
二倍性
( n = Z x = 2 2 )
多倍 性
( n = 3 x
,
4 x = 3 3
, 4 4 )
多侣性花
粉粒数 占观察总 数
( 写 )
二倍性花
粉粒数 占观察总数
( % )
察总观 数
重复无性系
兴隆 2 4一 10 l
平均
6 8 80
5 6 2 5
6 2 5 2
4 6 6 0
3 2 03
3 9 3 0
2 0 6 0
2 1 7 5
2 1 1 7
1 6 0
2 50
2 0 5
2 。 3 3
4
一
4 4
3
。
3 9
2 9
。
9 4
3 8
.
6 7
3 4
。
3 1
兴隆 2 4
I
I
平均
5 9 6 8
5 5 8 2
5 7 7 5
2 1 6 0
1 8 2 7
1 9 9 4
2 8 9 6
2 8 8 0
2 8 8 8
1 5
。
28
1 5
。
7 1
1 5
。
5 0
4 8 。 5 3
5 1
。
5 9
50
。
0 6
峨 兴隆 26 兀
平均
5 8 5 2
5 8 6 8
5 8 6 0
4 2 42
4 7 3 4
4 4 8 8
1 5 9 6
1 1 2 2
1 3 5 9
9 1 2
8 7 7
8 9 5
1 4
1 2
1 3
: :::
0
。
2 2
2 7 。 2 7
1 9
.
1 2
2 3
。
2 0
6 2 热 带 作 物 学 报 1 1卷
裹 6一 2
变异来源
无 性 系
方 差 分 析 裹
自由度 下吵立一丰一竺一卜二竺一 {崖兜 一 {一 瞥一 {一竺竺一 !燮竺一卜竺竺一卜 -一 }
02 8
.
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F
o, 0 5 F
o 一皿 布
9 。 5 5 3 0
。 8 2
上 3公复差重误
总 变 异
衰 6 一 8
` t了曰 目 . . . . . . ,团 . . . 暇 . 目 . , 甲 . 曰 . . . . . `月 . . . 口~
无 性 系
不 同 无 性 系 的 均 数 比 较
.
-
. , ~ ~ ~ . ~ ~ ~ . ~ ~ . .
均 数 X 一 2 8 一 7 1 {
_ X 一 3 5 一 8 4
兴隆 2 4
兴隆 2 4一 lfJ
兴 隆 2 6
4 5 。 0 3
3 5 . 8 4
2 8 。 7 1
16
。
3 2
7
。
3 1
9 。 1 9 .
D o
. o s
(
a 二 8 ) = 5 . 18 D o . 0 1 ( a = 8 ) = 2咚 . 1 -
三 、 秋水仙素处理的效果
秋水仙素处理的结果见表 7 。 方差分析结果表明 , 不同浓度和不同处理方法的效果差异
表 7 一 1 秋水仙案诱导中粒种咖啡小袍子染色体加倍的效果 _ __ _缪…舒了} 2 {” ’ 5 }半竺2 6资} 3 {。 ’ 7 5 }携竺2 6
竺 } 兰} ` ’ o }攒竺2 6专 } ” }” ’ lJ {兴竺2 4一 , 0钾 { “ }。 ’ 5 ! 兴陵 2 4一 `。百 } ’ l “ ’ 7 5 }兴砰2 4一 `。一阵竺生卜缪竺势。 -花 } g …” ’ 0 {兴呼2 6柄 { ` 0 } ” ’ 5 !兴隆 2 6上 { ` ’ 1“ ’了5 !兴竺2 6擂 { ` 2 { ` ’ 0 }兴竺2 6毛 { ` 3 } ” ’ lJ {兴呼2 4一` 0细
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_ _
} ` 了 {
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’ 9 】” ’ 丫 5 }兴竺2 6` …翔几…雄;:一“ …粼蕊 !墨:拭:
} 2 4 { 卜 几` } 头隆 2通一 I U
花粉粒 不 同 格 性 的 花 粉 粒 数
总数 单 倍 性
( n , x = 1 1 )
~三鑫红{望氮袭轰 , 4 4 )
多倍性花粉粒数 占
观察 总数
( % )
二倍性花粉拉数 占
观察 总数
( % )
6 〕0 0
60 70
6 1 13
6 0 3 5
6 0 0 0
6 0 2 5
5 98 0
6 0 0 1
0
一
00
0
。
0 7
0
。 4 7
0
。
6 0
0
。
0 0
0
一
2 5
0
。 3 3
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。 42
O
一 1 3
1 . 1 4
3
。 4 7
6
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0 5
0
。 10
1 。 2 4
1 。 8 7
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1期 余凤英等 : 中粒种咖啡小抱子染色体加倍方法的研究
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处理方法
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极显著 , 不同品系间差异不显著 . Q测验结果表明 , 三种处理浓度的效果均极 显 著 高 于 对
照 , 而以 1 %为最好 . 处理方法中 , 滴液法极显著优于花束柄上插毛细管法 , 显著优于节上
播毛细管法 . 不同处理方法差 异显著的原因 , 与吸收药液的组织面积大小有密切的关系 。 滴
液法处理 , 药液与组织的接触面大 , 吸收药液的面积也大 , 且药液运输距离短 , 故处理效果
好 。 插 毛细管法处理 , 组织仅靠毛细管作用吸收药液 , 数量有限 , 且毛细管常被堵塞或在伤
口处形成褐色保护物 , 不利于对药液的吸收 。 此外 , 药液经长距离运输 , 到达花药时就更少
了 , 故处理效果较差 。
结 论
1
. 花粉粒直径大小与染臼沐倍性之 I’ir] 存在着极显著 的相关性 , 已在多种作物中得到证
实 。 木研究以人工 诱变的中粒种咖啡嵌合体 ( 同一几性系植株上可同时产生正常的单倍性花
粉 和二倍性花粉 ) 、 自然多倍体为材料 , 研究花粉倍性与直径之间的相关性 , 进而依据其明
显相关性 , 以花粉 粒直径大小作为衡量处理效果好坏的标准是简便可靠的 。
2
。 在小泡子母细胞减数分裂时期利用低温处理 , 可使中粒种咖 T[] 卜产生大量的二 倍性花
粉粒。 最佳处理时期为终变期一中期 工和后期 工 , 最适处理温度为 8 一 10 ℃ 。 在终变期一中
期 工时期 , 以 8一 10 ℃ 低温处理 2 天 , 所选用的三个无性系对处理有不同的反应 , 其 中兴隆
2 1的处理效果最好 。 该法从开始处理至获 一得二倍性花粉粒仅需 10 天时间 。 其 诱 导 率 高 , 见
热 带 作 物 学 报 l久卷以
效快 , 方法简便 , 在育种上可资应用 。 风六
3
. 以 0 . 5% , 0 . 7 5%和 1 . 0%秋水仙素溶液 , 采用滴液法和插毛细管法处理中粒种咖啡
小抱子母细胞减数分裂时期的材料。 均可获得染色体加倍的花粉粒 。 最好的处理织合为 1 %
浓度的滴液法 , 但效果尚不十分理想 , 应进一步改善诱导方法 , 以进一步提高二倍性花粉的
诱导率 。 {
今 考 文
〔 i 〕 H . A . M . V a n d e r V o s s e n . C o f f e e B o t a n y , B i o e h e m i s t r了 a n d P r o d u e t i o n o f B e a n s a n d
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〔 2 ) M e d in a一 F il h o , A . aC r v a lh o , e t a l . : P l a n t B r e e d in g R e v i e w , 1 9 84 ( 2 ) : 15 7一 19 3
〔 3 〕 A . C a r v a lh o : C o f f e e B r e e d in g , C r o s s b e t w e e n c . a r a b ie a a n d C · e a n e p h o r a , A S IC 19 8 3
36 3一 3 6 8
〔 4 〕 H . A · M · V a n d e r V o s s e n a n d J · B · 0 · o w u o r · : A p r o g r a m m e o f i n t e r s p e e if ie h y b r id z a t io n
b e t w e e n A r a b i e a a 几 d R o b u s t a e o f f e e i n K o n y a
.
K e n 了a C o f f e e , 4 6 ( 5 4 1 ) 1 9 8 1: 1 3 1一 1 3 7
〔 5 〕 H · A · M · V a n d e r V 。 , s e n : C o f f e e S e l e e t i o n a n d B r e e d i n g , C o f f e e B o t a n y , B i o e h e m i s t r y
a n
d P r o d u e t io n o f B e a乓5. a n d B e v e r a g e (M · N · C l if f o r d a n d K . C . W il ls o n e d ) W e s t p o r t ,
C o n n e e t ie a t 2 0 3 5
〔 6 〕 C . L a n a o d : N o n一 r e d u e t io n p r o e e s s e s e a u s e d b y e h il l in g d u r in g e o f f e e t r e e 口 ie r o ` p o r g e o e s is
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( T r o P i e a l C r O P s D e p a r tm e n t , S C C T C )
A b s t r a e t
T h e p r e s e n t p a p e r d e a l s w i t h t h e m e t h o d s f o r i n d u e i n g d i p l o i d p o l l e n s w i t h l o w
t e m p e r a t u r e a n d e o l e h i e i n e t r e a t m e n t s o f f l o w e r o r g a n s f r o m C o f f e a e a n e p h o r a a t
m e i o s i s s t a g e
.
T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t l o w t e m p e r a t u r e t r e a t m e n t o f t h e p o l l e n s a t
m e i o s i s s t a g e e o u l d b r i n g a b o u t l a r g
e n u m b e
r o f d i p l o i d p o l l e n s
.
T h e b e s t p h a s e f o r
t h e t r e a t m e n t w a s t h e d i a k i n e s i s一 m e t a p h a s e 1 a n d a n a p h a s e l , a n d t h e o p t i m u m t e m p e一
r a t u r e w
a s s 一 l o O C w i t h d i f f e r e n t r e s p o n s e s b e t w e e n e l o n e s . C o l e h i e i n e t r e a t m e n t
b y d r o p p i n g o f i % e o l e h i
e i n e s o l u t i o n o n t o f l o w e r b u d s e o u l d h a v e a y i e l d o f 7
.
2 5一
习. 2 0% d i p l o i d p o l l e n s .
Ke y w o r d s
: C o f f e a e a n e p h o r a , l o w t e m p e r a t 让 r e t r e a t m e n t . e o l e h i e i n e , d i p l o i d y
p o l l e n s