全 文 ：暗 柳 橙 花 粉 贮 藏 中
生 活 力 变 化 规 律 的 研 究
黄寿山 邓崇岭
( 广 西农学院 ) ( 广 西柑桔研 究所 )
花粉贮藏对杂交育种有重要意义 。 它可
以解决杂交过程中的花期不遇问题 ;可 以使
育种者在杂交育种过程中灵活掌握 工 作 进
度 ;科研单位和育种机关之间可以相互邮寄
花粉 , 便于种质文流 。 这些都有利于加速育
种进程 , 选育出更多优 良品种 。 另 外 在 栽
培方面 , 用大年贮藏下来的花粉在小年进行
授粉 , 可提高某些果树 ( 如苹果 等 ) 的 产
量 。 关于花粉贮藏的技术手段目前已有了很
大的进步 , 如从常规手段 ( 如低温 O ℃ 以上
等 ) 发展到超低温 、 无氧 、 液态氮 ( 一 19 6℃ ) 、
液态氨等先进手段 。 柑桔花粉贮 藏 研 究 工
作 , 国外进行了一些 , R o s in c k 曾把 沙 莫
蒂甜橙花粉贮藏于 一 5℃下 , 2周后失去活力 ;
而积的花粉贮藏 4 周后失去生活 力 。 S o o st
和 C a m e r o n把采集 花 粉 贮 藏 于 4℃ 下 ,
并置于氯化钙上 , 经过 36 天后用来授粉就不
能产生种子 。 近来 S a h a r ( 1 9 8 0 ) 用先进的
手段贮藏克里迈丁红桔 、 伏令夏橙和积的花
粉 , 获得了 比较理想的结果 : 克里迈丁红桔
和积的花粉在 4℃下 (冰箱 ) 可贮藏 7 星期 ;
用氮或二氧化碳代替正常气体 , 克里迈丁红
桔的花粉能延至 27 星期 ; 应用极低温 (一 18 ℃ )
和无氧贮藏 , 经 57 周发芽率仍有 13 % ; 而积
的花粉发芽率为 7一 9% 。 国内对柑桔花粉贮
藏很少报道 , 特别在甜橙方面更少 。 本试验
采用常规 、 经济实用的方法贮 藏暗 柳 橙 花
粉 , 获得满意的结果 。 现将结果分述如下 :
材料与方法
本试验以暗柳橙 ( C i t r u S 5 1二 e 。 5 1 5
O s b e c k ) 花粉为材料 。 分二次试验 : 第一
次于 1 9 8 3年 3 月 3 1 日初花期 , 当花瓣刚开放
时采集 ( 把花粉放在培养皿内 , 置于干燥器
内干燥 6 小时 , 然后分装于培养皿中 , 进行
常温 、 干燥器 ( 氯化钙 ) 、 10 ℃ ( 冰箱 ) 、
低温2 ℃ (冰箱 ) 、 低温 2℃ ( 冰箱 )加干燥五
个贮藏处理 。 第二次采干 4 月 3 日 , 花粉采
回后放于培养皿内 , 置于干燥器中干燥 3 天
( 7 2小时 ) 后 ,分装于小瓶内 ,用胶盖密封 。
置于常温 、 10 ℃ ( 冰箱 ) 、 低温 2℃ (冰箱 ) 、
低温 2℃ ( 冰箱 ) 加干燥 ( 器 ) 进行贮藏 。
贮藏后每隔 2 一 3 天用培养基发芽法检
查一次发芽率 。 培养基成分是 15 % 蔗 糖 和
1%琼脂 。将花粉播于培养基上 , 2 4小时后在
显微镜下检查发芽情况 , 发芽标准 : 以花粉
管长度达花粉粒 1/ 2以上算为发芽 。
授粉试验共进行八次 。 前三次将贮藏花
粉授于暗柳橙上 , 后五次授于温州蜜柑上 。
各处理每次授粉 15 朵 , G月 10 日检 查 座 果
率 , 6 月 2 5 日检查种子数 。
结果与分析
一 、 暗柳橙花粉贮藏寿命
一般认为 , 在低温。一 4℃ 或低谧年燥架
件下 , 柑桔花粉只能贮藏 4 ~ 6 周 , 有的报
道低温 4℃下贮藏柑桔花粉最久也只 有 7 周
( S a h a : 等 , 1 9 50 ) 。 本试验在低温贮藏下
暗柳橙花粉在 10 周以上 。 这可能是采用的试
材不同 , 种间或品种间有差异 。 柑桔花粉贮
藏以低温 , 尤以低温加密封最为理想 , 详见
表 1 。
表 1 不同贮旅条件下暗柳橙花粉贮藏天橄一下子蔺尸一下一一丁一一…” ’一 ’ . { ’ `一 ” ’ . ’ `一「.l ’ .- -一 ’赘鱼全…立兰一…二杏口兰一 、兰生…一少一一里些竺型色. {一竺` 一 - }一二竺一阵一兰一 {舟一些二一 {一些一4 月 3 日采集 】 1 7 】 / 】 6 0 { 8` … 8 1一 -一一- - - ~ 一- 一- - 一一与
二 、 花粉在贮藏中的生活力变化规律
(一 )暗柳橙花粉 , 随着贮藏时 间 的 延
长 , 生活力逐渐降低 , 即发芽率逐 渐 下 降
(图 1 ) 。 通过 3 月 31 日第一次试验 , 花粉贮
藏天数与花粉发芽,率的统计分析表明两者呈
负相关 ,其相关系数是 : 低温为 一 。 . 7 7 3 6 , . ,
低温 + 干燥为 一 .0 8 2二 , 千燥为 一 0 . 8 2 3 7 . ;
10 ℃为 一 0 . 90 3石。 前二处理达到 极 显 著水
. , ~ . , .
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了口乞 〔习
平 , 第三处理为显著水平 。
(二 )暗柳橙花粉在贮藏中 , 前期发芽率
下降非常迅速 , 后期 下 降 比 较 缓 慢 ( 图
l )
。 开始 20 天 , 低温处理的花粉发芽率从
8 3
.
93 %迅速下降到 1 1 . 13 % ; 低温加干燥的
花粉发芽率从 83 。 35 %迅速下降到 1 1 . 1% 。贮
藏后期的 50 天 , 低温处理的花粉发芽率只从
1 1
。
13 %下降到 O; 低温加干燥的花粉发芽率
只从 7 . 9 6%下降到 0 。 贮藏花粉
进行授粉必须抓紧时间 , 尽量提
前 。 因暗柳橙花粉贮藏前期发芽
率下降非常迅速 , 前后侮隔一天
的发芽率相差悬殊 , 对授粉效果
影响很大 。
低渴 十于燥臼
低温 ( 一少
仁、 `
\ 吵、 、 l ’ \ 、 … …
旧 朋 , D日 夺本。日 乎户 o日 朔扣日 朔勿日 朋夕日 胡甲日日 期
图 1 不同贮藏条件下暗柳橙花粉生活 力变化曲线
8
三 、 暗柳橙花粉的发芽势
暗柳橙花粉在贮藏过程中随
时间的延长 , 发芽势也 逐 渐 减
弱 。 经观察 5 月 20 日以前 , 花粉
发芽势强 , 花粉管长且整齐 、 均
匀 。 5 月 2 1日以后 ( 52 天后 ) 花
粉管短且不整齐 , 并呈现长短不
一混杂状态 , 以后随时间的延 长
花粉管 短的 占比例越来越大 。 说
明授粉用的贮藏花粉不但要考虑
其发芽率 ,也要考虑其发芽势 。 如
花粉发芽势很弱 , 授粉后的花粉
管的生长到达不了子房 , 便完不
!沐那
成受精过程 , 得不到杂交种子 。 因此 , 以低
温贮藏 51 天后的花粉进行杂交很可能得不到
杂交种子 。
四 、 培养温度对花粉发芽率的影响
发芽条件对花粉的发芽有一定影响 。 在
发芽条件中尤其是培养温度更为重要 。 据报
道 , 柑桔花粉发芽的最适温度为 25 ℃左右 ,
当温度超过 30 ℃时发芽就受到影响 。 本试验
结果基本与此符合 。 如 4 月 9 日 温 度 为
2 8
.
8℃ , 低温加干燥的花粉发芽率为 46 . 2 5%;
4 月 1 2日温度升高到 3 1℃ , 发芽率迅速下降
到 25 . 7 % ; 4 月 14 日温度为 30 ℃ , 发芽率为
1 4
.
4 4% ; 4 月 1 6日温度下降到 2 6 . 8℃ , 发芽
率则上升到 1 7 . 79 % 。 又从表 3 可知 , 4 月 9
日 、 1 2日不同贮藏处理的花粉 , 授粉后其座
果率几乎全都为零 , 显然与授粉时的温度有
关 , 当时气温曾达 36 ~ 37 ℃ , 空气干燥 , 不
利于授粉 。 所以在进行发芽试验和杂交授粉
试验吧须注意温度这个因素 。五 、 贮藏前预处理和贮藏容器对暗柳橙
花粉生活力的影响
贮藏前预处 理和贮藏容器直接影响花粉
的贮藏寿命 (表 1 ) 。 第二次花粉的贮藏寿命
显著 比第一次长 。 如 10 ℃条件下 , 前一次花
粉贮藏期为 8 天 , 后 一次为 60 天 。 几 这与贮藏
前预处理 、 贮藏容器有关 。 第一次花粉贮藏
前只干燥了 6 小时 , 花粉还非常 湿润 , 容易
发霉 , 如常温的贮藏 3 天就开始发霉 ; 10 ℃
贮藏的 6 天就发霉 。 花粉只要一发霉 , 就立
即丧失生活力。 第二次花粉贮藏前干燥 了 72
小时 ( 因当时下雨 , 空气湿度大 ) , 花粉 比
较干燥 , 符合贮藏条件 。 从贮藏容器分析 ,
第一次花粉贮藏使用的是培养皿 , 虽 然 有
盖 , 但不严实 , 空隙大 , 湿度过大 , 并随着
外界变化而变化 , 空气流通 , 氧气多 , 花粉
的呼 吸作用及其他代谢活动强 , 消耗营养物
质多 ; 其次一些致病菌类也易侵入 , 导致寿
命缩短 。 第二次使用小瓶并加盖密封 。 这样
菌类不易侵入 , 湿度也保持一定 , 氧 气 也
少 , 呼吸作用就弱 , 消耗的物质就少 , 贮藏
寿命也就延长 。 因此花粉贮藏前必须经过干
燥 ,一般为 24 ~ 48 小时 。 贮藏器一定要密封 。
六 、 贮藏花粉的授粉效果
授粉是为了检查贮藏花粉的实际受精结
籽能力。 试验结果表明 , 种子多少与花粉发
芽率相一致 , 即花粉发芽率越高 , 种子数就
越多 ( 表 2 ) 。 4 月 12 日前 , 以低温加干燥
.-
表 2 不同贮藏条件下暗柳橙花粉授粉后种子数
常 温 干 燥 1 0℃ 低温 + 干燥 低 温 常 温
三…二 A B . A B A { B A B A B二 }一生 4 1 4 6 1 0 。 5 7 1 7 。 3 1 1 4 O 0土 {主 1 0 1 4 . 2 5 ! `。 . 0 8 1 1 。 9 0羊 6 1 1 。 7 5 1 1 。 6 0 O 40 0 0 0 1 2 9 。 6 2 0 。 5 12 3 l 。 8 0 O0 0 0 4 0
3
。
3 0 0 8
7
二…二 0 0 0 03 2 。8 6 43 。 3 3 。 3 35 7
A : 果数 , B: 平均每果种 子数 。
贮藏的花粉授粉后种子数最多。 座果率高低
与发芽串也基本相一致 。 表 3 说明在各个不
同的贮藏处理中 , 4 月 16 日以前以低温加干
燥和低温的花粉发芽率高 , 座果率也高 。
结 语
一 、 暗柳橙花粉贮藏 , 以低温 2℃ 下寿
命最长 , 达 72 天 , 低温加干燥 次 之 , 6 6
天 ; 干燥器贮藏的 15 天 ; 10 ℃贮藏的 8 天 ;
常温为 6 天 。 以低温贮藏最理想 。
二 、 暗柳橙花粉生活力随贮藏时间的延
长 , 发芽率逐渐下降。 发芽率与贮藏 日数成
负相关 。 相关 系 数 : 干 燥 : 一 。 . 8 4 3 7 . ,
裹 3 不 同贮藏条件下暗柳橙花粉授粉后的座果率 (% )
\巍洪 闰_ 。川_ _ …, 八_ 磕+ }_ : 。 …* 。。 ! , 。 _ …_ , _ 。。 ~ \ 、 \ } 吊 星血 」 「 夕禾 } I U幻 } 二七 韶洁 ! I晰 也匡 } 巾 山几 { i v 勺 }和 I , 十 1乙不 J矍巨二兰、一 , …一…一阵兰…一…一…一…一一三全生一 {一生` }里生竺 . }丝望生尸燮上军二兰 {一 - ,— …一一一生竺 二 {二竺…竺竺 }里旦竺` }里些生 .…卫些 - !— …-一!— -一 生些 -一 }兰竺 ` {.竺竺竺一 )二一一 {竺竺 -卜卫生…— — {一一一些义一 {一…土一卜一旦-一呼竺`卜i玉兰` }.竺竺一…— {-一`兰二生- j— …~兰竺一…— }二一 一 {二 -一 {二一一…— }一兰一一二口生一 {— 卜生一 {— }产三一一 {土一…二一一…二一阵二一一二里生一 {— …一竺竺…— }竺些一 {里竺兰.…竺竺一…些竺一…—4 / 1 6 1 { … { 2 6· 6 7 } 4 6· 6 7 { 2 3· 0 8 …5 3· 3 3 {
10 ℃ : 一 0 . 9 0 3衍 低温 + 干燥 : 一 0 . 8 2每 . ,
低温 : 一 0 . 7 7 3 6二 。 花粉发芽势也随贮藏时
何的延长而逐渐减弱 。 用来授粉的贮藏花粉
要考虑发芽率 , 也要考虑发芽势。
三 、 在暗柳橙花粉贮藏前必须 经 过 干
燥 , 使花粉达到一定的干燥度 。 干燥时间一
般为24 ~ 48 小时 。 贮藏容器必须密封 。 这样
可大大延长暗柳橙花粉贮藏寿命 。 以 低 温
2℃加密封最为理想 。
四 、 不同贮藏处理的暗柳橙花粉给暗柳
橙和温州蜜柑授粉 , 种子数和座果率与花粉
发芽率趋势是一致的 。
五 、 培养温度直接影响到花粉的萌发及
花粉管的生长 , 因而影响到花粉发芽率及发
芽势 。 花粉发芽的最适温度为 25 ℃左右 。 授
粉时温度和空气湿度影响受精结籽的效果 。
( 参考文献 8 篇略 )