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蒙药照山白挥发油化学成分的研究



全 文 :— 28 — 现代中药研究与实践2013年第27卷第5期Chin Med J Res Prac,2013 Sept.Vol.27 No.5
·药理药化·
收稿日期:2013-04-11
基金项目:国家科技重大专项课题(2010ZX09401-302-5-12)
作者简介:陈萌(1986-),女,硕士研究生,研究方向:中药质量控
制与资源研究;。Email:chenmengtianping@126.com
*通讯作者:郭庆梅(1968-),女,教授、博士生导师,主要从事中药
质量控制与中药资源学的研究;Email:qmguo@sina.com。
蒙药照山白挥发油化学成分的研究
陈 萌 1, 郭 伟 2 , 郭庆梅 1 , 周凤琴 1
(1. 山东中医药大学药学院 , 山东 济南 250355 ; 2. 山东省千佛山医院,山东 济南 250014)
摘 要:目的 研究照山白挥发油化学成分的组成。方法 用水蒸气蒸馏法提取不同产地照山白的挥
发油,以气相色谱 -质谱联用技术测定其成分。结果 从不同产地照山白挥发油中分离得到含量超过 1%
的挥发性成分的种类和含量均不同。结论 为鉴别不同产地不同部位的照山白提供了依据。
关键词:照山白叶与果实;挥发油;气相色谱法 -质谱
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1673-6427(2013)05-0028-03
Study on the Chemical Constituents in the Volatile Oils of the Leaves and Fruits of
Rhododendron micranthum Turcz.
CHEN Meng1, GUO Wei2 , GUO Qing-mei1 , ZHOU Feng-qin1
(1. Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250355, China; 2. Qianfoshan Hospital of
Shandong Province, Jinan 250014, China)
Abstract: Objective To study the chemical constituents in the volatile oils of the leaves and fruits of
Rhododendron micranthum Turcz. Methods The volatile oils from the leaves and fruits of Rhododendron
micranthum were extracted by water steam distillation and its chemical constituents were separated and identifi ed
by GC-MS. Results More than 1% different compounds which are different in variety and composition had been
isolated from the volatile oils of Rhododendron micranthum from different product area. Conclusion The results
could be provided the basis for identify the different origin in different parts .
Key words: Leaves and fruits of Rhododendron micranthum Turcz; Volatile oil; GC-MS
照山白药材为杜鹃花科杜鹃花属植物照山白
(Rhododendron micranthum Turcz.)的干燥叶或带叶
枝梢,秋、冬二季采收。枝叶具有祛风、通络、止
血、镇痛的作用。照山白又为民族药,蒙医传统以其
叶入药。性味辛、苦,寒;归肺、脾经。具有止咳、
祛痰的功效,用于急、慢性支气管炎。《新修晶珠本
草》[1] 载 :“分黑白两种,塔里嘎保是白色的类型,
这类群叶小,一般叶片长在 3 cm 以内,枝条白色,
或灰白色或淡黄色(嫩枝)色;叶片表面淡绿色,背
面淡黄色或灰褐色;花白色,淡黄色或带粉红色。”
药理研究证明其挥发油具有良好的镇咳、祛痰、平
喘作用,在医药上有广泛的应用前景。李铣等 [2] 通
过硅胶薄层鉴定照山白叶片挥发油中含有 20 余种成
分,并经过分离初步认定其中三个结晶分别为:莪术
醇 (Curcurmo1),杜松脑 (Juniper comphor) 和 δ- 卡蒂
醇 (δ-Cadinol)。本实验采用水蒸气蒸馏法提取,同
时采用毛细管气相色谱 -质谱联用法分离并鉴定其
挥发性化学成分的百分含量,并用气相色谱归一化法
测定各个组分的相对百分含量,为进一步研究照山白
奠定了基础。
1 仪器和材料
GC 6890X 型气相色谱仪,MS 5975 型质谱仪,
7683 B 型自动进样器;样品 1、2 分别为 2010 年 11
月采自山东济南南部山区照山白的黄叶和绿叶;样品
3、4 分别为 2010 年 9 月采自山东蒙山的照山白的果
实和绿叶。由山东中医药大学郭庆梅教授鉴定为杜鹃
花科杜鹃花属植物照山白(Rhododendron micranthum
Turcz.)。
DOI:10.13728/j.1673-6427.2013.05.013
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2 方法和结果
2.1 挥发油的提取
称取样品(过 40 目筛)约 100 g,精密称定,加
蒸馏水 1000 mL 与玻璃珠数粒,振摇均匀后,照《中
国药典》2010 年版一部附录 XD 甲法提取挥发油。
得到的挥发油总量分别约为 0.53、0.47、0.36、0.29mL,
得率分别为 0.53、0.47、0.36、0.29%(mL·g-1)。
2.2 气相色谱及质谱条件
色谱条件:色谱柱为 Agilent HP-5 MS 柱(30
m×250 μm,0.25 μm);采用程序升温:80 ℃开
始,以 5℃·min-1 升至 180℃,再以 10℃·min-1
升 至 300 ℃, 保留 6 min , 载 气 氦气;柱流量
1.0mL·min-1,进样口温度 280 ℃;进样量 0.4μL,
分流比 15 ∶ 1 ;质谱条件:电离方式 EI ;离子源温
度 230 ℃,接口温度 280 ℃;扫描质量范围 35~550
amu ;电子倍增器电压 1.28kV。
2.3 分析鉴定
经 GC-MS 分析,分别得到了南部山区黄叶、南
部山区绿叶、蒙山叶、蒙山果实挥发油成分总离子
图。经过标准质谱库检索,采用面积归一化法计算各
峰的相对含量,对照山白 4个样品相对百分含量大于
表 1 照山白 4个样品挥发油成分及其相对含量
Tab. 1 The composition and relative contents of volatile oils in 4 samples of Rhododendron micranthum Turcz
序号 化合物 保留时间 /min 分子量 南部山区黄叶百分含量(%)
南部山区绿叶百
分含量(%)
蒙山叶百分含量
(%)
蒙山果实百分含
量(%)
1 蒎烯 4.869 136 1.04 1.193 1.066 -
2 莰烯 5.224 136 1.675 - - -
3 β- 水芹烯 5.922 136 - 1.654 - -
4 月桂烯 6.179 136 1.609 - - -
5 D- 柠檬烯 7.324 136 2.169 1.674 1.236 -
6 乙酸龙脑酯 16.347 196 6.398 6.117 - -
7 1- 乙烯基 -1- 甲基 -2,4-(1- 甲基乙烯基)双环己烷 21.417 204 2.397 3.014 - -
8 β- 石竹烯 23.546 204 15.627 10.345 1.135 2.531
9 γ- 榄香烯 24.873 204 12.8 14.913 - -
10 α- 石竹烯 25.983 204 5.483 5.229 2.32 -
11 古巴烯 27.248 220 - - - 1.932
12 1-(1,5 二甲基 -4- 己烯)-4- 甲基苯 27.791 164 - - 7.048 4.858
13 α- 依兰烯 28.924 204 - - - 3.826
14 5-(1,5- 二甲基 -4- 己烯 )-2- 甲基 -1,3- 环己二烯 30.727 164 - - 1.942 -
15 6- 乙烯基 -3,6- 二甲基 -5- 异丙烯基 -4,5,6,7- 四氢化香豆素 31.602 216 23.301 30.274 - -
16 4,7- 二甲基 -1-(1- 甲基乙基)-1,2,3,5,6,8a 六氢萘 31.694 204 - - 1.826 1.747
17 3-(1,5- 二甲基 -4- 己烯 )-6- 亚甲基环己烯 31.963 164 - - 1.27 -
18 β- 葎草烯 32.972 204 4.448 - - 1.942
19 匙叶桉油烯醇 36.065 220 - 5.10 - -
20 氧化石竹烯 38.961 220 4.091 1.973 - -
21 β- 榄烯酮 42.428 190 - 1.046 - -
22 杜松醇 47.343 222 - - 1.22 -
23 姜黄酮 49.375 202 - - - 1.307
24 α- 毕澄茄烯 49.747 204 - - 1.318 -
25 芳姜黄酮 51.509 216 - - 44.312 30.12
26 姜黄新酮 55.52 206 - - 3.012 1.617
27 长叶松香芹酮 56.653 218 - - - 1.122
28 合计 81.038 82.532 67.705 51.030
1.00% 的成分进行分析,见表 1 。
3 讨论
由结果可知,照山白挥发油的主要化学成分包括
烷烃、醇、杂环酮、香豆素、脂类。
研究表明,样品 1(南部山区采集的黄叶)
中符合积分条件的峰共有 12 个,相对百分含量为
81.038% ;样品 2(南部山区采集的绿叶)中符合积
分条件的峰共 11 个,相对百分含量为 82.532%。南
部山区采集的黄叶和绿叶共有成分有 8种,分别为莰
烯、D-柠檬烯、乙酸龙脑酯、[1S-(1α-2β-4β)]-1-
乙烯基 -1- 甲基 -2,4-(1- 甲基乙烯基)双环己烷、
石竹烯、γ-榄香烯、α-石竹烯、6- 乙烯基 -3,6-
二甲基 -5- 异丙烯基 -4,5,6,7- 四氢化香豆素、氧化
石竹烯。挥发油中含量最高的 3种成分均为 6- 乙烯
基 -3,6- 二甲基 -5- 异丙烯基 -4,5,6,7- 四氢化香豆
素、β-石竹烯、γ-榄香烯,含量分别为 23.301、
15.627、12.8% 和 30.274、14.913、10.345%。其中香
豆素类化合物在 2个样品中含量均为最高,有药理研
究表明香豆素类化合物具有抗炎镇痛作用 [2],对过敏
性哮喘有良好的治疗作用 [3]。2 个样品中烯烃的含量
分别为 51.339、45.095%。李铣等 [2] 研究发现照白杜
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鹃挥发油中主要镇咳有效成分为烯烃。其中石竹烯有
平喘作用,对于老年慢性支气管炎有治疗作用 , 同时
石竹烯还具有抗氧化作用 [5]。
样品 3(蒙山照山白果实)中符合积分条件的峰
有 11 个,相对百分含量为 51.002%;样品 4(蒙山照
山白叶)中符合积分条件的峰有 11 个,相对百分含
量为 67.705%。蒙山果实与叶的共有成分有 5种,分
别为石竹烯、1-(1,5-二甲基-4-己烯 )-4-甲基苯、4,7-
二甲基 -1-(1- 甲基乙基 )-1,2,3,5,6,8a,- 六氢化萘、芳
姜黄酮、姜黄新酮。挥发油含量最高的 2种成分为芳
姜黄酮、1-(1,5 二甲基 -4- 己烯)-4- 甲基苯,含
量分别为 44.312、7.048% 和 30.12、4.858%。芳姜黄
酮为倍半萜类衍生物,王晓玲等 [6] 从芳姜挥发油中提
取出了芳姜黄酮,李诚秀等 [7] 通过研究证明芳姜挥发
油具有明显的祛痰、止喘及预防哮喘发作的作用。
山东两地采集的照山白样品共有成分较少,但是
其主要成分均具有止咳,祛痰的功效,其挥发油的生
物活性还有待于进一步的实验验证。
参考文献
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合物的抗炎镇痛活性 [J] 光谱实验室 ,2011,28(6):2999-3003.
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[5] 纳智 . 三种黄皮属植物叶挥发油化学成分的研究 [J]. 生物质化学工
程 ,2006, 40(2):19-22.
[6] 王晓玲 , 赵永春 , 郭进宝 . 芳姜中芳姜黄酮的柱色谱制备及波谱鉴定 [J].
中国中药杂志 ,2003,28(12):1196-1197.
[7] 李诚秀 , 李玲 , 罗俊 , 等 . 姜黄挥发油对呼吸道作用的研究 [J]. 中国中药
杂志 ,1998,23(10):624-625.
四种中成药微生物限度检查方法验证
李 菁 ,侯飞燕
(怀化医学高等专科学校,湖南 怀化 418000)
摘 要:目的 建立四种中成药的微生物限度检查方法。方法 采用《中国药典》2010 年版一部规定
的常规法,培养基稀释法进行菌回收率比较试验。结果 四种药品在常规法检测金黄色葡萄球菌回收率均
低于 70%。采用培养基稀释法,其菌回收率均大于 70%。结论 四种中成药的微生物限度检查应采用培养
基稀释法检测才能得到满意的结果。
关键词:微生物限度检查;培养基稀释法
中图分类号:R927.1 文献标识码:A 文章编号:1673-6427(2013)05-0030-03
收稿日期:2013-06-07
作者简介:李菁( 1 9 6 9 - ),女,硕士,副教授,主要从事药物分
析和药品质量控制方面的研究,Te l : 0 7 4 5-2 3 8 1 0 5 2 ; E-
mail:lj699768@163.com