全 文 ：基金项目:科技部国际科技合作项目(S2011ZR0193)
作者简介:张东，男，实习研究员 研究方向:中药化学 * 通讯作者:杨岚，女，研究员 研究方向:中药化学 Tel:(010)64014347
E-mail:ylan_66@ 163. com;朱晓新，男，研究员 研究方向:中药药理与药代 Tel:(010)64014347 E-mail:zhuxx59@ yahoo. com. cn
·论 著·
紫萁营养叶中化学成分的研究
张东，刘为广，杨岚* ，李玉洁，朱晓新* (中国中医科学院中药研究所，北京 100700)
摘要:目的 对紫萁科植物紫萁(Osmunda japonica Thunb.)干燥营养叶的化学成分进行研究。方法 以体积分数 95%乙醇对
紫萁干燥营养叶进行提取，对乙酸乙酯部位采用各种柱色谱进行分离，通过 NMR和 MS等波谱学数据分析进行结构鉴定。结
果 分离鉴定了 8 个化合物的结构:(+)-去氢催吐萝芙木醇(1)、对羟基苄叉丙酮(2)、3，4-二羟基苄叉丙酮(3)、原儿茶醛
(4)、原儿茶酸(5)、对羟基苯甲醛(6)、15-二十九酮(7)、β-谷甾醇(8)。结论 化合物 1、2、4、6、7 为首次从紫萁属植物中分离
得到。
关键词:紫萁科;紫萁;化学成分;去氢催吐萝芙木醇;对羟基苄叉丙酮
doi:10. 11669 /cpj. 2013. 08. 003 中图分类号:R284 文献标志码:A 文章编号:1001 － 2494(2013)08 － 0587 － 03
Chemical Constituents of Sterile Fronds of Osmunda japonica
ZHANG Dong，LIU Wei-guang，YANG Lan* ，LI Yu-jie，ZHU Xiao-xin* (Institute of Chinese Materia Medica，China Acade-
my of Chinese Medical Sciences，Beijing 100700，China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To study the chemical constituents of the sterile fronds of Osmunda japonica. METHODS The 95%
ethanol extract of the sterile fronds of Osmunda japonica was partitioned with. Eight compounds were isolated by column chromatography
from ethyl acetate part，and their structures were identified by analysis of NMR and MS data. RESULTS The compounds were identi-
fied as:(+)-dehydrovomifoliol(1) ，p-hydroxybenzylideneacetone(2) ，3，4-dihydroxybenzylideneacetone(3) ，protocatechuicaldehyde
(4) ，protocatechuic acid(5) ，p-hydroxy-benzaldehyde(6) ，15-nonacosanone(7) ，and β-sitosterol(8). CONCLUSION Compounds
1，2，4，6，and 7 were obtained from the genus Osmunda for the first time.
KEY WORDS:Osmundaceae;Osmunda japonica Thunb．;chemical constituent;dehydrovomifoliol;p-hydroxybenzylideneacetone
紫萁(Osmunda japonica Thunb． )为紫萁科
(Osmundaceae)紫萁属(Osmunda)植物，在我国
分布广泛。紫萁为多年生植物，营养叶和孢子叶
分离，紫萁根茎及叶柄残基入药，称为紫萁贯
众［1］，性苦，寒。归肝、胃经，具有清热解毒、祛瘀
止血、杀虫的功效。笔者研究中发现，紫萁贯众
药材中叶柄残基和根状茎的质量比约为 3 ∶ 1，据
此推测紫萁叶与紫萁贯众药材可能有相似的化
学成分和药理作用。紫萁为多年生宿根性的草
本地生蕨类植物，根茎的过量采挖，会导致资源
的枯竭，而紫萁营养叶为一年生且资源丰富。为
探讨紫萁营养叶药用价值，本课题对其化学成分
进行了研究，首次从紫萁营养叶中分离得到了 8
个化合物，分别鉴定为(+ )-去氢催吐萝芙木醇
(1)、对羟基苄叉丙酮(2)、3，4-二羟基苄叉丙
酮(3)、原儿茶醛(4)、原儿茶酸(5)、对羟基苯甲
醛(6)、15-二十九酮(7)、β-谷甾醇(8) ，其中化
合物 1、2、4、6、7 为首次从紫萁属植物中分离
得到。
1 药材、仪器与试剂
Agilent1200 － 6130 SQ 型质谱仪(Agilent 公
司) ;Waters GCT质谱仪(Waters 公司) ;Perkin － El-
mer 241 polarimeter 旋光仪(Perkin-Elmer 公司) ;
AVANCE II 400 MHz、AVANCE －Ⅲ 500 MHz 核磁
共振仪(Bruker 公司)。薄层色谱硅胶 GF254 和柱
色谱硅胶(100 ～ 200 目和 200 ～ 300 目，青岛海洋化
工有限公司) ;大孔树脂 SP700(日本三菱公司) ;
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Sephadex LH － 20 葡聚糖凝胶(GE healthcare 公
司) ;ODS反相硅胶(Chromatorex公司)。提取、分离
所用试剂均为分析纯。
紫萁叶于 2008 年 7 月采集自湖南沅陵地区。
经中国中医科学院中药研究所冯雪峰研究员鉴定为
紫萁科植物紫萁(Osmunda japonica)的地上部分。
2 提取分离
10 kg 干燥紫萁叶粉碎后，用 10 倍量的体积分
数 95%乙醇冷浸，提取 3 次，每次 24 h，过滤提取
液，合并浓缩得 95%醇提浸膏(360 g) ;药渣再以 10
倍量 50%乙醇回流提取，每批回流提取 3 次，每次 3
h，过滤，合并提取液，浓缩得 50% 醇提浸膏(210
g)。将 95%醇提浸膏分散于水中，依次用石油醚、
乙酸乙酯萃取，回收溶剂分别得到石油醚部分(185
g)和乙酸乙酯部分Ⅰ(60 g)。将 50%醇提浸膏分
散于水中，乙酸乙酯萃取，浓缩得到乙酸乙酯部分Ⅱ
(24 g)。
乙酸乙酯部分Ⅰ60 g，经硅胶柱色谱，用石油
醚-丙酮梯度洗脱，8 ∶ 2 洗脱部分经反复硅胶柱色
谱，用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱、二氯甲烷-乙酸乙
酯，得到化合物 1(50 mg)。乙酸乙酯部分Ⅱ24 g，
经硅胶柱色谱，用二氯甲烷-丙酮梯度洗脱。其中
9∶ 1洗脱部分经硅胶柱色谱及反相硅胶柱色谱纯化
得到化合物 2(15 mg) ;8∶ 2 洗脱部分经硅胶柱色谱
及 Sephadex LH － 20 柱色谱纯化得到化合物 3(25
mg) ;丙酮洗脱部分经硅胶柱色谱及反复 Sephadex
LH －20 柱色谱得到了化合物 4(12 mg)、化合物 5
(15 mg)、化合物 6(20 mg)。石油醚部分经硅胶柱
色谱，用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，9 ∶ 1 洗脱部分
经反复硅胶柱色谱，用石油醚-二氯甲烷、石油醚-乙
酸乙酯洗脱，分离得到化合物 7(500 mg)、化合物 8
(300 mg)。
3 结构鉴定
化合物 1:无色油状物，ESI-MS m/z: ［M + H］+
223。［α］25D + 133. 8°(c 0. 36，MeOH)。
1H-NMR(400
MHz，CD3OD)δ:2. 30(3H，s，10-CH3) ，1. 06(3H，s，
11-CH3) ，1. 01(3H，s，12-CH3) ，1. 89(3H，d，J = 1. 2
Hz，13-CH3) ，2. 28(1H，d，J = 17. 2 Hz，2b-H) ，2. 60
(1H，d，J = 17. 2 Hz，2a-H) ，5. 93(1H，s，4-H) ，6. 43
(1H，d，J = 16 Hz，8-H) ，6. 99(1H，d，J = 16 Hz，7-
H)。13C-NMR(100 MHz，CD3OD)δ:41. 2(C-1) ，49. 1
(C-2) ，198. 9(C-3) ，126. 6(C-4) ，163. 2(C-5) ，78. 6
(C-6) ，146. 9(C-7) ，130. 3(C-8) ，199. 2(C-9) ，26. 2
(C-10) ，22. 1(C-11) ，23. 3(C-12) ，17. 7(C-13)。经
与文献对照［2］，确定其结构为(+)-去氢催吐萝芙
木醇(dehydrovomifoliol)。
化合物 2:黄色针状结晶，mp 109 ～ 110 ℃。
ESI-MS m/z: ［M － H］－ 161。1 H-NMR(400 MHz，
CD3OD)δ:2. 31(3H，s，4-H) ，6. 81(2H，d，J = 8. 8
Hz，3，5-H) ，7. 46(2H，d，J = 8. 8 Hz，2，6-H) ，
6. 58(1H，d，J = 16 Hz，1-H) ，7. 54(1H，d，J = 16 Hz，
2-H)。13 C-NMR(100 MHz，CD3 OD)δ:25. 7(C-4) ，
115. 6(C-3，5) ，123. 4(C-2) ，125. 8(C-2，6) ，
130. 2(C-1) ，144. 9(C-1) ，150(C-4) ，200. 1(C-
3)。经与文献对照［3］，确认化合物 2 为对羟基苄叉
丙酮(p-hydroxybenzylideneacetone)。
化合物 3:橙黄色晶体，mp 176 ～ 178 ℃，EI-MS
m/z［M］+ 178，162，145，135，117，107，89。1 H-NMR
(500 MHz，CD3OD)δ:2. 26(3H，s，1-H) ，6. 50(1H，
d，J = 16 Hz，1-H) ，7. 47(1H，d，J = 16 Hz，2-H) ，
7. 02(1H，d，J = 2 Hz，2-H) ，6. 74(1H，d，J = 8 Hz，
5-H) ，6. 94(1H，dd，J = 8，2 Hz，6-H)。13 C-NMR
(125 MHz，CD3 OD)δ:27. 0(C-4) ，115. 3(C-2) ，
116. 0(C-5) ，123. 5(C-2) ，124. 8(C-6) ，127. 8(C-
1) ，146. 8(C-1) ，146. 9(C-3) ，150. 0(C-4) ，201. 5
(C-3)。经与文献对照［4］，确认化合物 3 为 3，4-二
羟基苄叉丙酮(3，4-dihydroxybenzylideneacetone)。
化合物 4:灰白色结晶，mp 153 ～ 155 ℃;ESI-MS
m/z:［M － H］－ 137。1 H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)
δ:6. 90(H，d，J = 8 Hz，5-H) ，7. 23(1H，d，J = 2 Hz，
2-H) ，7. 27(H，dd，J = 2，8 Hz，6-H) ，9. 51(1H，s，3-
OH) ，9. 70(1H，s，7-H) ，10. 07(1H，s，4-OH)。13 C-
NMR(100 MHz，CD3OD)δ:129. 3(C-1) ，116(C-2) ，
146. 4(C-3) ，152. 6(C-4) ，114. 9(C-5) ，124. 9(C-
6) ，191. 5(C-7)。经与文献对照［5］确定其结构为原
儿茶醛(protocatechuic aldehyde)。
化合物 5:无色针状结晶，mp 204 ～ 205 ℃。
ESI-MSm/z: ［M － H］－ 153。1 H-NMR(400 MHz，
CD3OD)δ:7. 52(1H，d，J = 2 Hz，2-H) ，6. 89(1H，d，
J = 8. 4 Hz，5-H) ，7. 46(1H，dd，J = 2，8. 4 Hz，2，6-
H)。13C-NMR(100 MHz，CD3 OD)δ:123. 1(C-1) ，
115. 6(C-2) ，145. 4(C-3) ，150. 6(C-4) ，117. 4(C-
5) ，123. 6(C-6) ，167. 4(C-7)。经与文献对照［6］，确
定其结构为原儿茶酸(protocatechuic acid)。
化合物 6:淡黄色针状结晶，mp 115 ～ 117 ℃。
ESI-MS m/z［M － H］－ 121。1H-NMR(400 MHz，DM-
·885· Chin Pharm J，2013 April，Vol. 48 No. 8 中国药学杂志 2013 年 4 月第 48 卷第 8 期
SO-d6)δ:6. 94(2H，dd，J = 8. 8，1. 6 Hz，3，5-H) ，
7. 76(2H，dd，J = 8. 8，1. 6 Hz，2，6-H) ，9. 79(1H，s，
7-CHO) ，10. 64(1H，s，4-OH)。13 C-NMR(100 MHz，
CD3OD)δ:128. 9(C-1) ，132. 6(C-2，6) ，116. 2(C-3，
5) ，163. 7(C-4) ，191. 4(C-7)。经与文献对照［7］，确
定其结构为对羟基苯甲醛(p-hydroxybenzaldehyde)。
化合物 7:白色粉末，mp 71 ～ 73 ℃。EI-MS m/
z:［M］+ 422，［C14 H28 CO］
+ 225，［C14 H28］
+ 197。1 H-
NMR(400 MHz，CDCL3)δ:0. 87(6H，t，J = 7. 4 Hz，1-
CH3，29-CH3) ，1. 26 ～ 1. 60(48H，m，2 ～ 13-H，17 ～
28-H) ，2. 40(4H，m，14-H，16-H)。13 C-NMR(100
MHz，CDCL3)δ:14. 1 (C-1，C-29) ，23. 8 ～ 37. 5
(C-2 ～ 13，C-17 ～ 28) ，42. 8(C-14，C-16) ，211. 9(C-
15)。经与文献［8］对照，鉴定其结构为 15-二十九酮
(15-nonacosanone)。
化合物 8:无色针状结晶，mp 135 ～ 136 ℃，
Liebermann-Burchard 反应阳性。与 β-谷甾醇标准品
薄层对照，3 种不同展开系统 Rf 值一致，确定该化
合物为 β-谷甾醇(β-sitosterol)。
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(收稿日期:2012-07-04)
基金项目:辽宁省科技厅科技创新团队项目(2008T117) ;辽宁省高等学校优秀人才支持计划项目(2008RC34) ;国家自然基金资助项目
(81173499)
作者简介:张建逵，男，博士研究生，讲师 研究方向:药用植物品质评价 * 通讯作者:窦德强，男，教授，博士生导师 研究方向:天然
药物化学 Tel:(0411)87576014 E-mail:doudeqiang2003@ yahoo. com. cn;康廷国，男，教授，博士生导师 研究方向:中药鉴定与品质
评价 Tel:(024)31207058 E-mail:kangtg@ lnutcm. edu. cn
酶解-3，5-二硝基水杨酸(DNS)比色法测定人参中果胶的含量
张建逵，高睿，窦德强* ，康廷国* (辽宁中医药大学，辽宁 大连 116600)
摘要:目的 测定人参中的果胶含量。方法 先除去人参中的可溶性糖，然后加入果胶酶将果胶分解，再采用-3，5-二硝基水
杨酸比色法对果胶含量进行测定。结果 测定人参中果胶含量的最佳条件为:供试品细粉 500 mg，经 80%乙醇水浴提取后，
过滤，残渣加入含有果胶酶 1 200 U的枸橼酸-枸橼酸三钠缓冲液 50. 0 mL(pH 3. 5) ，50 ℃水浴中恒温加热 6 h酶解。用 DNS
比色法测定酶解液中的果胶含量(以半乳糖醛酸计)。结论 本法操作方便、准确，可用于人参果胶含量的检测。
关键词:人参;果胶;酶解;DNS比色法
doi:10. 11669 /cpj. 2013. 08. 004 中图分类号:R917 文献标志码:A 文章编号:1001 － 2494(2013)08 － 0589 － 04
Determination of Pectin in Panax ginseng by Enzymolysis-3，5- Dinitrosalicylic Acid Colorimetry
ZHANG Jian-kui，GAO Rui，DOU De-qiang* ，KANG Ting-guo* (Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，
Dalian 116600，China)
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中国药学杂志 2013 年 4 月第 48 卷第 8 期 Chin Pharm J，2013 April，Vol. 48 No. 8