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年第 3 期2016
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Production of semicarbazide in different tissues of chickens treated by NaClO
ZHANG Le-nian1, XU Zi-hua1, ZHANG Wen-bo2
(1.Animal Health Supervision Institute in Ganzhou District of Zhangye City, Zhangye Gansu 734000;2.Animal Disease Prevention
and Control Center in Zhangye of Gansu Province, Zhangye Gansu 734000, China)
Abstract：Chicken liver, meat and feet were chosen as samples, then treated with different concentration of NaClO, after
purification by ethyl acetate extraction, combined with LC-MS/MS technology and isotope internal standard quantitative method,
the production of semicarbazide in them were tested, and their differences were compared. The results showed that markedly
difference existed in semicarbazide production among different chicken tissue samples treated by NaClO, of which chicken feet had
the highest production. Further analysis of protein and amino acid showed that the production of semicarbazide had a close
relationship with the content and composition of protein and amino acid, and the differences of arginine content was the main
reason for the different production of semicarbazide in chicken tissues.
Key words：NaClO; semicarbazide; protein; amino acid; arginine
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
溪黄草水提物对鸡多杀性巴氏杆菌病防治效果研究
彭金菊，禤敏莹，王冬琴，凌建林，梁辉燕，陈荣伟，范葶莉，马 驿
（广东海洋大学农学院动物医学系，广东湛江 524088）
摘 要：给人工感染多杀性巴杆菌的鸡饲喂含药饲料，观察溪黄草水提物、头孢曲松钠以及溪黄草与头孢
曲松钠联用对鸡的巴氏杆菌病防治效果。结果表明，治疗组和预防组的死亡率较对照组降低，预防组的死亡率
显著低于治疗组。单独使用溪黄草对鸡巴氏杆菌病防治效果不太理想；头孢曲松钠对鸡巴氏杆菌病治疗及预防
效果较好，存活率显著高于对照组，保护率分别为 47.8%和 68.2%；溪黄草与头孢曲松钠联用对鸡巴氏杆菌病治
疗及预防效果较单独用药略有增加，保护率分别为 52.2%和 72.7%。试验结果与该两种药物联用的体外抑菌效
果基本一致，呈现协同效果。
关键词：溪黄草；中西药联用；鸡；多杀性巴氏杆菌
中图分类号：S853.7 文献标志码：A 文章编号：1000-6354（2016）03-0029-03
DOI:10.13823/j.cnki.jtcvm.2016.03.008
收稿日期：2015-12-16
基金项目：广东省科技计划项目（2013B020307012）；广东海洋大
学大学生创新创业训练计划项目
作者简介：彭金菊（1974-），女，高级实验师，兽医学专业，E-mail:
pengjinju74@163.com
通讯作者：马 驿，男，教授，E-mail:mayi761@163.com
溪黄草 [Rabdosia serra (maxim.)Hara]系唇形科香茶菜
属植物，入药用于清热利湿、凉血散瘀 [1]，主产于广东、湖
南、湖北、广西、云南、贵州、四川、江西、福建、浙江等[2]，因其
喜生于山谷阴湿溪旁、新鲜叶片捣碎有黄汁而得名。研究
结果表明，溪黄草对动物源性致病性金黄色葡萄球菌、沙
门氏菌、蜡状芽孢杆菌、溶血性链球菌、巴氏杆菌及大肠杆
菌等具有良好的抑制与杀灭作用 [3,4]，临床疗效初步试验亦
呈现较好的抗感染治疗作用 [5]。
禽巴氏杆菌病(Pasteurellosis)又称禽霍乱、禽出血性败
血症，是由多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)引起的禽
类的接触性传染病。该病在世界大多数国家都有发生，强
毒株能使不同年龄的鸡感染，发病率高达 100%，死亡率达
60%以上，是重点防制的家禽疫病之一 [6,7]。目前，治疗细菌
性疾病的最常用药物是抗生素，病菌易产生耐药性，中药
对病菌不仅不易产生耐药性，而且还可增强动物免疫力，
因此，使用中药或中药的有效活性成分防治动物细菌性疾
病的研究较多 [8-10]。笔者等选取具有体外抑菌效果溪黄草
水提物，通过给人工感染多杀性巴氏杆菌的鸡饲喂含药饲
料，观察药物对其防治效果，并观察其与头孢曲松钠联用
对鸡巴氏杆菌病的防治效果，为采用中西药结合防治畜禽
疾病提供理论依据和参考。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 溪黄草 购自广东清远市药材市场，阴干切碎。
1.1.2 禽巴氏杆菌（C48-3）标准菌株 由中国兽医药品
实
验
技
术
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监察所提供。
1.1.3 试验动物 40 日龄三黄鸡，公母各半，体质量 0.7-
1.0 kg。
1.2 方法
1.2.1 溪黄草水提物的制备 称取阴干切碎的溪黄草 50 g，
置于烧杯内，加水 200 mL，置于室温下浸泡 10-30 h，加热
煮沸 30 min，连续煎煮 3 次，冷却，过滤，合并煎煮液，浓
缩至 50 mL，使药液含原药材达 1 g/mL。将溪黄草水提物
与饲料混合拌匀。
1.2.2 试验分组 试验设阴性对照组、阳性感染对照组、
不同药物试验组，每组 30 只。Ⅰ组为不感染细菌阴性对照
组；Ⅱ组为感染细菌阳性对照组；Ⅲ组为中药组，饲料中添
加溪黄草水提物 2 mL/（只·d）；Ⅳ组为西药组，饲料中添
加头孢曲松钠 20 mg/（kg·d）；Ⅴ组为中西药结合组，在饲
料中添加溪黄草水提物与头孢曲松钠混合物，溪黄草水提
物 2 mL/（只·d），头孢曲松钠 20 mg/（kg·d）。
1.2.3 菌液的制备及人工感染试验 将多杀性巴氏杆菌
接种于 1%兔血清营养肉汤中，37 ℃恒温培养 8-12 h，采
用平板计数法计数，用肉汤稀释至所需浓度。通过预试验
筛选可引起鸡死亡的多杀性巴氏杆菌菌液的浓度，通过皮
下注射不同浓度的菌液，以感染后能引起鸡只 72 h 内死
亡率超过 70%的最小菌液浓度为攻毒浓度。以预试验确定
每只皮下注射浓度为 104 CFU/mL 的细菌混悬液 0.1 mL，
阴性对照组每只皮下注射生理盐水 0.1 mL。治疗试验：攻
毒当天饲喂添加药物的饲料，连续给药 5 d，停药后观察
10 d；预防试验：连续饲喂添加药物的饲料 5 d 后注射细
菌，自攻毒之日开始连续观察 10 d。统计各组死亡鸡数
量，按常规检验方法解剖死鸡，分离体液及组织中细菌、镜
检，确定死亡原因。
1.2.4 防治效果评价 用保护率进行评价。
保护率/%=（阳性感染对照组的死亡数-药物试验组
死亡数）/阳性感染对照组的死亡数×100。
2 结果
2.1 人工感染鸡病理变化及细菌形态特征
给鸡攻毒巴氏杆菌后，患病鸡食欲减退，精神沉郁，羽
毛松乱，呆立，呼吸困难，体温升高，鸡冠、肉髯暗红色或
青紫色，排灰白或黄绿色稀粪。攻毒 18 h 后开始出现死
亡，第 2-5 天死亡数较多，第 7 天后未见死亡。解剖病死
鸡可见鼻腔内有黏液；皮下组织、腹腔脂肪、肠系膜有大小
不等的出血点；胸腔、腹腔和气囊有纤维素性灰白色渗出
物；肠黏膜充血，有出血性病灶，十二指肠最严重；心外膜
上有较多出血点，心包内有淡黄色液体，并混有纤维素；肺
充血水肿；脾脏肿大；肝脏肿大，质变脆，表面布满针尖大
小的白色坏死点。分离体液及组织中细菌进行培养鉴定，
在鲜血培养基上生长良好，长成淡灰白色、闪光的露珠状
小菌落，且无溶血现象。镜检为革兰氏阴性、两端钝圆、两
极浓染，以单个和成双排列为主的球杆状或短杆状细菌，
与实验前感染的多杀性巴氏杆菌的形态特征相同。
2.2 药物治疗试验结果
治疗试验结果见表 1。攻毒后阳性对照组鸡死亡 23只，
存活率仅为 23.3%。饲喂药物组的鸡死亡率与阳性对照组比
较有所降低；溪黄草、头孢曲松钠以及溪黄草与头孢曲松钠
联用对鸡的保护率分别为 4.3%、47.8%和 52.2%，不同给药
方案对鸡巴氏杆菌病均有一定的治疗效果。
表 1 不同药物对鸡巴氏杆菌病的治疗效果
Table 1 Effects of Rabdosia serra Hara and its extract
combined with cefatriaxone sodium against chicken
pasteurellosis
2.3 药物预防试验结果
预防试验结果见表 2。攻毒后阳性对照组鸡死亡 22只，
存活率仅为 23.3%。饲喂药物组的鸡死亡率与阳性对照组
比较均降低，投喂药物组的存活率均高于阳性对照组，溪
黄草、头孢曲松钠以及溪黄草与头孢曲松钠联用对鸡的保
护率分别为 13.6%、68.2%和 72.7%，溪黄草与头孢曲松钠
联用对鸡巴氏杆菌病的预防效果较好。
表 2 不同药物对鸡巴氏杆菌病的预防效果
Table 2 Preventive effects of Rabdosia serra Hara and its
extract combined with cefatriaxone sodium against
chicken pasteurellosis
3 讨论
3.1 溪黄草对鸡巴氏杆菌病的防治效果
笔者通过试验得知，溪黄草水提取物对 G+菌的体外
抑菌效果较好（MIC 为 25-100 mg/mL），对 G-菌的体外抑
菌效果相对较差（MIC 为 50-400 mg/mL）[11]。溪黄草与头
孢曲松联用后，明显增强了抗菌药的体外抑制效果，头孢
曲松用量为单药用量的 1/8、溪黄草用量为单药用量的 1/64
时即呈现抑菌效果 [12]。说明溪黄草具有一定的抑菌作用，
但体外抑菌效果欠佳，溪黄草与头孢曲松联用的体外抑菌
阴性对照
阳性对照
溪黄草
头孢曲松钠
溪黄草/头
孢曲松钠
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
Ⅴ
组别 灌服药物
死亡
数量/只 百分比/%
鸡数
/只
存活
数量/只 百分比/%
保护
率/%
30
30
30
30
30
0
23
22
12
11
0
76.7
73.3
40.0
36.7
30
7
8
18
19
100.0
23.3
26.7
60.0
63.3
4.3
47.8
52.2
阴性对照
阳性对照
溪黄草
头孢曲松钠
溪黄草/头
孢曲松钠
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
Ⅴ
组别 灌服药物
死亡
数量/只 百分比/%
鸡数
/只
存活
数量/只 百分比/%
保护
率/%
30
30
30
30
30
0
22
19
7
6
0
73.3
63.3
23.3
20.0
30
8
11
23
24
100.0
26.7
36.7
76.7
80.0
13.6
68.2
72.7
实
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效果呈现协同作用。将溪黄草水提物 2 mL/（只·d）[相当
于溪黄草原药材 2 g/（只·d）]拌料给鸡饲喂后，对鸡巴氏
杆菌病治疗和预防的保护率分别为 4.3%和 13.6%；溪黄
草与头孢曲松钠联用对鸡巴氏杆菌病的治疗及预防效果
较好，保护率分别为 52.2%和 72.7%。试验结果与溪黄草
的体外抑菌实验结果基本一致，单独使用溪黄草的体外抑
菌效果及对细菌性疾病的防治效果均不太理想；溪黄草与
头孢曲松联用后，体外抑菌能力增强，对动物细菌性疾病
的防治作用也增强。中药体外抗菌试验只能说明所试中药
与细菌直接接触所产生的影响，而对被细菌感染患病动物
的治疗效果还须进行动物体内试验才能证实 [13]。溪黄草对
人工感染巴氏杆菌的病鸡有一定的保护作用，一方面是溪
黄草具有体外抑菌作用，另一方面可能是溪黄草中的抑菌
成分如萜类、黄酮类和蒽醌类化合物在鸡体内相互作用而
产生抗菌效应。
3.2 中西药结合在畜禽疾病防治中的作用
有关中西药联合防治鸡细菌性疾病的报道较多，西药
注重消除病因；中药强调整体，重在提高机体的抗病能力，
调整、平衡机体的各种功能，应用安全可靠，中西药相互取
长补短，提高临床疗效，其效果已得到普遍认可 [10, 14]。中西
药联用对禽巴氏杆菌病的治疗和预防效果较好，周勇 [7]用
氯霉素与自拟清瘟散与苍苓散结合，对鹅巴氏杆菌病疗效
显著。由黄连、黄柏等中药和盐酸环丙沙星组成的中西药
复方制剂（炎瘟清片）对肉鸽巴氏杆菌病的治愈率达到
96.6％ [15]。临床使用的清热解毒中药大多数具有抗菌消炎、
抗病毒、抗过敏及提高机体免疫力的功效，在防治禽细菌
性疾病时，可直接使用中药或中药复方制剂进行预防，也
可采用中西药结合进行治疗。
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Efficacy of Rabdosia serraHara extract against experimental Pasteurellosis of chickens
PENG Jin-ju, XUAN Min-ying, WANG Dong-qin, LING Jian-lin, LIANG Hui-yan, CHEN Rong-wei,
FAN Ting-li, MA Yi
(Department of Veterinary Medicine, Guangdong Ocean University, Zhanjiang Guangdong 524088, China)
Abstract：Chickens artificial infected with Pasteurella multocida were fed with medicated diet to study the effects of Rabdosia
serra Hara and its extract combined with cefatriaxone sodium against chicken pasteurellosis. The results showed that the mortality
of prevention group and curative group was decreased compared with control. Meanwhile the mortality of prevention group was
significantly lower than that of curative group. Rabdosia serra Hara present less preventive and curative effects alone against
chicken pasteurellosis. While cefatriaxone sodium showed significant efficacy against chicken pasteurellosis with preventive rate of
68.2% and curative rate of 47.8%, respectively. Moreover, Rabdosia serra Hara combined with cefatriaxone sodium showed more
obvious efficacy against chicken pasteurellosis with preventive rate of 72.7% and curative rate of 52.2% , respectively. The
combination of Rabdosia serra Hara and cefatriaxone had significant inhibitory effects in vitro, consistent with the experimental
results.
Key words：Rabdosia serra Hara; combination of Chinese medicine and antibiotics; chicken; Pasteurella multocida
实
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