全 文 ：半边旗祛瘢乳膏的制备及皮肤安全性评价
吴科锋　廖　靖　刘　义　杨小飞　梁念慈
【摘要】　目的　制备半边旗提取物 5F祛瘢乳膏 , 并对其安全性进行评价。 方法　将 5F 瘢痕乳膏
涂敷于实验动物的完整和破损皮肤上 , 24 h 后观察其局部刺激作用 、过敏反应和急性皮肤毒性 , 并与正
常对照组相比较。结果　局部应用半边旗祛瘢乳膏后对大鼠皮肤无刺激性 , 及在大鼠完整皮肤和破损
皮肤均未见毒性作用 ,并且对豚鼠也不起过敏反应。病理学检查未见明显改变。结论　半边旗乳膏是
一种安全的外用制剂。
【关键词】　半边旗　5F　皮肤　毒理学
Preparation of the Psl5F Scar emulsion and evaluation of the cutaneous safety 　WU Ke- feng , et al.　
(Guangdong Key Lab fo r Resea rch and Development o f Natural D rugs , The A ffiliate Hospital of Guang-
dong M edical Co llege , Zhanjiang 524001 , China)
【Abstract】　Objective　To prepare 5F Scar emulsion and evaluate the local to xicity on animal skin.
Methods　The complete and damage skin of the experimental animals w ere covered with 5F Scar emul-
sion fo r 24 hours.The local stimula ting effect , allergy and acute tox icity of skin we re obse rved , and com-
pared with contro l g roups.Results　5F Scar emulsion had no stimula ting effect to skin of rats , and had
no acute to xicity to the intact or damaged skin o f rats.5F Scar emulsion had no alle rgic effects on the in-
tact skin of guinea pig s.Patho lo gica l e xamination was no rmal in general.Conclusions　5F Scar emulsion is
a safe prepara tion fo r ex te rnal rise.
【Key words】　P te ris semipinna ta L　5F　Skin　Toxico log y
　　半边旗(P teris semipinnata L , PsL)为凤尾属蕨类植物其
二萜类提取物(化学结构为 11α-羟基-15-氧-16-烯-
对映贝壳杉烷-19-酸 , 简称 PsL5F)具有显著的抗肿瘤活
性[ 1-2] ,同时还具有显著的抑制成纤维细胞增生的作用[ 3] ,而
成纤维细胞癌性增生是瘢痕形成的主要原因之一。曾有研究
表明 ,以 5F为主药的药物在防治瘢痕的动物实验中具有一
定疗效 ,因此将其制成乳膏剂 , 并评价其使用安全性有助于其
推广应用。
1　实验动物与试剂
1.1　动物　豚鼠;SD 大鼠 ,均由广东医学院实验动物中心提
供。
1.2　半边旗提取物 5F(本实验室制备);2 , 4 一二硝基氯苯
(上海试剂一厂 , 批号 05l016)。
2　实验方法
2.1 　半边旗 5F 祛瘢乳膏的制备[ 4] 　将油相成分(5F
0.5%～ 2%、硬脂酸 12.5%、蓖麻油 12.5%、液体石蜡
12.5%、单硬脂酸甘油酯 6%、氮酮 2%)置于烧杯中 , 水浴加
热使其熔化 ,并使温度保持(80±1)℃;同时将水相成分(三乙
基金项目:国家自然科学基金资助项目(编号:39870900);香港创新科
技署粤港合作项目(GHP/ 022/ 06)
作者单位:广东天然药物研究与开发实验室(吴科锋 、刘义 、杨小飞 、梁
念慈)
广东医学院附属医院妇产科(廖靖)
邮　　编　524023　　收稿日期　2009-09-22
醇胺 0.5%、甘油 5%、尼泊金乙酯 0.1%)加热溶解 , 亦使其
温度保持在(80±1)℃。在此温度下 , 将水相缓缓倒入油相
中 , 边加边搅拌 ,放至室温 , 即得半边旗 5F祛瘢乳膏。
2.2　急性皮肤刺激试验 　取豚鼠 18 只 , 体重(459.0 ±
105.8)g ,雌性 , 随机分为三组 , 分别为 0.5%5F 瘢痕乳膏组 ,
1%5F 瘢痕乳膏组 , 2%5F 瘢痕乳膏组 , 两侧背部去毛 , 翌日
敷药。面积 3cm×3cm , 各豚鼠均在敷药部位邻近皮肤贴敷
同样面积的基质作自身对照。 24 h 后去除药物及基质 ,作肉
眼观察 , 并各组处死 2 只取背部用药及对照部位皮肤作病理
检查 , 余继续观察 14 d 后病检。皮肤刺激反应评分标准按文
献[ 5]实施。
2.3　皮肤过敏试验　取白色健康豚鼠 18 只 , 体重(510.3±
84.1)g , 雌雄各半 ,按文献[ 4]方法 , 随机分为三组 ,分别为基质
对照组 、1%5F瘢痕乳膏组和 2 , 4 一二硝基氯代苯阳性对照
组。将豚鼠脊柱两侧皮肤脱毛 , 每侧面积约 3cm ×3cm。分
别于1 d、7 d、14 d致敏 3 次 ,致敏剂量为 1%5F 瘢痕乳膏 、1%
2 , 4-二硝基氯代苯 、基质各 0.5 g ,敷于动物左侧脱毛区。于
28 d 激发 , 激发剂量为 1%5F 瘢痕乳膏 、0.1%2 , 4 一二硝基
氯代苯 、基质各 0.5 g , 敷于动物右侧脱毛区。观察皮肤过敏
反应 , 并计算致敏强度。皮肤过敏反应评分标准按文[ 5]评定。
2.4　完整皮肤急性毒性试验　取健康大鼠 24只 , 雌雄各半 ,
体重(236.8±23.0)g , 按文献方法 , 背部去毛。 3 d 后随机分
为四组 , 分别为高剂量组(2%5F)、中剂量组(1%5F)、低剂量
组(0.5%5F)、对照组(贴敷基质)。贴敷面积占总体表面积
的 10%, 固定 24 d 后将药物去除 , 连续观察 14 d 皮肤局部反
·3022· Journal of Qiqihar Medical College , 2009 , Vol.30 , No.24
应及全身反应。于 14 d 处死解剖 , 观察各重要脏器的病理改
变。
2.5　破损皮肤急性毒性试验　大鼠体重(195.5±35.3)g ,背
部去毛后采用乙醚浅麻醉 ,用 60 号粗砂纸均匀擦伤皮肤表层
至轻度出血。剂量分组 、敷药方法 、观察时间同完整皮肤急性
毒性试验。
2.6　统计学处理　计数资料采用χ2 检验 , 由统计软件 SPSS
13.0 完成。
3　实验结果
3.1　急性皮肤刺激试验　敷药后 , 各剂量组豚鼠皮肤用药部
位均无红斑。各组各时期皮肤组织学检查表示与自身对照无
差异。
3.2　皮肤过敏试验　2 , 4 一二硝基氯代苯阳性对照组在接
触和激发试验中 , 所有豚鼠均出现皮肤红斑形成(轻度红斑 1
只 ,中度红斑 3 只 , 重度 1 只), 其中 4 只出现皮肤水肿现象。
5F 瘢痕乳膏组及基质组在接触和激发试验中均未见到红斑
形成及水肿等皮肤过敏反应 ,结果见表 1。
表 1　皮肤过敏试验
组别 出现过敏症状的动物数量
基质对照组 0
1%5F对照组 0
1%2 , 4-二硝基氯代苯组 6＊
　　注:＊表示与基质比较 P <0.01。
3.3　完整皮肤急性毒性试验　敷药后 , 各组动物活动行为无
明显改变 ,大小便及饮食量正常。观察期间各组动物均无异
常情况。14 d 处死病理解剖 , 肉眼观察各重要脏器均未发现
异常 ,切片镜检均无明显病理变化。
3.4　破损皮肤急性毒性试验　敷药后各组动物活动均减少
(包括对照组), 3 d 后恢复正常 , 未见其它行为异常。皮肤受
损部位 3 d结痂 , 并有轻微皮肤发红 , 7 d 开始脱痂 , 14 d 伤口
全部愈合。 14 d 处死病理解剖 ,肉眼观察及切片镜检各重要
脏器均无明显病理变化。
4　讨论
瘢痕是皮肤损伤达到一定程度后组织修复的必然结果 ,
烧伤 、外伤 、感染等均可造成瘢痕形成与增生。皮肤瘢痕本质
上是一种皮肤伤口的病理愈合过程 ,其最显著的特征是成纤
维细胞(fibr oblast , FB)持续活化所产生的细胞外基质(ECM)
成分导致真皮的纤维化 , 但成纤维细胞增殖旺盛并分泌大量
细胞外基质 ,使细胞外基质主要成分胶原蛋白的过量合成和
沉积 , 最终导致了瘢痕的形成[ 6] 。目前临床上对于瘢痕的治
疗 , 有手术 、激光 、加压 、冷冻和药物等多种疗法 , 其中药物疗
法是应用的最为广泛的。但由于传统药物的毒副作用及易产
生耐药性等缺陷 , 因从天然产物中筛选有效治疗瘢痕的药物
有着广阔的前景。
我们过去的研究发现半边旗提取物 5F 能有效抑制瘢痕
FB的增殖 , 并且能够诱导其发生凋亡 , 同时亦抑制 FB 分泌
胶原[ 7-8] 。我们还发现 5F 能下调促瘢痕形成的血管内皮生
长因子 VEGF 的表达 , 抑制转录因子 NF -kappa B 活
性[ 9-10] ,这些都说明了 5F 是一种能有效治疗瘢痕的化合物。
本实验结果表明 , 以 5F 为主药研制的祛瘢乳膏对皮肤无刺
激 、不产生过敏反应 ,作为外用制剂能较安全地应用于动物身
上 , 为进行人体实验打下了基础。
参　考　文　献
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