免费文献传递   相关文献

乌蕨总黄酮及水提液的药理试验



全 文 :乌蕨总黄酮及水提液的药理试验
蔡建秀 ,黄晓冬
(泉州师范学院生物系 ,福建 泉州 362000)
摘要: 为观察乌蕨有效部位总黄酮与乌蕨水提液的保肝、抗炎、止血作用 ,采用 CCl4致中毒性小鼠肝损伤
法、二甲苯致小鼠耳肿胀法及小鼠断尾出血法 ,观察乌蕨总黄酮及其水提液对小鼠血清 AL T活性、耳肿胀度及
出血时间的影响。结果显示乌蕨总黄酮可降低 CCl4性肝损伤小鼠血清 AL T的活性 ,减轻二甲苯致小鼠的耳肿
胀 ,缩短小鼠的出血时间 ,其水提液能减轻二甲苯致小鼠的耳肿胀 ,缩短小鼠的出血时间 ,对小鼠血清 ALT的
活性无明显影响。 说明乌蕨具有保肝、抗炎、止血作用 ,其水提液中具有消炎、止血的成分。
关键词: 乌蕨 ;黄酮类 ;水提液 ;保肝 ;抗炎 ;止血
中图分类号: R285. 5  文献标识码: A  文章编号: 1004-5627( 2004) 01-0013-02
收稿日期: 2003-11-02
基金项目:福建省科委三项基金项目资助 ( No. K2001106)
作者简介:蔡建秀 ( 1957— ) ,女 ,副教授 ,主要从事药用植物学研究。
  乌蕨为鳞始蕨科植物 ,乌蕨 [Stenoloma chu-
sanum ( Thunb ) Kze. ]又名野鸡尾、金花草、中华
金粉蕨 ,具有清热、解毒、利尿、退黄、止血的功
效 [1 ]。本实验用乌蕨水提液及其总黄酮 ,对小鼠进
行保肝、抗炎、止血治疗试验 ,现将试验结果报道
如下。
材 料
1 药物: ① 乌蕨总黄酮: 选晒干的乌蕨全草 ,粉
碎后过 40目筛 ,称取干燥样品 5 g ,加入 70%乙
醇 150 ml进行索氏提取 ,将提取液置于装有 1. 5
g聚酰胺粉的烧杯中搅匀 ,移入装有 3 g聚酰胺
粉的砂芯层析柱 ,用 70%、 80% 、 90%、 100%乙醇
依次洗脱 ,收集各级洗涤液 ,再用减压蒸馏法浓缩
得 3%乌蕨总黄酮粗品 (用盐酸—镁粉显色法 [2 ] ,
类型定性试验呈红色 )。② 100%水提液:水提液
浓缩至 1 g /ml (含生药 ) ,由课题组提供。水提液
有毒性 ,测得小鼠 1次灌胃最大耐受量为 20 g /kg
生药。
2 动物: 昆明种小鼠 ,体重 18~ 25 g ,雌雄兼用 ,
由福建省卫生防疫站实验动物场提供 ,合格证书:
医动字第 23— 002(质 )号。
3 试剂: ALT试剂盒 ,上海长征 -康仁医学科学
有限公司 ,批号: 030215。
4 统计学处理:采用 t检验。
方法与结果
1 乌蕨总黄酮及其水提液的保肝试验 [3 ]: 选小鼠
60只 ,按性别随机分 6组 ,每组 10只 ,雌雄各半。
1组小鼠为正常组 ,给等积的饮用水 ; 2~ 6组小鼠
隔日给 0. 2% CCl4 ,按体重 10 ml /kg灌胃 (共 4
次 )造模。第 1次造模灌胃后 24 h , 2组小鼠为模
型对照组 ,给饮用水 ; 3、 4组小鼠为模型乌蕨总黄
酮治疗组 ,分别给乌蕨总黄酮 1. 2 g /kg、 0. 6 g /kg
(相当 40 g /kg、 20 g /kg生药 ,下同 ) , 5、 6组小鼠
为模型乌蕨水提液治疗组 ,分别给乌蕨水提液 10
m l、 5 m l(相当 10 g /kg、 5 g /kg生药 ,下同 ) ,均用
饮用水配成 20 m l,按体重 0. 2 m l /10 g每天灌胃
1次 ,连续 6 d。 末次灌胃后 1 h,小鼠摘眼球取血
分离血清 ,按试剂盒说明书检测血清丙氨酸氨基
转换酶 ( ALT)活性 ,结果见表 1。
表 1 乌蕨黄酮类粗品对 CCl4性肝损伤
小鼠 ALT活性的影响 (x-± s )
组 别 小鼠
(只 )
剂量
( g /kg)
体 重
( g )
ALT
( nmo l· s- 1 / L)
正 常 对 照 组 10 — 25. 2± 2. 8 626. 8± 130. 0
模 型 对 照 组 10 — 20. 3± 3. 61) 1420. 3± 210. 01)
模型+ 总黄酮 1组 10 40 23. 6± 4. 2 1140. 2± 160. 03)
模型+ 总黄酮 2组 10 20 21. 2± 2. 6 1230. 2± 140. 02)
模型+ 水提液 1组 10 10 21. 5± 3. 2 1396. 9± 156. 7
模型+ 水提液 2组 10 5 22. 3± 2. 8 1330. 3± 145. 0
  注:与正常对照组比较 , 1) P < 0. 05;与模型对照组比较 ,
2) P < 0. 05, 3) P < 0. 01
2 乌蕨总黄酮及其水提液的抗炎试验:选雄性小
鼠 50只 ,按性别随机分 5组 ,每组 10只。 1组小
13
福 建 中 医 学 院 学 报 2004年 2月 第 14卷 第 1期
Journal of Fujian Co llege o f TCM Februar y 2004, 14( 1)
DOI : 10. 13261 /j . cnki . jf utcm. 001399
鼠为对照组 ,给饮用水 ; 2、 3组小鼠为乌蕨总黄酮
组 ,分别给乌蕨总黄酮 1. 2 g /kg、 0. 6 g /kg; 4、 5
组小鼠为乌蕨水提液组 ,分别给乌蕨水提液 10
m l、 5 m l, 均用饮 用水配成 20 ml, 按体 重
0. 2 ml /10 g每天灌胃 1次 ,连续 3 d。末次灌胃后
30 min,小鼠右耳两面涂二甲苯 0. 2 m l(左耳不
涂 ) , 2 h后处死小鼠 ,用直径 6 mm的打孔器分别
打下左、右耳同一部位的耳片于分析天平称重 ,计
算肿胀度和抑制率 ,结果见表 2。
表 2 乌蕨总黄酮对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 (x-± s )
组 别 小鼠
(只 ) 剂量( g /kg ) 肿胀度( mg ) 抑制率(% )
对 照 组 10 — 11. 6± 2. 6 —
总黄酮 1组 10 40 7. 0± 2. 82) 39. 7
总黄酮 2组 10 20 10. 9± 2. 1 6. 0
水提液 1组 10 10 8. 6± 2. 311) 25. 9
水提液 2组 10 5 9. 7± 1. 6 16. 4
  注:与对照组比较 , 1) P < 0. 05, 2) P < 0. 01
3 乌蕨总黄酮及其水提液的止血试验: 选小鼠
50只 ,按性别随机分 5组 ,每组 10只 ,雌雄各半。
1组小鼠为对照组 ,给饮用水 ; 2、 3组小鼠为乌蕨
总黄酮组 ,分别给乌蕨总黄酮 1. 2 g /kg、 0. 6 g /
kg; 4、 5组小鼠为乌蕨水提液组 ,分别给乌蕨水提
液 10 ml、 5 ml ,均用饮用水配成 20 ml,按体重
0. 2 ml /10 g每天灌胃 1次 ,连续 7 d。末次灌胃后
2 h,于小鼠尾部 2 cm处用剪刀剪断 ,随即将小鼠
尾巴插入装有生理盐水的烧杯中 ,同时按秒表观
察、记录小鼠断尾处的出血持续时间。结果见表
3。
表 3 乌蕨总黄酮对小鼠出血时间的影响 ( x-± s)
组 别 小鼠(只 ) 剂 量( g /kg ) 出血时间( s)
对 照 组 10 — 247. 3± 46. 0
总黄酮 1组 10 40 129. 7± 31. 02)
总黄酮 2组 10 20 240. 2± 67. 5
水提液 1组 10 10 131. 9± 44. 12)
水提液 2组 10 5 162. 3± 64. 61)
  注:与对照组比较 , 1) P < 0. 01, 2) P < 0. 001
讨 论
实验显示乌蕨总黄酮可降低 CCl4性肝损伤
小鼠血清 ALT的活性 ;减轻二甲苯致小鼠的耳
肿胀 ;缩短小鼠的出血时间 ;乌蕨水提液可减轻二
甲苯致小鼠的耳肿胀 ,对缩短小鼠的出血时间作
用明显 ,而对 CCl4性肝损伤小鼠血清 ALT的活
性无明显影响。本实验为乌蕨的保肝、抗炎、止血
作用提供了实验依据。 同时初步认定 ,乌蕨有保
肝、抗炎、止血作用 ,其有效成分主要为黄酮类化
合物 ,其水提液中也有抗炎、止血成分。为乌蕨进
一步的开发应用 ,打下了基础。
参考文献:
[1 ] 江西中医学院 .药用植物学 [M ].上海:上海科学技术出版
社 , 1979. 85.
[2 ] 北京医学院 .中草药成分化学 [M ].北京:人民卫生出版社 ,
1988. 289.
[3 ] 李仪奎 .中药药理实验方法学 [M ].上海: 上海科学技术出
版社 , 1991. 300— 496.
Pharmacological Experiments of Gross Flavone in Stenoloma
Chusanum( Thunb)Kze. and its Water Extractant
CAI Jian-xiu,HUANG Xiao-dong
(Department of biology,Quan zhou Normal college,Quanzhou, Fujian 362000, China)
Abstract: To observ e the functions o f pro tecting liv er, anti-inf lamma to ry and stopping bleeding of
g ross flavone, the effectiv e pa rts in Stenoloma chusanum ( Thunb) Kze, and its ex tractant wi th w ater,
The autho rs applied the methods as follow s to mice: 1) CCl4 resulting in toxic liv er injury; 2) dimethyl
benzene resul ting in ear sw elling; 3) bleeding due to broken tai l; and observ ed the inf luences of gro ss
f lav one in Stenoloma Chusanum ( Thunb) Kze. And i ts ex t ractant w ith w ater on blo od serum ALT ac-
tivi ty, ear sw el ling deg ree and bleeding time. Resul t: 1) g ross f lav one in Stenoloma Chusanum( Thunb)
Kze. can reduce the blood serum ALT activ ity of toxic liv er injury in mice due to CCl4 , al levia te ea r
sw el ling deg ree due to dimethyl benzene. and sho rten bleeding time. 2) Its w ater ex t ractant can allevi-
ate ear sw elling degree and sho rten bleeding time, but hasn′t o bvious inf luence on blood serum ALT
activi ty. All of these deno te tha t Stenoloma Chusanum has functions of pro tecting liv er, anti-inflamma-
to ry and stopping bleeding , and i ts ex tractant includes the ing redients o f anti-inflammatory and stop
bleeding.
Key words: Steno loma Chusanum , flavonoid, ex t ractant wi th w ater, pro tecting liver, anti-inflam-
ma to ry, stop bleeding .
14 福建中医学院学报 第 14卷